泉州地區(qū)非小細(xì)胞肺癌人群中表皮生長因子受體基因突變分析

陳偉文 鄭錦陽 沈冰寒 徐 萌 郭偉峰 王志剛

(福建醫(yī)科大學(xué)附屬泉州第一醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，福建 泉州 362000)

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泉州地區(qū)非小細(xì)胞肺癌人群中表皮生長因子受體基因突變分析

陳偉文 鄭錦陽1沈冰寒2徐 萌2郭偉峰2王志剛3

(福建醫(yī)科大學(xué)附屬泉州第一醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，福建 泉州 362000)

目的 探討泉州地區(qū)非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)患者表皮生長因子受體(EGFR)基因突變的情況。方法 收集130例泉州地區(qū)NSCLC組織或胸腔積液，用ADx-ARMS技術(shù)檢測NSCLC患者石蠟組織標(biāo)本EGFR DNA突變19、20及21的突變，同時分析其突變與臨床特征的關(guān)系。結(jié)果 130例NSCLC中共檢出37例EGFR基因突變，EGFR突變陽性率為28.46 %(37/130)，女性EGFR基因突變率(26/54)48.15%，顯著高于男性(12/78)15.4%(P<0.05)；EGFR突變外顯子19和21突變占總突變的100.0 %；腺癌突變發(fā)生率為89.19%(33/37)。結(jié)果 泉州地區(qū)NSCLC患者EGFR基因突變以外顯子19和21突變?yōu)橹?。結(jié)論 臨床上對未進(jìn)行EGFR檢測的晚期NSCLC腺癌女性患者，可考慮先予EGFR酪氨酸激酶抑制劑進(jìn)行診斷性治療。

非小細(xì)胞肺癌；表皮生長因子受體；基因突變

目前腫瘤治療主要依據(jù)患者的分期、病理類型等臨床特點，對一個特定群體中的所有患者給予同一種治療，其標(biāo)準(zhǔn)化方案確立主要是以高質(zhì)量循證醫(yī)學(xué)證據(jù)為基礎(chǔ)。要想進(jìn)一步提高晚期非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)一線治療的療效，以分子指標(biāo)為導(dǎo)向的個體化治療可能是一個突破口。但是由于基因突變檢測費用昂貴，很多病人因不愿承擔(dān)高昂檢測費用，而放棄檢測?；谏鲜鲈?，本文設(shè)計如果能夠初步了解本地區(qū)人群的基因突變情況，根據(jù)人群中的表皮生長因子受體(EGFR)基因突變情況，指導(dǎo)選擇相應(yīng)的初步個體化治療方案，將有助于進(jìn)一步提高晚期非小細(xì)胞肺癌一線治療的療效，改善患者的生活質(zhì)量，延長生存期。

1 材料與方法

1.1 對象 收集2012年3月至2014年8月在本院經(jīng)病理診斷為NSCLC的病例1 005例，通過隨機表隨機抽取130例病理標(biāo)本，男76例，女54例；腺癌96例，鱗癌34例。

1.2 方法 采集NSCLC患者病變中心區(qū)樣本，75%乙醇固定后，56℃溫箱中裂解2 h，加入緩沖液和支持探針微球于上述混合液后再將其置于55℃溫箱中震蕩混勻，孵育過夜。棄混合液上清，再洗滌3次后將延伸探針和標(biāo)記探針加入其內(nèi)，將其置于溫箱中震蕩后將混合液上清棄之，加入鏈霉親和素-藻紅蛋白，洗滌2次，在Luminex儀上讀取數(shù)據(jù)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0軟件行χ2檢驗。

2 結(jié) 果

2.1 130例NSCLC標(biāo)本中共檢出EGFR基因突變37例(28.5%)，其中19外顯子(Exom-19)突變率為11.5%(15/130)，21外顯子(Exom-21)突變率為16.9%(22/130)。女性基因突變率為46.3%(25/54)，顯著高于男性15.8%(12/76)(P<0.001)。長期吸煙者基因突變率為16.2%(12/74)，顯著低于非吸煙者44.6%(25/56)。腺癌患者基因突變率為34.4%(33/96)，顯著高于鱗癌患者11.8%(4/34)。

2.2 54例女性NSCLC患者中，腺癌患者基因突變率是51.1%(24/47)，顯著高于鱗癌患者14.3%(1/7)。與吸煙組〔33.3%(1/3)〕相比，非吸煙組患者的基因突變率〔47.1%(24/51)〕未見明顯增加(P>0.05)。

2.3 76例男性NSCLC患者中，腺癌〔18.4%(9/49)〕與鱗癌〔11.1%(3/27)〕基因突變率比較無差異(P>0.05)。與非吸煙組〔20.0%(1/5)〕相比，吸煙組基因突變率〔15.5%(11/71)〕未見明顯增加(P>0.05)。

2.4 37例基因突變的NSCLC患者中，E21型突變比例方面，與女性患者〔12例(48.0%)〕比較，男性患者突變率〔10例(83.3%)〕顯著增高(P<0.05)；與非吸煙組NSCLC患者〔12例(48.0%)〕比較，吸煙組NSCLC患者突變率〔10例(83.3%)〕顯著增高(P<0.05)；腺癌〔18例(54.5%)〕和鱗癌〔4例(100.0%)〕患者基因突變類型無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。

3 討 論

EGFR基因的第二至十四外顯子編碼胞外區(qū)，十六至二十二外顯子編碼酪氨酸激酶區(qū)，二十三至二十六外顯子編碼C端至磷酸化部位〔1〕。EGFR的胞外區(qū)在細(xì)胞表面與相應(yīng)的配體結(jié)合形成同源或異源二聚體后進(jìn)入胞內(nèi)特定酪氨酸殘基磷酸化，最終達(dá)到活化下游信號通路的目的。這一過程在血管生成、癌細(xì)胞增殖中發(fā)揮了重要的調(diào)控作用〔2〕。在EGFR酪氨酸激酶編碼區(qū)(外顯子18-21編碼)多出現(xiàn)框內(nèi)缺失性突變或替代突變等突變，影響腫瘤的生成和發(fā)展〔3〕。當(dāng)EGFR發(fā)生突變后可不依賴配體酪氨酸激酶而發(fā)生活化而異?；罨疎GFR下游信號通路〔4〕。

EGFR酪氨酸激酶抑制劑吉非替尼(又名易瑞沙)在臨床上常用于NSCLC的治療。目前多項臨床試驗結(jié)果表明，該藥物總體治療效果不高，僅為10%～30%〔5〕。因此，在使用酪氨酸激酶抑制劑之前，應(yīng)進(jìn)行EGFR基因突變檢查。在以2 880例病例為對象的13項研究匯總分析中，東方人EGFR基因突變的頻率為32.0 %，腺癌發(fā)生率達(dá)30.0 %，非東方人突變頻率為7.0 %，非腺癌發(fā)生率為2.0%〔6〕。此外，研究發(fā)現(xiàn)，我國腺癌EGFR基因突變率顯著高于非腺癌的(43.1% vs 12.0%)〔7〕，說明EGFR基因突變與肺癌患者的臨床特征及病理呈正相關(guān)性。截至2008年，通過對我國949例非小細(xì)胞肺癌患者EGFR基因突變情況進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)該基因在女性患者中的突變率為43.4%，而男性患者僅為21%；此外，與吸煙者13.1%比較，非吸煙者EGFR基因突變率明顯增加，為44.1%(P<0.05)〔8〕，從上述數(shù)據(jù)可知：性別和吸煙狀況等臨床背景與EGFR基因突變均存在相關(guān)性。

此外，大量研究表明，我國不同時期、不同區(qū)域肺癌EGFR基因突變率存在一定的差異，如2011年在北京、上海、天津、吉林、廣東、云南、湖南、臺灣選取737例NSCLC患者EGFR突變率為30.0 %；廣西壯族突變率為44.8 %〔9〕。同樣，在2005年北京、上海、廣東、云南及臺灣肺癌患者EGFR突變率為34%〔5〕。本研究選取的對象是泉州地區(qū)的患者，上述結(jié)果能夠為酪氨酸激酶抑制劑分子靶向治療非小細(xì)胞肺癌提供參考依據(jù)。在我國，不同地區(qū)民族遺傳背景存在差異，EGFR基因突變率可能也有差異。

上述結(jié)果提示，在女性腺癌的患者中進(jìn)行酪氨酸激酶抑制劑的治療，可使一部分患者受益。特別對于老年患者，當(dāng)無法接受手術(shù)或化療的情況下，可根據(jù)EGFR突變情況選擇靶向藥物，更有臨床意義。

1 周瑞芳，盧仁泉.EGFR 基因突變檢測的臨床應(yīng)用〔J〕.現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2013;28(3)：72-4.

2 Cohen S.Purification of the receptor for epicermal growth factor from A-431 cells:its function as a tyrosyl kinase〔J〕.Methocs Enzymol,1983;99(4)：379-87.

3 Kosaka T,Yatabe Y,Encoh H,etal.Mutations of the epidermal growth factor receptor gene in lung cancer:biological and clinical implications〔J〕.Cancer Res,2004;64(24)：8919-23.

4 Shigematsu H,Lin L,Takahashi T,etal.Clinical and biological features associated with epidermal growth factor receptor gene mutations in lung cancers〔J〕.J Natl Cancer Inst,2005;97(5)：339-46.

5 董強剛.肺癌靶向治療研究進(jìn)展與我國肺癌的EGFR基因突變概況〔J〕.腫瘤，2005;25(6)：625-8.

6 Mitsucomi T,Yatabe Y.Mutations of the epidermal growth factor receptor gene and related genes as determinants of epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors sensitivity in lung cancer〔J〕.Cancer Sci,2007;98(12)：1817-24.

7 王國慶，符雅君，王 蓉，等.中國人非小細(xì)胞肺癌EGFR基因突變與患者特征關(guān)系的Meta分析〔J〕.中國醫(yī)學(xué)檢驗雜志，2009;10(2)：55-60.

8 陳慧娟，喻長順，李洪波，等.廣東地區(qū)非小細(xì)胞肺癌EGFR基因的突變研究〔J〕.分子診斷與治療雜志，2011;3(1)：29-32.

9 利基林，林書瀚，唐艷萍，等.廣西壯族非小細(xì)胞肺癌患者EGFR基因突變的研究〔J〕.中國癌癥防治雜志，2011;3(3)：200-3.

〔2015-12-31修回〕

(編輯 袁左鳴)

泉州市科技計劃重點項目(No.Z〔2013〕0064)

陳偉文(1971-)，男，副主任醫(yī)師，主要從事肺部腫瘤的規(guī)范化診療，呼吸系統(tǒng)危重癥診治研究。

R734.2

A

1005-9202(2016)20-5055-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.20.054

1 福建醫(yī)科大學(xué)附屬泉州第一醫(yī)院病理科

2 福建醫(yī)科大學(xué)附屬泉州第一醫(yī)院呼吸內(nèi)科

3 泉州醫(yī)高專附屬泉州市人民醫(yī)院