間充質(zhì)干細(xì)胞調(diào)控細(xì)胞自噬的作用及機(jī)制

劉紅紅 徐積兄

(南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院，江西 南昌 330006)

間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)是一種多能基質(zhì)細(xì)胞，可以分化為多種細(xì)胞類(lèi)型，包括成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、肌細(xì)胞和脂肪細(xì)胞〔1〕，具有抗自身免疫、分泌多種細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子的功能〔2～4〕。MSCs 在治療許多疾病上都具有比較好的療效，如糖尿病并發(fā)癥、肝硬化、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)等疾病，但具體作用機(jī)制尚不完全明確。自噬是細(xì)胞程序性死亡的一種類(lèi)型，即“Ⅱ型程序性細(xì)胞死亡”，是通過(guò)與溶酶體融合來(lái)消化細(xì)胞自身細(xì)胞器、蛋白質(zhì)的一種降解過(guò)程。自噬是調(diào)節(jié)細(xì)胞發(fā)育、分化、存活和內(nèi)穩(wěn)態(tài)的重要途徑〔5〕。鑒于MSCs的治療作用，目前關(guān)于MSCs在調(diào)控宿主細(xì)胞自噬方面的作用及機(jī)制也越來(lái)越受關(guān)注，本文就MSCs及其外泌體、條件培養(yǎng)基調(diào)控不同宿主細(xì)胞自噬的作用及機(jī)制進(jìn)行綜述。

1 MSCs與細(xì)胞自噬

自噬是指從粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的無(wú)核糖體附著區(qū)脫落的雙層膜包裹部分胞質(zhì)和細(xì)胞內(nèi)需降解的細(xì)胞器、蛋白質(zhì)等成分形成自噬體，并與溶酶體融合形成自噬溶酶體，降解其所包裹的內(nèi)容物，以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞本身的代謝需要和某些細(xì)胞器的更新。在自噬過(guò)程中，自噬小體吞噬細(xì)胞質(zhì)成分，導(dǎo)致胞漿形式的微管相關(guān)蛋白1A/1B輕鏈3(LC3-Ⅰ)結(jié)合形成LC3-磷脂酰乙醇胺復(fù)合物(LC3-Ⅱ)。因此，LC3-Ⅱ與LC3-Ⅰ的比率代表自噬活性〔6～8〕。自噬相關(guān)蛋白(ATG)6和Beclin-1是最重要的自噬調(diào)節(jié)因子，Beclin-1的上調(diào)通常代表自噬活性的增加〔9〕。在正常生理?xiàng)l件下，自噬在低水平持續(xù)進(jìn)行，清除多余和受損的細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)。這使細(xì)胞能夠重復(fù)利用降解的核苷酸、氨基酸和脂肪酸，以維持細(xì)胞的正常結(jié)構(gòu)和功能〔10〕。然而，在應(yīng)激條件下，自噬誘導(dǎo)營(yíng)養(yǎng)物再生或細(xì)胞死亡〔11，12〕。因此，自噬可以影響細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)，調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖或誘導(dǎo)細(xì)胞死亡。自噬也在生理和病理過(guò)程中起著重要作用〔13〕。已有研究表明，自噬不足導(dǎo)致蛋白質(zhì)聚集物的積累，導(dǎo)致包括中樞神經(jīng)系統(tǒng)、肝臟和腎臟在內(nèi)的各種器官的組織損傷〔14～16〕。雷帕霉素機(jī)械靶蛋白(mTOR)是自噬的關(guān)鍵調(diào)節(jié)劑，磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)-蛋白激酶B(Akt)及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)-結(jié)節(jié)性硬化復(fù)合物(TSC)通路是mTOR的上游信號(hào)通路。PI3K-Akt途徑被認(rèn)為是調(diào)節(jié)自噬的主要途徑之一〔17〕。

MSCs具有很強(qiáng)的自我更新能力和分化潛能，廣泛應(yīng)用于再生醫(yī)學(xué)。目前應(yīng)用較多的MSCs主要有：骨髓(BM)-MSCs、脂肪(AD)-MSCs、臍帶(UC)-MSCs、胎盤(pán)(P)-MSCs。目前關(guān)于MSCs在調(diào)控細(xì)胞自噬的治療作用的研究越來(lái)越多。MSCs可以增強(qiáng)細(xì)胞的自噬能力以抵抗凋亡〔18〕。在BM-MSCs與露于高糖(HG)培養(yǎng)基的大鼠胰島素(INS)-1細(xì)胞共培養(yǎng)的一項(xiàng)研究中發(fā)現(xiàn)：BM-MSCs可使細(xì)胞Beclin-1和LC3-Ⅱ表達(dá)增強(qiáng)，自噬小體和自噬溶酶體的形成增加，細(xì)胞凋亡減少〔19〕。MSCs可分泌外泌體，外泌體可與受體細(xì)胞的細(xì)胞膜融合，并將蛋白質(zhì)和RNA運(yùn)送到細(xì)胞中，從而影響細(xì)胞功能。研究表明，移植的干細(xì)胞主要通過(guò)旁分泌機(jī)制發(fā)揮治療作用，而外泌體在這一過(guò)程中起著重要的作用〔20〕。Liu等〔21〕發(fā)現(xiàn)MSCs來(lái)源的外泌體(MSC-Exo)可通過(guò)AMPK/mTOR和Akt/mTOR途徑誘導(dǎo)心肌細(xì)胞自噬，從而降低心肌缺血再灌注(I/R)損傷。

據(jù)報(bào)道，干細(xì)胞在培養(yǎng)液中分泌的神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、胰島素樣生長(zhǎng)因子和腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子等細(xì)胞因子可促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)〔22～24〕。因此，MSCs條件培養(yǎng)基(MSCs-CM)也可以影響細(xì)胞活性及功能。研究發(fā)現(xiàn)ucMSCs-CM通過(guò)調(diào)節(jié)小膠質(zhì)細(xì)胞的自噬和增強(qiáng)β-淀粉樣蛋白(Aβ)降解酶的表達(dá)，保護(hù)小膠質(zhì)細(xì)胞免受Aβ25-35誘導(dǎo)細(xì)胞死亡，促進(jìn)Aβ吞噬〔25〕。

2 MSCs對(duì)細(xì)胞自噬的調(diào)節(jié)作用

MSCs可通過(guò)不同通路調(diào)節(jié)β細(xì)胞、肝細(xì)胞、膽管上皮細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、肺內(nèi)皮細(xì)胞及T細(xì)胞的自噬水平，從而發(fā)揮對(duì)疾病的治療作用。

2.1胰島β細(xì)胞 2型糖尿病(T2DM)是人類(lèi)最常見(jiàn)的慢性代謝性疾病，其特征是胰腺β細(xì)胞衰竭引起的HG和胰島素分泌不足以補(bǔ)償胰島素抵抗。而慢性HG又是β細(xì)胞功能和質(zhì)量進(jìn)行性下降的主要原因〔26〕。動(dòng)物研究表明，BM-MSCs治療可以不同程度地降低血糖水平，并再生胰島和β細(xì)胞〔27，28〕。臨床研究表明，華通膠MSCs移植改善了T2D患者的代謝水平和β細(xì)胞功能〔29〕。Zhao等〔19〕通過(guò)與BM-MSCs共培養(yǎng)的INS-1細(xì)胞研究發(fā)現(xiàn)：BM-MSCs可增強(qiáng)β細(xì)胞的自噬能力，從而保護(hù)β細(xì)胞免受HG的慢性損傷。此外，體內(nèi)研究顯示BM-MSCs輸注可調(diào)節(jié)T2DM大鼠胰腺的自噬活性。

2.2肝細(xì)胞 I/R被廣泛認(rèn)為是肝損傷的一個(gè)重要因素，I/R可能會(huì)導(dǎo)致肝大部切除術(shù)后的肝功能衰竭。血紅素加氧酶(HO)-1是一種應(yīng)激誘導(dǎo)酶，具有抗炎、抗凋亡和抗氧化等功能。HO-1已被證實(shí)能通過(guò)調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激或炎癥來(lái)保護(hù)肝臟I/R損傷〔30〕。此外，研究發(fā)現(xiàn)HO-1也可通過(guò)自噬減輕肝臟I/R損傷〔31〕。BM-MSCs移植治療大鼠肝臟I/R損傷的研究中發(fā)現(xiàn)，BM-MSCs可減輕I/R損傷，促進(jìn)HO-1的表達(dá)，增強(qiáng)自噬作用，而用3-甲基腺嘌呤(MA)抑制自噬、鋅原卟啉IX抑制HO-1均可逆轉(zhuǎn)BM-MSCs的治療效果。這說(shuō)明BM-MSCs可通過(guò)HO-1介導(dǎo)的自噬保護(hù)肝臟免受I/R損傷〔32〕。Jung等〔33〕在胎盤(pán)分離的絨毛膜板源性MSCs(CP-MSCs)移植治療四氯化碳(CCl4)+損傷大鼠肝臟中發(fā)現(xiàn)：自噬表達(dá)水平顯著增加。此外，CCl4處理的原代大鼠肝細(xì)胞與CP-MSCs共培養(yǎng)時(shí)，壞死細(xì)胞減少，自噬信號(hào)及再生因子增加。因此CP-MSCs可通過(guò)增加肝細(xì)胞自噬表達(dá)水平來(lái)促進(jìn)肝細(xì)胞修復(fù)。

2.3膽管上皮細(xì)胞 原發(fā)性膽管炎(PBC)是一種器官特異性炎癥性疾病，其組織學(xué)特征是小膽管的膽管炎，導(dǎo)致肝硬化并最終衰竭，有研究提示肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞(IBECs)的自噬可能參與了該病進(jìn)行性膽管丟失的發(fā)病機(jī)制〔34〕。STAT3與細(xì)胞能量代謝和細(xì)胞死亡密切相關(guān)，在感染性疾病中發(fā)揮著重要作用。STAT3通過(guò)降低dsRNA依賴(lài)的蛋白激酶R(PKR)的活性作為自噬的負(fù)調(diào)控因子〔35〕。Zhu等〔36〕在人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞(HIBEC)與人骨髓MSCs(hMSCs)共培養(yǎng)時(shí)發(fā)現(xiàn)：LC3-Ⅱ、PKR的表達(dá)增加，P62、pSTAT3、STAT3明顯降低，自噬小體和自噬溶酶體的形成增加，自噬小體清除能力增強(qiáng)。STAT3沉默后，自噬水平無(wú)明顯改變。MSCs可能通過(guò)抑制STAT3活性來(lái)增強(qiáng)HIBECs的自噬通量。

2.4神經(jīng)細(xì)胞 慢性接觸有機(jī)溶劑可導(dǎo)致中樞-外周神經(jīng)病變，這種病變主要由其毒性代謝物2，5-己二酮(HD)介導(dǎo)。Hao等〔37〕在BM-MSCs移植治療HD中毒的大鼠后發(fā)現(xiàn)：BM-MSCs顯著降低HD中毒大鼠脊髓和坐骨神經(jīng)LC3-Ⅱ的水平和P62的降解。此外，在暴露于HD的背部運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞中，BM-MSCs也下調(diào)了細(xì)胞自噬水平，PIKⅢ抑制自噬減輕了HD的神經(jīng)毒性效應(yīng)。 BM-MSCs不能干擾Beclin-1，但可以促進(jìn)mTOR的激活。結(jié)果提示BM-MSCs移植通過(guò)Beclin-1非依賴(lài)性激活mTOR通路有效地改善了HD誘導(dǎo)的自噬，從而改善神經(jīng)元損傷和運(yùn)動(dòng)障礙。

2.5軟骨細(xì)胞 骨關(guān)節(jié)炎(OA)是關(guān)節(jié)退行性變最常見(jiàn)的原因，在關(guān)節(jié)軟骨的損傷中，軟骨會(huì)受到細(xì)胞外基質(zhì)代謝與軟骨細(xì)胞死亡和功能障礙之間的失衡，而軟骨細(xì)胞是軟骨中唯一的駐留細(xì)胞〔38，39〕。因此軟骨細(xì)胞是決定軟骨退變的重要因素。Zhou等〔40〕在軟骨細(xì)胞與AD-MSCs共培養(yǎng)時(shí)發(fā)現(xiàn)：AD-MSCs降低促炎因子白細(xì)胞介素(IL)-1β、IL-6和腫瘤壞死因子(TNF)-α的表達(dá)，抑制軟骨細(xì)胞凋亡，上調(diào)LC3-Ⅱ、p-Akt/Akt，下調(diào)p62、p-Smad1/Smad1和p-CAMK Ⅱ/CaMKⅡ，3-MA預(yù)處理可逆轉(zhuǎn)AD-MSCs對(duì)半胱氨酸天冬氨酸特異性蛋白酶(Caspase)-3的抑制作用，表明其抗凋亡作用與誘導(dǎo)自噬有關(guān)。此外，AD-MSCs治療可減輕大鼠OA模型的OA。AD-MSCs可能通過(guò)p-Akt/Akt，p-Smad1/Smad1和p-CAMKⅡ/CaMKⅡ通路調(diào)控自噬減少促炎因子的分泌，保護(hù)軟骨細(xì)胞免受凋亡。另外，Jiang等〔41〕研究發(fā)現(xiàn)AD-MSCs可通過(guò)mTOR通路介導(dǎo)的自噬調(diào)控抑制軟骨細(xì)胞分解代謝。

2.6肺內(nèi)皮細(xì)胞(PECs) PECs損傷是急性肺損傷(ALI)的重要病理過(guò)程。Zhou等〔42〕在BM-MSCs移植治療ALI小鼠時(shí)發(fā)現(xiàn)：BM-MSCs移植顯著減輕了小鼠ALI的嚴(yán)重程度，增加了PECs LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1的表達(dá)，促進(jìn)PECs存活，降低PECs中miR-142a-5p的水平。MSCs可能通過(guò)下調(diào)miR-142a-5p，增加Beclin-1介導(dǎo)的細(xì)胞自噬，從而減輕肺損傷。 Li等〔18〕在BM-MSCs與人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí)發(fā)現(xiàn)：BM-MSCs可降低PI3K Ⅰ類(lèi)和p-Akt的表達(dá)，增加PI3K Ⅲ類(lèi)的表達(dá)，增強(qiáng)自噬激活，降低細(xì)胞死亡水平以致降低內(nèi)皮通透性。此外，自噬抑制劑LY294002可抑制BM-MSCs誘導(dǎo)的自噬活性。BM-MSCs可通過(guò)PI3K/Akt信號(hào)通路調(diào)控PECs自噬水平。

2.7T細(xì)胞 SLE是一種自身免疫性炎癥性結(jié)締組織病，自噬在SLE中發(fā)揮著重要作用〔43〕。Chen等〔44〕發(fā)現(xiàn)SLE患者T細(xì)胞比健康對(duì)照者的T細(xì)胞具有更高的自噬活性，在UC-MSCs與SLE患者的T細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí)發(fā)現(xiàn)：UC-MSCs可抑制活化T細(xì)胞呼吸線(xiàn)粒體的生物發(fā)生，通過(guò)線(xiàn)粒體轉(zhuǎn)移下調(diào)自噬，從而減少T細(xì)胞凋亡。此外，雷帕霉素(RAPA)激活自噬增加T細(xì)胞凋亡，而3-MA抑制自噬減少T細(xì)胞凋亡。UC-MSCs通過(guò)線(xiàn)粒體轉(zhuǎn)移抑制SLE患者T細(xì)胞自噬，在SLE治療中可能發(fā)揮重要作用。

3 MSC-Exo對(duì)細(xì)胞自噬的調(diào)節(jié)作用

MSC-Exo是復(fù)雜的細(xì)胞間通訊系統(tǒng)中最小的內(nèi)源性膜結(jié)合型納米囊泡，其主要功能是在細(xì)胞通訊中傳遞細(xì)胞類(lèi)型的特定蛋白質(zhì)和核酸，包括mRNAs和miRNAs，以調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路〔45，46〕。MSC-Exo可以通過(guò)不同通路調(diào)節(jié)心肌細(xì)胞、肝細(xì)胞和腎小管上皮細(xì)胞的自噬水平，從而發(fā)揮治療作用。

3.1心肌細(xì)胞 缺血性心臟病(IHD)是目前世界范圍內(nèi)的主要死亡原因之一，I/R是IHD的主要治療方法，然而，I/R也可能導(dǎo)致梗死擴(kuò)大。Liu等〔21〕在MSC-Exo與大鼠缺氧心肌細(xì)胞H9C2共培養(yǎng)時(shí)發(fā)現(xiàn)：Beclin 1、LC3-Ⅱ和P-AMPK/AMPK表達(dá)增加，p-mTOR/mTOR與p-Akt/Akt表達(dá)降低。由此說(shuō)明MSC-Exo可通過(guò)AMPK/mTOR和Akt/mTOR途徑誘導(dǎo)心肌細(xì)胞自噬，從而降低心肌缺血I/R損傷(MIRI)。然而，Jiang等〔47〕研究發(fā)現(xiàn)hMSC-Exo可通過(guò)B細(xì)胞淋巴瘤(Bcl)-2的上調(diào)抑制心肌細(xì)胞I/R誘導(dǎo)的凋亡和自噬的激活。Xiao等〔48〕研究發(fā)現(xiàn)MSC-Exo中富含miR-125b-5p，miR-125b-5p的靶基因是p53。在缺氧和去血清培養(yǎng)的新生小鼠心肌細(xì)胞與MSCs或MSC-Exo共同培養(yǎng)時(shí)，p53-Bnip3通路活性及細(xì)胞的自噬通量和細(xì)胞死亡下降，但外泌體抑制劑GW4869基本消除這些改變。此外，體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)移植的MSCs治療改善了心功能和梗死面積，同時(shí)減少了凋亡和自噬流量的測(cè)量。結(jié)果表明，MSC-Exo分泌的miR125b-5p可通過(guò)p53/Bnip3信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)控心肌細(xì)胞自噬，從而改善心功能。MSCs對(duì)于自噬水平的調(diào)節(jié)是基于受損細(xì)胞的一個(gè)自噬狀態(tài)。所以，MSC-Exo無(wú)論是上調(diào)還是下調(diào)心肌細(xì)胞自噬水平，對(duì)于受損心肌細(xì)胞發(fā)揮的都是保護(hù)作用。

3.2肝細(xì)胞 急性肝衰竭(ALF)是由炎癥介導(dǎo)的肝細(xì)胞損傷并伴有肝細(xì)胞凋亡和壞死所引起的臨床綜合征。Zhao等〔49〕在BMSC-Exo與肝細(xì)胞損傷和凋亡模型共培養(yǎng)時(shí)發(fā)現(xiàn)：BMSC-Exo增強(qiáng)LC3和Beclin-1的表達(dá)，促進(jìn)自噬小體的形成；Bcl-2-Associated X的蛋白質(zhì)(Bax)和裂解Caspase-3的表達(dá)水平明顯降低，而B(niǎo)cl-2的表達(dá)水平上調(diào)。此外，3-MA可逆轉(zhuǎn)BMSC-Exo抑制凋亡的作用。結(jié)果表明BMSC-Exo通過(guò)促進(jìn)肝細(xì)胞自噬來(lái)減輕肝細(xì)胞凋亡，具有減少ALF后肝細(xì)胞凋亡的潛力。

3.3腎小管上皮細(xì)胞 順鉑是臨床上廣泛使用的廣譜抗腫瘤藥物之一，然而腎毒性是順鉑治療最嚴(yán)重、最常見(jiàn)的副作用。Wang等〔50〕在順鉑誘導(dǎo)的大鼠腎小管上皮細(xì)胞與hucMSC-Exo共孵育時(shí)發(fā)現(xiàn)：hucMSC-Exo可上調(diào)LC3B和自噬相關(guān)蛋白(ATG)5、ATG7的表達(dá)，抑制mTOR磷酸化和線(xiàn)粒體凋亡和炎性細(xì)胞因子的分泌。hucMSC-Exo可通過(guò)抑制腎近端小管上皮細(xì)胞mTOR信號(hào)通路激活自噬，從而減輕早期細(xì)胞凋亡和炎癥反應(yīng)，效減輕順鉑的腎毒性。因此，hucMSC-Exo預(yù)處理可能是提高順鉑療效的一種新方法。

4 MSCs-CM對(duì)細(xì)胞自噬的調(diào)節(jié)作用

MSCs-CM含有多種細(xì)胞因子和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，支持組織修復(fù)和再生。因此MSCs-CM可通過(guò)調(diào)節(jié)神經(jīng)細(xì)胞自噬水平，發(fā)揮對(duì)疾病的治療作用。

Zhang等〔51〕在BMSC-CM干預(yù)HD誘導(dǎo)的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元時(shí)發(fā)現(xiàn)：BMSC-CM可降低LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值，增加P62表達(dá)，減少自噬空泡數(shù)量。此外，BMSC-CM可增加NGF、p-Akt、mTOR的表達(dá)。因此BMSC-CM可能通過(guò)激活NGF-PI3K/Akt/mTOR來(lái)抑制HD誘導(dǎo)的神經(jīng)元自噬。

阿爾茨海默病(AD)是一種進(jìn)行性神經(jīng)退行性疾病，俗稱(chēng)“老年性癡呆”。AD的特征是細(xì)胞外沉積Aβ，膠質(zhì)增生和神經(jīng)元丟失。而小膠質(zhì)細(xì)胞參與了AD的發(fā)病和進(jìn)展。Xu等〔25〕將小膠質(zhì)細(xì)胞BV2與ucMSCs-CM共孵育后發(fā)現(xiàn)：ucMSCs-CM逆轉(zhuǎn)了Aβ25-35誘導(dǎo)的BV2細(xì)胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值的升高，解除了對(duì)Beclin-1和P62的抑制，上調(diào)了Aβ降解酶的表達(dá)，抑制BV2細(xì)胞增殖和細(xì)胞死亡，促進(jìn)對(duì)Aβ25-35的吞噬。ucMSCs-CM通過(guò)調(diào)節(jié)小膠質(zhì)細(xì)胞的自噬和增強(qiáng)Aβ降解酶的表達(dá)來(lái)保護(hù)小膠質(zhì)細(xì)胞。由上可知，MSCs-CM 可通過(guò)抑制受損神經(jīng)細(xì)胞的自噬水平，從而保護(hù)細(xì)胞，但具體是MSCs-CM 中的哪種或者哪些成分發(fā)揮的保護(hù)作用，則需要進(jìn)行更深入的實(shí)驗(yàn)研究。

5 MSCs 研究現(xiàn)狀

到目前為止，注冊(cè)MSCs臨床研究的總共有9 233個(gè)。MSCs對(duì)于終末期肝病、下肢缺血性疾病、炎性腸病、腎病等疾病都有不錯(cuò)的療效。

MSCs對(duì)于心臟疾病也有一定的作用。MSCs可通過(guò)多種機(jī)制啟動(dòng)心肌修復(fù)，包括促進(jìn)新生血管、抑制細(xì)胞凋亡和抑制心肌肥厚。有研究人員評(píng)估了三種劑量的自體或同種異體BM-MSCs對(duì)IHD患者的影響。研究表明，所有劑量都對(duì)患者的能力和心室轉(zhuǎn)換有積極影響，而且自體BM-MSCs冠狀動(dòng)脈內(nèi)移植3個(gè)月后，左心室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)顯著改善〔52〕。此外，在隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)中，有學(xué)者對(duì)非IHD患者的同種異體BM-MSCs和安慰劑對(duì)照進(jìn)行了比較，結(jié)果表明，左心室功能有趨于完善的趨勢(shì)〔53〕。

MSCs可通過(guò)與廣泛的免疫細(xì)胞如T、B淋巴細(xì)胞、自然殺傷(NK)細(xì)胞和樹(shù)突細(xì)胞相互作用來(lái)調(diào)節(jié)適應(yīng)性和先天免疫系統(tǒng)。因此MSCs也被用于治療各種免疫疾病，如移植物抗宿主病(GVHD)、SLE和多發(fā)性硬化癥(MS)。

UC-MSCs通過(guò)調(diào)節(jié)SLE患者轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β和前列腺素E-2的水平，增加調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)，降低Th17細(xì)胞〔54〕。一項(xiàng)臨床研究發(fā)現(xiàn)同種異體BM-MSCs使難治性SLE患者在12～18個(gè)月內(nèi)病情穩(wěn)定緩解，Treg細(xì)胞上調(diào)〔55〕。GVHD是一種難治性甚至致死性疾病，通常發(fā)生在異體造血干細(xì)胞移植后。在急性GVHD環(huán)境下，特別是激素難治性GVHD，通常向患者輸注異體BM-MSCs〔56〕。結(jié)果顯示，7例激素難治性急性GVHD患者中有5例完全改善，炎性細(xì)胞因子迅速減少，存活率顯著延長(zhǎng)，基線(xiàn)淋巴細(xì)胞絕對(duì)值高〔57〕。另一項(xiàng)研究24例患者中有17例對(duì)異基因BM-MSCs輸注有改善作用〔58〕。MS是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一種炎癥性疾病，以脫髓鞘和神經(jīng)退行性疾病為特征。到目前為止，MS患者還沒(méi)有明確的治療方法，BM-MSCs正在成為最有前景的治療方法之一。這些臨床試驗(yàn)中的大多數(shù)都是采用自體BM-MSCs進(jìn)行的，并通過(guò)髓鞘內(nèi)輸注給藥。在注射MSCs一年后發(fā)現(xiàn)，MSCs移植能夠改善或延緩難治性MS的疾病進(jìn)展〔59〕。

綜上，對(duì)于細(xì)胞治療，MSCs可以直接應(yīng)用于受損組織，也可以以細(xì)胞外小泡的形式使用，其中包含MSCs以自分泌或旁分泌方式產(chǎn)生的生物活性分子，特別是生長(zhǎng)因子和免疫調(diào)節(jié)分子。MSCs移植是目前治療各種疾病的一種非常有應(yīng)用前景的治療方法，但其具體機(jī)制并不是十分明確，但在最終廣泛應(yīng)用于臨床前，仍有相當(dāng)大的挑戰(zhàn)需要克服。MSCs制備、最佳細(xì)胞類(lèi)型、給藥劑量、給藥途徑和安全性等問(wèn)題都需要統(tǒng)一解決。自噬是真核細(xì)胞中溶酶體對(duì)受損或老化的細(xì)胞器和大分子進(jìn)行生物降解的有序過(guò)程，在MSCs治療過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用。但自噬與MSCs治療之間的具體機(jī)制目前不是很清楚，仍需大量的臨床前研究去明確闡述其作用機(jī)制，以便將來(lái)更好地應(yīng)用于臨床。