豬繁殖與呼吸綜合征的綜合防治措施

關(guān) 淼

（1.遼寧省動物疫病預(yù)防控制中心，遼寧 沈陽 110164； 2.遼寧省動物醫(yī)學(xué)研究院，遼寧 沈陽 110164）

豬繁殖與呼吸綜合征（porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）引起的一種急性、高度接觸性傳染病。該病毒可以破壞感染豬機體的免疫細(xì)胞，造成持續(xù)性感染和多途徑傳播，隨著養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，其感染的范圍越來越廣，目前該病在世界范圍內(nèi)傳播范圍廣泛，是嚴(yán)重影響?zhàn)B豬業(yè)健康發(fā)展的主要豬傳染病之一。

1 飼養(yǎng)管理

加強日常生產(chǎn)過程中的飼養(yǎng)管理是保障豬只健康的重要環(huán)節(jié)。制定日常飼養(yǎng)管理規(guī)程，飼喂優(yōu)質(zhì)全價飼料，保證營養(yǎng)供給，提高機體免疫力保障豬舍內(nèi)部適宜的溫濕度，“小豬怕冷，大豬怕熱”，哺乳仔豬舍要常年維持在25～30℃，育肥豬舍要維持在20～23℃，成年豬舍維持在15～18℃，豬舍內(nèi)最適宜相對濕度一般為50%～80%。根據(jù)季節(jié)以及豬的大小調(diào)節(jié)設(shè)置合適的圈舍內(nèi)飼養(yǎng)密度，冬季增加飼養(yǎng)密度，夏季減少飼養(yǎng)密度。在豬舍內(nèi)設(shè)置通風(fēng)設(shè)備，保持門窗經(jīng)常開啟，保證豬舍內(nèi)良好的通風(fēng)換氣。保證圈舍內(nèi)干燥衛(wèi)生，同時保證充足的光照可以影響豬只的健康和增加生產(chǎn)力。

引種盡量做到種源供應(yīng)單位的單一性，認(rèn)真考察種豬健康水平，外引豬隔離期要不小于8周。建立完備的進(jìn)出豬只檢疫制度。最好做到自繁自養(yǎng)，堅持做到全進(jìn)全出的運營模式。對豬場環(huán)境進(jìn)行系統(tǒng)的消毒，包括豬舍內(nèi)消毒，豬群內(nèi)正在使用的設(shè)備的清洗消毒，場內(nèi)使用的車輛的清洗消毒以及人員進(jìn)出豬舍的消毒等。做好廢棄污物以及豬只排泄物的無害化處理。不要與其他動物混合飼養(yǎng)，嚴(yán)格防止嚙齒類動物、野生動物以及禽類與豬只接觸。

2 免疫接種

PRRSV的內(nèi)在基因組具有不穩(wěn)定性，隨著新的毒株的不斷出現(xiàn)而持續(xù)的發(fā)生變化，并產(chǎn)生新的致病模式。目前，治療PRRS仍然沒有特殊有效的方法，雖然市場上可獲得的疫苗僅能部分地預(yù)防或抵消疾病以及相關(guān)的損失，但疫苗接種仍然是預(yù)防和控制該病最有效的方法之一。

2.1 滅活疫苗

同其他疫苗相比，滅活疫苗因為蛋白結(jié)構(gòu)的改變，沒有散毒和毒性返強的危險，具有更高的安全性，同時還具有其對母源抗體的干擾作用不明顯，儲存條件要求低，更便于運輸?shù)葍?yōu)點。但是由于滅活使抗原物質(zhì)在抗原表位上的缺失，使之在一定程度上降低了抗原物質(zhì)的免疫原性，滅活的抗原物質(zhì)在豬體內(nèi)不能進(jìn)行復(fù)制來增加抗原物質(zhì)，所以注射滅活苗而產(chǎn)生的免疫水平很低，不足以產(chǎn)生足夠的免疫保護(hù)，免疫效果并不理想。

與弱毒苗相比，由于更好的安全性，滅活的PRRSV疫苗已在全球獲得許可。同時，一些報告報道了滅活PRRSV疫苗對野生型病毒感染的不良表現(xiàn)，缺乏產(chǎn)生可檢測的PRRSV特異性抗體和細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。但是有研究表明與新型佐劑組合的特殊制劑可以增強對滅活的PRRSV疫苗的免疫應(yīng)答。同時長期給予血清反應(yīng)陽性母豬滅活病毒可提高其抗PRRSV免疫力，并引起母豬繁殖性能的顯著改善。

2.2 弱毒疫苗

弱毒疫苗的優(yōu)點是能夠使被免疫豬產(chǎn)生較強的免疫保護(hù)力，疫苗病毒可以在豬體內(nèi)進(jìn)行復(fù)制使免疫豬獲得較長的免疫期，是目前臨床最常使用的疫苗。其缺點是存在毒力返強和散毒的可能，使用弱毒疫苗時應(yīng)該謹(jǐn)慎并注意其適用范圍。

Canelli E等[1]的研究結(jié)果顯示測試的疫苗可以提供部分但統(tǒng)計學(xué)上顯著的臨床、病毒學(xué)和病理學(xué)保護(hù)，與未接種疫苗豬相比，接種疫苗的動物即使在病毒血癥期也顯示出更高的平均日增重。Sattler T等[2]的試驗結(jié)果顯示使用的實驗PRRSV-2活疫苗提供了對臨床疾病的保護(hù)，并且顯著降低了用越南HP-PRRSV野毒株攻擊后的所發(fā)生的組織病理學(xué)變化和病毒載量。Jeong J等試驗結(jié)果表明用PRRSV-2 MLV疫苗對豬進(jìn)行疫苗接種可以減少PRRSV-1和PRRSV-2的病毒載量。Kroll J等通過對后備母豬接種MLV疫苗，用以比較單次接種和再次接種疫苗對免疫效果的影響。試驗結(jié)果表明，單次疫苗接種和再次接種均可有效降低PRRSV攻擊后產(chǎn)生的病毒血癥，再次接種似乎比單次疫苗接種能提供更好地防止產(chǎn)生病毒血癥的保護(hù)。另外該研究人員通過對歐洲衍生PRRS MLV疫苗進(jìn)行評估結(jié)果表明，該MLV疫苗可以賦予免疫豬接種疫苗后針對歐洲異源PRRSV長達(dá)26周的免疫保護(hù)期，這個保護(hù)期長度可與商業(yè)豬的預(yù)期壽命相符合。

2.3 核酸疫苗

核酸疫苗是挑選一段目的基因并將其與真核表達(dá)載體進(jìn)行重組，該基因在宿主體內(nèi)可以表達(dá)出抗原蛋白，從而刺激機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答。核酸疫苗可以刺激機體產(chǎn)生體液免疫應(yīng)答和細(xì)胞免疫應(yīng)答，但對DNA疫苗的研究表明其仍然存在與非復(fù)制病毒載體疫苗相同的缺點。此外，關(guān)于DNA疫苗是否能夠充分解決PRRSV的異源性質(zhì)知之甚少。盡管PRRSV疫苗的這些新方法仍需要大量開發(fā)，但它們作為促進(jìn)MLV誘導(dǎo)保護(hù)的替代方法顯示出前景。最近的一項研究表明，在MLV免疫前2周用編碼截短的PRRSV N蛋白的DNA疫苗進(jìn)行免疫，在攻毒實驗期間可以導(dǎo)致PRRSV特異性免疫力提高IL-10減少和PRRSV特異性Treg的產(chǎn)生。另外有研究構(gòu)建了可以表達(dá)PRRSV-1的GP3和GP5的DNA疫苗，免疫BALB/c小鼠后，研究的結(jié)果表明，其在小鼠中產(chǎn)生了更好的免疫應(yīng)答。另一項研究顯示，用GP5 Mosaic T細(xì)胞DNA疫苗免疫豬可以引起更高的病毒特異性抗體和IFN-γ mRNA表達(dá)，但仍然無法提供全面保護(hù)。因此，基于單一PRRSV抗原的DNA疫苗可能不足以完全保護(hù)?？傊m然效力和安全性問題仍然圍繞著當(dāng)前的PRRSV MLV，但基于新方法的疫苗還遠(yuǎn)未做好實際應(yīng)用的準(zhǔn)備，并且在沒有重大技術(shù)突破的情況下幾乎沒有可能取代MLV。

2.4 活載體疫苗

作為載體疫苗的復(fù)制缺陷型病毒（腺病毒載體和痘病毒載體）已被測試用于PRRSV并取得了一些成功。Xia W等的研究表明兩種重組腺病毒載體表達(dá)的可溶性唾液酸黏附素（sialoadhesin，Sn）受體Sn4DFc和可溶性CD163受體SRCR59-Fc在體外具有附加的抗PRRSV作用，臨床觀察和定量RT-PCR分析顯示，在感染高致病性JXA1，JS07或SH1705株P(guān)RRSV后，所有雙重接種的豬均存活，并可以顯著減輕臨床表現(xiàn)、病毒血癥、糞便病毒排放和組織病毒載量。Han J等開發(fā)了一種可以共表達(dá)歐洲型PRRSV的GP3和GP5蛋白以及PCV2的ORF2蛋白的重組痘病毒疫苗，評估結(jié)果顯示重組痘病毒疫苗及其滅活疫苗均引發(fā)顯著的體液和細(xì)胞免疫應(yīng)答，其特異性抗體應(yīng)答和T淋巴細(xì)胞增殖水平高于對照組。此外，接種了該種組痘病毒疫苗的豬對105 TCID50歐洲型PRRSV LV毒株的感染獲得了完全保護(hù)力，表明重組痘病毒疫苗是針對歐洲PRRSV和PCV2的潛在候選疫苗。Hu P等構(gòu)建了一種日本腦炎病毒，這種基因基于復(fù)制子的日本腦炎病毒在結(jié)構(gòu)基因（C-prM-E）中含有大量缺失。將PRRSV GP5/M插入缺失位置，以研發(fā)一種PRRSV的嵌合復(fù)制子候選疫苗。結(jié)果顯示這種復(fù)制子疫苗可以刺激BALB/c小鼠模型產(chǎn)生抗體應(yīng)答并誘導(dǎo)細(xì)胞免疫應(yīng)答。ELSA數(shù)據(jù)的分析顯示，用表達(dá)GP5/M的復(fù)制子疫苗接種疫苗比傳統(tǒng)DNA疫苗能夠誘導(dǎo)更好的抗體應(yīng)答。

2.5 亞單位疫苗

Jeong J等通過試驗評估了接種PRRS亞單位疫苗后母豬的繁殖性能，在妊娠58和79 d（產(chǎn)前8周和5周）進(jìn)行肌肉免疫。疫苗接種未導(dǎo)致任何觀察到的不良反應(yīng)。與未接種疫苗的母豬相比，接種疫苗的母豬在繁殖性能（減少流產(chǎn)）和窩仔特性（斷奶仔豬增加）方面表現(xiàn)出顯著改善。與未接種疫苗的對照組相比，接種疫苗的母豬具有顯著更高的PRRSV ELISA陽性率和PRRSV特異性IFN-γ分泌細(xì)胞的數(shù)量。

3 治療

目前并無特異有效的藥物可以治療PRRS，發(fā)病后主要采取對癥和控制繼發(fā)感染治療。發(fā)現(xiàn)豬只異常后及時診斷并確診，采取消毒、應(yīng)急免疫、隔離等綜合防治措施控制病情的擴(kuò)散。發(fā)生PRRS以后發(fā)病豬常會混合感染其他病毒和細(xì)菌而使病情加重，比如豬瘟病毒、豬傳染性腹瀉病毒、豬病毒性胃腸炎病毒、偽狂犬病毒、豬圓環(huán)病毒、鏈球菌、附紅細(xì)胞體和豬肺炎支原體等。針對豬瘟病毒、偽狂犬病毒等有疫苗的病原體需要按照免疫規(guī)程定期接種疫苗進(jìn)行預(yù)防和控制，沒有疫苗的病原體需要使用有效藥物治療。對發(fā)病豬使用敏感抗生素來預(yù)防和治療繼發(fā)感染，建議使用抗生素以前進(jìn)行藥敏試驗，用以篩選最為合適的抗生素。使用解熱鎮(zhèn)痛藥物減少和降低發(fā)熱。補充微量元素，用以提高患病豬的抗病能力。如果發(fā)生腹瀉需要口服補液鹽。發(fā)病嚴(yán)重的患豬要及時淘汰并進(jìn)行無害化處理。疑似發(fā)生HP-PRRSV的應(yīng)立即向政府機關(guān)主管部門報告，按國家規(guī)定的控制規(guī)范進(jìn)行后續(xù)處置。

有研究觀察到異黃酮查爾酮（IBC）在體外具有有效的抗PRRSV活性，IBC最早是從補骨脂中分離出來的。經(jīng)過系統(tǒng)研究表明IBC在PRRSV感染后階段可以抑制PRRSV的復(fù)制。原花青素A2在Marc-145細(xì)胞中表現(xiàn)出有效的抗PRRSV感染的抗病毒活性，在豬體內(nèi)PRRSV感染的主要靶細(xì)胞豬肺泡巨噬細(xì)胞中也發(fā)現(xiàn)了類似的抑制作用，其通過靶向多種途徑抑制PRRSV復(fù)制，包括阻斷病毒進(jìn)入和子代病毒釋放。另外，膽固醇25-羥化酶（CH25H）可以通過靶向病毒滲透以及降解NSP1α來限制PRRSV復(fù)制，具有廣泛的抗病毒作用。CH25H不僅通過產(chǎn)生25-羥基膽固醇（25HC）抑制病毒穿透，而且通過泛素-蛋白酶體途徑降解病毒蛋白，發(fā)揮其抗PRRSV作用。

4 凈化

凈化的方法包括全群撲殺、重新繁殖、檢疫、淘汰和封閉豬群等。全群撲殺、重新繁殖費用太高，對于養(yǎng)殖量大的場戶會造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。檢疫和淘汰方法是使用鑒別PRRSV野毒和疫苗毒的RT-PCR檢測方法進(jìn)行鑒別診斷，可以凈化非免疫種豬群和血清陽性率較低的豬群。封閉豬群方法是發(fā)生PRRS陽性豬場在6～8個月時間內(nèi)不再補充后備母豬，陸續(xù)淘汰發(fā)病豬及帶毒豬，在3個月后建立PRRSV陰性豬群，在之后的6個月內(nèi)要保持公豬精液的陰性。

臨床上沒有行之有效的藥物可以治療PRRS，使易感動物獲得主動免疫或者被動免疫是臨床預(yù)防該病發(fā)生的有效手段之一，結(jié)合日常生產(chǎn)過程中對生物安全措施的嚴(yán)格把控，降低感染發(fā)病風(fēng)險。雖然國內(nèi)外的研究人員對PRRS的研究取得了很大成果，但是仍然存在很多尚未解決的問題。首先，其致病機制尚未完全清楚；其次PRRS的發(fā)生有一定的地域性，要對PRRS施行有效免疫預(yù)防，首先應(yīng)該掌握該地區(qū)PRRSV流行毒株的生物學(xué)特征；由于不同地區(qū)的PRRSV存在一定差異性，各個地區(qū)實驗室在進(jìn)行PRRSV相關(guān)檢驗的時候，需要有針對本地區(qū)流行毒株以及基因型的診斷方法作為檢驗依據(jù)，便于數(shù)據(jù)匯報、分析和統(tǒng)計；由于目前臨床主要采取疫苗免疫接種控制該病的發(fā)生，PRRSV不同基因型的鑒別診斷也是必不可少的；在制定免疫程序的時候，各個養(yǎng)豬場戶存在超前免疫、超量免疫、加強免疫時間不同以及接種疫苗種類等問題，過大的免疫壓力對病毒變異的影響，制定合理的免疫程序使豬群產(chǎn)生足夠的免疫保護(hù)都是需要探索解決的問題。PRRS和PRRSV的應(yīng)用研究任重而道遠(yuǎn)。