1例雞痘病的診斷與防治

羅世民，白 玲

懷化職業(yè)技術(shù)學(xué)院，湖南 懷化 418000

雞痘是由雞痘病毒經(jīng)皮膚、黏膜創(chuàng)傷感染而引起的一種發(fā)熱、急性且能通過接觸而傳播的傳染病[1]。該病的主要病理特征是在皮膚上出現(xiàn)水痘和皮疹，在沒有或很少有毛發(fā)的皮膚和口腔及咽喉的黏膜中形成纖維素壞死假膜[2]。每個日齡段的雞均會感染雞痘，但其主要危害雛雞[3]。雞一旦感染雞痘病，在雞冠、肉髯、臉部、嘴角及眼部等無毛或少毛部位會出現(xiàn)疣狀灰白色結(jié)節(jié)[4]，會出現(xiàn)增重緩慢、消瘦、產(chǎn)蛋量嚴(yán)重下降的現(xiàn)象。在飼養(yǎng)衛(wèi)生條件差及雞群營養(yǎng)不良的情況下，該病還可并發(fā)其他傳染病、寄生蟲病，可引起較多雞只的死亡。該病呈全球性分布，且一年四季均可發(fā)生，尤以春夏兩季發(fā)生較多[5]。

臨床上該病可分為皮膚型、黏膜型、眼型、混合型及敗血型等[6]，其中以皮膚型最為常見[7]。目前，在大型養(yǎng)雞場中，該病最易相互接觸傳播而造成流行。

1 發(fā)病情況

2021 年8 月12 日，湖南省邵陽新寧縣某養(yǎng)殖戶于林間飼養(yǎng)2 月齡廣西三黃雞580 羽。最近，60余只雞發(fā)生異常狀況，病雞出現(xiàn)精神沉郁，羽毛蓬松，食欲不振或廢絕，縮頸閉眼，行走困難、眼瞼及眼周圍腫脹、咳嗽甩頭等一系列臨床癥狀，部分雞的雞冠、肉髯和眼等部位長出疣狀灰白色小結(jié)節(jié)。在一些病雞的雞冠、臉及肉髯等處會出現(xiàn)小泡疹及痂皮；在病雞的口腔及喉頭的黏膜上，覆蓋一層黃灰色纖維素壞死膜或口瘡。一般在發(fā)病3 d 后，病雞開始出現(xiàn)死亡（已死亡13 只）。養(yǎng)殖戶一直以為是蚊蟲叮咬雞群所引起，故從未加以重視，只在痘疹出現(xiàn)的部位使用紅霉素、環(huán)丙沙星等抗生素進行涂抹，但雞群的病情仍未得到好轉(zhuǎn)，反而愈加惡化。遂邀請筆者前往進行診治。

2 臨床癥狀

筆者趕到現(xiàn)場，見大部分病雞出現(xiàn)精神沉郁、打瞌睡、食欲減退或廢絕、羽毛蓬松粗亂、縮頸閉眼、行走困難、眼瞼及眼周圍腫脹、咳嗽甩頭、流淚及呼吸困難等一系列臨床癥狀。部分雞的雞冠、肉髯和眼等部位有小泡疹出現(xiàn)，一些皰疹破裂形成痂皮，一些已長出疣狀灰白色小結(jié)節(jié)。在一些病雞的口腔及喉頭的黏膜上發(fā)現(xiàn)有一層黃灰色偽膜覆蓋和口瘡現(xiàn)象。

3 剖解及病理變化

挑選1 只病雞進行解剖，臨床檢查可見病雞精神沉郁、羽毛蓬松粗亂，雞冠及垂髯有疣狀灰白色小結(jié)節(jié)、眼瞼及眼周圍腫脹、頻頻咳嗽甩頭。病理剖解可見口腔、咽喉及氣管開口處的黏膜有潰爛，并在潰爛處附有一層干酪狀假膜，撕去假膜黏膜出血。此外，可見肺部充血，氣管渾濁。用剪刀剖開病雞的口腔、喉頭及氣管開口，發(fā)現(xiàn)位于這些部位的黏膜發(fā)生潰瘡，甚至一些潰瘡創(chuàng)面污穢不堪，在黏膜上遺留出血裂口，甚至有些潰瘡面已形成乾酪狀偽膜。此外，在某些病雞的肺部，發(fā)現(xiàn)有充血、呈混濁狀氣囊。

4 診 斷

4.1 初步診斷

根據(jù)發(fā)病季節(jié)、場地的衛(wèi)生情況、雞所表現(xiàn)出來的臨床癥狀、養(yǎng)殖戶用藥情況、剖檢所見的病理變化及筆者臨床實踐經(jīng)驗，初步診斷該病為雞痘病。

4.2 分子生物學(xué)診斷

剝?nèi)○酄罨野咨〗Y(jié)節(jié)于1 支潔凈的離心管中，置于冰盒內(nèi)，拿回實驗室進行分子生物學(xué)檢測。用血液、組織DNA 提取試劑盒（購買于北京天根生化科技有限公司）提取疣狀灰白色小結(jié)節(jié)的總DNA。將提取好的DNA 樣品置于-20 ℃保存，備用。

根據(jù)已公布的雞痘病毒的P4b 基因序列設(shè)計引物，運用Primer primer 5.0 軟件設(shè)計1 對特異性引物，即P4b-F（ACAACGACCTATGCGTCTTC），P4b-R（CGTAGCCTATGGAATCCTGG）對已提取好的DNA 進行擴增。反應(yīng)體系為50 μL（高保真酶（Mix），25 μL；ddH2O，22 μL；DNA 模板，1 μL；上游引物，1 μL；下游引物，1 μL），反應(yīng)條件為：95 ℃（預(yù)熱），5 min；95 ℃（變性），30 s；54 ℃（退火），30 s；72 ℃（延伸），1 min；共35 個循環(huán)；最后72 ℃（延伸），5 min。反應(yīng)完成后，用移液槍從反應(yīng)液中吸取5 μL PCR 產(chǎn)物于含有溴化乙錠的1.5%瓊脂糖上進行凝膠電泳檢測。在瓊脂糖凝膠中出現(xiàn)1條明亮、清晰的條帶，結(jié)果顯示為陽性。將PCR 產(chǎn)物發(fā)送至上海生工生物有限公司進行雙向測序，以獲得目的基因條帶。

將所獲得的序列在GenBank 上進行BLAST 搜索分析，發(fā)現(xiàn)與已公布的雞痘病毒的P4b 基因序列的相似度為99%，從而確定該病原體為雞痘病毒，確診該病為雞痘病。

5 治 療

根據(jù)確診結(jié)果，采用碘酊+泰樂菌素對雞群進行治療和防預(yù)。用鑷子小心剝離患部痂膜，使用碘酊在患部涂搽，2 次/d，連涂5 d[3]；用0.5%～1.0%的泰樂菌素混入飼料或飲水，1 次/d，連喂7 d[5]。此外，在飼料中添加維生素A 和魚肝油，增強雞的抵抗力，以利于組織和黏膜的新生[4]。

6 預(yù)防措施

6.1 加強飼養(yǎng)管理

養(yǎng)殖戶在平時的飼養(yǎng)過程中，應(yīng)注重雞飼料的搭配，使其營養(yǎng)分布均衡；也可在飼料中適量添加一定量的維生素和礦物質(zhì)，以期使雞的身體素質(zhì)和抗病能力得到大幅度地提高[8]。

6.2 改善養(yǎng)殖場內(nèi)的衛(wèi)生條件

及時清掃和定期消毒雞舍，盡量確保雞舍的地面干燥；在一偏僻處堆積發(fā)酵雞糞。對容易孳生和隱避蚊蟲的區(qū)域要徹底清除，不定期地在這些區(qū)域噴灑殺蟲劑。特別在悶熱的天氣，選用無藥害的殺蟲劑（特效滅蟲精）對雞舍進行帶雞噴霧殺蟲[9]。此外，可在雞舍內(nèi)安裝紗窗（孔徑＞0.15 mm），甚至可在雞舍內(nèi)加裝誘蟲燈，以誘殺蚊蟲等吸血性昆蟲[10]。

6.3 接種疫苗

接種疫苗可有效地防止該病的發(fā)生，一般第1次接種是在雞10 日齡左右進行，第2 次接種是在雞75 日齡至產(chǎn)蛋前進行[7]。若養(yǎng)雞場位于疫區(qū)，建議對雞只實施翼膜穿刺法接種“沙氏雞痘疫苗”，甚至1～2 日齡的雞只也需接種。用溫和雞痘疫苗補充接種小雞群，用沙氏雞痘疫苗對6～12 周齡雞只進行補充接種。用時以相同體積的生理鹽水或冷開水將疫苗稀釋10～50 倍，用鋼筆尖或大針蘸取疫苗，于雞翅膀內(nèi)側(cè)無血管處皮下進行刺種。在接種7 d后，接種部位會出現(xiàn)紅腫，甚至起泡的現(xiàn)象，然后再逐漸干燥、結(jié)痂，一段時間后痂皮脫落。雞痘疫苗接種時必須注意：在緊迫情況下，如選擇同一時間對雞群接種，其接種的先后順序是：從未發(fā)病或發(fā)病癥狀較輕的雞群開始，再是發(fā)病嚴(yán)重的雞群。疫苗盡量一次用完，不要留存。接種時，疫苗要充分搖勻。此外，接種疫苗必須和斷喙在時間上要錯開3 d以上，否則容易誘導(dǎo)發(fā)病。工作完成后，雙手必須做消毒，殘液要做燃燒或煮沸處理。此外，雞痘是高傳染性疾病，只要有雞痘的苗頭出現(xiàn)，就要引起重視并及時治療。

7 結(jié) 語

雞痘主要通過吸血性昆蟲傳播，其臨床癥狀與雞傳染性支氣管炎等病的癥狀相似，非專業(yè)人士很難識別該病，故如何精準(zhǔn)、快速地診斷該病已成為防控的關(guān)鍵。PCR 檢測不僅操作簡便、省時，而且結(jié)果精確，為養(yǎng)殖戶對該病的診斷和治療提供了便捷有效的途徑。