1例山羊痘病的診斷與防治

鄒南花，羅世民

1.湖南省中方縣銅灣鎮(zhèn)人民政府農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)中心，湖南 中方 418000；2.懷化職業(yè)技術(shù)學(xué)院，湖南 懷化 418000

山羊痘病，俗稱“羊天花”，是由隸屬于痘病毒科、羊痘病毒屬的山羊痘病毒所引起的一種急性、熱性及高度接觸性傳染病[1-2]，以發(fā)熱、全身痘疹、結(jié)節(jié)及內(nèi)臟病變和死亡為病理特征[3-4]。該病可通過接觸、飛沫、塵埃、經(jīng)呼吸道、消化道或受損傷的皮膚、黏膜及羊虱等體外寄生性節(jié)肢動物等途徑感染山羊和綿羊[5-6]。

1 發(fā)病情況

2020 年6 月13 日，筆者接到湖南省懷化市芷江縣某養(yǎng)殖戶電話。據(jù)養(yǎng)殖戶反映：其于山林放養(yǎng)了156 頭山羊，有6 頭3 月齡的羔羊出現(xiàn)異常狀況。6 頭發(fā)病羊均出現(xiàn)高熱不退、精神不振、食欲廢絕、飲欲增加、呼吸急促的癥狀，口腔上下唇及少毛或無毛皮膚等部位出現(xiàn)丘疹和皰疹，皰疹破裂干涸結(jié)成1 層厚厚的結(jié)痂。該養(yǎng)殖戶曾使用阿莫西林、恩諾沙星等抗生素進(jìn)行治療，但未取得良好的療效。遂邀筆者前往進(jìn)行診治。

2 臨床癥狀

筆者趕到現(xiàn)場，經(jīng)視診發(fā)現(xiàn)這6 頭發(fā)病羔羊的被毛粗亂、精神不振、喜臥、厭食但喜飲水、鼻腔或眼角流出黏膿性分泌物，有時(shí)伴發(fā)輕咳，口腔上下唇及少毛或無毛皮膚等部位有1 層厚厚的結(jié)痂；經(jīng)臨床檢查，發(fā)現(xiàn)6 頭羔羊的體溫偏高（39.0～40.0 ℃），心跳及呼吸加快，大腿內(nèi)側(cè)及蹄間等少毛或無毛皮膚等部位均有大量顆粒狀的皰疹出現(xiàn)。

3 診 斷

3.1 初步診斷

根據(jù)發(fā)病羔羊表現(xiàn)出的臨床癥狀、病變，結(jié)合筆者的臨床經(jīng)驗(yàn)，初步診斷該病為山羊痘病毒引起的山羊痘病。

3.2 分子生物學(xué)診斷

剝?nèi)〔⊙蚩诖缴系慕Y(jié)痂于1 支潔凈的EP 管中，置于冰盒內(nèi)，帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行分子生物學(xué)檢測。用血液、組織DNA 提取試劑盒（購于北京天根生化科技有限公司）提取結(jié)痂的總DNA。將提取好的DNA 樣品置于-20 ℃保存，備用。

基于已公布的山羊痘病毒的P32基因序列，運(yùn)用引物設(shè)計(jì)軟件Primer 5.0，設(shè)計(jì)1 對特異性引物，即P32-F（CACCGAATTCACCATGGCAGATATCCCATTATATTAT），P32-R（GATGGCGGGCCGCAACTATATACGTAAATAAC）對已提取好的總DNA 進(jìn)行擴(kuò)增。反應(yīng)體系為50 μL，反應(yīng)條件：95 ℃（預(yù)熱）5 min；95 ℃（變性）30 s；54 ℃（退火）30 s；72 ℃（延伸）1 min；共35 個(gè)循環(huán)；最后72 ℃（延伸）5 min。反應(yīng)完成后，吸取5 μL PCR 產(chǎn)物在1.5%瓊脂糖上進(jìn)行凝膠電泳檢測，結(jié)果顯示為陽性。將PCR 產(chǎn)物發(fā)送至上海生工生物有限公司進(jìn)行測序。

將所獲得的序列在GenBank 上進(jìn)行BLAST 搜索分析，發(fā)現(xiàn)與已公布的山羊痘病毒P32基因序列的相似度為99%，從而確定該病原體為山羊痘病毒，確診該病為山羊痘病。

4 治 療

根據(jù)確診結(jié)果，采用利巴韋林+磺胺間甲氧嘧啶及一些輔助治療措施對發(fā)病羔羊進(jìn)行治療。首先，用鑷子小心剝離嘴唇的痂塊，使用碘酊在患部涂搽，2 次/d，連涂5 d；然后，肌肉注射磺胺間甲氧嘧啶，劑量為0.05 g/kg，2 次/d，連用5 d；待癥狀有所緩解時(shí)，肌肉注射鹽酸利巴韋林注射液，劑量為5 mg/kg，2 次/d，連用5 d。此外，肌肉注射黃芪多糖，劑量為100 mg/kg，1 次/d，連用5 d；并在飼料中添加維生素A 和魚肝油，增強(qiáng)羔羊的抵抗力，以利于組織和黏膜的新生。

用藥1 周后回訪，6 只病羊的病情得到控制，基本康復(fù)。

5 預(yù)防措施

5.1 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

養(yǎng)殖戶在進(jìn)行飼料配比的過程中，應(yīng)注重山羊飼料的營養(yǎng)均衡搭配，適量增加維生素和礦物質(zhì)的含量，以期提高山羊（特別是羔羊）的身體素質(zhì)，增強(qiáng)其抵抗疾病的能力。尤其在春冬兩季應(yīng)特別注意補(bǔ)給飼料，均衡搭配營養(yǎng)。

5.2 改善養(yǎng)殖場內(nèi)的衛(wèi)生條件

及時(shí)清掃羊圈，定期對羊圈進(jìn)行消毒，確保羊圈地面干燥。多采用鏤空式羊圈，以盡量避免羊群與糞便接觸，且羊糞要置于一偏僻處堆積發(fā)酵。對羊場周圍容易孳生和隱避蚊蟲的區(qū)域要徹底清除，不定期在這些區(qū)域噴灑殺蟲劑。特別在悶熱的天氣，選用無藥害的殺蟲劑（特效滅蟲精）對羊圈進(jìn)行噴霧殺蟲。在羊圈內(nèi)安裝紗窗（孔徑＞0.15 mm）和誘蟲燈，以誘殺蚊蟲等吸血性昆蟲。養(yǎng)殖場內(nèi)的飲水及用具應(yīng)定期進(jìn)行嚴(yán)格的消毒，一旦發(fā)現(xiàn)患病羊只，應(yīng)立即隔離，并將其置于遠(yuǎn)離羊群的偏僻處進(jìn)行治療。對已死亡的羊只應(yīng)立即對其尸體進(jìn)行焚燒或深埋。與病羊接觸過的護(hù)理用具及圈舍要使用3%石炭酸消毒。此外，定期對羊群進(jìn)行藥浴，盡量降低體外寄生蟲的感染幾率。

5.3 接種疫苗

接種弱毒疫苗，在健康羊群尾下或股內(nèi)側(cè)部注射山羊痘弱毒疫苗，劑量為每頭0.5 mL。

6 結(jié) 語

山羊痘病的臨床癥狀極類似于羊口腔皰疹病，容易讓人相互混淆，而導(dǎo)致誤診。然而，傳統(tǒng)的檢測方法盡管能將其與羊口腔皰疹病區(qū)別，但操作繁瑣、費(fèi)時(shí)且檢測結(jié)果往往存在一定偏差。分子技術(shù)檢測不但操作簡便、省時(shí)，而且結(jié)果精確，為養(yǎng)殖戶對該病的診斷和治療提供了便捷有效的途徑。