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    子宮頸癌組織中miR-153和Survivin的表達及其臨床意義

    2022-12-26 12:08:20劉淑允
    實用癌癥雜志 2022年12期
    關(guān)鍵詞:子宮頸癌生存率腫瘤

    劉淑允

    子宮頸癌為常見惡性腫瘤,在臨床具有較高的發(fā)病率,且近年發(fā)病逐漸趨于年輕化。由于子宮頸癌在發(fā)病早期無明顯癥狀,多數(shù)患者經(jīng)臨床檢查確診時已處于中晚期,威脅生命安全[1-2]。臨床應(yīng)探尋更為合理的篩查措施和診斷方式,以盡早檢查出子宮頸癌前病變,保障患者健康及生命安全[3-4]。微小RNA-153(miR-153)為非編碼單鏈RNA分子,參與生物體細胞增殖、凋亡等多種調(diào)控,其異常表達與各種婦科腫瘤的發(fā)生聯(lián)系緊密[5]。而生存素(Survivin)為抗凋亡基因,與人體多數(shù)腫瘤的發(fā)生、預(yù)后有關(guān)[6]。但臨床關(guān)于miR-153與Survivin在子宮頸癌患者癌組織內(nèi)的表達的相關(guān)研究報道較為缺乏,還有待進一步研究?;诖?,本研究以58例子宮頸癌患者為研究對象,分析兩者在子宮頸癌患者癌組織內(nèi)的表達與意義。結(jié)果示下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    選取該院2018年3月至2019年3月診治的58例子宮頸癌患者為研究對象,采集所有患者的癌組織(觀察組)與癌旁組織(對照組)。研究經(jīng)醫(yī)學倫理委員會批準。納入標準:患者均經(jīng)病理檢查證實;患者的病歷資料齊全;術(shù)前均未服用抗腫瘤藥物或接受任何放、化療者;患者納入遵從自愿原則,依從性較高,簽署知情同意書。排除標準:存有其他惡性腫瘤者;合并免疫系統(tǒng)病癥者;存在神經(jīng)疾患者;存有肝腎等重要臟器功能嚴重不全者;存有精神疾患或難以進行正常交流者;存有全身性感染者;合并血液系統(tǒng)疾病者。所有患者年齡30~64歲,平均年齡(50.79±2.38)歲;體重指數(shù)18.7~26.9 kg/m2,平均體重指數(shù)(23.57±0.64)kg/m2;腫瘤直徑:≥4 cm 31例,<4 cm 27例;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移:有34例,無24例;臨床分期:20例Ⅰ期,13例Ⅱ期,25例Ⅲ期。

    1.2 方法

    標本采集:于施行手術(shù)時,取患者的癌組織與癌旁組織標本,以逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)(RT-PCR)法檢測miR-153,以免疫組化法檢測Survivin。檢測方法:(1)RT-PCR法:以RT-PCR法測定轉(zhuǎn)染效果,Trizol法提取組織內(nèi)的總RNA,之后嚴格依據(jù)試劑盒步驟提取核酸,制備逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系,最終以2-ΔΔCt法計算miR-153水平。 (2)免疫組化法:選擇2組的標本予以石蠟切片的制備,以一般方法脫蠟、包埋、切片,把切片置在0.01 mol/L枸櫞酸鈉緩沖液內(nèi),施以15 min加熱,以此對抗原修復(fù);取出后以0.01 mol/L磷酸鹽緩沖液(PBS)溶液施行3次清洗,加入過氧化氫溶液進行25 min孵育,然后再一次的以PBS溶液清洗5次,加入5%山羊血清,在室溫條件下進行10 min封存,之后滴加一抗在4 ℃冰箱內(nèi)過夜,第2天用PBS清洗3次,滴加二抗,在室溫條件下孵育30 min;二氨基聯(lián)苯胺(DAB)染色,蘇木精復(fù)染,脫水、透明與封固,在鏡下觀察,另外以空白PBS液當成陰性對照。結(jié)果評判:依據(jù)細胞染色程度與染色細胞百分率予以綜合評分,0分:無著色;1分:黃色;2分:棕黃色;3分:黃褐色。依照陽性細胞百分率評分:0分:<10%;1分:≥10%~40%;2分:>40%~70%;3分:>70%。以上兩項得分相加,滿分在2分及以上為高表達,反之為低表達。

    1.3 觀察指標

    (1)2組miR-153、Survivin表達情況。(2)miR-153、Survivin表達與子宮頸癌患者臨床病理特征關(guān)系。(3)miR-153、Survivin表達與子宮頸癌患者預(yù)后關(guān)系。

    1.4 統(tǒng)計學分析

    2 結(jié)果

    2.1 2組miR-153、Survivin表達對比

    觀察組miR-153相對表達量低于對照組,Survivin高于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

    表1 2組miR-153、Survivin表達對比

    2.2 miR-153、Survivin表達與子宮頸癌患者臨床病理特征關(guān)系

    miR-153、Survivin表達與患者年齡、腫瘤大小、臨床分期無關(guān),差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

    2.3 miR-153、Survivin表達與子宮頸癌患者預(yù)后關(guān)系

    Kaplan-Meier結(jié)果顯示:miR-153低表達患者3年生存率低于miR-153高表達者,Survivin高表達患者3年生存率低于Survivin低表達者,差異有統(tǒng)計學意義(χ2=4.117、4.203,P=0.043、0.040)。見圖1-2。

    3 討論

    受病毒感染、女性分娩次數(shù)等影響,子宮頸癌的發(fā)病率呈升高趨勢。子宮頸癌發(fā)病機制較為復(fù)雜,臨床尚未完全明晰,臨床多認為人乳頭瘤病毒(HPV)感染是子宮頸癌發(fā)生獨立危險因素,而抽煙、性生活開始過早等均參與該病的發(fā)生發(fā)展[7-8]。同時,子宮頸癌患病初期無明顯表現(xiàn),導(dǎo)致多數(shù)患者忽視有關(guān)癥狀,進而錯失最佳治療時機[9-10]。臨床需探尋一快速有效的檢查措施,以提高疾病的早期診斷率,指導(dǎo)臨床施行個體化的治療,以增強病情控制效果。

    臨床多項研究表明,基因、蛋白均會參與子宮頸癌的發(fā)生與發(fā)展[11-12]。miRNA參與多條信號通路的調(diào)控,而miR-153為與腫瘤相關(guān)的miRNA之一[13]。miR-153在乳腺癌、導(dǎo)管腺癌內(nèi)表達均呈顯著降低態(tài)勢,可阻礙癌變細胞的增殖與侵襲,而在結(jié)直腸癌中則為過高表達水平,會間接強化癌變細胞的侵襲水平,促進疾病進展。Survivin屬目前篩選分離的分子量最小、凋亡抑制活性最強的抑制因子,其通過對半胱氨酸蛋白酶Caspase-3與Caspase-7活性予以阻礙,從而發(fā)揮抗凋亡作用,并通過對細胞周期的調(diào)控加速癌變細胞的增殖,在多個腫瘤細胞內(nèi)均呈高表達狀態(tài)[14-15]。但臨床關(guān)于miR-153與Survivin在子宮頸癌內(nèi)的相關(guān)分析研究報道較為缺乏,尚需進一步探究。本研究結(jié)果顯示:觀察組miR-153相對表達量低于對照組,Survivin高于對照組;miR-153、Survivin表達與患者年齡、腫瘤大小、臨床分期無關(guān),與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān);且Kaplan-Meier結(jié)果顯示:miR-153低表達者,Survivin高表達患者3年生存率較低。表明miR-153與Survivin參與子宮頸癌的發(fā)生發(fā)展,且miR-153越低、Survivin越高,則患者的生存率更低。其原因為miR-153有抑癌作用,其表達水平降低可能促使子宮頸癌細胞增殖;Survivin相對高表達會抑制子宮頸癌細胞凋亡,改變細胞周期,促使癌細胞增殖過度,與疾病的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。但尚需值得注意的是,本次試驗還存有樣本量較少的局限性,可能會對本試驗結(jié)果精準性構(gòu)成一定干擾。因此,后續(xù)臨床還需持續(xù)完善試驗設(shè)計,不斷擴充樣本量,以此進行更深層次探究,進一步了解miR-153、Survivin與子宮頸癌的關(guān)系,繼而為臨床制定規(guī)范、個體化的診治措施提供更為可靠的指導(dǎo),以最大程度地提高患者生存率。

    表2 miR-153、Survivin表達與子宮頸癌患者臨床病理特征關(guān)系(例,%)

    圖1 miR-153低表達者Kaplan-Meier生存曲線圖

    圖2 Survivin高表達者Kaplan-Meier生存曲線圖

    綜上所述,子宮頸癌患者癌組織內(nèi)的miR-153呈低表達,Survivin呈高表達狀態(tài),兩項指標均與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),且miR-153表達越低,Survivin表達越高,則患者生存率更低,臨床需予以高度重視。

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