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    腦膜瘤組織中H3K27me3的表達及臨床意義

    2022-12-26 12:08:18司昊天任虹宇王曉斌張小廣馬建功
    實用癌癥雜志 2022年12期

    司昊天 任虹宇 王曉斌 張小廣 馬建功 何 承

    腦膜瘤為中樞神經系統(tǒng)多發(fā)腫瘤,多數為良性,約占全部腦腫瘤的19.2%~30.0%[1]。組蛋白H3K27三甲基化(H3K27me3)是一類重要的轉錄抑制性翻譯后修飾,在基因表達和染色質功能調節(jié)中具有重要功效[2]。臨床有關研究說明,H3K27me3在平常的腦膜上皮不表達,而在腦膜瘤組織內表達,少數腦膜瘤組織內的H3K27me3表達還會丟失,而該物質表達丟失的腦膜瘤患者術后復發(fā)風險較高[3]?;诖?,為更深入的了解H3K27me3能夠當成早期評判腦膜瘤級別與預后的重要指標,本研究以2018月2月至2019年2月本院診治的75例腦膜瘤患者為研究對象,探究其在腦膜瘤組織中的表達及其與患者臨床病理特征的關系。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    選取2018月2月至2019年2月該院收治的75例腦膜瘤患者為對象。納入標準:患者均經病理檢查證實為腦膜瘤;患者的病歷有關資料齊全;患者納入遵照自愿原則,簽署知情同意書,且依從性較高。排除標準:存在心肝腎等臟器功能不全者;存在全身性感染者;存有意識障礙、精神障礙或難以進行正常交流者;存有免疫系統(tǒng)病癥者;合并嚴重的腦器質性疾病者;合并血液系統(tǒng)疾病者。所有患者中男性43例,女性32例;年齡35~69歲,平均年齡(53.26±2.49)歲;體重指數19.6~27.7 kg/m2,平均體重指數(24.28±1.67)kg/m2;腦膜瘤WHO分級:36例Ⅰ級,25例Ⅱ級,14例Ⅲ級;WHOⅠ級腦膜瘤組織學亞型:12例腦膜上皮細胞型,10例纖維型,9例過度細胞(混合型),5例血管瘤型;WHOⅡ級腦膜瘤組織學亞型:4例脊索樣型,18例非典型性腦膜瘤,3例透明細胞型;WHOⅢ級腦膜瘤組織學亞型:3例乳頭型,9例間變型腦膜瘤,2例橫紋肌樣型。

    1.2 方法

    所有患者均在行手術時取其腦膜瘤組織標本,采用免疫組織化學法檢測H3K27me3蛋白表達。檢測方法:全部標本均由10%福爾馬林液固定,常規(guī)石蠟包埋,切成4 μm切片,然后施行脫蠟處理,滴加3%的過氧化氫,在室溫環(huán)境之下進行30 min的孵育,然后用磷酸緩沖鹽溶液(PBS)洗滌3次;把切片放到含有枸櫞酸鹽抗原的修復盒,在高壓鍋中進行20 min的高壓處理,等到冷卻之后再次用PBS沖洗3次;之后滴加10%兔血清后再次行30 min的孵育,丟棄血清,滴加H3K27me3單克隆體,空白對照滴加PBS代替一抗,把切片放于4 ℃的冰箱中保存;于次日清晨取出,滴加生物素化二抗施以30 min的孵育,PBS沖洗3次;然后滴加辣根酶標記的鏈霉卵白素工作液孵育10 min,PBS洗滌3次,最后進行二氨基聯苯胺(DAB)染色7 min,蘇木精復染30 s,自來水沖洗返藍,封片鏡檢。結果判定:按照著色強度以及數目評判H3K27me3蛋白表達。著色強度:0分:未染色;1分:淡黃色;2分:棕黃色;3分:深褐色。著色數量:0分:著色細胞數<5%;1分:5%≤著色細胞數<25%;2分:25%≤著色細胞數<50%;3分:著色細胞數≥50%。按照著色強度評分與著色數量評分乘積判斷,0~2分為陰性,≥3分為陽性。

    1.3 觀察指標

    (1)不同WHO分級腦膜瘤組織中H3K27me3蛋白表達對比。(2)H3K27me3蛋白表達與腦膜瘤患者臨床病理特征的關系。

    1.4 統(tǒng)計學分析

    2 結果

    2.1 不同WHO分級腦膜瘤組織中H3K27me3蛋白表達

    WHO Ⅰ級腦膜瘤組織中H3K27me3蛋白陽性表達率高于WHO Ⅱ級與WHO Ⅲ級,且WHO Ⅱ級腦膜瘤組織中H3K27me3蛋白陽性表達率高于WHO Ⅲ級,有統(tǒng)計學差異(P<0.05),見表1。

    表1 不同WHO分級腦膜瘤組織中H3K27me3蛋白表達情況比較(例,%)

    2.2 H3K27me3蛋白表達與腦膜瘤患者臨床病理特征的關系

    H3K27me3蛋白表達與腦膜瘤患者的年齡、性別、WHOⅠ級腦膜瘤組織學亞型、WHOⅡ級腦膜瘤組織學亞型以及WHOⅢ級腦膜瘤組織學亞型均無關(P>0.05),見表2。

    表2 H3K27me3蛋白表達與腦膜瘤患者臨床病理特征的關系(例,%)

    3 討論

    腦膜瘤屬較為常見的中樞神經系統(tǒng)腫瘤之一,手術是主要治療手段,可通過切除病灶減輕相關遵照[4]。根據WHO中樞神經系統(tǒng)腫瘤分類標準及組織學特征,可將腦膜瘤劃分成Ⅰ~Ⅲ級,腦膜瘤手術之后的復發(fā)風險、術后是否需聯同放療以及患者的預后全部與該病的級別聯系緊密[5-6]。但該病的組織學亞型具有多樣性,加之臨床分級較為繁復,因此尋求可幫助臨床進行腦膜瘤分級的分子標志物成為目前臨床診斷的關注重點。

    臨床研究提示,腫瘤的發(fā)生發(fā)展是由表現遺傳不正常,導致基因的DNA序列不出現轉變的前提下,基因的能力發(fā)生可遺傳的變化,進而誘發(fā)表達異常而引發(fā),往往以組蛋白修飾、DNA甲基化等為主要表現[7-8]。核心組蛋白在翻譯結束過后,其N端尾部發(fā)生甲基化、乙?;冉M蛋白修飾,此種修飾將造成染色質的結構出現變化,從而對復制、轉錄等重要的生理過程構成較多影響,最終對其下游基因的表達予以調控[9-10]。H3K27me3的修飾為表現遺傳內關鍵的基因沉默標志,參與調控細胞分化與增殖間的平穩(wěn),其表達異常將會導致細胞增殖分化失去控制,最終導致腫瘤的產生。多梳抑制復合物2(EZH2)可產生H3K27me3,EZH2,在多種腫瘤內呈高表達,其表達異?;蚬δ墚a生轉變全部會導致H3K27me3的表達紊亂。臨床較多的研究顯示,H3K27me3在乳腺癌等癌癥內均存在異常表達,也是進行獨立預后評判的關鍵指標,H3K27me3在神經鞘瘤中較高表達,而在惡性外周神經鞘膜瘤內表達丟失[11-12]。本研究結果顯示,WHO Ⅰ級腦膜瘤組織中H3K27me3蛋白陽性表達率[88.89%(32/36)]高于WHO Ⅱ級[48.00%(12/25)]與WHO Ⅲ級[21.43%(3/14)],且WHO Ⅱ級腦膜瘤組織中H3K27me3蛋白陽性表達率[48.00%(12/25)]高于WHO Ⅲ級[21.43%(3/14)]。提示H3K27me3蛋白在腦膜瘤組織中呈高表達,且伴隨腦膜瘤WHO級別的上升,其表達會逐步的減低。本研究結果還顯示:H3K27me3蛋白表達與腦膜瘤患者的年齡、性別無關;與WHO不同級別腦膜瘤組織學亞型有關,提示H3K27me3能夠當成腦膜瘤WHO分級的一個關鍵指標,為臨床評估該病行手術過后是否行放療提供可靠依據。隨著臨床對H3K27me3研究的持續(xù)深入,其有望發(fā)展成腦膜瘤靶向治療的關鍵。但仍需值得注意的是,本次研究尚存在納入樣本量較少等不足,可能會對本次試驗結果的可信度與準確性構成一定干擾。因此,后續(xù)臨床還需不斷完善試驗設計,繼續(xù)擴大樣本量的納入,以進行更深層次的研究,從而更為深入的了解H3K27me3在腦膜瘤組織內的表達與其臨床意義,旨在為腦膜瘤臨床早期診斷及治療提供可靠參考。

    綜上所述,H3K27me3在腦膜瘤組織內呈異常表達,且伴隨WHO級別的上升,其表達逐步降低,及時檢測腦膜瘤組織內的H3K27me3蛋白表達水平可為腦膜瘤分級提供參考,臨床可大力推行。

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