不同分子分型乳腺癌組織中HSF1的表達(dá)情況及其與預(yù)后的相關(guān)性

宋芳霞 王 楠 劉 維

乳腺癌為臨床高發(fā)惡性腫瘤，多發(fā)于女性，且近年發(fā)生率呈逐年上升趨勢(shì)，給我國(guó)女性居民的身心安全造成眾多威脅[1-2]。目前，對(duì)于該病臨床多數(shù)給予手術(shù)、放化療等綜合措施診治，然而乳腺癌存在高度的異質(zhì)性，不同組織學(xué)分型患者的治療方法與其獲得的效果不盡相同[3-4]。臨床多項(xiàng)研究表明，熱休克轉(zhuǎn)錄因子1(HSF1)的水平與較多惡性腫瘤的發(fā)生聯(lián)系緊密[5]。HSF1可在生理病理性的刺激之下快速地轉(zhuǎn)錄激活，以此確保內(nèi)環(huán)境的平穩(wěn)，提升細(xì)胞凋亡抗性。然而臨床關(guān)于HSF1在乳腺癌組織內(nèi)的表達(dá)與其意義的相關(guān)研究報(bào)道較為缺乏，基于此，本研究回顧性分析186例女性乳腺癌患者的病歷資料，探究HSF1在不同分子分型乳腺癌組織內(nèi)的表達(dá)情況以及與患者預(yù)后的聯(lián)系。信息如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2017年3月至2019年3月該院收治的186例女性乳腺癌患者的病歷資料。納入標(biāo)準(zhǔn)：患者均經(jīng)病理有關(guān)檢查證實(shí)；患者病歷有關(guān)資料齊全；患者依從性較高。排除標(biāo)準(zhǔn)：存在神經(jīng)疾患者；合并其他惡性腫瘤者；存有精神障礙或難以進(jìn)行正常交流者；長(zhǎng)期服藥者；合并血液系統(tǒng)疾病者；存有凝血功能異常者；合并免疫系統(tǒng)紊亂者。依照雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)以及人表皮生長(zhǎng)因子受體2(HER2)表達(dá)水平的不同，把所有患者劃分成Luminal A型組(n=68)、Luminal B型組(n=46)、HER2型組(n=34)與三陰性組(n=38)。Luminal A型組年齡34～67歲，平均年齡(50.26±6.69)歲；腫瘤直徑4～10 cm，平均直徑(7.59±0.74)cm；體重指數(shù)(BMI)18.4～27.7 kg/m2，平均BMI(23.57±1.64)kg/m2。Luminal B型組年齡35～68歲，平均年齡(50.31±6.74)歲；腫瘤直徑3～9 cm，平均直徑(7.36±0.68)cm；BMI 18.5～27.8 kg/m2，平均BMI(23.64±1.58)kg/m2。HER2型組年齡37～69歲，平均年齡(50.40±6.81)歲；腫瘤直徑3～10 cm，平均直徑(7.40±0.71)cm；BMI 18.7～27.5 kg/m2，平均BMI(23.59±1.71)kg/m2。三陰性組年齡35～65歲，平均年齡(50.26±6.45)歲；腫瘤直徑3～11 cm，平均直徑(7.35±0.68)cm；BMI 18.4～27.7 kg/m2，平均BMI(23.61±1.66)kg/m2。比較4組一般資料，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

1.2 方法

手術(shù)時(shí)取所有患者的病灶組織，以免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)乳腺癌組織內(nèi)的HSF1、熱休克蛋白70(HSP70)、抗凋亡蛋白B細(xì)胞淋巴瘤因子-2(Bcl-2)、巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)表達(dá)。取經(jīng)10%福爾馬林固定與石蠟包埋的病理標(biāo)本，切成3 μm厚片，脫蠟脫水，以檸檬酸鹽緩沖液行3 min的抗原修復(fù)，在室溫條件下以0.3%雙氧水處理20 min，然后以磷酸鹽緩沖液(PBS)清洗，在胎牛血清室溫環(huán)境之下封存35 min；然后以此放入鼠抗人HSF1、HSP70，兔抗人Bcl-2、MIF單抗，在4 ℃冰箱內(nèi)孵育至第2天，PBS清洗，放入經(jīng)由生物素標(biāo)記完的二抗，全部以室溫孵育30 min，PBS沖洗，放入一辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉卵白素，室溫孵育30 min，PBS沖洗，二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色，蘇木精復(fù)染，脫水、封片，同時(shí)以同一病理標(biāo)本切片作為空白對(duì)照，PBS代替一抗，在鏡下分析各指標(biāo)的表達(dá)。鏡下觀察細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)內(nèi)存在棕黃色顆粒為陽(yáng)性，陽(yáng)性細(xì)胞率=陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)/(陽(yáng)性+陰性)細(xì)胞數(shù)×100%，0分：陽(yáng)性細(xì)胞率<1%；1分：≥1%且<25%；2分：≥25%且<50%；3分：≥50%且<75%；4分：≥75%。陽(yáng)性細(xì)胞染色強(qiáng)度評(píng)分：0分：不染色；1分：淡黃色；2分：棕黃色；3分：棕褐色染色。上述兩者分?jǐn)?shù)相乘總分判定陰陽(yáng)性，0～3分為陰性，4～12分為陽(yáng)性。

1.3 觀察指標(biāo)

(1)4組HSF1與HSP70、Bcl-2、MIF陽(yáng)性表達(dá)對(duì)比。(2)HSF1與HSP70、Bcl-2、MIF的相關(guān)性。(3)運(yùn)用Kaplan-Meier法分析HSF1陽(yáng)性、陰性表達(dá)患者的3年生存率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 4組HSF1與HSP70、Bcl-2、MIF陽(yáng)性表達(dá)對(duì)比

Luminal A型組與Luminal B型組患者乳腺癌組織內(nèi)的HSF1、HSP70、Bcl-2與MIF陽(yáng)性表達(dá)率均低于HER2型與三陰性組患者，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。見(jiàn)表1。

2.2 HSF1與HSP70、Bcl-2、MIF的相關(guān)性

乳腺癌組織內(nèi)HSF1與HSP70、Bcl-2與MIF表達(dá)呈正相關(guān)(γ=0.358、0.405、0.426，P<0.05)。見(jiàn)表2。

2.3 HSF1陽(yáng)性表達(dá)與陰性表達(dá)患者的生存率

HSF1陽(yáng)性表達(dá)患者的3年生存率為44.25%(50/113)，低于陰性表達(dá)患者的67.12%(49/73)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=9.322，P=0.002)。見(jiàn)圖1。

表1 4組HSF1與HSP70、Bcl-2、MIF陽(yáng)性表達(dá)對(duì)比(例，%)

表2 HSF1與HSP70、Bcl-2、MIF的相關(guān)性

圖1 HSF1陽(yáng)性表達(dá)與陰性表達(dá)患者的Kaplan-Meier生存曲線圖

3 討論

乳腺癌占女性惡性腫瘤死亡率的首位[6-7]，發(fā)病早期無(wú)明顯癥狀，通常經(jīng)由體檢或乳腺癌篩查發(fā)現(xiàn)，而一旦經(jīng)檢查證實(shí)，則多數(shù)患者的病情已發(fā)展至中晚期，最終錯(cuò)失最佳的手術(shù)診治時(shí)間，預(yù)后較差[8-9]。乳腺癌的組織形態(tài)、治療反應(yīng)等均存有較多的不同，加之癌細(xì)胞之中各類(lèi)因子表達(dá)情況的不同亦會(huì)對(duì)乳腺癌的治療效果與患者預(yù)后構(gòu)成較多影響[10-11]。而臨床有相關(guān)研究提示，HSF1與較多惡性腫瘤發(fā)生聯(lián)系緊密，且在乳腺癌癌組織之中表現(xiàn)為過(guò)高水平[12]。然而臨床對(duì)于HSF1在不同分子分型乳腺癌組織內(nèi)的表達(dá)研究較為缺乏，還需進(jìn)一步探究。

本研究結(jié)果顯示，Luminal A型與 B型組乳腺癌組織內(nèi)的HSF1、HSP70、Bcl-2與MIF陽(yáng)性表達(dá)率較HER2型與三陰性組低，由此表明，HSF1在HER2型與三陰性乳腺癌內(nèi)呈過(guò)高表達(dá)，分析原因與HSF1表達(dá)存在極大的可能受分子分型的干擾，推測(cè)ER、PR可能與HSF1具有調(diào)節(jié)功效有關(guān)，但仍需進(jìn)一步探討。ER、PR全部屬正常乳腺上皮細(xì)胞之中存有的性激素受體，能夠?qū)θ橄偕L(zhǎng)、發(fā)育予以調(diào)節(jié)，在發(fā)生癌變之時(shí)，ER與PR均會(huì)減少，促使腫瘤組織的生長(zhǎng)與增殖缺乏內(nèi)分泌激素調(diào)節(jié)，繼而造成腫瘤分化程度低，預(yù)后差。而HSF1在真核細(xì)胞的蛋白質(zhì)分子內(nèi)表達(dá)，其構(gòu)造與功能處于較高的保守狀況，具有加快機(jī)體發(fā)育、穩(wěn)定內(nèi)環(huán)境等作用[13-14]。HSF1表達(dá)與活性異常與各類(lèi)腫瘤的發(fā)生密切聯(lián)系，且腫瘤惡性程度越高，則其表達(dá)水平越高[15]。本研究結(jié)果顯示，HSF1陽(yáng)性表達(dá)患者的3年生存率[44.25%(50/113)]低于陰性表達(dá)患者[67.12%(49/73)]，表明HSF1表達(dá)水平可有效預(yù)測(cè)乳腺癌患者的預(yù)后。乳腺癌組織內(nèi)HSF1與HSP70、Bcl-2與MIF表達(dá)呈正相關(guān)(γ=0.358、0.405、0.426，P<0.05)。HS970可在細(xì)胞遭受到感染、化學(xué)物質(zhì)等刺激之后迅速的分泌，繼而促進(jìn)細(xì)胞修復(fù)與內(nèi)環(huán)境恢復(fù)平穩(wěn)。而HSF1為HSP表達(dá)的重要調(diào)控因子，同樣屬HSP基因轉(zhuǎn)錄重要因子，若機(jī)體處于應(yīng)激刺激狀態(tài)之時(shí)，HSF1將被快速激活，進(jìn)而加快HSP70轉(zhuǎn)錄。Bcl-2能夠阻礙細(xì)胞因各類(lèi)因素造成的程序性死亡，于不同癌細(xì)胞中呈過(guò)高表達(dá)，而通過(guò)抑制HSF1的表達(dá)，可降低Bcl-2表達(dá)，進(jìn)而加快細(xì)胞凋亡。另外，MIF會(huì)加快腫瘤細(xì)胞擴(kuò)散、侵襲，促使腫瘤組發(fā)生、發(fā)展。而MIF與HSF1存在相互作用，能夠加速HER2型乳腺癌惡性轉(zhuǎn)變。由此可知，HSF1在乳腺癌組織內(nèi)可能通過(guò)某種機(jī)制干擾上述幾者的表達(dá)，繼而給患者帶來(lái)不良預(yù)后。

綜上所述，HSF1在HER2型與三陰性乳腺癌患者癌組織內(nèi)呈高表達(dá)，且HSF1陽(yáng)性患者的生存率低于陰性患者，預(yù)后更差。