血清CN-1、β2-MG 與2 型糖尿病患者微血管病變的關(guān)系

胡文秀 徐潤和 許珊珊 葉啟寶

2 型糖尿?。╠iabetes mellitus type 2，T2DM）為糖尿病中的主要發(fā)病類型，在高收入國家中，T2DM 的患者占糖尿病患者的85%～95%，在中等收入乃至低收入國家的占比可能會更高［1-2］。糖尿病微血管病變（diabetic microangiopathy，DMAP）是T2DM 常見的并發(fā)癥，其主要以微血管基底膜增厚并有透明樣物質(zhì)沉積為特征，主要表現(xiàn)為糖尿病視網(wǎng)膜病變（diabetic retinopathy，DR）、糖尿病腎?。╠iabetic nephropathy，DN）等，相比于無DMAP 的患者而言，T2DM 患者合并DMAP 后死亡風(fēng)險會急劇增加［3］。因此早期識別DMAP 的發(fā)生是有效減低T2DM 患者死亡率的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。研究發(fā)現(xiàn)，低水平的血清肌肽酶-1（dipeptide carnosinase 1，CN-1）可能通過維持組織中高濃度的肌肽從而對糖化和（或）氧化性組織損傷具有較好的保護(hù)作用［4］。血清β2 微球蛋白（β2-microglobulin，β2-MG）水平能夠作為敏感指標(biāo)反映糖尿病患者早期腎小球以及腎小管的損害情況。本文主要對T2DM 患者CN-1、β2-MG 水平與T2DM 患者并發(fā)DMAP 的關(guān)系進(jìn)行研究，以期為T2DM 患者發(fā)生DMAP 的早期診療提供參考數(shù)據(jù)?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019 年3 月至2022 年4 月于安徽省廬江縣人民醫(yī)院內(nèi)分泌科收治的98 例2 型糖尿病患者，按照是否發(fā)生微血管病變分為對照組（不合并DAMP，n=64）和觀察組（合并DAMP，n=34）。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《中國2 型糖尿病防治指南（2020 年版）》［5］的標(biāo)準(zhǔn)確診為2 型糖尿?。╠iabetes mellitus type 2，T2DM）；②臨床表現(xiàn)為口服葡萄糖耐量試驗期間至少8 h 或者是餐后2 h 內(nèi)無熱量攝入的情況，空腹血糖（fasting plasma glucose，F(xiàn)PG）≥126mg/dL（7.0mmol/L）［6］；③按照《基層糖尿病微血管病變篩查與防治專家共識（2021 年版）》［7］的標(biāo)準(zhǔn)完成DMAP 篩查；④糖化血紅蛋白（Glycated hemoglobin，HbA1c）≥7%［8］；⑤臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并急性或慢性感染者；②已確診具有大血管病變者；③有嚴(yán)重臟器功能異常者；④開始研究前已接受過DMAP 治療者；⑤年齡＜18 歲。所有患者或家屬均已簽署知情同意。本研究經(jīng)安徽省廬江縣人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理會審批并通過。

1.2 方法

患者于清晨空腹采集其肘靜脈血4 mL，采用0.109 mol/L 的枸櫞酸抗凝，離心速度為3 500 r/min，離心半徑8 cm，離心時間為10 min，取上清液裝于EP 管，并保存于-80℃的低溫冰箱內(nèi)待檢。測定血清CN-1 水平采用固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗，并使用ELISA 試劑盒（上海酶聯(lián)生物科技有限公司）測定，采用全自動生化分析儀（型號：日立7600 Series，廠家：日立高新技術(shù)（上海）國際貿(mào)易有限公司）測定β2-MG 水平。另對研究組進(jìn)行空腹血糖（Fasting blood glucose，F(xiàn)PG）、HbA1c、甘油三酯（Tri-glyceride，TG）、總膽固醇（Total cholesterol，TC）、低 密度脂蛋白膽 固醇（Low density Lipoprotein，LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（High density lipoprotein cholesterol，HDL-C）檢測。其中HbA1c 使用全自動糖化血紅蛋白儀（型號：HLC-723G11，廠家：東曹（上海）生物科技有限公司）進(jìn)行檢測；FPG、TG、TC、LDL-C、HDL-C 采用全自動生化分析儀（型號：日立7600 Series，廠家：日立高新技術(shù)（上海）國際貿(mào)易有限公司）測定。

1.3 觀察指標(biāo)

①比較血清CN-1、β2-MG 在不同人群中的水平；②微血管病變診斷標(biāo)準(zhǔn)［1］：DR：同一名眼科醫(yī)生對全部患者進(jìn)行免散瞳眼底照相初篩和眼底熒光造影的確診。DN：患者的腎小球濾過率＜60 mL/min 或者是3～6 個月的復(fù)查中至少有兩次復(fù)查出現(xiàn)尿白蛋白/肌酐比值≥30 mg/g。比較對照組和觀察組的血清CN-1、β2-MG 的水平；③分析影響T2DM患者并發(fā)DMAP 的危險因素，并判斷血清CN-1、β2-MG 診斷T2DM 患者合并DMAP 的價值。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 影響T2DM 患者并發(fā)DMAP 的單因素分析

單因素分析結(jié)果顯示，觀察組的合并高血脂發(fā)生率、病程、HbA1c、FPG、CN-1、β2-MG 水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；兩組患者的年齡、性別、體重指數(shù)、合并高血壓發(fā)生率、收縮壓、舒張壓、TC、TG、LDL-C、HDL-C 水平相比差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 影響T2DM 患者并發(fā)DAMP 的單因素分析［n（%），（±s）］Table 1 Univariate analysis of the influence of T2DM patients complicated with DAMP［n（%），（±s）］

表1 影響T2DM 患者并發(fā)DAMP 的單因素分析［n（%），（±s）］Table 1 Univariate analysis of the influence of T2DM patients complicated with DAMP［n（%），（±s）］

因素年齡（歲）性別體重指數(shù)（kg/m2）合并高血壓χ2/t 值0.279 0.013 0.115 2.953 P 值0.781 0.910 0.909 0.086合并高血脂病程（年）收縮壓（mmHg）舒張壓（mmHg）HbA1c（%）FPG（mmol/L）TC（mmol/L）TG（mmol/L）LDL-C（mmol/L）HDL-C（mmol/L）CN-1（μg/L）β2-MG（μg/mL）女男 有無有無對照組（n=34）56.12±5.49 15（44.12）19（55.88）24.29±3.64 14（41.18）20（58.82）8（23.53）26（76.47）7.53±1.24 120.04±10.02 75.91±8.63 8.56±2.00 7.62±0.67 5.45±0.58 1.95±0.22 2.56±0.74 1.24±0.16 9.30±3.03 0.58±0.21觀察組（n=64）55.79±5.61 29（45.31）35（54.69）24.38±3.71 38（59.37）26（40.63）7（10.94）57（89.06）6.99±0.81 119.16±11.03 76.07±8.58 9.26±2.01 9.73±0.98 5.79±0.60 2.03±0.25 2.48±0.73 1.26±0.18 7.04±2.51 0.36±0.09 2.716 2.598 0.388 0.088 1.999 12.579 2.701 2.159 0.514 0.544 3.944 7.245 0.099 0.011 0.699 0.930 0.103＜0.001 0.008 0.033 0.609 0.588＜0.001＜0.001

2.2 血 清CN-1、β2-MG 與T2DM 患 者 并 發(fā)DAMP 的關(guān)系

經(jīng)Spearman 相關(guān)分析，患者的CN-1 水平與T2DM 患者并發(fā)DAMP 呈正相關(guān)（r=0.304，P＜0.05），患者的β2-MG 水平與T2DM 患者并發(fā)DAMP 呈正相關(guān)（r=0.401，P＜0.05）。

2.3 影響T2DM 患者DMAP 的多因素Logistic 回歸分析

以T2DM 患者是否發(fā)生DMAP 作為因變量（否=0，是=1），以病程、FPG 水平、CN-1 水平、β2-MG 水平為自變量，Logistic 回歸分析結(jié)果顯示，病程、FPG 水平、血清CN-1 水平、β2-MG、TC、TG水平為DMAP 的獨(dú)立影響因素（P＜0.05）。見表2。

表2 T2DM 患者DMAP 的多因素Logistic 回歸分析Table 2 Multivariate logistic regression analysis of DMAP in T2DM patients

2.4 血清CN-1、β2-MG 對T2DM 患者DMAP 的診斷價值

繪制血清CN-1、β2-MG 水平診斷T2DM 患者并發(fā)DMAP 的ROC 曲線，ROC 曲線分析顯示，血清CN-1、β2-MG 以及兩者聯(lián)合診斷對應(yīng)的AUC為0.742、0.800、0.905。其對應(yīng)的約登系數(shù)為0.429、0.601、0.774。聯(lián)合診斷的價值高于CN-1、β2-MG 單獨(dú)對T2DM 患者并發(fā)DMAP 的診斷價值（P＜0.05）。見表3、圖1。

圖1 ROC 曲線Figure 1 ROC curve

表3 血清CN-1、β2-MG 水平以及聯(lián)合檢測對T2DM 患者并發(fā)DMAP 的診斷價值Table 3 Serum CN-1，β2-MG levels and the diagnostic value of combined detection in patients with T2DM complicated by DMAP

3 討論

T2DM 是一種以慢性高血糖為特征的一組代謝性疾病，其發(fā)病原因十分復(fù)雜，隨著病程的進(jìn)展，T2DM 可以引起不同程度的器官損傷、功能障礙或者是衰竭，引發(fā)一系列嚴(yán)重的慢性疾病，主要有糖尿病周圍神經(jīng)病變（diabetic peripheral neuropathy，DPN）、DN、和DR、糖尿病腦血管病變、糖尿病下肢血管病變，已然成為世界性的重大衛(wèi)生問題。其中微血管病變主要包括DR、DN 等，在T2DM 患 者 中DR 的 發(fā) 病 率 為24.61%，DN 為26.04%，發(fā)病率較高［9-10］。因此，及時明確地診斷T2DM 患者是否并發(fā)DMAP，并采取積極干預(yù)措施具有重要意義。

周紅軍等［6］對血清CN-1、β2-MG 水平進(jìn)行比較：T2DM 合并DN 的患者＞單純T2DM 患者＞健康體檢者。谷沛等［11］的研究發(fā)現(xiàn)DR 患者的血清β2-MG 水平明顯高于未合并DR 的患者。本文中，T2DM 患者的CN-1、β2-MG 水平均高于健康人群，并且T2DM 合并DMAP 患者中的CN-1、β2-MG水平均高于單純T2DM 患者，與上述文獻(xiàn)結(jié)果一致。說明CN-1、β2-MG 與T2DM 患者發(fā)生DMAP存在一定的關(guān)系，能夠作為評估T2DM 患者是否發(fā)生DMAP 的重要指標(biāo)。肌肽作為一種具有多種生化特性的二肽，其保護(hù)T2DM 患者的腎臟免受腎病影響的機(jī)制是消除氧自由基的產(chǎn)生，且DMAP 發(fā)生的主要原因之一為線粒體產(chǎn)生過多的活性氧（reactive oxygen species，ROS），而肌肽能夠有效地降低ROS 的水平，抑制機(jī)體形成晚期糖基化終末產(chǎn)物（advanced glycation end products，AGEs）并且減少轉(zhuǎn)化生長因子-β 的產(chǎn)生，而CN-1作為這種肌肽的降解酶，其含量的降低能夠增加組織中肌肽的含量，從而使得機(jī)體發(fā)生DMAP 的幾率下降。Zhou 等［12］研究表明，DN 患者的血清CN-1 水平顯著升高。β2-MG 是一種低分子量的蛋白質(zhì)，能夠作為腎小管間質(zhì)損傷的經(jīng)典生物標(biāo)志物，腎臟為其唯一的排泄途徑，血清β2-MG 聯(lián)合HbA1c 以及尿β2-MG 能夠作為T2DM 患者是否并發(fā)DMAP 的判斷指標(biāo)。本文通過多元Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，病程、FPG 水平、血清CN-1 水平、β2-MG、TC、TG 水平為影 響T2DM 患者并發(fā)DMAP 的危險因素。劉慶山等［13］通過探究生化指標(biāo)聯(lián)合檢測在糖尿病患者DMAP 的臨床意義，發(fā)現(xiàn)糖尿病病程、空腹血糖等是糖尿病微血管疾病的獨(dú)立危險因素。龔紅波［14］的研究結(jié)果顯示FBG、TC、TG 均為DMAP 的主要危險因素。陳斌等［15］的研究表明β2-MG 為T2DM 患者并發(fā)DR 的獨(dú)立危險因素。本研究發(fā)現(xiàn)，雖然血清CN-1、血清β2-MG 對T2DM 患者并發(fā)DMAP 具有診斷價值，但兩者聯(lián)合檢測的診斷價值高于單獨(dú)診斷的價值，為疾病的早診斷、早治療提供新的檢測指標(biāo)。

綜上所述，血清CN-1、血清β2-MG 在T2DM 合并DMAP 患者中的水平遠(yuǎn)高于正常人群以及單純T2DM 患者，并且血清CN-1 和β2-MG 的高水平與T2DM 患者并發(fā)DMAP 具有一定的聯(lián)系。因此，臨床上可以通過檢測血清CN-1、血清β2-MG 水平，以早期診斷T2DM 并發(fā)DMAP 的患者。