缺鐵性貧血患兒Flt-3L、TF、25（OH）D檢測的臨床意義

趙曉敏， 江曉宇， 單凱莉， 單鐵英， 劉秀珍

（邯鄲市中心醫(yī)院兒科，河北 邯鄲 056000）

缺鐵性貧血是由鐵攝入不足、需求量增加、吸收障礙、丟失過多等多種因素引起體內(nèi)鐵元素缺乏，血紅素合成減少而引起的[1]，是嬰幼兒常見的慢性疾病之一。嬰幼兒期是人快速生長發(fā)育的黃金階段，如這個時期外源性鐵攝入不足，極易發(fā)生鐵元素缺乏，從而引起缺鐵性貧血，嚴重危害嬰幼兒健康[2]。缺鐵性貧血不僅可造成嬰幼兒免疫、神經(jīng)、肌肉等各系統(tǒng)、器官的功能損傷，還會對智力發(fā)育造成不可逆的影響[3]。因此，早期發(fā)現(xiàn)和診斷是降低嬰幼兒缺鐵性貧血發(fā)生率的關(guān)鍵。FMS樣酪氨酸激酶3配體（FMS-like tyrosine kinase 3 ligand，F(xiàn)lt-3L）是早期造血生長因子，可以單獨或與其他細胞因子協(xié)同增強原始造血干細胞的增殖和分化，進而增強機體的造血功能，是與造血和免疫功能密切相關(guān)的調(diào)控因子[4-5]。Flt-3L還能促進樹突狀細胞的增殖和成熟，激活機體的天然免疫反應(yīng)[6]。轉(zhuǎn)鐵蛋白（transferrin，TF）屬于急性時相反應(yīng)蛋白，能準確反映機體內(nèi)鐵的利用水平及貯存量，其主要的生理功能是與鐵結(jié)合后將其運送到細胞內(nèi)[7]。另外，TF與炎癥反應(yīng)和免疫應(yīng)答也存在一定的聯(lián)系[8]。25-羥基維生素D[25-hydroxyvitamin D，25（OH）D]在嬰幼兒的生長發(fā)育中起著重要作用[9]。目前，臨床針對缺鐵性貧血的篩查多以傳統(tǒng)血常規(guī)、體內(nèi)鐵代謝指標等檢測為主，存在一定的漏診風(fēng)險。為此，本研究擬探討Flt-3L、TF、25（OH）D對嬰幼兒缺鐵性貧血的輔助診斷價值。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2019年3月—2021年3月邯鄲市中心醫(yī)院兒科確診的缺鐵性貧血患兒128例（缺鐵性貧血組），其中男66例、女62例，年齡5～36個月；按貧血的嚴重程度分為輕度貧血[血紅蛋白（hemoglobin，Hb）為90～110 g/L]61例、中度貧血（Hb為60～89 g/L）55例、重度貧血（Hb<60 g/L）12例。選取同期邯鄲市中心醫(yī)院確診的非缺鐵性貧血患兒68例（非缺鐵性貧血組），其中男31例、女37例，年齡6～49個月；包括巨幼細胞性貧血29例、再生障礙性貧血15例、溶血性貧血24例。另選取同期邯鄲市中心醫(yī)院體檢健康嬰幼兒100名作為正常對照組，其中男51名，女49名，年齡5～45個月。各組間年齡、性別差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。本研究經(jīng)過邯鄲市中心醫(yī)院倫理委員會批準（審批號：2019003）。

納入標準：（1） 符合《鐵缺乏癥和缺鐵性貧血診治和預(yù)防多學(xué)科專家共識》[10]和《兒童缺鐵和缺鐵性貧血防治建議》[11]中關(guān)于缺鐵性貧血的診斷標準；（2）血清鐵蛋白（serum ferritin，SF）<15 μg/L，血清鐵（serum iron，SI）<10.7 μmol/L；（3）無慢性出血，且3個月內(nèi)未服用過鐵劑；（4）近期無消化道、呼吸道等感染；（5）患兒家屬同意并簽署知情同意書。

排除標準：（1）患心、肺、肝、腎等重要臟器的嚴重疾??；（2）患嚴重的免疫系統(tǒng)疾病或血液系統(tǒng)疾病；（3）近期服用過治療缺鐵性貧血的相關(guān)藥物；（4）由不明原因出血導(dǎo)致的貧血；（5）患兒依從性差。

1.2 方法

1.2.1 紅細胞相關(guān)指標測定 采用抗凝管采集所有對象清晨空腹靜脈血3 mL，采用ADVIA 2120i全自動血液分析儀（德國西門子公司）及配套試劑檢測Hb、紅細胞平均體積（mean corpuscular volume，MCV）、紅細胞平均血紅蛋白含量（mean corpuscular hemoglobin，MCH）、紅細胞平均血紅蛋白濃度（mean corpuscular hemoglobin concentration，MCHC）。

1.2.2 血清Flt-3L、TF、25（OH）D、SI水平測定 采用促凝管采集所有對象清晨空腹靜脈血4 mL，分裝于2管，1 000×g離心20 min，分離血清，-80 ℃保存待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測血清Flt-3L、TF、25（OH）D、SI水平。Flt-3L試劑盒購自美國Abcam公司[批號ab4598753，最低檢出限為4.7 pg/mL，線性范圍為4.7～300.0 pg/mL，批間、批內(nèi)變異系數(shù)（coefficient of variation，CV）分別為4.19%、4.29%，標準曲線r2=0.998]。TF、25（OH）D和SI試劑盒均購自上海晶抗生物工程有限公司[批號分別為JLC7702-3245、JLC480-431、JLC7453-31；TF試劑盒的最低檢出限為0.25 g/L，線性范圍為0.25～8.00 g/L，批間、批內(nèi)CV分別為10.0%、11.5%，標準曲線r2=0.997；25（OH）D試劑盒最低檢出限為1.5 ng/mL，線性范圍為1.5～48.0 ng/mL，批間、批內(nèi)CV分別為10%、11%，標準曲線r2=0.999；SI試劑盒最低檢出限為1.25 μmol/L，線性范圍為1.25～40.00 μmol/L，批間、批內(nèi)CV分別為10%、12%，標準曲線r2=0.999]。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 13.0軟件進行統(tǒng)計分析。呈正態(tài)分布的計量資料以±s表示，多組間比較采用方差分析，兩兩比較采用獨立樣本t檢驗。計數(shù)資料以例或率表示，組間比較采用χ2檢驗。采用Logistic回歸分析評估嬰幼兒發(fā)生缺鐵性貧血的危險因素。采用受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線評價各項指標診斷缺鐵性貧血的效能。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 缺鐵性貧血組、非缺鐵性貧血組和正常對照組各項指標比較

缺鐵性貧血組和非缺鐵性貧血組Hb、MCV、MCH、MCHC均低于正常對照組（P<0.05）。缺鐵性貧血組Flt-3L、TF水平均高于正常對照組和非缺鐵性貧血組（P<0.05），SI、25（OH）D水平均低于正常對照組和非缺鐵性貧血組（P<0.05）。見表1。

表1 缺鐵性貧血組、非缺鐵性貧血組和正常對照組各項指標比較

2.2 不同程度貧血患兒各項指標比較

重度貧血組Flt-3L、TF水平高于中度貧血組和輕度貧血組（P<0.05），25（OH）D、Hb、MCV、MCH、MCHC、SI水平均低于中度貧血組和輕度貧血組（P<0.05）。中度貧血組Flt-3L、TF水平高于輕度貧血組（P<0.05），25（OH）D、Hb、MCV、MCH、MCHC、SI水平低于輕度貧血組（P<0.05）。見表2。

表2 不同程度貧血患兒各項指標比較

2.3 缺鐵性貧血的危險因素分析

Logistic回歸分析結(jié)果顯示，血清Flt-3L、TF、25（OH）D均是嬰幼兒發(fā)生缺鐵性貧血的危險因素[比值比（odds ratio，OR）分別為4.319、4.513、5.094，95%可信區(qū)間（confidence interval，CI）分別為1.537～12.133、1.932～10.545、1.414～18.354]。見表3。

表3 缺鐵性貧血的危險因素分析

2.4 Flt-3L、TF、25（OH）D單項與聯(lián)合檢測診斷和鑒別診斷缺鐵性貧血的效能

采用Logistic回歸分析建立Flt-3L、TF、25（OH）D的聯(lián)合檢測方程：Logit（P）=1.463×Flt-3L+1.507×TF+1.628×25（OH）D +0.186。ROC曲線分析結(jié)果顯示，F(xiàn)lt-3L、TF、25（OH）D單項檢測和聯(lián)合檢測診斷缺鐵性貧血的曲線下面積（area under curve，AUC）分別為0.860、0.854、0.897、0.983，鑒別診斷缺鐵性貧血和非缺鐵性貧血的AUC分別為0.797、0.821、0.862、0.981。見表4、表5、圖1。

表4 Flt-3L、TF、25（OH）D單項與聯(lián)合檢測診斷缺鐵性貧血的效能

表5 Flt-3L、TF、25（OH）D單項與聯(lián)合檢測鑒別診斷缺鐵性貧血與非缺鐵性貧血的效能

圖1 Flt-3L、TF、25（OH）D單項與聯(lián)合檢測診斷缺鐵性貧血和鑒別診斷缺鐵性貧血與非缺鐵性貧血的ROC曲線

3 討論

目前，隨著物質(zhì)生活水平的提高，各種營養(yǎng)素缺乏癥已明顯減少，但缺鐵性貧血仍是威脅嬰幼兒健康最常見的營養(yǎng)缺乏性疾病，其起病緩慢且隱匿，嚴重影響嬰幼兒身體健康[12]。嬰兒期鐵元素主要來自于母體及輔食喂養(yǎng)，約4月齡后，嬰兒從母體獲得的鐵逐漸耗盡[13]。由于4月齡的嬰兒生長發(fā)育迅速、造血活躍，但嬰兒主食或乳類食品中鐵含量均不高，不能滿足嬰兒生長發(fā)育的需求，導(dǎo)致其體內(nèi)的鐵元素被大量消耗，進而發(fā)生缺鐵癥狀[14]。早診斷、早治療可有效緩解嬰幼兒的缺鐵狀態(tài)，保障嬰幼兒健康成長。

本研究結(jié)果顯示，缺鐵性貧血組MCV、MCH、MCHC、SI、25（OH）D均低于正常對照組（P<0.05），F(xiàn)lt-3L、TF水平均高于正常對照組（P<0.05）。提示缺鐵性貧血患兒體內(nèi)鐵元素含量不足，直接導(dǎo)致紅細胞中Hb含量減少，從而引發(fā)貧血[15]。另外，F(xiàn)lt-3L水平升高可促進T細胞增殖，T細胞會介導(dǎo)骨髓造血細胞的過度凋亡，抑制骨髓造血，增加了嬰幼兒的造血負擔[16]，尤其是Flt-3L能促進樹突狀細胞的增殖和成熟，并增強機體的免疫反應(yīng)[17]。SI直接反映了機體用于造血的鐵的含量。TF是血漿中主要的含鐵蛋白，負責輸送消化道吸收的鐵和紅細胞降解后釋放出的鐵，在調(diào)節(jié)機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定性方面發(fā)揮重要作用[18]。血清中可溶性TF受體水平升高程度與生成紅細胞所需的鐵的缺乏量有關(guān)，能夠準確反映紅細胞內(nèi)鐵水平[19]。維生素D（vitamin D，Vit D）屬于脂溶性維生素，其主要功能包括促進小腸黏膜細胞對鈣和磷的吸收、促進皮膚組織細胞的增殖、對細胞分化的調(diào)節(jié)和對免疫功能的調(diào)節(jié)[20]。25（OH）D可以反映體內(nèi)Vit D水平，Vit D水平不足會降低鈣、磷、鐵的合成與吸收，進而引發(fā)相關(guān)疾病[21]。有研究結(jié)果顯示，慢性疾病引發(fā)的炎癥和感染與缺鐵性貧血的發(fā)病密切相關(guān)，會導(dǎo)致紅細胞破壞增多，使鐵利用發(fā)生障礙，幼紅細胞對紅細胞生成素的反應(yīng)性減弱，機體鐵吸收減少，細胞免疫功能受到抑制，從而引發(fā)鐵代謝紊亂[22]。另外，本研究ROC曲線分析結(jié)果顯示，F(xiàn)lt-3L、TF、25（OH）D聯(lián)合檢測診斷和鑒別診斷缺鐵性貧血的效能均優(yōu)于3項指標單項檢測。

綜上所述，F(xiàn)lt-3L、TF、25（OH）D對嬰幼兒缺鐵性貧血有較高的輔助診斷價值，其水平高低與貧血的嚴重程度有關(guān)。