分析3種水產(chǎn)藥物對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的急性毒性影響

張 濤，胡江偉，劉 鴻，李 冬，沙文軍，王小渝，蔡林鋼，牛建功

（1.新疆維吾爾自治區(qū)水產(chǎn)科學(xué)研究所/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部西北地區(qū)漁業(yè)資源環(huán)境科學(xué)觀測(cè)實(shí)驗(yàn)站，烏魯木齊 830000；2.國(guó)家能源集團(tuán)新疆吉林臺(tái)水電開發(fā)有限公司，新疆伊寧 835000）

0 引言

【研究意義】新疆裸重唇魚（Gymnodiptychus dybowskii），屬鯉形目（Cypriniformes），鯉科（Cyprinidae），裂腹魚亞科（Schizothoracinae），裸重唇魚屬（Gymnodiptychus Herzenstein），主要分布在伊犁河流域雅瑪渡段以上各支流水域[1]。新疆裸重唇魚是伊犁河水系具有代表性的土著種和生態(tài)敏感種[2]，具有重要的價(jià)值[3]，目前種群數(shù)量銳減，種群個(gè)體趨于小型化[2]。2004年被列入新疆Ⅰ級(jí)水生野生重點(diǎn)保護(hù)動(dòng)物名錄[4]?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】蔡林鋼等[5]對(duì)鞏乃斯河新疆裸重唇魚產(chǎn)卵場(chǎng)微環(huán)境開展研究，發(fā)現(xiàn)新疆裸重唇魚產(chǎn)卵場(chǎng)處于中游河道散流區(qū)，底質(zhì)為小礫石，繁殖水溫8～14℃；牛玉娟[2]對(duì)伊犁河三支流新疆裸重唇魚的生長(zhǎng)特性研究，發(fā)現(xiàn)新疆裸重唇魚在鞏乃斯河生長(zhǎng)最快，喀什河次之，在特克斯河生長(zhǎng)最慢；牛建功等[6]對(duì)新疆裸重唇魚胚胎及早期仔魚發(fā)育開展研究，發(fā)現(xiàn)其胚胎發(fā)育特征與新疆地區(qū)其他幾種裂腹魚類存在差異；王新月等[7]對(duì)開都河新疆裸重唇魚進(jìn)行生物學(xué)特性研究，發(fā)現(xiàn)其體長(zhǎng)及體重生長(zhǎng)較慢，體重和其他水系差異顯著（P＜0.05）；張文潤(rùn)等[8]對(duì)伊犁河流域新疆裸重唇魚寄生蟲感染情況研究發(fā)現(xiàn)，寄生三代蟲更偏好寄生于體長(zhǎng)14～19 cm的宿主胸鰭?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】新疆裸重唇魚在魚苗培育階段易受到寄生蟲、細(xì)菌性疾病的威脅，采用水產(chǎn)藥物是防治疾病最有效的辦法。不同藥物對(duì)魚體的敏感性不同[9]，藥物毒性不明或濃度使用不當(dāng)會(huì)導(dǎo)致魚苗大量死亡，有關(guān)水產(chǎn)藥物對(duì)新疆裸重唇魚毒性研究未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道，研究甲醛、食鹽及高聚碘對(duì)新疆裸重唇魚的急性毒性十分關(guān)鍵?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】分析3種常見(jiàn)水產(chǎn)藥物對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的急性毒性試驗(yàn)，為新疆裸重唇魚幼魚養(yǎng)殖過(guò)程中疾病防治的用藥劑量提供參考，為其苗種培育及規(guī)模化養(yǎng)殖提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

2021年5月選用1月齡子一代新疆裸重唇魚幼魚，挑選體質(zhì)健壯，規(guī)格相近的個(gè)體開展試驗(yàn)，體質(zhì)量（75.23±5.08）mg，全長(zhǎng)（23.90±1.03）mm，在伊犁喀什河流域魚類增殖站開展實(shí)驗(yàn)。

開始前24 h，幼魚停止投喂餌料，試驗(yàn)用水為增殖站用壩后滲水，水質(zhì)穩(wěn)定，符合漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)（GB11607-89），水溫（12.2±0.2）℃，pH（8.6±0.1），溶氧（8.4±0.3）mg/L，試驗(yàn)期間停食。表1

表1 試驗(yàn)藥物規(guī)格與廠家Table 1 The specifications and manufacturers of the drugs used in the test

1.2 方法

前期開展預(yù)實(shí)驗(yàn)，確定各藥物的24h 最高無(wú)死亡濃度及100%致死最低濃度。

參照盧玲等[10]的方法進(jìn)行室內(nèi)研究，將試驗(yàn)幼魚放入60×40×20（cm）的塑料箱中，每個(gè)濃度試驗(yàn)箱放入40尾幼魚[11]。

按照等對(duì)數(shù)間距設(shè)置各藥物試驗(yàn)濃度梯度組[12]，設(shè)置3組平行試驗(yàn)組，3種藥物各設(shè)7個(gè)試驗(yàn)濃度梯度及空白對(duì)照組。每隔4 h 觀察魚類狀況，記錄死亡幼魚數(shù)量、死亡時(shí)間，及時(shí)清理死亡個(gè)體，重點(diǎn)記錄試驗(yàn)魚24、48、72、96 h 的死亡率。死亡判定依據(jù)為用玻璃棒輕觸魚的尾部，無(wú)反應(yīng)既為死亡。甲醛和高聚碘為易氧化、易揮發(fā)的藥物，每隔24h換液1次，食鹽不換液。表2

表2 3種藥物試驗(yàn)濃度Table 2 Test Concentration of three drugs

1.3 數(shù)據(jù)處理

急性毒性試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)采用平均值作為最后結(jié)果，用直線內(nèi)切法求出各時(shí)間點(diǎn)的半致死濃度（LC50），將藥物的濃度轉(zhuǎn)換為濃度對(duì)數(shù)，作為橫坐標(biāo)；致死率作為縱坐標(biāo)，用Excel 2007軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，擬合回歸直線方程。

根據(jù)Turubell 公式，計(jì)算三種藥物對(duì)新疆裸重唇幼魚的安全濃度（SC）：

安全濃度SC=48 hLC50×0.3/（24 hLC50/48 hLC50）2。

式中SC為安全濃度；24 hLC50和48 hLC50分別為24和48 h半致死濃度（mg/L）。

2 結(jié)果與分析

2.1 甲醛對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的急性毒性實(shí)驗(yàn)

研究表明，新疆裸重唇魚幼魚死亡率隨甲醛濃度升高逐漸增大，當(dāng)甲醛濃度為91.48 mg/L時(shí)，24 h 死亡率為65%，72h 全部死亡。甲醛對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的24、48、72、96 h 的LC50分別為89.27、69.21、56.23 和48.07 mg/L，SC為12.48 mg/L。甲醛對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的刺激較為明顯，當(dāng)甲醛濃度為175.00 mg/L 時(shí)，試驗(yàn)魚極度不安，劇烈游動(dòng)；其后身體失去平衡，呈45 度角斜臥在水底，活力減弱后，4 h開始死亡；死魚體表有少量粘液，鰓蓋微張，體色變淺，12 h 內(nèi)全部死亡。表3，表4

表3 甲醛對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的急性毒性Table 3 Acute toxicity of formaldehyde to Gymnodiptychusdybowskiiseedling

表4 甲醛對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的半致死濃度和安全濃度Table 4 Semi-lethal concentration（LC50）and safe concentration（SC）of formaldehyde to Gymnodiptychus dybowskii seedling

2.2 食鹽對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的急性毒性實(shí)驗(yàn)

研究表明，新疆裸重唇魚幼魚對(duì)食鹽的耐受能力較強(qiáng)，低濃度組試驗(yàn)魚前期未見(jiàn)明顯不適，后期出現(xiàn)死亡。食鹽對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的24、48、72、96 h 的LC50分別為13 580.67、13 010.59、12824.48和12 621.56 mg/L，SC為3 582.37 mg/L。當(dāng)食鹽濃度為15 000.00 mg/L 時(shí)，試驗(yàn)魚初期在水面焦躁不安游動(dòng)，2h 后活力減弱并身體側(cè)翻，體表顏色變淡，5 h后試驗(yàn)魚體表分泌大量粘液并開始陸續(xù)死亡，13 h全部死亡。表5，表6

表5 食鹽對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的急性毒性Table 5 Acute toxicity of salt to Gymnodiptychus dybowskii seedling

表6 食鹽對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的半致死濃度和安全濃度Table 6 LC50 and SC of salt to Gymnodiptychus dybowskii seedling

2.3 高聚碘對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的急性毒性實(shí)驗(yàn)

研究表明，高聚碘對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的毒性較強(qiáng)，低濃度組試驗(yàn)魚，初期未見(jiàn)中毒現(xiàn)象，隨著浸泡時(shí)間的延長(zhǎng)，幼魚開始出現(xiàn)中毒現(xiàn)象并逐漸死亡。高聚碘對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的24、48、72、96 h 的LC50分 別 為44.89、38.46、34.74 和32.42 mg/L，SC為8.47 mg/L。當(dāng)高聚碘藥物濃度為60 mg/L 時(shí)，水體顏色變?yōu)槲⒑稚a(chǎn)生粘性氣泡，試驗(yàn)魚在水面劇烈游動(dòng)，而后游動(dòng)不暢并逐漸沉于底部，體表及鰓蓋部黏連藥物呈淡褐色，1 h 后呼吸減弱開始出現(xiàn)死亡，死亡魚身體僵硬，6 h后全部死亡。表7，表8

表7 高聚碘對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的急性毒性Table 7 Acute toxicity of high polyiodine to Gymnodiptychus dybowskii seedling

表8 高聚碘對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的半致死濃度和安全濃度Table 8 LC50 and SC of high polyiodine to Gymnodiptychus dybowskii seedling

3 討論

3.1 3種藥物對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的毒性評(píng)價(jià)

依據(jù)生態(tài)毒理學(xué)危害性分級(jí)[13]，以96 hLC50為分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，極高毒＜1 mg/L；高毒1 mg/L＜96 hLC50≤10 mg/L；中毒10 mg/L＜96 hLC50≤100 mg/L；低毒＞100 mg/L 等標(biāo)準(zhǔn)，甲醛對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的96 hLC50為48.07 mg/L，中毒性；食鹽對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的96 hLC50為12 621.56 mg/L，低毒性；高聚碘對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的96 hLC50為32.42 mg/L，中毒性。

3.2 甲醛對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的毒性作用

甲醛傷害魚類的鰓組織，使魚的黏液、表皮蛋白質(zhì)凝固，危害魚鰓及體表[14]。甲醛對(duì)細(xì)菌、芽孢、病毒、寄生蟲、藻類、真菌均有明顯殺滅作用[15]，可有效防治魚、蝦、蟹、鱉等水產(chǎn)動(dòng)物的寄生蟲類疾病。養(yǎng)殖設(shè)施和工具消毒常用劑量為10.00～30.00 mg/L[16]。研究中甲醛對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的SC 為12.48 mg/L，低于扁吻魚幼魚[17]的安全濃度14.2 mg/L，高于硬刺松潘裸鯉幼魚[18]、齊口裂腹魚幼魚[19]、錦鯉幼魚[20]的安全濃度10.43和、7.53 和、5.87 mg/L。當(dāng)濃度為25 mg/L 時(shí)新疆裸重唇魚幼魚96h 死亡率為0%，在濃度為66.14 mg/L時(shí)新疆裸重唇魚幼魚24 h死亡率為15%。

3.3 食鹽對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的毒性作用

食鹽主要利用其滲透作用改變寄生蟲的滲透壓，殺滅一些體外寄生的原生動(dòng)物及微生物[21-22]?？煞乐味喾N皮膚及鰓部寄生蟲病、水霉病和細(xì)菌性魚病等[14]。食鹽對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的安全濃度為3 582.37 mg/L，與鱸鯉幼魚[23]的安全濃度3 428.29 mg/L較為接近，高于歐鯰[24]、似鮈幼魚[25]的安全濃度1 520 和、910.6 mg/L，低于花鰻鱺[26]的安全濃度6 600 mg/L。當(dāng)食鹽濃度為12 845.23 mg/L，幼魚24 h死亡率僅為15%，新疆裸重唇魚對(duì)食鹽的耐受性較強(qiáng)，食鹽可作為新疆裸重唇魚幼魚病害防治可選藥物。但高濃度食鹽會(huì)導(dǎo)致魚體脫水、體表粘液脫離，增加細(xì)菌感染幾率[27]，實(shí)際生產(chǎn)中必須嚴(yán)格控制食鹽的用量。

3.4 高聚碘對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的毒性作用

高聚碘指含有多碘離子的化合物，多碘離子由多個(gè)碘原子組成的多原子陰離子，是多聚鹵素陰離子的一類[28]。高聚碘在水產(chǎn)應(yīng)用中藥效強(qiáng)于聚維酮碘，對(duì)細(xì)菌、病毒和真菌有較強(qiáng)的消殺作用，可加快魚類傷口愈合[29]。復(fù)合S 高聚碘為常用碘制劑類消毒劑[30]，其氧化性更強(qiáng)，藥效時(shí)間更持久，且在強(qiáng)光照射下穩(wěn)定性良好，對(duì)人體無(wú)毒副作用[31]。高聚碘對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的安全濃度為8.47 mg/L。高聚碘是防治水霉病、細(xì)菌性感染的理想藥物[25]，2種疾病是新疆裸重唇魚的常見(jiàn)病且致死率高。

但魚類在不同生長(zhǎng)階段及生長(zhǎng)環(huán)境會(huì)影響其對(duì)藥物的敏感性[32]，今后研究中需對(duì)不同規(guī)格新疆裸重唇魚及各水環(huán)境因子對(duì)藥物的敏感性做進(jìn)一步分析。

4 結(jié)論

新疆裸重唇魚幼魚的死亡率與藥物濃度高低及浸泡時(shí)間長(zhǎng)短呈現(xiàn)正相關(guān)，甲醛、食鹽和高聚碘的安全濃度分別為12.48 和、3 582.37 和、8.47 mg/L。3種藥物對(duì)新疆裸重唇魚幼魚的敏感性為高聚碘＞甲醛＞食鹽。甲醛毒性為中毒性；食鹽為低毒性；高聚碘為中毒性。