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    紫甘薯水溶性多糖的提取工藝優(yōu)化及結(jié)構(gòu)研究

    2022-12-20 04:22:50李晨京馮怡華王春玲
    食品研究與開(kāi)發(fā) 2022年24期
    關(guān)鍵詞:單糖液料甘薯

    李晨京,馮怡華,王春玲

    (天津科技大學(xué) 食品科學(xué)與工程學(xué)院,天津 300457)

    紫甘薯,屬于旋花科甘薯屬,是一種雙子葉農(nóng)業(yè)作物[1]。它在世界的三大溫度帶(熱帶、副熱帶和溫帶)地區(qū)種植廣泛,因其產(chǎn)量高和對(duì)不同環(huán)境、溫度和土壤條件的適應(yīng)能力強(qiáng),紫甘薯被認(rèn)為是甘薯市場(chǎng)上最有優(yōu)勢(shì)的經(jīng)濟(jì)作物之一[2]。我國(guó)于20世紀(jì)90年代引進(jìn)紫甘薯,并在河北、河南、山東、江蘇等地種植[3]。紫甘薯營(yíng)養(yǎng)豐富,與普通甘薯相比,其含有更多的氨基酸、淀粉、可溶性糖、花青素等[4]。近幾年,紫甘薯以其特有的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值受到越來(lái)越多人的喜愛(ài),因此其種植面積也呈現(xiàn)出逐年增加的趨勢(shì),市場(chǎng)開(kāi)發(fā)潛力很大。

    植物多糖是一種具有生物活性的大分子,由相同或不同數(shù)量的單糖組成,研究發(fā)現(xiàn)多糖具有抗炎、預(yù)防癌癥、抗氧化、降低血糖、保護(hù)肝臟[5-8]等多種生物活性,是保健類(lèi)食品開(kāi)發(fā)的重要原料之一。目前能夠參與體內(nèi)生理功能的天然多糖已被鑒定出300多種[9],且大部分植物多糖都比較安全,不會(huì)產(chǎn)生明顯的副作用[10]。多糖提取方法有很多,酸法和堿法提取多糖時(shí),由于提取液的酸堿度比較高,容易引起糖苷鍵斷裂,破壞多糖結(jié)構(gòu)[11-12]。超聲波輔助提取和微波輔助提取雖然可以比較徹底地破壞細(xì)胞壁,提高多糖的提取率,但也會(huì)對(duì)多糖的結(jié)構(gòu)產(chǎn)生破壞作用[13]。而熱水提取是在一定的溫度和時(shí)間內(nèi)提取多糖[14],它因具有成本低、操作簡(jiǎn)單、試劑無(wú)污染、提高多糖的溶解度等優(yōu)點(diǎn)而備受青睞。近年來(lái)對(duì)于紫甘薯,國(guó)內(nèi)外的學(xué)者的研究主要集中于對(duì)其花青素[15]、黃酮類(lèi)化合物[16]、酚酸衍生物[17]等具有活性成分的物質(zhì)分離,但是對(duì)紫甘薯多糖的提取、工藝的優(yōu)化以及結(jié)構(gòu)鑒定的研究鮮見(jiàn)。

    因此,本試驗(yàn)以紫甘薯為原料,采用熱水提取法提取多糖,通過(guò)單因素和響應(yīng)面試驗(yàn)優(yōu)化提取工藝,并對(duì)紫甘薯多糖進(jìn)行分離純化和結(jié)構(gòu)分析鑒定,為后續(xù)的開(kāi)發(fā)利用提供基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    紫甘薯(紫羅蘭品種):市售。

    石油醚、無(wú)水乙醇、正丁醇、濃硫酸、三氟乙酸、甲醇(均為分析純):天津市化學(xué)試劑一廠;三氯甲烷(分析純):上海藍(lán)季科技公司;重蒸酚、標(biāo)準(zhǔn)葡聚糖(分析純)、Sepharose 4B、α-淀粉酶(≥40 000 U/g,食品級(jí))、糖化酶(≥100 000 U/g,食品級(jí))、蛋白酶(≥100 000 U/g,食品級(jí))、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸(均為分析純):北京Sorlabio生物公司。

    1.2 儀器與設(shè)備

    多功能粉碎機(jī)(1500C):東莞市華泰電器有限公司;Freezone凍干機(jī)(6 plus):美國(guó) Labconco公司;精密天平(Q224-1CN):美國(guó)Sartorius公司;磁力攪拌器(Tex-Ⅱ)、高性能臺(tái)式離心機(jī)(X1R)、酶標(biāo)儀(MULTISKAN GO)、高效陰離子色譜儀(ICS-5000+):美國(guó)Thermo公司;電熱恒溫水浴鍋(BCI-HW):上海醫(yī)療器械五廠;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(3000A)、自動(dòng)部分收集器(BSZ-100):上海亞榮生化儀器廠;蠕動(dòng)泵(100M):保定創(chuàng)銳泵業(yè)有限公司;高效液相色譜儀(LC20A):日本島津公司;紫外分光光度計(jì)(U-T6):上海屹譜儀器制造有限公司;傅里葉變換紅外光譜檢測(cè)儀(IS50):美國(guó)布魯克儀器公司。

    1.3 試驗(yàn)方法

    1.3.1 紫甘薯預(yù)處理

    紫甘薯洗凈、去皮,切成5 cm×0.5 cm×0.5 cm的矩形長(zhǎng)條,-80℃凍干機(jī)中冷凍干燥24 h至無(wú)水分,粉碎過(guò)篩后裝袋儲(chǔ)存在干燥器中。

    1.3.2 單因素試驗(yàn)

    1.3.2.1 提取溫度對(duì)紫甘薯多糖提取率的影響

    每份稱取10 g紫甘薯粉末,共計(jì)5份。在設(shè)定提取時(shí)間 2.5 h、液料比為 20∶1(mL/g)的條件下,于 50、60、70、80、90℃的溫度下提取多糖,離心收集上清液并濃縮。水浴鍋60℃加熱濃縮液,加入適量糖化酶水解30 min后溫度調(diào)至95℃,加入適量淀粉酶水解15 min,冷卻至室溫(26℃)。結(jié)束后,緩慢加入濃縮液體積4倍的無(wú)水乙醇,4℃冷藏12 h,離心后除去上清,加入適量蒸餾水復(fù)溶。采用蛋白酶-Sevag聯(lián)合法除蛋白,首先水浴鍋70℃加熱后,加入適量蛋白酶水解30 min后冷卻;其次加入1/4多糖溶液體積的Sevag試劑,搖床均勻振蕩15 min離心除去白色沉淀物,重復(fù)此操作6次。AB-8大孔吸附樹(shù)脂脫除色素,作用時(shí)間為12 h,結(jié)束后用蒸餾水沖洗3次樹(shù)脂以充分獲得全部多糖。除去色素的多糖溶液濃縮至1/10體積,凍干后得到紫甘薯多糖。測(cè)定糖含量,得出提取率。

    1.3.2.2 提取時(shí)間對(duì)紫甘薯多糖提取率的影響

    每份稱量10 g紫甘薯粉末,共計(jì)5份。設(shè)定提取溫度80℃、液料比為20∶1(mL/g)恒定不變,提取時(shí)間分別取 1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 h。其余操作步驟同 1.3.2.1。

    1.3.2.3 液料比對(duì)紫甘薯多糖提取率的影響

    每份稱量10 g紫甘薯粉末,共計(jì)5份。設(shè)定提取溫度80℃、提取時(shí)間為2.5 h恒定不變,液料比分別取5∶1、10∶1、15∶1、20∶1、25∶1(mL/g)。其余操作步驟同1.3.2.1。

    1.3.3 紫甘薯多糖含量的測(cè)定

    采用苯酚-硫酸法[18]測(cè)定紫甘薯中的多糖含量。

    1.3.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

    精確稱取干燥無(wú)水的葡萄糖10.0 mg,使用100 mL容量瓶定容,即得到0.1 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液。分別吸取 0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9 mL 于各試管中,蒸餾水補(bǔ)足至終體積為1.0 mL。向各管加入5.0 mL濃硫酸與1.0 mL 6%苯酚,均勻振蕩后加熱煮沸15 min,冷卻后于490 nm測(cè)定吸光值。

    1.3.3.2 紫甘薯多糖含量的測(cè)定

    稱取一定質(zhì)量的多糖,定容至250 mL,依照標(biāo)椎曲線的方法加入試劑進(jìn)行試驗(yàn),并以此計(jì)算出紫甘薯多糖的提取率。紫甘薯多糖提取率的計(jì)算如下。

    式中:R為紫甘薯多糖的提取率,%;C為紫甘薯多糖濃度,μg/mL;V為樣液體積,mL;D為稀釋倍數(shù);W為所稱樣品的質(zhì)量,g。

    1.3.4 響應(yīng)面試驗(yàn)

    響應(yīng)面試驗(yàn)因素與水平見(jiàn)表1。

    表1 響應(yīng)面試驗(yàn)因素與水平Table 1 Response surface experiment factors and levels

    1.3.5 紫甘薯多糖的分離純化

    Sepharose 4B的特點(diǎn)是分子量分離范圍較大,根據(jù)它的特點(diǎn)選用其作為層析的填料進(jìn)行紫甘薯多糖的分離和純化,方法參考文獻(xiàn)[19]并進(jìn)行適當(dāng)修改。

    將紫甘薯粗多糖用超純水配制成20mg/mL的多糖溶液,過(guò)0.22μm水系濾膜后在Sepharose4B(id1.6cm×60 cm)凝膠層析柱中上樣2.0 mL,以超純水洗脫,流速設(shè)置為0.5 mL/min,每管的收集時(shí)間設(shè)定為4 min,用苯酚-硫酸法檢測(cè)各管吸光值,將收集管數(shù)作為橫坐標(biāo),各管的吸光度值作為縱坐標(biāo),繪制紫甘薯多糖的洗脫曲線。根據(jù)曲線將洗脫峰對(duì)應(yīng)管數(shù)分別合并收集,低溫真空冷凍干燥,得純化后多糖組分。

    1.3.6 多糖的分子量測(cè)定

    采用高效液相色譜法進(jìn)行紫甘薯多糖的純度鑒定。精確稱量標(biāo)準(zhǔn)葡聚糖各5.0 mg,分子量分別為4×104、1×105、2×105、5×105、1×106、2×106。1 mL 超純水溶解后,過(guò)0.22 μm水系膜除雜,進(jìn)樣針吸取20 μL進(jìn)樣。根據(jù)不同分子量葡聚糖的出峰時(shí)間制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到回歸方程。

    純多糖按照上述方法進(jìn)行溶解,過(guò)膜后上樣,采用高效液相色譜法進(jìn)行檢測(cè),根據(jù)保留時(shí)間按照回歸方程計(jì)算分子量。

    1.3.7 紫甘薯多糖的純度鑒定

    紫外分光光度計(jì)在200 nm~400 nm處掃描濃度為1.0 mg/mL的純多糖溶液?;?60 nm和280 nm處曲線是否光滑來(lái)判定多糖中是否存在核酸和蛋白質(zhì)[20]。

    1.3.8 紅外光譜分析

    首先稱量100 mg干燥的KBr,研磨成粉末后模具加壓1 min制成近乎透明的薄片,紅外光譜儀在4 000 cm-1~400 cm-1內(nèi)進(jìn)行掃描,測(cè)定空白背景。1 mg干燥至恒重的純多糖與100 mg KBr混合后迅速研磨至粉狀,制片后采用相同方法掃描并分析多糖的特征吸收峰。

    1.3.9 單糖組成分析

    1.3.9.1 單糖標(biāo)準(zhǔn)品的配制

    稱量適量的8種單糖標(biāo)準(zhǔn)品(鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸)于試管中,超純水溶解配制成1 mg/mL的混合單糖標(biāo)準(zhǔn)液,4℃冰箱儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?/p>

    1.3.9.2 樣品處理

    試管中加入5 mg的純多糖,N2環(huán)境下加入5 mL的三氟乙酸(2 mol/L),確保N2充滿整個(gè)試管后迅速封管。120℃的油浴鍋中降解反應(yīng)3 h,取出冷卻至室溫。50℃蒸干樣品后加入1 mL甲醇繼續(xù)蒸干,操作重復(fù)5次。加入5 mL超純水振蕩溶解樣品,用0.22 μm水系濾膜、小柱過(guò)濾后,吸取1 mL準(zhǔn)備上樣。

    1.3.9.3 流動(dòng)相的配制

    200 mmol/L NaOH溶液:4.2 mL NaOH溶液定容至400 mL,搖勻,通N2保護(hù)備用。

    1mol/L醋酸鈉溶液:稱取8.2g醋酸鈉固體,用50mL超純水溶解,減壓抽濾后定容至100 mL,搖勻后通N2保護(hù)備用。

    800 mL超純水,通N2保護(hù)備用。

    1.3.9.4 檢測(cè)條件

    Thermo Dionex ICS2500色譜系統(tǒng),色譜柱為Carbo Pac PA10(150 mm×3 mm),柱溫設(shè)為 30℃,進(jìn)樣量1 mL,檢測(cè)時(shí)間為40 min。

    根據(jù)8種單糖的色譜圖出峰時(shí)間與純糖進(jìn)行分析比較,對(duì)純多糖的單糖組成進(jìn)行定性,結(jié)合峰面積、相對(duì)分子質(zhì)量等其他數(shù)據(jù)計(jì)算出純糖中各單糖的摩爾比。

    1.4 數(shù)據(jù)分析與處理

    利用Design-Expert.V8.0和Origin 8.6等軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析及制圖。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 紫甘薯多糖提取的單因素試驗(yàn)

    2.1.1 提取溫度對(duì)紫甘薯多糖提取率的影響

    提取溫度對(duì)紫甘薯多糖提取率的影響結(jié)果如圖1所示。

    圖1 不同提取溫度對(duì)多糖提取率的影響Fig.1 Influence of different extraction temperature on extraction yield of polysaccharides

    由圖1可知,紫甘薯多糖提取的溫度較低時(shí),隨著提取溫度的升高,多糖提取率隨之增加,說(shuō)明了溫度升高可促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)多糖分子的運(yùn)動(dòng),以促進(jìn)多糖溶出[21],當(dāng)溫度升高到80℃時(shí),多糖提取率最大。但當(dāng)溫度升高到90℃時(shí),糖苷鍵可能會(huì)斷裂,發(fā)生多糖降解。通過(guò)分析以上結(jié)果,選取提取溫度80℃作為紫甘薯多糖的最佳提取溫度。

    2.1.2 提取時(shí)間對(duì)紫甘薯多糖提取率的影響

    提取時(shí)間對(duì)紫甘薯多糖提取率的影響結(jié)果如圖2所示。

    圖2 不同提取時(shí)間對(duì)多糖提取率的影響Fig.2 Influence of different extraction time on extraction yield of polysaccharides

    由圖2可知,當(dāng)提取時(shí)間設(shè)定在1.0 h~2.5 h內(nèi)時(shí),隨著時(shí)間的逐漸延長(zhǎng),紫甘薯多糖的提取率也逐漸增加,并在2.5 h時(shí)達(dá)到最大,說(shuō)明了提取時(shí)間適當(dāng)?shù)难娱L(zhǎng)也可提高多糖的提取效率[22]。但過(guò)長(zhǎng)的時(shí)間,多糖的溶解逐漸達(dá)到平衡后,可能會(huì)引起多糖結(jié)構(gòu)的改變從而降低提取率。因此選定2.5 h為紫甘薯多糖的最優(yōu)提取時(shí)間。

    2.1.3 液料比對(duì)紫甘薯多糖提取率的影響

    液料比對(duì)多糖提取率的影響結(jié)果如圖3所示。

    圖3 不同液料比對(duì)多糖提取率的影響Fig.3 Influence of different liquid-solid ratio on extraction yield of polysaccharides

    由圖 3 可知,在液料比為 15∶1(mL/g)時(shí),多糖得率最大。當(dāng)紫甘薯細(xì)胞內(nèi)多糖浸出率達(dá)到最大值之前,多糖的提取率隨著溶劑用量的增大而變大,但當(dāng)多糖在溶液中幾乎完全浸出后,過(guò)多的溶劑使后續(xù)步驟更加繁瑣,引起大量多糖被損耗,從而提取效率下降[23]。因此選取15∶1(mL/g)為紫甘薯多糖提取的最佳液料比。

    2.2 紫甘薯多糖提取的響應(yīng)面試驗(yàn)

    2.2.1 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)

    通過(guò)對(duì)單因素的試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析后,確定了提取溫度:70、80、90 ℃,提取時(shí)間:2.0、2.5、3.0 h,提取液料比 10∶1、15∶1、20∶1(mL/g)作為下一步試驗(yàn)因子。響應(yīng)值為多糖的提取率,響應(yīng)面試驗(yàn)使用Design-Expert 8.0.6軟件進(jìn)行設(shè)計(jì),試驗(yàn)方案共17組,試驗(yàn)后通過(guò)計(jì)算得出多糖提取率,結(jié)果見(jiàn)表2。

    2.2.2 擬合模型與顯著性檢驗(yàn)

    應(yīng)用Design-Expert 8.0.6軟件對(duì)表2中的數(shù)據(jù)進(jìn)行了建模和分析,得到了提取率(R)的提取溫度(A)、提取時(shí)間(B)、液料比(C)的多元回歸方程:R/%=9.00+0.23A+0.33B+0.34C-0.65AB-0.041AC-0.23BC-1.58A2-1.16B2-1.60C2。

    響應(yīng)面試驗(yàn)數(shù)據(jù)的分析結(jié)果見(jiàn)表3。

    由表3可知,P<0.000 1,R2=0.995 6,說(shuō)明此模型顯著性很高;且失擬項(xiàng)P值0.728 3>0.05,說(shuō)明明顯的失擬因素不存在,因此該回歸方程可信。F檢驗(yàn)可評(píng)估判斷自變量對(duì)因變量產(chǎn)生的影響[24],可知3個(gè)因素影響提取率的程度為C(液料比)>B(提取時(shí)間)>A(提取溫度)。

    表3 Box-Behnken數(shù)據(jù)分析結(jié)果Table 3 Results of Box-Behnken data analysis

    2.2.3 響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果分析

    3個(gè)因素的兩兩交互作用對(duì)提取率的影響見(jiàn)圖4~圖6。等高線若為圓形則表明兩因素間的相互作用對(duì)提取率的影響很小,若是橢圓形則說(shuō)明影響很大[25]。

    圖4 提取溫度和提取時(shí)間兩因素對(duì)提取率的交互作用Fig.4 Interaction of extraction temperature and extraction time on extraction yield

    圖5 提取溫度和液料比兩因素對(duì)提取率的交互作用Fig.5 Interaction of extraction temperature and liquid-solid ratio on extraction yield

    圖6 提取時(shí)間和液料比兩因素對(duì)提取率的交互作用Fig.6 Interaction of extraction time and liquid-solid ratio on extraction yield

    由圖4~圖6可知,對(duì)提取率影響最大的交互作用是提取溫度和提取時(shí)間,而提取溫度和液料比的影響最小。

    通過(guò)軟件計(jì)算后,得到最優(yōu)的條件為溫度80.70℃、時(shí)間 2.58h、液料比 15.64∶1(mL/g),預(yù)測(cè)提取率為9.06%。在實(shí)驗(yàn)室實(shí)際操作后,確定了最優(yōu)的條件為提取時(shí)間2.5 h、溫度 80 ℃和液料比 15∶1(mL/g),測(cè)得實(shí)際的提取率取平均值為9.03%,相對(duì)偏差為0.74%,這表明響應(yīng)面法優(yōu)化的提取條件是穩(wěn)定可行的。

    2.3 紫甘薯多糖的分離純化

    洗脫曲線如圖7所示,兩個(gè)峰命名為PSPP-A和PSPP-B。合并收集糖含量最高的PSPP-A,進(jìn)行后續(xù)的純度鑒定。

    圖7 紫甘薯多糖的Sepharose 4B洗脫曲線Fig.7 Sepharose 4B elution curve of purple sweet potato polysaccharide

    2.4 PSPP-A的純度及分子量鑒定

    多糖分子量標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖8所示。分子量不同的葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為Y=-4.310 7X+36.120 0。PSPP-A的液相色譜圖如圖9所示。

    圖8 多糖分子量標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.8 Standard curve of molecular weight of polysaccharide

    由圖9可知,PSPP-A的液相色譜圖為單一峰,證明多糖經(jīng)Sepharose 4B凝膠層析柱純化后均一性較好。PSPP-A的出峰時(shí)間為8.438 min,經(jīng)過(guò)計(jì)算,最終得出PSPP-A的分子量為2.63×103kDa。

    圖9 PSPP-A的高效液相色譜圖Fig.9 High performance liquid chromatography of PSPP-A

    2.5 PSPP-A的紫外光譜分析

    PSPP-A的紫外掃描光譜圖見(jiàn)圖10。

    圖10 PSPP-A的紫外掃描光譜圖Fig.10 UV scanning spectra of PSPP-A

    紫外分光光度計(jì)掃描PSPP-A溶液后,260 nm和280 nm處均無(wú)明顯的吸收峰,說(shuō)明多糖基本不含核酸、蛋白質(zhì)類(lèi)物質(zhì)[26]。

    2.6 PSPP-A的傅里葉紅外光譜分析

    利用KBr壓片法對(duì)多糖進(jìn)行傅里葉紅外光譜分析,可以得到PSPP-A的特征官能團(tuán)和糖環(huán)構(gòu)型等結(jié)構(gòu)信息[27]。PSPP-A的傅里葉變換紅外光譜圖見(jiàn)圖11。

    圖11 PSPP-A的傅里葉變換紅外光譜圖Fig.11 Fourier transform infrared spectrumdiagram of PSPP-A

    由圖11可知,3 416.39 cm-1處的寬吸收峰是—OH伸縮振動(dòng),2 924.24 cm-1和2 853.98 cm-1處的吸收峰是C—H的伸縮彎曲振動(dòng),這都是多糖的特征峰,因此可以驗(yàn)證PSPP-A是多糖類(lèi)物質(zhì)[28]。1 739.94 cm-1處有吸收峰是因?yàn)榇嬖邗ヴ然?,說(shuō)明PSPP-A含有糖醛酸;1 617.85 cm-1處的吸收峰是羧酸鹽離子[29]。1 438.34、1 420.30 cm-1處的吸收峰是由于C—H的變角振動(dòng)[30]。在1 077.59、1 050.61 cm-1處存在C—O—C的彎曲振動(dòng),表明存在吡喃糖環(huán)[31]。在830.54 cm-1處的吸收峰表明糖結(jié)構(gòu)為α-糖苷鍵,在920.32 cm-1處的吸收峰歸因于 β-糖苷鍵[32]。

    2.7 PSPP-A的單糖組成分析

    離子色譜法能使單糖通過(guò)金電極表面時(shí)發(fā)生氧化反應(yīng),進(jìn)而引起電流變化來(lái)高效地進(jìn)行單糖分析[33],不需要進(jìn)行衍生操作,且每種單糖都會(huì)有顯著的色譜峰,適合不易提取多糖中的糖類(lèi)成分分析[34]。PSPP-A經(jīng)三氟乙酸水解后進(jìn)行離子色譜分析,結(jié)果如圖12所示。PSPP-A的單糖組成分析見(jiàn)表4。

    表4 PSPP-A的單糖組成分析Table 4 Monosaccharide composition of PSPP-A

    圖12 PSPP-A的單糖組成離子色譜圖Fig.12 Ion chromatograms for determination of PSPP-A monosaccharide composition

    根據(jù)圖12單糖標(biāo)準(zhǔn)品的出峰順序和時(shí)間判斷PSPP-A中的單糖組成為鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、葡萄糖醛酸。

    由表4可知,PSPP-A單糖(鼠李糖:阿拉伯糖:半乳糖:葡萄糖:葡萄糖醛酸)組成的相對(duì)摩爾比為1.89∶8.45∶1.95∶1.13∶1.00。

    3 結(jié)論

    本論文以紫甘薯多糖為研究對(duì)象,對(duì)其提取率的工藝優(yōu)化和分離純化進(jìn)行了研究,通過(guò)進(jìn)行單因素和響應(yīng)面試驗(yàn),得到當(dāng)提取溫度80℃、提取時(shí)間2.5 h和液料比15∶1(mL/g)時(shí),紫甘薯多糖提取率最佳,為9.03%。選用Sepharose 4B凝膠分離純化后得到純多糖PSPP-A。PSPP-A的相對(duì)分子量為2.63×103kDa。通過(guò)紫外吸收光譜可知,PSPP-A中不含核酸和蛋白質(zhì)類(lèi)物質(zhì)。PSPP-A的FT-IR圖譜存在吡喃糖環(huán)、α-糖苷鍵和β-糖苷鍵。PSPP-A經(jīng)單糖組成分析判定后得出,其是由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖和葡萄糖醛酸5 種單糖組成,相對(duì)摩爾比為 1.89∶8.45∶1.95∶1.13∶1。本研究可為紫甘薯的綜合開(kāi)發(fā)和食品功能因子的應(yīng)用提供參考。

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