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    肉牛魏氏梭菌病的診斷與防控

    2022-12-18 00:35:29王麗娟
    養(yǎng)殖與飼料 2022年10期
    關(guān)鍵詞:魏氏梭家兔瓊脂

    王麗娟

    遼寧職業(yè)學(xué)院,遼寧 鐵嶺 112099

    牛魏氏梭菌病又稱(chēng)牛猝死癥,由魏氏梭菌在一定條件下感染引起的多種家畜共患的急性傳染病,臨床上以發(fā)病急、病程短、死亡快、死亡率高,消化道和實(shí)質(zhì)性器官?lài)?yán)重出血為典型特征,嚴(yán)重危害養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。

    各種應(yīng)激因素是誘發(fā)牛魏氏梭菌病的主要原因。當(dāng)牛群受到應(yīng)激,如氣候、飼養(yǎng)環(huán)境突然改變或者突然更換飼料,導(dǎo)致牛體抵抗力下降,反芻減少甚至停止,瘤胃微生態(tài)平衡被破壞,造成胃腸道菌群失調(diào),食物在胃內(nèi)過(guò)度發(fā)酵產(chǎn)酸,引起正常的酸堿度失去平衡,沒(méi)有消化的淀粉顆粒飼料通過(guò)真胃進(jìn)入小腸,致使進(jìn)入腸道中的魏氏梭菌快速繁殖并產(chǎn)生大量的毒素,經(jīng)過(guò)機(jī)體吸收進(jìn)入血液,出現(xiàn)全身毒血癥,造成臟器衰竭,往往來(lái)不及治療即突然死亡,給養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)重大經(jīng)濟(jì)損失[1-2]。

    1 發(fā)病情況

    遼寧省鐵嶺市某肉牛養(yǎng)殖場(chǎng),一共飼養(yǎng)西門(mén)塔爾育肥公牛5 000 頭,于2019 年10 月4 日早晨突然發(fā)現(xiàn)死亡2 頭,1 頭正在發(fā)病,表現(xiàn)腹部膨大,肌肉震顫,口鼻流出紅色泡沫液體,約2 h 也發(fā)生死亡。據(jù)駐場(chǎng)獸醫(yī)敘述,夜里巡視時(shí)牛群正常,早上巡查時(shí)才發(fā)現(xiàn)上述病例,可推斷死亡時(shí)間在下半夜或者凌晨。同時(shí)獸醫(yī)介紹,牛場(chǎng)近幾年內(nèi)在7-8 月暴雨過(guò)后、天氣悶熱季節(jié)曾發(fā)生過(guò)幾起類(lèi)似牛只突然死亡的情況。調(diào)查發(fā)現(xiàn),該牛場(chǎng)共有10 棟舍,每棟500 頭,體重大約500 kg,飼養(yǎng)密度較大,糞便不能及時(shí)清理,圈舍環(huán)境衛(wèi)生較差,晝夜溫差大,一直按照標(biāo)準(zhǔn)采用稻草喂牛,自動(dòng)料線飼喂全價(jià)飼料,平均每頭牛每天采食9 kg 左右。臨床檢查,同群牛只體溫、呼吸均正常。

    2 臨床癥狀

    死亡2 頭牛,均在17 月齡左右,膘情好,1 頭橫躺在飼槽邊,1 頭橫躺在墻邊,頭頸呈角弓反張,腹部膨脹,口鼻流出紅色泡沫狀液體,舌頭脫出口外,肛門(mén)外翻[3]。發(fā)病牛,表現(xiàn)呼吸急促,反芻停止,腹部膨大,肌肉震顫、抽搐,眼球突出,口鼻流出紅色泡沫液體,四肢運(yùn)動(dòng)失調(diào),不能站立,臥倒,體溫38.9 ℃,心跳加快,100 次/min 以上,心率不齊,肺部有明顯濕啰音,注射磺胺類(lèi)藥物,但未能緩解。

    3 剖檢病理變化

    剖檢病死牛,發(fā)現(xiàn)全身實(shí)質(zhì)器官出血、淤血現(xiàn)象。主要表現(xiàn)腹腔和胸腔內(nèi)有大量的暗紅色液體;肺部嚴(yán)重氣腫、充血,肺間質(zhì)變寬,氣管和支氣管內(nèi)均有大量泡沫狀白色黏液;心臟擴(kuò)張、質(zhì)地柔軟,心臟內(nèi)外膜有出血,心肌表面有樹(shù)枝樣出血,心包積液;肝臟腫大、質(zhì)地脆弱,淤血呈黑紫色;膽囊腫大、膽汁充盈;脾臟嚴(yán)重淤血腫大、質(zhì)地較脆且易碎;腎臟輕微腫大,腎被膜易剝離,廣泛性充血出血;膀胱無(wú)尿;小腸、盲腸充滿(mǎn)氣體,腸壁薄,腸壁外觀呈暗紅色,小腸黏膜嚴(yán)重充血、出血、黏膜脫落;皺胃黏膜有潰瘍、出血;腸系膜淋巴結(jié)腫大、出血。

    4 實(shí)驗(yàn)室診斷

    4.1 涂片染色鏡檢

    采取病死牛的心血、肺臟、肝臟和脾臟、腸黏膜及內(nèi)容物等組織進(jìn)行切片,分別進(jìn)行瑞氏染色、美蘭染色和革蘭氏染色,油鏡下檢查。發(fā)現(xiàn)革蘭氏陽(yáng)性菌,多為單個(gè)存在,少數(shù)成對(duì)存在,兩端鈍圓、粗大直桿菌,有莢膜,部分菌體有偏端芽孢或中央芽孢,無(wú)鞭毛,不能運(yùn)動(dòng),符合魏氏梭菌菌體形態(tài)特征[4]。

    4.2 細(xì)菌分離培養(yǎng)和鑒定

    將上述病料分別接種于普通瓊脂平板、血液瓊脂平板、麥康凱瓊脂平板上和皰肉培養(yǎng)基中,放置37 ℃溫箱厭氧法培養(yǎng)24~48 h。結(jié)果發(fā)現(xiàn),麥康凱瓊脂平板上無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng);普通瓊脂平板上菌落呈表面光滑、邊緣整齊、不透明、灰白色的菌落,有些菌落中間有突起,外周有放射狀條紋,邊緣呈鋸齒狀;血液瓊脂平板上明顯見(jiàn)到內(nèi)環(huán)透明、外環(huán)淡綠的雙層溶血環(huán)灰白色較大菌落,邊緣呈鋸齒狀;在皰肉培養(yǎng)基中肉渣不被消化,有時(shí)呈肉紅色。挑取上述典型菌落進(jìn)行涂片,經(jīng)革蘭氏染色、鏡檢,也可見(jiàn)到革蘭氏陽(yáng)性、兩端鈍圓的粗大直桿菌,單個(gè)或成對(duì)存在。

    將血液瓊脂平板上的典型菌落接種牛乳培養(yǎng)基(液體表面覆蓋石蠟或凡士林)中,37 ℃溫箱厭氧培養(yǎng)8~10 h 觀察結(jié)果。在牛乳培養(yǎng)基中牛乳凝固,并產(chǎn)生氣體,使凝固的牛乳呈多孔海綿狀碎塊,出現(xiàn)典型的“洶涌發(fā)酵”現(xiàn)象[4]。

    4.3 生化試驗(yàn)

    取分離純化的典型菌落分別接種糖發(fā)酵管、硫化氫反應(yīng)管及其他生化鑒定管中,置于37 ℃溫箱厭氧法培養(yǎng)24~72 h。該分離菌株能分解葡萄糖、乳糖、麥芽糖、蔗糖、果糖產(chǎn)酸且產(chǎn)氣,不發(fā)酵甘露醇、山梨醇和水楊苷;MR 試驗(yàn)陰性,V-P 試驗(yàn)陽(yáng)性,吲哚試驗(yàn)陰性,硫化氫試驗(yàn)陽(yáng)性,明膠液化試驗(yàn)陽(yáng)性,硝酸鹽利用試驗(yàn)陽(yáng)性。

    4.4 動(dòng)物試驗(yàn)

    選擇4 只2 月齡的健康家兔隨機(jī)分成2 組備用。采取病牛腸內(nèi)容物進(jìn)行毒素檢查。方法是取回腸內(nèi)容物,加適量滅菌生理鹽水稀釋?zhuān)?jīng)4 000 r/min離心沉淀15 min,取上清液用一次性濾器過(guò)濾后分裝在無(wú)菌帶蓋的試管中分成2 組,第1 組上清液不加熱,第2 組上清液60 ℃加熱30 min 處理完待用。分別取2 mL 靜脈注射健康的家兔體內(nèi),每組上清液分別注射2 只家兔進(jìn)行觀察。結(jié)果第2 組2 只家兔一直健活,而第1 組2 只家兔于注射后12~24 h內(nèi)死亡,說(shuō)明有毒素存在[3-5]。

    將死亡的家兔置于37 ℃溫箱中4~5 h,剖檢時(shí)見(jiàn)兔腹圍明顯增大,肝臟腫脹呈泡沫狀,肝臟質(zhì)地脆弱呈泥狀,腸道內(nèi)有大量氣體,腸黏膜出血嚴(yán)重。采集死亡家兔的病變組織進(jìn)行觸片、染色鏡檢,發(fā)現(xiàn)革蘭氏陽(yáng)性的大桿菌與牛病料觸片上的細(xì)菌形態(tài)一致。

    5 診 斷

    該病的診斷應(yīng)從發(fā)病特點(diǎn)、典型的臨床癥狀及特征性的剖檢病理變化做出初步診斷,確診必須結(jié)合實(shí)驗(yàn)室診斷。如根據(jù)氣候驟變、飼養(yǎng)環(huán)境改變或者突然更換飼料等應(yīng)激因素刺激引起病牛突然死亡、腹部膨大、肌肉震顫、口鼻流出紅色泡沫液體,消化道和實(shí)質(zhì)性器官出血等典型特征,即可作出初步診斷,但確診必須采取病變組織作涂片染色鏡檢,觀察到革蘭氏陽(yáng)性粗大桿菌并有莢膜,呈偏端或中央芽孢,并作分離培養(yǎng),有雙層溶血環(huán),特別是在牛乳培養(yǎng)基中引起牛乳“洶涌發(fā)酵”,可用于本菌的快速診斷。

    取腸內(nèi)容物做動(dòng)物試驗(yàn)進(jìn)行毒素檢查是有效的微生物診斷方法,即可確診為肉?;加形菏纤缶?。若要確定毒素的類(lèi)型,需進(jìn)一步做毒素中和保護(hù)試驗(yàn)。目前,已采用多重PCR 等分子生物學(xué)方法用于毒素基因的檢測(cè),快速方便。

    6 防控措施

    6.1 消滅傳染源

    將3 頭病死牛的尸體及其病料送到無(wú)害化處理廠統(tǒng)一銷(xiāo)毀處理,消滅傳染源,避免疫病擴(kuò)散。

    6.2 切斷傳播途徑

    及時(shí)清理污染的糞便、草料并進(jìn)行焚燒處理;對(duì)水槽、料槽用20%漂白粉水溶液進(jìn)行消毒;對(duì)牛欄、器具每天早晚用0.3%過(guò)氧乙酸、聚維酮碘溶液加500 倍水進(jìn)行交換消毒;對(duì)牛舍的地面、墻壁及周?chē)h(huán)境用4%熱燒堿溶液、20%漂白粉等交替進(jìn)行全面消毒,1 次/d,連用1 周。之后牛舍地面、通道鋪撒生石灰粉,進(jìn)行吸濕除潮、抑菌消毒處理。

    6.3 保護(hù)易感牛群

    加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,做好牛舍保溫,在飲水中投放恩諾沙星可溶性粉,按每升水1 g 劑量,連續(xù)投放3 d,以防止同群牛感染病菌;在飼料中適當(dāng)加入微生態(tài)制劑來(lái)促進(jìn)反芻和采食,調(diào)節(jié)胃腸道菌群,抑制有害菌群的繁殖。同時(shí),全群健康牛使用魏氏梭菌多價(jià)疫苗緊急免疫接種,提高牛的抗病能力[3]。

    7 討 論

    7.1 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

    根據(jù)肉牛的生長(zhǎng)階段,飼喂優(yōu)質(zhì)的全價(jià)配合飼料,更換飼料時(shí)禁止突然更換,應(yīng)逐漸調(diào)整;避免擁擠,降低牛舍飼養(yǎng)密度。

    7.2 做好衛(wèi)生消毒

    魏氏梭菌的繁殖體使用一般消毒藥均可殺死,但芽孢的抵抗力較強(qiáng)。因此,病死牛尸體及其分泌物、排泄物等一律焚燒或者深埋,做無(wú)害化處理;及時(shí)清理舍內(nèi)糞便、不潔墊料及霉變飼料,保持牛舍清潔、干燥;保證飼料和飲水清潔;場(chǎng)地、設(shè)施及用具等要定期使用漂白粉、石灰水、氫氧化鈉等消毒藥進(jìn)行全面消毒,消毒藥要定期更換,保證消毒效果,防止病原從消化道入侵是預(yù)防該病的關(guān)鍵措施[6]。

    7.3 保證舍溫恒定

    在悶熱季節(jié),及時(shí)開(kāi)窗通風(fēng)換氣、舍內(nèi)防暑降溫,保持涼爽,避免牛煩躁、牛群間擁擠、斗毆等;天氣驟變季節(jié),及時(shí)關(guān)窗防寒保暖,既要通風(fēng)換氣,又要保持環(huán)境溫度穩(wěn)定,防止晝夜溫差過(guò)大造成應(yīng)激。

    7.4 免疫防治

    在東北地區(qū),暴雨及晝夜溫差大的高發(fā)季節(jié)以及易發(fā)病的地區(qū),應(yīng)該對(duì)易感牛群提前接種與當(dāng)?shù)胤蛛x株相同血清型制備的疫苗或者魏氏梭菌多價(jià)疫苗,使動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體,抵抗魏氏梭菌的侵襲。對(duì)于發(fā)病的牛只,及早使用抗牛魏氏梭菌高免血清或者治愈病牛血清進(jìn)行緊急治療,有一定的療效。

    7.5 藥物防治

    隔離病牛,及時(shí)采用鎮(zhèn)靜、解毒、強(qiáng)心補(bǔ)液、調(diào)理胃腸等對(duì)癥治療,改善癥狀以控制死亡;同舍牛只緊急藥物預(yù)防。發(fā)病牛及時(shí)采取病料進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)確定致病菌,并進(jìn)行藥敏試驗(yàn)篩選出敏感藥物。預(yù)防劑量按照治療量的一半給藥,一般不超過(guò)3 d,否則對(duì)牛生長(zhǎng)不利[7]。

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