晨痰和隨機痰在檢測抗酸桿菌中的差別分析

王 姝

江蘇省泰州市中醫(yī)院檢驗科 225300

結(jié)核病是由感染結(jié)核分枝桿菌引起的慢性傳染病。結(jié)核分枝桿菌主要侵染肺部與腦部，引起肺結(jié)核與腦結(jié)核。同時結(jié)核病也可累及多個器官，從而影響患者生活質(zhì)量[1-2]。結(jié)核病傳染性比較強，很多患者通過噴嚏、談話、咳嗽就可進行傳染，給社會帶來沉重負擔。同時由于各種因素的影響，雖然公眾結(jié)核病知識知曉率較高，但是預(yù)防管理行為依從性卻較低。對結(jié)核病盡早診斷對于有效預(yù)防疾病傳播具有重要意義[3]。痰涂片檢查是一種早期發(fā)現(xiàn)結(jié)核病的重要途徑，對制定治療方案、觀察療效和進行預(yù)后判斷有著重要作用[4]。常用痰涂片檢查方法包括直接涂片法與羅氏培養(yǎng)法。羅氏培養(yǎng)法陽性率高，但其檢測周期較長，直接涂片法操作簡單、成本低，但檢測陽性率較低，敏感性也較低[5]。液基細胞學(xué)涂片法抗酸桿菌檢測技術(shù)是通過痰保存液液化痰液，然后收集細菌，可達到痰涂片的標準化，并結(jié)合液基細胞學(xué)技術(shù)，提高痰抗酸桿菌的檢出率[6]，但是其對于標本的來源性要求比較高。本文探討與分析了晨痰和隨機痰在檢測抗酸桿菌中的差別，以促進合理收集標本。現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2016年8月—2021年9月在本院診治的70例擬診斷為肺結(jié)核患者作為觀察對象。納入標準：研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準；患者自愿簽署知情同意書；具有肺結(jié)核的臨床特征，且具有肺結(jié)核病例的接觸史；年齡18～70歲。排除標準：調(diào)查期間死亡者；合并其他呼吸道疾病感染者；合并腫瘤者；臨床資料缺乏者。在70例患者中，男38例，女32例；年齡19～65歲，平均年齡(45.20±2.19)歲；肺結(jié)核密接者45例，次密接者25例；平均受教育年限(15.20±0.28)年；臨床癥狀(可合并)：咳嗽43例，咳痰52例，咳血43例；平均收縮壓(125.01±11.28)mmHg(1mmHg=0.133kPa)；平均舒張壓(73.10±7.19)mmHg；平均心率(87.15±5.19)次/min；平均空腹血糖(6.10±0.14)mmol/L。

1.2 標本采集與檢測 標本保存液購自宜興市潤迪醫(yī)療器械有限公司，抗酸菌染色液購自珠海貝索生物技術(shù)有限公司，抗酸桿菌藥敏羅氏培養(yǎng)管購自深圳晶美公司，薄層液基細胞制片機購自長沙英泰儀器有限公司，調(diào)速多用振蕩購自北京儀器總廠，恒溫水箱購自常州國宇儀器制造有限公司，KP-1型快速干片機購自上海器械公司。采集所有患者的晨痰和隨機痰各1份，每份5.0ml左右。都采用液基細胞學(xué)涂片法進行抗酸桿菌的檢測，使用竹簽挑取痰標本中0.05～0.10ml的膿樣、干酪樣物、血性物，置于玻片正面靠右大約2/3位置，均勻地涂抹成卵圓形痰膜(大小約為20mm×10mm)。在生物安全柜內(nèi)使用紫外線燈對其照射15min，固定痰涂片火焰。在剩余痰標本中加入5.0%的次氯酸鈉溶液，混合后靜置30min后進行再液化、滅菌，再次混勻后在離心管內(nèi)保留1ml沉渣，制成集菌痰涂片，然后進行染色與鏡檢。

同時所有樣本都進行羅氏培養(yǎng)法檢測，以羅氏培養(yǎng)法作為診斷的金標準。所有檢測都按照《結(jié)核病診斷細菌學(xué)檢驗規(guī)程》進行操作，質(zhì)量控制按照《結(jié)核病防治規(guī)劃—痰涂片鏡檢質(zhì)量保證手冊》進行嚴格管理[7-8]。

1.3 觀察指標 (1)觀察與記錄晨痰和隨機痰的檢測時間。(2)記錄與觀察晨痰和隨機痰的檢測陽性率。(3)以羅氏培養(yǎng)法檢測作為診斷的金標準，判斷晨痰和隨機痰診斷的敏感性與特異性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS21.00軟件處理數(shù)據(jù)，計量數(shù)據(jù)與計數(shù)數(shù)據(jù)分別采用均數(shù)±標準差、率(%)表示，兩兩對比方法為t檢驗與χ2檢驗，檢驗水準為α=0.05。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 檢測時間對比 在70例患者中，晨痰的液基細胞學(xué)涂片法檢測時間為(3.21±0.21)h，隨機痰的檢測時間為(3.31±0.18)h，隨機痰檢測時間多于晨痰，二者對比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=0.872，P=0.218>0.05)。

2.2 抗酸桿菌液基細胞學(xué)涂片法檢測陽性率對比 在70例患者中，隨機痰的檢測陽性率為74.3%(52/70)，較晨痰的90.0%(63/70)低(t=10.360，P=0.001<0.05)。

2.3 診斷價值 在70例患者中，羅氏培養(yǎng)法診斷為抗酸桿菌陽性64例，為此隨機痰、晨痰的抗酸桿菌液基細胞學(xué)涂片法檢測敏感性與特異性分別為100.0%(6/6)、100.0%(6/6)和81.3%(52/64)、98.4%(63/64)。晨痰的抗酸桿菌液基細胞學(xué)涂片法檢測敏感性與隨機痰對比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.000，P=1.000>0.05)，檢測特異性高于隨機痰(χ2=10.360，P=0.001<0.05)。見表1。

表1 晨痰和隨機痰液基細胞學(xué)涂片法檢測抗酸桿菌的敏感性與特異性(n=70)

3 討論

結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌引起的一種傳染病，嚴重危害患者健康[9]。早期診斷結(jié)核病主要通過檢測，為此加強臨床檢測具有重要價值。抗酸桿菌是結(jié)核病患者體內(nèi)的一種傳染性病菌，基本存在于患者肺部病灶的壞死組織內(nèi)，可通過排痰將抗酸桿菌排至外界空氣中，因此患者痰液內(nèi)可檢測到抗酸桿菌，也為臨床診斷提供了基礎(chǔ)[10]?？顾崛旧淙痉ㄊ强顾釛U菌檢驗的常用手段，但其診斷特異性與敏感性有所差異，導(dǎo)致其應(yīng)用受限。熒光金胺O法具有染色明顯、操作簡易等特點，適合于檢測排菌量少結(jié)核病，就某一方面而言，有利于結(jié)核病患者病灶組織中抗酸桿菌檢出率的提高，但是檢測成本比較高[11]。聚合酶鏈反應(yīng)具有很高敏感性和特異性，但對于技術(shù)操作的要求較高，不利于很多醫(yī)院開展。

本文結(jié)果顯示，在70例患者中，隨機痰與晨痰的液基細胞學(xué)涂片法檢測時間對比差異無統(tǒng)計學(xué)意義，表明抗酸桿菌液基細胞學(xué)涂片法檢測具有很好的快速性。分析可知：晨痰檢測多為批量次檢測，而隨機痰檢測多為單個檢測，從而可增加一定的檢測時間。但是抗酸桿菌液基細胞學(xué)涂片法為一個既省時又低成本的方法，且在操作中的人為因素影響比較少，有很好的生物安全性，同時其操作易標準化，在單個檢測與批量檢測時間的耗時都較少[12]。

本文結(jié)果顯示，在70例患者中，隨機痰的檢測陽性率低于晨痰。分析可知：晨痰為持續(xù)8h左右產(chǎn)生的痰液，累計的物質(zhì)相對較多，能有效反映機體抗酸桿菌的感染情況。隨機痰多為水樣痰，主要是一些來自上呼吸道或口腔的分泌物產(chǎn)生的痰，故檢測陽性率較低。痰結(jié)核桿菌抗酸桿菌檢查對結(jié)核病診斷以及早期預(yù)防管理傳染源有著決定性作用，但對于標本質(zhì)量的要求比較高[13]?；颊咴谇宄繒r易于咳出黏液痰、干酪痰、血性痰，其均由患者肺部病灶壞死組織與氣管內(nèi)分泌物產(chǎn)生，黏度相對較高，在檢測時可檢出大量的抗酸桿菌，從而具有較高的陽性檢出率。同時在檢測結(jié)核病患者痰涂片抗酸桿菌時，需留取足夠痰液量的晨痰，進而有利于痰涂片抗酸桿菌檢出率的提高。并且晨痰的標本采集質(zhì)量比較高，隨機痰的標本采集質(zhì)量有待提高，為此需重視標本采集前質(zhì)量控制，需由醫(yī)務(wù)人員在采集痰液標本前向患者介紹的各種注意事項，以留取最佳且合格的痰液檢測標本。

當前結(jié)核病防控主要問題是缺乏及時有效可靠的診斷方法，傳統(tǒng)的結(jié)核病診斷方法均存在一定的局限性?？顾釛U菌液基細胞學(xué)涂片法檢測是開展結(jié)核病控制項目符合成本效益原則的一種細菌學(xué)試驗技術(shù)，具有可靠、快速等優(yōu)勢。本文結(jié)果顯示，羅氏培養(yǎng)法診斷為抗酸桿菌陽性64例，為此隨機痰、晨痰的抗酸桿菌液基細胞學(xué)涂片法檢測敏感性與特異性分別為100.0%、100.0%和81.3%、98.4%；晨痰的抗酸桿菌液基細胞學(xué)涂片法檢測敏感性與隨機痰對比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，而檢測特異性高于隨機痰(P<0.05)，說明晨痰在檢測抗酸桿菌中具有更高的特異性。分析可知：晨痰在分泌過程中具有均勻性和不間斷性，從而可提高檢測的陽性率。同時很多隨機痰的采樣方法不適宜，在分布中多為水痰，標本質(zhì)量比較差，在操作中有一定的誤差。且液基細胞學(xué)涂片法在檢測中需要比較高的生物安全性，隨機痰的采樣也有一定的生物安全危險，為此在檢測中需要及時保障檢測人員的安全[14]。不過本研究存在一定不足，未納入其他更多的方法進行對比分析，調(diào)查人數(shù)也比較少，未納入健康人群進行探討，將在后續(xù)研究中分析。

總之，抗酸桿菌液基細胞學(xué)涂片法檢測結(jié)核病的檢測時間比較短，同時相對于隨機痰，晨痰在檢測抗酸桿菌中具有更高的檢測特異性，值得臨床借鑒。