microRNA-375在腫瘤中的研究進展

包樹明，諾布央卓，向小燕

（川北醫(yī)學院附屬醫(yī)院，四川 南充 637000）

0 引言

惡性腫瘤是目前正在攻克的醫(yī)學難題，雖然目前腫瘤的綜合治療為治愈腫瘤帶來了較好的前景，但腫瘤的發(fā)生發(fā)展、復發(fā)、放化療治療、靶向治療的藥物對人體的副作用，仍是腫瘤治療的難題與挑戰(zhàn)。miR-375在大部分腫瘤中都異常表達。同時，隨著研究的深入，許多研究顯示miR-375可能成為腫瘤靶向治療的重要新方向之一，并在腫瘤診斷、治療、預后及抗腫瘤藥物耐藥改善等方面起重要作用。

1 miR-375與肺腫瘤

肺癌是發(fā)病率和死亡率增長最快，對人群健康和生命威脅最大的惡性腫瘤之一，因此探索其分子機制，揭示其致癌機制，發(fā)現(xiàn)新的治療靶標，是目前急需要去做的。[1]研究發(fā)現(xiàn)miR-375在肺腺癌和小細胞癌中顯著上調，在肺鱗癌中表達下調。同時，Wong等[2]發(fā)現(xiàn)miR-375在所有肺NENs（神經(jīng)內分泌腫瘤）中過表達，并且miR-375在肺類癌(TC和AC)中的表達比例明顯低于肺NENs。另外，耿僡臨等[3]發(fā)現(xiàn)低級神經(jīng)內分泌肺腫瘤樣本中的miR-375水平高于非神經(jīng)內分泌肺腫瘤，但miR-375不能區(qū)分不同類型的神經(jīng)內分泌肺腫瘤。Hippo-YAP通路是腫瘤研究中的常見通路，Yang等[4]發(fā)現(xiàn)在肺NENs中， miR-375/YAP軸是肺類癌細胞中神經(jīng)內分泌分化和腫瘤發(fā)生的關鍵介質，在敲除腫瘤細胞中miR-375的表達后，YAP（Yes相關蛋白）表達上調，腫瘤細胞神經(jīng)內分泌分化降低，細胞增殖明顯受到抑制。長鏈非編碼RNAMLK7是促進非小細胞肺癌和卵巢癌侵襲和遷移的關鍵因子[5]，MLK7-AS1是相對于MLK7的反義方向，與致癌基因具有相似作用，Jia等的研究中miR-375在肺小細胞癌中上調，確定了YWHAZ為miR-375的靶基因，MLK7-AS1能與miR-375結合上調YWHAZ的表達，同時實驗中驗證了miR-375能抑制癌細胞的侵襲和遷移，在癌細胞中 可能存在MLK7-AS1/miR-375/YWHAZ反饋系統(tǒng)影響腫瘤細胞的增殖和侵襲。此外，在非小細胞肺癌治療（NSCLC）中，放療耐受是一個常見問題，Jin等[6]發(fā)現(xiàn)miR-375可以通過miR-375/SPIN1軸增強NSCLC對放療的敏感性，有助于NSCLC放療耐受的改善。在肺癌預后研究中，Ming等[7]通過對小細胞肺癌化療誘導后的患者血清miR-375進行測定，發(fā)現(xiàn)有效化療后血清miR-375水平降低。綜上，miR-375通過靶向miR-375/YPA軸為肺類癌的治療提供了新思路，同時miR-375也可作為肺小細胞癌化療后預后評估指標。MLK7-AS1/miR-375/YWHAZ可能形成了一個相互調節(jié)的反饋系統(tǒng)，在小細胞肺癌侵襲遷移中的關鍵作用，如證實這一反饋系統(tǒng)的存在及功能，也可為小細胞肺癌的治療提供新途徑。

2 miR-375與腸道腫瘤

2.1 miR-375與胃癌

胃癌（GC）是起源于胃黏膜上皮的惡性腫瘤，在我國高居消化系統(tǒng)腫瘤第二位，惡性成都高或晚期胃癌治療措施有限，因此探索新的治療靶點可能給胃癌治療帶來新的治療策略。Lee等[8]發(fā)現(xiàn)miR-375在胃癌細胞中顯著下調，與正常胃癌組織相比下調了14.2倍，進一步的研究中，過表達的miR-375可以靶向Circ-SERPINE（調節(jié)miR-375/YWHAZ的新型增殖性啟動子）降低YWHAZ表達顯著抑制胃癌細胞的增殖。此外，[9]李鳳山等發(fā)現(xiàn)miR-375能直接靶向JAK2抑制胃癌增殖、遷移和侵襲，并在在胃癌 SGC-7901細胞中驗證了這一結果。有研究認為[10]，miR-375能通過調控自噬介導AKT/mTOR信號通路、YAP1-TEAD4-CTGF軸介導的Hippo通路（YAP1、TEAD4和CTGF）抑制腫瘤的生長，還發(fā)現(xiàn)miR-375的低表達也與胃癌患者的較短生存期相關?？傊?，miR-375有可能成為治療胃癌的新靶點，也可能成為評估胃癌患者預后的生物標志物，同時也支持直接靶向Circ-SERPINE2、JAK2，AKT/mTOR通路、Hippo通路抑制胃癌的增殖、侵襲、遷移。

2.2 miR-375與肝癌

肝癌（HCC）是我國高發(fā)、惡性程度高、危害極大的惡性的腫瘤。有研究結果顯示，[11]miR-375在肝癌組織中呈低表達，miR-375在HCC中的表達水平高低與肝癌腫瘤直徑有密切的聯(lián)系。近期Wang等[12]的研究中發(fā)現(xiàn)miR-375可以直接靶向HIF1α、rbB2基因降低HCC細胞的侵襲能力。此外，王濤等[13]發(fā)現(xiàn)miR-375能直接靶向血小板源性生長因子（PDGFC）而抑制PDGFC基因表達，進而抑制肝癌新生血管生成，產(chǎn)生抑癌作用。Juan等[14]確定了HCC中(ASH1)-miR-375-YWHAZ信號軸的存在和功能，ASH1上調miR-375的表達，過表達的miR-375直接抑制YWHAZ的表達，使肝癌細胞增殖、侵襲、遷移明顯抑制，并在進一步的裸鼠模型中驗證了這一結果。Xue等[15]的研究中，將miR-375與納米粒子結合成AuNP-miR-375納米顆粒并遞送到肝癌細胞中，表達出了顯著的抑癌效應。Zhao等[16]發(fā)現(xiàn)長鏈非編碼RNA轉移相關肺腺癌轉錄因子1 (MalaT1)參與了肝癌的形成和轉移，進一步實驗發(fā)現(xiàn)，MalaT1能夠抑制miR-375的表達，上調YAP1表達，從而促進肝癌增殖和轉移。另外，F(xiàn)an等和Zhao等[17-18]將miR-375與多柔比星（DOX）納米粒子結合遞送到肝癌細胞內后發(fā)現(xiàn)miR-375能夠明顯加速肝癌細胞凋亡并阻斷肝癌細胞G2/M期，研究中證實miR-375能大大改善HCC細胞對DOX的耐藥性。因此，miR-375通過靶向HIF1α、rbB2、PDGFC、(ASH1)-miR-375-YWHAZ可能是治療肝癌的潛在治療方法，同時將miR-375與納米粒子結合的模式開發(fā)抗腫瘤藥物或將成為肝癌治療改善化療藥物耐藥的新的重要的探索方向。

2.3 miR-375與結直腸癌

結腸直腸癌（CCa）胃腸道中常見的惡性腫瘤，其發(fā)病率和病死率在消化系統(tǒng)惡性腫瘤中僅次于胃癌和原發(fā)性肝癌，因此找尋新的治療靶點和靶向藥物十分重要。Salem等[19]發(fā)現(xiàn)miR-375在結直腸癌中表達顯著下調，作者進一步證實miR-375是通過靶向凋亡介導基因MTDH、MAP3K1、PDK1、BCL-XL和BAX誘導結直腸癌細胞凋亡，從而抑制腫瘤細胞增殖。Alam等[20]發(fā)現(xiàn)miR-375能直接靶向結締組織生長因子(CTGF)，下調人結腸直腸細胞和組織中的EGFR信號通路的表達水平，進而抑制細胞增殖和遷移。此外，結直腸癌綜合治療中，新輔助化療和術后化療，腫瘤對化療藥物的耐藥是一個難題。在Xu等[21]的研究中發(fā)現(xiàn)miR-375能夠逆轉結直腸癌對5-氟尿嘧啶（5FU）的耐藥性，miR-375可以通過靶向YES相關蛋白YAP1，下調YAP1表達，導致Hippo-YAP1通路下游基因CTGF、細胞周期蛋白D1和BIRC5(生存素)表達減少，從而提高了癌細胞對5FU的化療敏感性。同時，Xu等[22]將miR-375與5-FU/NPs（納米粒子）聯(lián)合轉運到結直腸癌細胞后發(fā)現(xiàn)直腸癌細胞的增殖、侵襲和遷移受到的抑制遠遠大于對照組，從側面印證了miR-375能增加結直腸癌對5-FU的敏感性。綜合以上內容，miR-375不僅可以靶向凋亡介導基因、YAP1和CTGF抑制結直腸癌細胞的增殖、侵襲、轉移，并且其能增強5-氟尿嘧啶的化療敏感性，轉化耐藥性，同時其也可能成為早期診斷結直腸癌的潛在生物標記物。

3 miR-375與女性生殖系統(tǒng)腫瘤

3.1 miR-375與宮頸癌

宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤，雖因目前HPV疫苗的普及，其以后的發(fā)病率會降低，但如能從其發(fā)病機制上尋找到新的有效治療措施，仍能使宮頸癌患者受益。Stich等[23]發(fā)現(xiàn)miR-375不僅在宮頸癌（CCa）中表達顯著下調，并且miR-375能靶向抑制CCa細胞中E6和E7癌基因的表達，進而導致包括p53和p21在內的靶蛋白水平的增加，降低了宮頸癌細胞增殖和集落。進一步的研究報道，miR-375能通過上調AEG-1、JAK2的表達[24-25]，抑制宮頸癌細胞增殖、遷移和侵襲。同時，為進一步研究miR-375與CCa的關系，Wang等將CCa細胞與miR-375激動劑/抑制劑分別負載于脂質體納米粒后分組轉染培養(yǎng)，過表達miR-375組受到顯著抑制，同時發(fā)現(xiàn)與Tgf-β、Smad7、P-Smad2和FZD4的表達顯著低于對照組和NC組[26]。此外在抗腫瘤藥物研究方面，Zhang等[27]發(fā)現(xiàn)毛蕊異黃酮能上調miR-375的表達，使CCa細胞的侵襲、遷移、增殖受到明顯抑制。從以上研究可以看出，miR-375在宮頸癌中表現(xiàn)出顯著的抑癌作用，同時能使miR-375在CCa細胞中過表達的方法或藥物有望成為CCa治療的有效途徑。

3.2 miR-375與卵巢癌

卵巢癌是死亡率高居婦科癌癥首位，是嚴重威脅婦女健康的最大疾患，探尋新的治療策略至關重要。目前的研究支持miR-375在卵巢癌（OCa）細胞表達上調[28]。進一步的研究中miR-375不僅在OCa組織中上調[29-30]，在患者血清中也被上調，雖然作者未進行體內體外實驗，但初步討論了miR-375可能通過與LINC00662（一種長鏈非編碼RNA）結合，降低下游蛋白HIF-1 alpha的表達，從而抑制OCa細胞的糖酵解過程，達到抑制OCa增殖的目的。進一步的實驗中，Yang等[31]在體內和體外實驗中證實了miR-375可以直接與MLK7-AS1結合并下調MLK7-AS1的表達，促進卵巢癌細胞的增殖和轉移，但上調MLK7-AS1的表達抑制了卵巢癌細胞的增殖、轉移，進一步實驗證實其機制為，卵巢癌細胞中上調的miR-375與MLK7-AS1結合，下調MLK7-AS1的表達，導致YAP1的表達上調，進而促進上皮間質轉化(EMT)過程，從而促進OCa的增殖和轉移。此外，在抗OCa藥物反面，De等[32]的一項研究研究發(fā)現(xiàn)miR-375能被AmLa提取物(AE)直接靶向，使其表達下調，EMT過程受到抑制，從而抑制卵巢癌細胞的增殖、分化、遷徙。綜上，miR-375可以靶向LINC00662、AE靶向miR-375作為治療OCa的潛在治療方法，同時也為腫瘤中miR-375/ MLK7-AS1/YAP1反饋調節(jié)系統(tǒng)的存在提供進一步的證據(jù)支持。

3.3 miR-375與前列腺癌

前列腺癌（PCa）是原發(fā)于前列腺的一種惡性腫瘤，是男性泌尿生殖系常見的惡性腫瘤。[33]有研究發(fā)現(xiàn)前列腺癌細胞中miR-375表達水平顯著上升，較前對照組增加了2.27倍。有研究[34]指出miR-375在PCa中起促癌作用，腫瘤抑制基因CBX7是miR-375的靶標，miR-375可直接靶向CBX7促進PCa細胞增殖遷移、侵襲，作者還發(fā)現(xiàn)CBX8蛋白是miR-375下游效應蛋白，miR-375可能通過抑制CBX7，間接上調CBX8蛋白的表達，進而激活上皮-間質轉化（EMT）和Wnt/β-連環(huán)蛋白信號通路，導致致癌信號的激活和腫瘤進展。相反，在Gong等[35]的研究中，CBX7與siRNA-circGOLPH3結合顯著提高了PCa細胞的增殖能力和生存能力，并減少了細胞凋亡。綜上，miR-375靶向CBX7是促進前列腺癌侵襲、發(fā)展的重要因素之一，同時CBX7在PCa研究中出現(xiàn)抑癌和促癌的特性，如對其展開進一步研究，可能成為治療前列腺癌的新方向。

3.4 miR-375與食管癌

食管癌是常見的消化道腫瘤，我國是世界上食管癌高發(fā)地區(qū)之一，因食管位置的特殊性，一旦確診食管癌，無論是手術或化學治療，均給患者日常生活和身心帶來巨大影響，因此探索新的治療方案是十分迫切的。Liu等[36]的實驗發(fā)現(xiàn)食管鱗狀細胞癌（ESCC）中miR-375表達水平顯著降低，并且還指出miR-375的低表達與有與患者的腫瘤有無淋巴結轉移、分化程度和TNM分期密切相關[37]。有研究發(fā)現(xiàn)miR-375可以靶向SP1顯著抑制食管癌細胞的增殖，同時作者發(fā)現(xiàn)miR-375高表達的ESCC患者比miR-375低表達的ESCC患者有更好的生存率和預后[38]。有研究還證實特異黏附素（MTDH）是miR-375的靶點，其機制為過表達的miR-375下調MTDH、細胞周期蛋白D1和血管內皮生長因子的表達，從而抑制ESCC腫瘤EMT過程，進而抑制ESCC的遷移和侵襲。此外，He等[39]的研究中ENAH被確定為miR-375的靶點，且人間充質干細胞系外分泌的miR-375在體內體外實驗中都抑制ESCC細胞的增殖、侵襲、遷移和腫瘤球形成。上述研究證明了miR-375在食管癌中起抑癌作用，靶向miR-375/SP1、miR-375/MTDH、miR-375/ENAH有望成為食管癌治療的新途徑。同時，有研究表明miR-375聯(lián)合HCCR、C-myc和MDM2、miR-21、miR-223能夠有效地區(qū)分食管鱗狀細胞癌患者和正常人[40]。另外，有分析表明[41-42]，miR-375可以作為ESCC病患者的非侵入性診斷及預后的生物標志物之一。

3.5 miR-375與乳腺癌

乳腺癌是中老年女性常見腫瘤之一，目前在青年女性中發(fā)病率逐漸上升，因此研究其發(fā)病機制及探索新的治療靶標尤為重要[43]。有研究報道m(xù)iR-375在乳腺癌組織中表達顯著下降[44]。miR-375還可以直接靶向PAX6，通過下調PAX6的蛋白表達，顯著抑制乳腺癌細胞的活性[45]。Tang等發(fā)現(xiàn)miR-375對三陰性乳腺癌（TNBC）的抑制作用是通過直接與F4A和KIF4A結合來實現(xiàn)的，過表達的miR-375通過circKIF4A-miR-375-KIF4A軸競爭內源性RNA(ceRNA)，從而抑制TNBC的增殖和遷移，同時證實低表達的miR-375與circKIF4A的過表達，大大降低了TNBC患者的生存率[46]。Liu等還發(fā)現(xiàn)ATG7和LC3-II是miR-375的下游效應蛋白，過表達的miR-375沉默ATG7和LC3-II的表達，導致乳腺癌細胞的局部自噬降低，進而調控乳腺癌細胞的增殖和浸潤。因此，miR-375可以作為評估乳腺癌預后生物標志物和治療靶點，也支持靶向circKIF4A-miR-375-KIF4A軸、miR-375/PAX6軸作為乳腺癌潛在有效的靶向治療研究點。

4 結語和展望

本文對miR-375在腫瘤性疾病中的作用及相關機制進行了概括。綜合本文的研究，miR-375在肺癌、胃癌、結直腸癌、肝癌、宮頸癌、食管癌、乳腺癌、甲狀腺癌中起抑癌作用，在卵巢癌、前列腺癌、骨肉瘤中起促癌作用。雖然miR-375在上述腫瘤中起不同作用，但我們也發(fā)現(xiàn)了其在不同腫瘤中有相同的靶點和通道，如JAK2、miR-375/YAP軸、MLK7-AS1/miR-375/YWHAZ等，也發(fā)現(xiàn)miR-375在前列腺癌、食管癌、卵巢癌、甲狀腺乳頭狀瘤中最終都可通過影響EMT過程抑制或促進腫瘤增殖和凋亡。同時，miR-375與納米粒子相結合的方式在實驗取得了理想的腫瘤抑制效應及改善化療耐藥效果。并且因miR-375具有高度保守性，其在臨床中可作為腫瘤診斷、預測預后的標志物也都得到進一步的實驗支持。綜上，miR-375可以為腫瘤性疾病的診斷、治療、預后帶來新的探索方向。但miR-375與其相關的靶基因和通路構成了一個精細且龐大的調控網(wǎng)絡，其中還有很多空白需要我們去探索補充。