腫瘤病理診斷中免疫組化技術(shù)和常規(guī)技術(shù)的效果觀察

劉鐘歆，司遠(yuǎn)，黃朝康

（邢臺市人民醫(yī)院，河北 邢臺 054001）

0 引言

隨著現(xiàn)代人生活節(jié)奏加快、作息不規(guī)律、飲食不健康及生存壓力大，使得各種疾病的發(fā)生率逐年提高，尤其是腫瘤，其在我國乃至世界范圍內(nèi)發(fā)病率不斷提升，嚴(yán)重威脅居民生命安全，成為人類主要死亡原因之一[1]。由于多數(shù)腫瘤患者早期臨床癥狀缺乏顯著特異性，常在體檢或發(fā)展到中晚期時(shí)確診，因此錯(cuò)過手術(shù)治療的最佳時(shí)期，使得患者5年生存率降低[2]。因此，盡早發(fā)現(xiàn)疾病并盡早做出準(zhǔn)確診斷及治療，對控制患者病情，改善其預(yù)后有著顯著意義。而如何提高腫瘤患者早期診斷符合率是檢驗(yàn)科醫(yī)學(xué)人員需要重視的問題。病理診斷符合率高，被臨床稱為診斷腫瘤的“金標(biāo)準(zhǔn)”，其中以活檢穿刺為主的常規(guī)技術(shù)，患者承受較大痛苦，因此依從性較差[3]。隨著臨床研究的不斷深入，診斷水平及診斷技術(shù)在不斷提升，近十年來免疫組化技術(shù)發(fā)展較快，在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中發(fā)揮重要作用，已成為病理醫(yī)生常規(guī)工作中不可或缺的一部分，對疾病，尤其是為臨床常見腫瘤的鑒別診斷提供支持[4]，給其后續(xù)治療及預(yù)后提供重要依據(jù)[5]。鑒于此，本次研究選取本院就診的78例腫瘤患者為對象，均采用兩種不同診斷技術(shù)，對比分析其診斷效能，具體為：

1 一般資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年10月至2021年9月到本院就診的78例腫瘤患者為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①具有完整的臨床資料且可追溯；②對于診斷方案知情，積極配合；③所選病例經(jīng)過倫理委員會批準(zhǔn)，患者均簽署知情同意書。排除條件：①預(yù)計(jì)生存期不足3個(gè)月；②意識模糊，無法配合相關(guān)診療工作；③合并其他器質(zhì)性疾病。性別之比為41:37（男：女）；年齡最小/年齡最大20/81歲，平均（55.34±4.12）歲；腫瘤類型：肝癌22例，肺癌25例，胃癌16例，大腸癌8例，乳腺癌5例，其他2例。

1.2 診斷方法

常規(guī)技術(shù)：對患者實(shí)施穿刺活檢，并做好檢查前的宣教工作，結(jié)合患者影像學(xué)檢查結(jié)果，判斷腫瘤位置、大小及類型，并在超聲輔助下對腫瘤加以診斷，將其與正常組織進(jìn)行對比分析。

免疫組化技術(shù)：通過手術(shù)獲取患者腫瘤樣本后，采用甲醛固定液浸泡樣本2h后，將其置于透明液中1h，然后再置入脫水液中1h，浸蠟液中1h，然后取出石蠟對埋，將樣本切成厚度適宜的片狀塊大小，對其實(shí)施免疫組染色處理。采用3%過氧化氫，溫度調(diào)節(jié)為37℃，浸泡100min，然后采用蒸餾水清洗3min，最后置于110℃的高壓鍋中進(jìn)行修復(fù)處理，采用PBS清洗后，加入U(xiǎn)ltrasen Sitive TMSP試劑，完成孵育環(huán)節(jié)，通過DBA顯色后，再將樣本封固。根據(jù)染色情況判斷診斷結(jié)果，如其為棕黃色，則表示診斷結(jié)果為陽性，否則為陰性。

1.3 觀察指標(biāo)

①兩種檢查方式的診斷符合率、敏感度、特異性比較。

②對比兩種檢查方式實(shí)施后患者的信任感、心理顧慮及生理問題評分情況；采用我院自制的調(diào)查問卷表，指導(dǎo)患者根據(jù)自身感受如實(shí)填下，滿分百分制，評分越高患者信任度越高，心理顧慮越少，生理問題越少。

③采用我科自制的滿意度調(diào)查表，對患者的滿意度情況開展調(diào)查，如對標(biāo)本采集過程的滿意度、出診斷結(jié)果時(shí)長的滿意度及病理報(bào)告準(zhǔn)確性的滿意度，滿分100 分， 達(dá)到90 分以上則表示非常滿意，70～90分則表示滿意，70分以下則表示不滿意。總滿意度為非常滿意+滿意人數(shù)/總?cè)藬?shù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

用SPSS 20.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)檢測，卡方檢驗(yàn)計(jì)數(shù)資料間的數(shù)據(jù)差異，t值檢驗(yàn)計(jì)量資料間的差異，根據(jù)最終得到P值的范圍判斷是否具有顯著性差異，P值區(qū)間在0.05以下則表示差異明顯。

2 結(jié)果

2.1 兩種檢查方式的診斷符合率、敏感度、特異性比較

78例腫瘤患者，實(shí)際診斷為陽性的患者70例，陰性10例，免疫組化技術(shù)診斷符合率、敏感度分別為89.74%（70/78）及95.71%（67/70），顯著高于常規(guī)技術(shù)的71.79%（56/78）及74.29%（52/70）（P＜0.05），免疫組化技術(shù)的特異度為30.00%（3/10），常規(guī)技術(shù)的特異度為40.00%（4/10），組間對比無顯著差異（P＞0.05），見表1。

表1 兩種檢查方式診斷符合率與實(shí)際診斷結(jié)果比較（%）

2.2 對比兩種檢查方式實(shí)施后患者的信任感、心理顧慮及生理問題評分情況

免疫組化技術(shù)組的信任感評分顯著高于常規(guī)技術(shù)組，心理顧慮及生理問題評分顯著低于常規(guī)技術(shù)組（P＜0.05），詳見表2。

表2 對比兩種檢查方式實(shí)施后患者的信任感、心理顧慮及生理問題評分情況（分）

2.3 對比兩種檢查方式實(shí)施后患者的滿意度調(diào)查情況

免疫組化技術(shù)組滿意度96.15%顯著比常規(guī)技術(shù)組的84.62%高（P＜0.05），詳見表3。

表3 對比兩種檢查方式實(shí)施后患者的滿意度調(diào)查情況（%）

3 討論

隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步，各種診斷技術(shù)在臨床得到廣泛使用，雖然臨床診斷腫瘤的方式較多，但病理診斷結(jié)果較為準(zhǔn)確，是目前主要的診斷方式，用于各種腫瘤的診斷中，而免疫組化技術(shù)作為病理診斷中一種新穎的技術(shù)，利用已知的特異性抗體或抗原特異性結(jié)合的特點(diǎn)，通過化學(xué)反應(yīng)，使得結(jié)合后的特異性抗體上的顯示劑顯示出顏色，最后通過顏色變化對腫瘤加以診斷，并通過分析腫瘤細(xì)胞結(jié)構(gòu)的成分及性質(zhì)，為疾病的診斷提供科學(xué)依據(jù)[6-7]。

通過對病理組織切片加以觀察，再根據(jù)抗體條件及實(shí)驗(yàn)室要求，篩選出符合條件的抗體，以滿足診斷要求[8]。對腫瘤進(jìn)行活檢前，需要提前對其進(jìn)行分期，了解其性質(zhì)及治療方案，開展術(shù)前計(jì)劃，以保證選取的部位準(zhǔn)確，從而提高活檢正確率。臨床研究發(fā)現(xiàn)，免疫組化技術(shù)具有較高的診斷符合率[9]，本次研究結(jié)果證實(shí)這一點(diǎn)，免疫組化技術(shù)診斷符合率及敏感度均顯著高于常規(guī)技術(shù)（P＜0.05）?？乖c抗體會在人體內(nèi)異常結(jié)合，采用免疫組化技術(shù)，對抗體情況加以分析，即可了解組織中抗原數(shù)量的具體分布情況，便于準(zhǔn)確定位抗原，指導(dǎo)臨床治療及預(yù)后[10]。

該種診斷技術(shù)使用的標(biāo)本以組織標(biāo)本及細(xì)胞標(biāo)本為主，其中組織標(biāo)本制作過程中常采用石蠟切片法，其能較好保存組織形態(tài)，便于后期觀察標(biāo)本的染色情況，同時(shí)石蠟切片的過程中，采用甲醛固定劑有利于組織內(nèi)抗原產(chǎn)生，可修復(fù)組織切片，使得診斷準(zhǔn)確率得以提高[11]。研究發(fā)現(xiàn)免疫組化技術(shù)不會對患者產(chǎn)生傷害，可減輕其心理壓力，進(jìn)而提高患者治療依從性[12]。本次研究結(jié)果顯示，免疫組化技術(shù)組的信任感評分顯著高于常規(guī)技術(shù)組，心理顧慮及生理問題評分顯著低于常規(guī)技術(shù)組，且滿意度高于常規(guī)技術(shù)組，證實(shí)以上說法，可見免疫組化技術(shù)可減輕患者痛苦，提高其對檢測人員的信任度，拉近醫(yī)患關(guān)系，提高患者診斷及治療的依從性。然而隨著免疫組化標(biāo)記物的增多及廣泛利用，原為特異的標(biāo)記物并非絕對特異，出現(xiàn)交叉反應(yīng)及異常表法的情況不斷增多[13]，因此免疫組化標(biāo)記結(jié)果的意義不能絕對化，需要采用光鏡觀察組織形態(tài)的同時(shí)，合理采用免疫組化技術(shù)，審慎判斷其標(biāo)記的意義。

筆者總結(jié)經(jīng)驗(yàn)后總結(jié)出提高腫瘤診斷結(jié)果準(zhǔn)確度的方法，認(rèn)為實(shí)施免疫組化技術(shù)檢測的過程中需要注意以下幾點(diǎn)：①固定采集的標(biāo)本可選擇10%的重型甲醛固定液，其固定效果良好，且固定時(shí)間久，可在3個(gè)月內(nèi)對患者加以診斷，不會影響其診斷陽性率；②烤片時(shí)需要嚴(yán)格控制溫度，在恒溫箱中進(jìn)行，溫度保持在60℃～68℃為宜，不可使用過高溫度烤片，以防影響診斷結(jié)果；③嚴(yán)格把握抗原修復(fù)的時(shí)間，一般時(shí)間在8min左右，并將切片切開，待其自然冷卻后再進(jìn)行染色；染色時(shí)雖需要反復(fù)進(jìn)行，但染色不可過深，以防影響診斷結(jié)果。需要注意的是，由于個(gè)體之間的差異，不同類型疾病患者，其組織標(biāo)本的來源存在差異，導(dǎo)致形成標(biāo)本的抗原含量存在差異[14]，因此，標(biāo)本之間的顯色時(shí)間存在差異，操作人員需要多注意。染色過程中，切片保持濕潤為宜，且保持孵育盒的平整，使得抗體液體分布均勻，盡可能減少對診斷結(jié)果的干擾。

綜上所述，腫瘤病理診斷中采用免疫組化技術(shù)診斷陽性率高，還可提升患者滿意度及信任度，并為后期治療方案的開展提供可靠依據(jù)。