降鈣素原在新生兒血流感染細菌鑒定中的應(yīng)用價值

褚福第 郭忠燕 馬亞軍

濟寧醫(yī)學(xué)院附屬滕州市中心人民醫(yī)院檢驗科，滕州 277599

新生兒血流感染是臨床常見的一種全身性感染，主要是由病原菌侵入患兒血液系統(tǒng)造成大量毒素產(chǎn)生而引發(fā)的全身炎性反應(yīng)［1］。由于新生兒免疫系統(tǒng)發(fā)育還未成熟，屏障功能和抵抗力相對較差，存在較高感染風(fēng)險，一旦發(fā)生感染較易播散，可發(fā)展為敗血癥，嚴重者可危及生命。血培養(yǎng)細菌鑒定是目前診斷血流感染的“金標準”，但存在新生兒取血量難以達到檢測要求、易污染、培養(yǎng)周期長等缺點，不利于新生兒血流感染的早期診治［2］。PCT、CRP 和 WBC 是輔助臨床診斷的常用感染性指標。PCT 在臨床上可用于輔助監(jiān)測新生兒早期血流感染，進而對疾病嚴重程度加以評估，且具有較高的準確度，整體應(yīng)用價值較高［3］。本研究嘗試分析血清PCT 水平在新生兒不同細菌血流感染的區(qū)別并探討其在細菌鑒定中的應(yīng)用價值，為臨床診斷和治療提供早期依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

資料與方法

1、一般資料

本研究經(jīng)濟寧醫(yī)學(xué)院附屬滕州市中心人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審批通過，選取2019年1月至2021年12月濟寧醫(yī)學(xué)院附屬滕州市中心人民醫(yī)院收治的經(jīng)血培養(yǎng)確診為血流感染的新生兒198 例作為研究對象，進行回顧性分析，根據(jù)血培養(yǎng)結(jié)果分為革蘭陰性菌組（86 例）和革蘭陽性菌組（112 例）。同時選取90 例血培養(yǎng)陰性新生兒為對照組。血流感染組男 103 例，女 95 例；日齡（15.15±2.63）d，體質(zhì)量（3.2±0.8）kg。對照組男47例，女43例；日齡（15.65±2.78）d，體質(zhì)量（3.3±0.7）kg。兩組新生兒一般資料比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05），具有可比性。納入標準：（1）符合人民衛(wèi)生出版社《實用新生兒學(xué)（第4 版）》［4］中新生兒血流感染診斷標準；（2）出生體質(zhì)量2 000～4 000 g，出生天數(shù)為0～28 d；（3）資料數(shù)據(jù)完整；（4）患兒家屬及其親屬知情同意并簽署知情同意書。排除標準：（1）抗菌藥物使用史；（2）早期顱內(nèi)出血或嚴重產(chǎn)傷；（3）考慮合并血液系統(tǒng)疾病者；（4）嚴重窒息或懷疑存在嚴重遺傳性疾病。

2、方法

（1）PCT 檢測：采集新生兒空腹靜脈血3 ml，以 3 000 r/min 轉(zhuǎn)速（離心半徑10 cm）離心6 min，分離血清，使用羅氏Cobas e602 全自動免疫分析儀進行檢測，PCT正常范圍為0～0.05 μg/L；CRP 和WBC 檢測：使用抗凝管采集新生兒靜脈血2 ml，使用全自動血液細胞分析儀BC-5180CRP 進行檢測，CRP 正常范圍為 0～10 mg/L，WBC正常范圍為（4～10）×109/L。超過正常范圍上限判為陽性。（2）細菌培養(yǎng)及鑒定：嚴格執(zhí)行無菌操作，在不同部位采取血培養(yǎng) 2 套，1 套 2 瓶（需氧和厭氧各 1 瓶），每瓶 3～5 ml。使用法國梅里埃微生物鑒定藥敏分析儀對分離后的單個菌落進行鑒定。以上嚴格遵照臨床檢驗操作規(guī)程。

3、統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 19.0 統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，符合正態(tài)分布的計量資料采用均數(shù)±標準差（）表示，多組間比較采用F檢驗；計數(shù)資料以例（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

1、不同新生兒血清PCT、CRP、WBC水平比較

革蘭陰性菌組和革蘭陽性菌組PCT、CRP、WBC 水平均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）；革蘭陰性菌組PCT 水平高于革蘭陽性菌組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 不同新生兒血清PCT、CRP、WBC水平比較（）

表1 不同新生兒血清PCT、CRP、WBC水平比較（）

注：革蘭陰性菌組為革蘭陰性菌感染的血流感染新生兒，革蘭陽性菌組為革蘭陽性菌感染的血流感染新生兒，對照組為血培養(yǎng)陰性新生兒；PCT 為降鈣素原，CRP 為 C 反應(yīng)蛋白，WBC 白細胞計數(shù)；與對照組比較，aP＜0.05；與革蘭陽性菌組比較，bP＜0.05

WBC（×109/L）17.23±3.43a 15.53±3.12a 8.54±2.37 3.862 0.003組別革蘭陰性菌組革蘭陽性菌組對照組F值P值例數(shù)86 112 90 PCT（μg/L）7.53±1.93ab 2.91±0.83a 0.07±0.02 2.323 0.032 CRP（mg/L）37.32±16.61a 30.73±15.94a 9.32±3.35 5.063＜0.001

2、PCT、CRP、WBC 檢測診斷新生兒血流感染的價值比較

PCT 檢測診斷新生兒血流感染的靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值及約登指數(shù)均高于CRP 和WBC，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），見表2。

表2 PCT、CRP、WBC檢測診斷新生兒血流感染的價值比較（288例）

3、血培養(yǎng)檢出菌構(gòu)成比及血清PCT水平比較

血培養(yǎng)檢出菌以大腸埃希菌、表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯菌為主，分別占41.86%（36/86）、38.39%（43/112）、27.91%（24/86）；PCT 水平最高為肺炎克雷伯菌感染新生兒［（11.21±3.32）μg/L］，其次為大腸埃希菌感染新生兒［（9.32±3.43）μg/L］。見表3。

表3 198 例新生兒血流感染血培養(yǎng)檢出菌構(gòu)成比及血清PCT 水平比較

4、革蘭陰性菌組與革蘭陽性菌組在各PCT 水平的分布比較

PCT ＜0.5 μg/L 時，革蘭陽性菌組占比明顯高于革蘭陰性菌組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；0.5 μg/L≤PCT＜2.0 μg/L時，兩組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；PCT≥2.0 μg/L 時，革蘭陰性菌組占比均明顯高于革蘭陽性菌組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）。見表4。

表4 革蘭陰性菌組與革蘭陽性菌組血流感染新生兒PCT水平分布比較[例（%）]

討 論

相關(guān)研究指出，醫(yī)院血流感染發(fā)生率為0.7%左右，每千住院日血流感染率為0.4%左右，主要包括革蘭陰性菌以及革蘭陽性菌2 種病原菌［5］。新生兒由于免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育成熟，其對于病原菌的防御和清除能力相對較弱，更易遭受細菌侵襲而發(fā)生感染［6］。在我國，血流感染導(dǎo)致的新生兒病死率達到15%左右，其中，早產(chǎn)新生兒血流感染病死率要遠遠高于平均水平［7］。血培養(yǎng)作為診斷血流感染、鑒定細菌種類的實驗室金標準，但耗時長［8］。

PCT 是近年來新發(fā)現(xiàn)的感染標志物，研究顯示，在正常生理狀況下，PCT 在血清中的濃度較低，一般由甲狀腺細胞組合并分泌，血液里面PCT 半衰期為24～29 h，當發(fā)生細菌感染時，PCT 會釋放進入血液，導(dǎo)致血清PCT 水平迅速升高，常用于細菌感染性疾病的診斷［9-11］。文獻報道，PCT 在新生兒感染4 h 明顯升高，6～8 h 達到高峰，可用于早期感染的輔助診斷［12］。大量研究和臨床經(jīng)驗表明，WBC 影響因素較多不能客觀反映感染的真實情況，CRP 靈敏度高但特異度不夠好且在新生兒血流感染有滯后性出現(xiàn)［13］。本研究結(jié)果顯示，血培養(yǎng)陽性患兒（革蘭陰性菌組和革蘭陽性菌組）PCT、CRP、WBC 水平均高于血培養(yǎng)陰性新生兒（對照組），但只有PCT 水平革蘭陰性菌組高于革蘭陽性菌組，這說明PCT 在輔助診斷新生兒血流感染中可以初步鑒別細菌類型，相對于CRP、WBC 更有優(yōu)勢。已有研究證實，PCT 可以作為區(qū)別革蘭陰性菌與革蘭陽性菌感染的有效工具［14］。革蘭陰性菌感染后PCT 水平比革蘭陽性菌更高，原因分析可能是革蘭陽性菌多以外毒素致病而革蘭陰性菌產(chǎn)生內(nèi)毒素，不同的致病因子而引起不同的反應(yīng)，內(nèi)毒素可能存在一個二次刺激導(dǎo)致PCT濃度較高［15］。

從診斷靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值及約登指數(shù)方面看，PCT 均高于CRP 和WBC，這進一步說明PCT用于診斷新生兒血流感染的價值相對于CRP 和WBC 更高一些。此外，本研究血培養(yǎng)檢出菌以大腸埃希菌、表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯菌為主，PCT 水平最高為肺炎克雷伯菌感染新生兒，其次為大腸埃希菌。王麗偉等［16］研究，在兒童血流感染中，致病菌以肺炎克雷伯菌、表皮葡萄球菌、白色假絲酵母菌最為多見，PCT 水平最高為鮑氏不動桿菌，其次為腸桿菌和大腸埃希菌。這與本研究不完全一致，可能因為不同地區(qū)致病菌有著自身的特點。

為進一步驗證PCT 在新生兒血流感染細菌鑒定中的應(yīng)用價值，將PCT 水平分為5 個層次［17］。從結(jié)果中可以看出，PCT ＜0.5 μg/L 感染革蘭陽性菌的可能性較大；0.5 μg/L≤PCT ＜2.0 μg/L 不能明確區(qū)分細菌類型；PCT ≥2.0 μg/L 時感染革蘭陰性菌的可能性較大。目前沒有文獻表明PCT 升高的幅度能夠明確區(qū)分不同類型的細菌，但是可為早期診斷及治療提供臨床參考。

綜上所述，PCT 在新生兒血流感染診斷中相對于CRP、WBC 更有優(yōu)勢，可用于初步鑒別細菌感染類型，為早期診斷和治療提供參考依據(jù)，有較高的應(yīng)用價值。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突