犬傳染性肝炎的診斷與防治

任普霞

犬 傳 染 性 肝 炎（Infectious canine hepatitis，ICH）是 由 犬1型 腺 病 毒（Canine adenovirus type 1，CAV-1）感染犬引起的一種多發(fā)性傳染病，該病具有傳染性強、發(fā)病率高、致死率高的特點，是目前對養(yǎng)犬業(yè)危害較大的疾病之一。本文系統(tǒng)的對犬傳染性肝炎的病原學、流行病學、臨床癥狀、診斷及防治措施等方面進行綜述，以期為犬傳染性肝炎的防控提供理論依據(jù)。

一、病原學

犬腺病毒在分類上屬腺病毒科，哺乳動物腺病毒屬，犬腺病毒分為1型和犬腺病毒2型（type2，CAV-2）。CAV-1屬于無囊膜病毒，引起傳染性肝炎，CAV-2引起犬傳染性支氣管炎。兩型具有共同的補體結(jié)合抗原，但其生化特征和核酸同源性不同，CAV-1核酸為線狀雙鏈DNA分子，基因組全長約為31kb左右，CAV-2基因組全長約為32.2kb左右，兩者同源性約為70%左右，基因水平僅約有56.6%的相關(guān)性。應(yīng)用血凝抑制實驗和中和實驗以及分子生物學方法可以將其加以區(qū)別。

CAV-1直 徑 約 為80nm左 右，其形態(tài)結(jié)構(gòu)特征與其他動物腺病毒相似，均呈二十面體立體對稱結(jié)構(gòu)，蛋白質(zhì)衣殼由252個殼粒組成，主要包括六鄰體、五鄰體、纖突等結(jié)構(gòu)。其中在五鄰體的纖突上有一個球狀物，球狀物表面有血凝素，在病毒感染細胞時可通過球狀物結(jié)合細胞受體。

犬腺病毒對乙醚、氯仿有抵抗力。在pH3～9條件下可以存活，最適pH6.0～8.5。在4℃可以存活270天，室溫下存活70～91天，37℃存活29天。56℃30min仍具有感染性。病犬肝、血清、尿液中的病毒，20℃可以存活3天。本病毒對碘酚和氫氧化鈉敏感，可用其進行消毒。

二、流行病學

CAV-1主要以剛離乳到一歲以內(nèi)的幼犬最為易感，常呈急性型，感染率和致死率最高。近年來隨著CAV-2疫苗的廣泛使用，CAV-1的感染比率大大降低，然而犬和不同種屬的狐貍?cè)匀淮嬖贑AV-1的高流行性以及其他的CAV-1臨床案例。1947年，Rubarth首次發(fā)現(xiàn)了犬傳染 性 肝 炎。1959年，Kapsenbrg首 次 分 離 到 了 CAV-1。1962年Ditchfield等人分離出了一株毒株，該毒株能引起感染犬的呼吸癥狀，但卻沒有出現(xiàn)肝炎的毒株，即首次發(fā)現(xiàn)了犬腺病毒2型Toronto A26/21株。用此株對犬進行免疫可以產(chǎn)生保護力抵抗CAV-1感染，而且CAV-1除了引起犬傳染性肝炎外，有時還可引起犬的呼吸癥狀，因此認為CAV-2有可能是CAV-1的變異株。有報道美國9月齡幼犬的CAV-1抗體檢出率高達80%以上，香港犬的CAV-1抗體檢出率高達75%以上。1984年發(fā)現(xiàn)美國黑熊感染了CAV-1。1994年Marinka等發(fā)現(xiàn)臥龍自然保護區(qū)的大熊貓感染CAV-1。近年來相繼在意大利和英國紅狐、韓國耳郭狐、意大利北部犬和狼、歐洲棕熊以及挪威北極熊有CAV-1感染，由此可見CAV-1傳播范圍之廣。

CAV-1主要經(jīng)消化道感染犬，感染犬通過眼鼻分泌物、糞便、尿液等污染周圍的環(huán)境，進而感染其他健康犬。除此之外，病毒還可經(jīng)胎盤傳播。人工感染可通過肌注、皮下、靜注、口服途徑使犬患病。該病傳播最主要的傳染源是病犬和康復(fù)后的帶毒犬，尤其是帶毒犬在康復(fù)180～270天內(nèi)仍可從尿液中檢出病毒。

CAV-1感染犬、狼、臭鼬、山狗等動物，其主要表現(xiàn)為肝炎癥狀，特征性的典型癥狀為“藍眼”。除此之外還可感染狐貍和黑熊，主要表現(xiàn)為腦炎癥狀。人工感染紅狐也有犬傳染性肝炎的癥狀。其中不同種屬的狐貍對CAV-1的敏感性也不一樣，銀狐比北極狐易感，北極狐比犬易感。有報道稱馬、兔子、松鼠、黑猩猩也是CAV-1的敏感動物。而CAV-2自Ditchfield等人分離出該毒株以來僅能感染犬，未有其他動物感染的報道。除此之外，CAV-1還可人工感染豚鼠，并可能激發(fā)神經(jīng)癥狀。有研究發(fā)現(xiàn)CAV-1序列發(fā)生變異，序列的變異可能導致其感染宿主的范圍擴大。

三、臨床癥狀

CAV-1感染犬按照臨床癥狀大致可分為四種類型：

（一）最急性型：常發(fā)生于新生至一歲以內(nèi)的幼犬。一般病犬出現(xiàn)劇烈腹痛，體溫突然明顯升高，排泄物帶血，后短時間內(nèi)迅速死亡。

（二）急性型：常發(fā)生于一歲以上的犬，此型感染犬可出現(xiàn)犬傳染性肝炎的典型臨床癥狀，多能耐過而康復(fù)。

（三）亞急性型（輕癥型）：臨床癥狀表現(xiàn)較輕微。可見感染犬食欲不振，精神抑郁，眼鼻有分泌物，腹瀉或排出血樣糞便，體溫稍高。

（四）隱性型（無癥狀型）：無明顯可見的臨床癥狀。

新生幼犬感染CAV-1常呈最急性型致死，對于急性感染犬，其初期癥狀為懼冷，精神沉郁，食欲降低，飲欲升高，眼鼻有分泌物，體溫可至41℃，隨著病程的延長，后出現(xiàn)心率增強，呼吸急促，乏力，嘔吐，腹瀉或排出帶血的糞便等癥狀。一般不發(fā)生神經(jīng)癥狀。該病常和其他犬病混合感染犬。感染犬發(fā)病一般可經(jīng)過這幾個階段：病毒通過口咽部進入機體首先侵入扁桃體，進而蔓延到局部淋巴結(jié)和淋巴管中增殖，病毒從淋巴導管進入血液循環(huán)導致犬的病毒血癥，后感染其他組織，使許多部位的血管內(nèi)皮細胞和肝實質(zhì)及其肝臟損傷，經(jīng)分泌物排毒。在病程的急性階段，病毒分布在病犬的全身各組織。有時在恢復(fù)期可見角膜混濁，俗稱“藍眼”。CAV-1和CAV-2在體內(nèi)的組織嗜性不同，CAV-1傾向于肝細胞和腦、腎、眼等的內(nèi)皮細胞，并引起肝炎、腎炎、腦炎和結(jié)膜炎等。而CAV-2則多傾向于呼吸道、消化道黏膜上皮細胞，并引起喉氣管炎或消化道方面的疾病，CAV-2感染犬多于上呼吸道中檢測到該病毒孕犬感染CAV-1可致使流產(chǎn)和畸胎。

四、診斷

（一）臨床診斷

“藍眼”是該病的典型臨床癥狀。病犬精神沉郁，食欲降低，飲欲升高，眼鼻有分泌物，體溫可至41℃，隨著病程的延長，后出現(xiàn)心率增強，呼吸急促，乏力，嘔吐，腹瀉或排出帶血的糞便等癥狀。

（二）實驗室診斷

本病在流行病學、臨床癥狀、病理變化上與許多可引起呼吸及消化系統(tǒng)相關(guān)的疾病相似。所以，要作出確診還應(yīng)輔助以實驗室手段進行。

1.病原的分離鑒定

CAV-1可在多種哺乳動物細胞上進行增殖，包括MDCK和犬睪丸細胞、豬、豚鼠和水貂的肺、腎和睪丸細胞等，而且Govaerts等報道CAV-1也可感染Hela細胞和人腎細胞并繁殖。其中MDCK為CAV-1最易感細胞。而CAV-2僅能感染犬細胞，對其他動物細胞不敏感。CAV-1感染細胞后使細胞呈“葡萄串”狀或單個的又大又圓的形態(tài)，并可感染細胞產(chǎn)生噬斑和包涵體。電鏡觀察病變細胞，可見核內(nèi)有結(jié)晶狀排列的病毒粒子。

2.分子生物學診斷

利用PCR檢測、qPCR等檢測方法進行診斷。 如2001年由Hurl等報道的CAV-1（E3區(qū)序列）基因序列設(shè)計特異性引物，擴增得到特異性片段，片段大小為508bp，回收處理后送測序。測序結(jié)果于Genbank中報道序列作比對進而做出確診。

3.血清學診斷

利用IFA檢測、HI檢測、ELISA等血清學方法進行診斷。如2019年由孟興等建立的HI實驗，用血清抗體與CAV-1結(jié)合，致使病毒上的血凝素無法吸附紅細胞表面上的受體，從而產(chǎn)生血凝抑制而達到檢測血清中是否存在CAV-1相應(yīng)抗體的檢測手段。

五、防治措施

在預(yù)防方面，由于CAV-1和CAV-2在免疫學上有交叉，CAV-1疫苗對CAV-2不能產(chǎn)生完全保護，但CAV-2疫苗可以使之產(chǎn)生CAV-1的抵抗力，且不會引起眼疾和腎炎，接種后2周即可產(chǎn)生保護力，故常用CAV-2弱毒苗免疫犬抗CAV-1感染。由于臨床上常與犬瘟熱、細小病毒性腸炎等病毒混合感染，因此目前市場上常采用五聯(lián)苗預(yù)防。我國當前普遍對于犬傳染性肝炎的防治方法是對感染犬接種五聯(lián)苗，對6～8周幼犬進行初免，后 10～12周齡時二免，13～15周齡進行三免即可獲得有效的保護力以抵抗感染，對于成年犬則需一年一免。

在治療方面，對于發(fā)病初期的患犬，應(yīng)注射抗CAV-1的高免血清或單克隆抗體進行治療，另用保肝散輔助以保護肝臟。臨床上常用犬干擾素IFN-α來抑制犬腺病毒等引起的病毒性疾病。