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    傳染性單核細(xì)胞增多癥患兒外周血CD4+/CD8+比值和血清IL-6水平的變化及臨床意義

    2022-12-07 07:59:16劉彩霞趙有麗高阿寧
    海南醫(yī)學(xué) 2022年22期
    關(guān)鍵詞:載量急性期比值

    劉彩霞,趙有麗,高阿寧

    1.漢中市人民醫(yī)院兒科,陜西 漢中 723000;2.咸陽市中心醫(yī)院兒科,陜西 咸陽 712000

    傳染性單核細(xì)胞增多癥(infective mononucleosis,IM)由EB病毒(Epstein-barr virus,EBV)感染引起,屬急性感染性疾病,預(yù)后較好,在任何階段均可發(fā)生,常見于兒童期和青少年時期[1-2]。EBV 附著于B 淋巴細(xì)胞中,在其感染潛伏期,B 細(xì)胞對EBV 核蛋白不轉(zhuǎn)錄表達,因而無致病性。隨著EBV 增殖,B 細(xì)胞分化成漿細(xì)胞,釋放EBV病毒顆粒,激活細(xì)胞毒性,激發(fā)機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答,炎癥因子被大量釋放,增強EBV活性,促進其增殖,機體此時產(chǎn)生一系列癥狀[3-4]。既往有學(xué)者提出炎性反應(yīng)和免疫破壞是IM 發(fā)病的主要原因,且與其預(yù)后可能存在相關(guān)性[5-6]。基于此,本研究對IM患兒不同時期的免疫狀態(tài)及炎癥反應(yīng)情況進行觀察,旨在分析EBV感染對兒童免疫功能的影響,為臨床治療提供新方向。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 選取2020年6月至2021年6月漢中市人民醫(yī)院收治的51 例感染EB 病毒的IM 急性期患兒作為研究組,并選取同期51例正常體檢兒童作為對照組。研究組中男性27例,女性24例;年齡1~14歲,平均(7.47±2.98)歲。對照組中男性25 例,女性26 例;年齡1~15 歲,平均(7.96±3.19)歲。兩組兒童的年齡、性別構(gòu)成比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本研究經(jīng)漢中市人民醫(yī)院倫理委員會審核并批準(zhǔn)。

    1.2 納排標(biāo)準(zhǔn) (1)納入標(biāo)準(zhǔn):①研究組患兒均符合IM診斷標(biāo)準(zhǔn)[7],并于實驗室檢測均為EBV病毒陽性(≥1×103copies/mL);②研究組均為初診患者;③入組前3個月未經(jīng)治療且未使用激素、免疫調(diào)節(jié)劑等藥物;④對照組兒童均經(jīng)體檢正常,且EBV 病毒檢測陰性(<1×103copies/mL);⑤患兒家屬了解本研究內(nèi)容及目的,并同意入組簽署知情同意書。(2)排除標(biāo)準(zhǔn):①非EBV 感染引起的IM 患兒;②有先天性免疫系統(tǒng)障礙者;③有血液系統(tǒng)障礙或惡性腫瘤者;④既往有變態(tài)反應(yīng)疾病史者。

    1.3 治療方法 研究組患兒均給予抗病毒治療,即給予阿昔洛韋注射液(國藥準(zhǔn)字H20068119 輔仁藥業(yè)集團有限公司,0.25 g/支) 5 mg/kg,經(jīng)100 mL 生理鹽水稀釋后行靜脈注射,每8 h 1次,持續(xù)7 d。并給予補能、呼吸支持等對癥治療,對伴有細(xì)菌性感染患兒,根據(jù)藥敏結(jié)果選擇抗生素治療。

    1.4 觀察指標(biāo)與檢測方法 于治療前(急性期)、治療后(恢復(fù)期:病程滿1個月)分別采取血液樣本檢測外周血T淋巴細(xì)胞亞群、炎癥細(xì)胞因子以及EBV DNA載量。對照組患兒僅抽取一次血液標(biāo)本進行相關(guān)指標(biāo)檢測。

    1.4.1 EBV DNA 載量檢測 采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)進行EBV DNA定量檢測,其試劑盒采自上海研生實業(yè)有限公司,熒光檢測系統(tǒng)為美國安捷倫3005P 實時PCR定量檢測儀。

    1.4.2 外周血T淋巴細(xì)胞亞群 采用流式細(xì)胞儀(儀器:貝克曼庫爾特CytoFLEX)檢測T 淋巴細(xì)胞亞群,即CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+的水平,試劑盒為儀器配套試劑盒。采用免疫散射法(試劑盒:中國貝克曼庫爾特有限公司)檢測免疫球蛋白IgA、IgG、IgM水平。

    1.4.3 炎癥細(xì)胞因子 采用酶聯(lián)吸附法檢測炎癥因子,即白細(xì)胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、腫瘤壞死因子-α (tumor necrosis factor-α,TNF-α)、γ干擾素(γ interferon,IFN-γ)的水平。試劑盒均由陜西凱捷體外診斷試劑有限公司提供。

    1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 21.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)。滿足正態(tài)分布且方差齊的計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,兩組組間比較采用t檢驗,多組間比較采用單因素方差分析,采用Peason相關(guān)性分析EBV DNA載量水平與外周血T淋巴細(xì)胞亞群、免疫球蛋白及炎癥細(xì)胞因子水平相關(guān)性,計數(shù)資料用率表示,采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 研究組與對照組兒童的外周血T 淋巴細(xì)胞亞群比較 研究組急性期患兒外周血T 淋巴細(xì)胞CD3+、CD8+水平明顯高于對照組,CD4+水平及CD4+/CD8+比值明顯低于對照組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),且研究組患兒恢復(fù)期CD3+、CD8+水平明顯低于患兒急性期,CD4+、CD4+/CD8+比值明顯高于患兒急性期,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表1。

    表1 研究組與對照組兒童的外周血T淋巴細(xì)胞亞群比較(±s)

    表1 研究組與對照組兒童的外周血T淋巴細(xì)胞亞群比較(±s)

    注:與研究組急性期比較,aP<0.05;與研究組恢復(fù)期比較,bP<0.05。

    組別研究組急性期研究組恢復(fù)期對照組F值P值例數(shù)51 51 51 CD3+(%)81.34±4.97 74.12±6.68a 66.59±5.14ab 86.931 0.001 CD4+(%)17.41±5.47 26.98±6.85a 36.57±5.41ab 132.331 0.001 CD8+(%)54.26±9.98 41.12±8.49a 26.78±5.86ab 140.291 0.001 CD4+/CD8+0.32±0.12 0.67±0.24a 1.37±0.57ab 110.185 0.001

    2.2 研究組與對照組兒童的免疫球蛋白水平比較 研究組急性期患兒IgA、IgG水平明顯高于對照組,恢復(fù)期患兒的IgA、IgG水平明顯低于急性期患兒,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),但研究組患兒的IgM水平與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),見表2。

    表2 研究組與對照組兒童的免疫球蛋白水平比較(g/L,±s)

    表2 研究組與對照組兒童的免疫球蛋白水平比較(g/L,±s)

    注:與研究組急性期比較,aP<0.05;與研究組恢復(fù)期比較,bP<0.05。

    組別研究組急性期研究組恢復(fù)期對照組F值P值IgM 1.54±0.29 1.46±0.26 1.42±0.31 2.305 0.103例數(shù)51 51 51 IgA 5.45±1.12 3.54±0.97a 2.57±0.42ab 138.520 0.001 IgG 14.97±1.54 12.24±1.26a 9.95±1.74ab 138.316 0.001

    2.3 研究組與對照組兒童的炎癥細(xì)胞因子水平比較 研究組急性期患兒IL-6、TNF-α、IFN-γ水平明顯高于對照組,恢復(fù)期患兒IL-6、TNF-α、IFN-γ水平明顯低于急性期患兒,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表3。

    表3 研究組與對照組兒童的炎癥細(xì)胞因子水平比較(pg/mL,±s)

    表3 研究組與對照組兒童的炎癥細(xì)胞因子水平比較(pg/mL,±s)

    注:與研究組急性期比較,aP<0.05;與研究組恢復(fù)期比較,bP<0.05。

    組別研究組急性期研究組恢復(fù)期對照組F值P值IFN-γ 92.36±14.21 35.64±12.34a 9.54±3.25ab 752.043 0.001例數(shù)51 51 51 IIL-6 28.54±9.23 15.24±5.35a 2.54±0.97ab 225.361 0.001 TNF-α 12.57±1.23 11.97±2.12a 5.64±1.34ab 289.068 0.001

    2.4 研究組患兒急性期與恢復(fù)期EBV DNA載量水平比較 研究組患兒急性期平均EBV DNA載量水平為(4.23±1.14)×103copies/mL,恢復(fù)期患兒平均EBV DNA載量水平為(1.62±0.23)×103copies/mL,恢復(fù)期患兒EBV DNA 載量水平明顯低于急性期,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=16.027,P<0.05)。

    2.5 EBV DNA載量與炎癥因子及CD4+/CD8+比值的相關(guān)性 經(jīng)Pearson 相關(guān)性分析結(jié)果顯示,EBV DNA 載量水平與IL-6、TNF-α、IFN-γ均呈正相關(guān)(r=0.613、0.514、0.466,P均<0.05),與CD4+/CD8+比值呈負(fù)相關(guān)性(r=-0.394,P<0.05)。

    3 討論

    因兒童免疫力發(fā)育不完善,抵抗力較弱,易受EBV感染,引起IM發(fā)生。IM屬于自限性疾病,預(yù)后較好,但因兒童免疫功能的原因,有部分患兒可出現(xiàn)腦膜炎、周圍神經(jīng)病變、肝功能損害等并發(fā)癥,患兒的免疫狀態(tài)不同對其預(yù)后和轉(zhuǎn)歸也具有較大的差異[8]。

    本研究結(jié)果顯示,IM 患兒外周血T 淋巴細(xì)胞CD3+、CD8+水平均明顯高于對照組,CD4+水平及CD4+/CD8+比值明顯低于對照組,且IM 恢復(fù)期患兒CD3+、CD4+、CD8+水平及CD4+/CD8+比值均有所好轉(zhuǎn),與黃彬曉等[9]研究部分一致。CD4+屬于輔助性T 細(xì)胞,具有協(xié)助細(xì)胞及體液免疫功能,CD8+具有殺傷或抑制T細(xì)胞免疫作用[10]。CD4+具有輔助B細(xì)胞產(chǎn)生抗體,中和抗原的作用,對CD8+細(xì)胞的毒性具有誘導(dǎo)和維持作用,進而影響EBV B 細(xì)胞增殖,IM 急性期T 淋巴細(xì)胞受到感染,免疫反應(yīng)增強,CD8+細(xì)胞增殖,殺傷感染EBV B淋巴細(xì)胞,促使其調(diào)亡[11-12]。CD4+與CD8+比值是判斷人體免疫功能紊亂的敏感指標(biāo),更能直觀地反映患兒免疫功能變化。CD4+/CD8+比值下降提示患者細(xì)胞免疫功能處于抑制狀態(tài),機體對外界的免疫功能下降,免疫狀態(tài)失衡,在患兒進入恢復(fù)期,CD4+/CD8+比值緩慢升高,提示此時患兒免疫功能逐漸恢復(fù),以避免過度免疫損害。本研究顯示,IM患兒IgA、IgG均高于對照組,且在恢復(fù)期下降,與劉曉宇等[13]研究部分一致??赡苁怯捎跈C體受EBV感染后,出現(xiàn)感染特異性致敏狀態(tài),激活免疫防御有關(guān)。

    本研究結(jié)果還顯示,IM患兒IL-6、TNF-α及IFN-γ水平均上升,祁正紅等[14]研究也提出EBV抗原激活細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞,誘發(fā)IL-6、TNF-α等炎癥因子大量釋放。CD4+淋巴細(xì)胞在抗原的刺激下可分化為Th1、Th2等亞群,對細(xì)胞免疫進行調(diào)節(jié),IL-6由Th2細(xì)胞分泌,屬于多效性細(xì)胞因子,對免疫系統(tǒng)具有調(diào)節(jié)作用,在感染初期急劇上升,可促進T細(xì)胞活化增殖、B細(xì)胞分化,誘導(dǎo)自身抗體的產(chǎn)生,調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)應(yīng)答,IL-6可通過刺激抗體,誘導(dǎo)幼稚CD4+細(xì)胞分化為效應(yīng)T細(xì)胞,在機體感染免疫反應(yīng)中起重要作用。鄧士勇等[15]研究也指出IL-6在IM 中具有輔助診斷價值。TNF-α與IFN-γ由Th1 細(xì)胞分泌,TNF-α可介導(dǎo)炎癥細(xì)胞因子的產(chǎn)生,激活機體炎癥信號通路,誘導(dǎo)IL-6 的合成分泌。本研究顯示,IM 患兒EBV DNA載量水平在恢復(fù)期逐漸下降,且與IL-6、TNF-α、IFN-γ及CD4+/CD8+比值具有相關(guān)性,說明EBV感染后可能通過刺激細(xì)胞免疫引起炎癥反應(yīng),引發(fā)IM一系列癥狀的出現(xiàn)。

    綜上所述,IM 患兒急性期T 淋巴細(xì)胞亞群CD4+/CD8+比值降低,血清IL-6 等炎癥因子水平升高,臨床可通過檢測其T 淋巴細(xì)胞亞群及炎癥因子變化了解IM患兒免疫及發(fā)病情況。

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