口蹄疫免疫抗體檢測及分析

米日古力·依布拉音

（喇嘛昭鄉(xiāng)農(nóng)業(yè)（畜牧業(yè)）發(fā)展服務(wù)中心，新疆塔城 834600）

0 引言

雖然我國是一個農(nóng)業(yè)大國，但是由于我國的人口優(yōu)勢，我國對于肉制品以及肉類產(chǎn)品的需求量很大，這為很多家禽家畜業(yè)的發(fā)展提供了契機。但是家禽家畜業(yè)的發(fā)展也面臨著有些威脅，譬如口蹄疫[1]?？谔阋咭驗樗膫魅舅俣戎?、發(fā)病率之多、死亡率之高而被列為一類傳染病。這種疾病不僅在我國不被忽視，而且在世界范圍內(nèi)也得到了相對程度上的重視。世界衛(wèi)生組織將口蹄疫命名為烈性傳染病之一。

1 基本材料

1.1 病理危害

口蹄疫是一種發(fā)病率非常高的疾病，雖然口蹄疫的死亡率并不是特別高，據(jù)不完全統(tǒng)計，口蹄疫的死亡率不超過3%，但是會嚴重影響動物的生長，尤其是在一些規(guī)?；酿B(yǎng)殖場中，如果有一頭豬得了口蹄疫，那么很快就會傳染給其他豬[2]。被感染的豬剛開始會長出一些比較小的白色水泡，并不容易被發(fā)現(xiàn)，直到口蹄疫感染的后期，會出現(xiàn)豬蹄腐爛，很容易被誤解為是皮膚疾病，容易導(dǎo)致誤診，誤診可能會影響最佳救治時間?？谔阋叩娜谝话銥槿茏笥?，會嚴重影響豬的出欄時間，從而影響?zhàn)B殖場的經(jīng)濟收益。

1.2 實驗對象

我國食用肉產(chǎn)品以及加工的肉類產(chǎn)品的主要來源是豬肉，而口蹄疫也主要發(fā)生在豬的身上，口蹄疫的發(fā)病率非常高，而且周期短。從發(fā)病到死亡之間的時間非常短。這種來勢洶洶而且死亡率非常之高的病毒已經(jīng)被世界衛(wèi)生組織列為最危險的傳染病之一?？谔阋叩陌l(fā)生給畜牧業(yè)的經(jīng)濟帶來巨大的損失，而且口蹄疫一旦在一頭豬身上發(fā)生，很快便可以席卷整個養(yǎng)豬場，豬的大量死亡會造成肉價飛漲，不利于社會穩(wěn)定和人民生活水平的提高[3]。因此為了預(yù)防和治療這種疾病，自從2017年開始，我國的很多地區(qū)便開始對口蹄疫進行針對性的檢測和相應(yīng)的疫苗的研發(fā)。

2017年的上半年，我國把對口蹄疫的檢測提上了日程。我國的衛(wèi)生組織把口蹄疫的檢測點設(shè)立在我國的河北地區(qū)。因為河北地區(qū)是一個相對重要的豬肉產(chǎn)品加工和檢測地區(qū)，尤其是在河北省的張家口市，養(yǎng)豬已經(jīng)形成了一定的規(guī)模和專業(yè)化的生產(chǎn)方向。因此我國政府對于該省該市的口蹄疫檢測和防疫具有很高的重視度。

1.3 實驗途徑

針對豬身上發(fā)生的口蹄疫傳染病，我國大部分地區(qū)所認定的相對權(quán)威的實驗試劑是產(chǎn)自蘭州生物藥廠的O型合成肽疫苗。這種疫苗已經(jīng)得到了國家相關(guān)部門以及醫(yī)學(xué)上的認可，是一種具有很高的權(quán)威性以及在當(dāng)前市場上流通度很高的一種藥劑。除了這種藥劑之外，還有另外一種配合使用的疫苗是產(chǎn)自洛陽萊普生信息科技的一種藥劑。只有這兩種藥劑產(chǎn)品比對使用，才能達到比較好的抑制和免疫效果。但是在對這兩種藥劑的比對使用的過程中，對于兩種藥劑的使用比例和使用方法仍然有待考證和進行進一步的精確化的分析。

2 實驗方法

2.1 血清采樣

把要作為實驗樣本進行分析的豬進行血清采樣，并對其血清進行離心分離，從而分離出血清中所含有的病毒樣本。因為如果可以離心出病毒樣本，那么可以了解到病毒的分子結(jié)構(gòu)，更好的提出相對性的措施來抑制病毒，除此之外，相對于直接在豬的身上進行疫苗測試的方法，通過血清樣本來測試的方法不僅節(jié)約資源，而且比較容易實施，受自然的干擾比較小，分析的結(jié)果具有更高的科學(xué)性和精準度，有利于提出更具有針對性的措施。因此對豬的血清進行采樣來進行對免疫抗體的檢測對口蹄疫的檢測及免疫具有主要價值和意義[4]。

2.2 檢測結(jié)果分析

實驗通過對七種不同血清的提取，在進行一系列的實驗之后，通過對科學(xué)顯微鏡一下抗原所表現(xiàn)出不同狀態(tài)的觀察分析可得，不同的血型受口蹄疫病毒的影響不同，有的血型瘦口蹄疫病毒的影響比較小，但相對的這種血型受抗原的影響也比較少，有的血型受口蹄疫病毒影響比較大，很容易被這種病毒所感染，但是受抗原的影響也比較大。通過對多種血型受口蹄疫病毒的影響及受抗原影響的比較，分析之后發(fā)現(xiàn)，最容易受到口蹄疫病毒感染的是O型血。O型血，因為血型的特殊性，因為O型血和A型血或者是B型血都可以相容，它的相容性是比較強的，因此，當(dāng)O型血受到病毒干擾之后，會和病毒相結(jié)合，變異，從而產(chǎn)生新的毒株，這為戰(zhàn)勝病毒，研發(fā)出新的抗原帶來了巨大的挑戰(zhàn)。

O型血在和口蹄疫的病毒結(jié)合之后，產(chǎn)生了新的毒株，由于這種新的毒株是基于原始口蹄疫病毒而分化而來，因此這種新的毒株被命名為泛亞株，這種毒株的抗原研發(fā)比傳統(tǒng)的口蹄疫病毒的抗原研發(fā)更困難，而且這種新的毒株更難從血清中提取出來，它的分子結(jié)構(gòu)也更難離析。這種毒株的傳播速度和發(fā)病率比傳統(tǒng)的口蹄疫病毒更高，也更難控制。

2.3 對口蹄疫病毒病理綜述

口蹄疫病毒的原理歸屬上屬于小RNA病毒，它的類潛伏期很長，而且不容易被發(fā)現(xiàn)，口蹄疫病毒的患病初期表象與其他病理病癥在表象上具有交叉之處，到目前為止，口蹄疫病毒已經(jīng)發(fā)展、衍化出七十多種病毒類型，而且這種病毒的生命力頑強，對外界環(huán)境的適應(yīng)力很強，很容易與不同的血清類型結(jié)合，從而衍生出新的病毒類型。據(jù)研究表示，口蹄疫病毒的結(jié)構(gòu)主要是5UTR、3UTR和ORF，在這三個主要結(jié)構(gòu)中又含有其他的小分支，在ORF結(jié)構(gòu)中含有與VP1一樣的解構(gòu)，不僅如此，還含有VP2、VP3等與VP1結(jié)構(gòu)不一樣的結(jié)構(gòu)基因，除此之外，這三個結(jié)構(gòu)的起始密碼號以及終止密碼子都各不相同。病毒的主要抗原點是VP1?？谔阋卟《驹谕庑紊吓c人體白細胞有相似之處，都是圓形，而且口蹄疫病毒的主要組成部分也是蛋白質(zhì)，其蛋白質(zhì)含量高達70%，剩余的30%則是病毒的RNA單鏈。

當(dāng)動物感染口蹄疫病毒之后，最初表現(xiàn)是會在皮膚上長出一些白色的小泡，損傷皮膚，使皮膚腐爛，隨之逐漸的損傷呼吸道和消化道的粘膜，然后病毒逐漸深入到血液中，伴隨著血液的流通，導(dǎo)致造成心肌出血和內(nèi)臟出血，最終造成心肌病變，臨床醫(yī)學(xué)表明，口蹄疫病毒造成的心肌病變后的心臟橫切面上有淡黃色斑點。

3 對口蹄疫的抗體檢測及分析

3.1 對于人工異變化毒株的培養(yǎng)

針對口蹄疫的抗體研發(fā)，弱毒疫苗的研發(fā)在很長一段時間內(nèi)被視為羅馬福音一樣的存在。弱毒疫苗是人工培植的一種抗體，其研發(fā)原理是，提取口蹄疫病毒的毒株，經(jīng)過人工培植之后，對其進行“鼠化”處理，促使其原本的分子結(jié)構(gòu)異變，異變后的口蹄疫分子結(jié)構(gòu)對原始的口蹄疫病毒能夠形成一定程度的抑制作用，但是被人工異變后的口蹄疫病毒毒株仍然帶有原始毒株的分子結(jié)構(gòu)特性，很容易形成“易返”效果，即：人工異變后的口蹄疫病毒恢復(fù)其原始結(jié)構(gòu)。這種方法的成本和造價比較低，但是使用這種方法具有一定的局限性，首先是對于病毒的醫(yī)療效果不夠突出，盡管給動物注射完這種疫苗之后，可能會在短期內(nèi)獲得一定的收效，但是受到病毒的影響可能會反彈；其次是這種抗原的制作方法會受到運輸?shù)纫蛩氐挠绊?，不利于推廣和普及；最后是給被口蹄疫病毒感染后的動物注射完這種疫苗之后，可能會使被注射弱毒疫苗的動物產(chǎn)生變態(tài)反應(yīng)，造成更嚴重的后果。

3.2 滅活疫苗

除了弱毒疫苗之外，還有另外一種疫苗的研發(fā)在很大程度上彌補了弱毒疫苗的缺陷和不足。滅活疫苗是上世紀20年代歐洲研發(fā)的，這種疫苗在弱毒疫苗功能的基礎(chǔ)上，添加了抗氧化鋁制劑，這使得滅活疫苗的功能比弱毒疫苗的功能更穩(wěn)定，功效也更為突出。對口蹄疫病毒具有針對性的抑制和消滅作用的一種抗原[5]。這種抗原在給感染口蹄疫病毒的動物注射之后，并不會產(chǎn)生反彈效果，而且對于口蹄疫病毒的抑制作用具有明顯的功效，這種疫苗是我國目前使用最廣泛的抵抗口蹄疫病毒的疫苗。

3.3 基因重組疫苗

基因重組疫苗所采用的基因重組技術(shù)與弱毒疫苗研發(fā)的技術(shù)具有相似之處，都是在血清中提取病毒毒株，然后通過基因改組技術(shù)對疫苗的分子結(jié)構(gòu)進行改組。但是基因重組疫苗與弱毒疫苗直接仍然有不同之處，前者的技術(shù)研發(fā)來源是來自于在大腸桿菌中發(fā)現(xiàn)的口蹄疫病毒毒株，由于毒株的70%是由蛋白質(zhì)構(gòu)成，通過使用蛋白質(zhì)對毒株進行誘導(dǎo)，從而刺激被感染的動物在體內(nèi)產(chǎn)生抗體，然后使用蛋白分離技術(shù)，在動物體內(nèi)提取出亞單位疫苗，然后對被感染的動物進行注射，以此達到對口蹄疫病毒的抑制作用。這種對動物進行間接接種疫苗的方法，使動物自身產(chǎn)生抗體，這種方法的發(fā)現(xiàn)，是我國當(dāng)前基因技術(shù)工程的一個重大突破。

3.4 接種口蹄疫免疫抗體的注意事項

對于口蹄疫免疫抗體的接種，首先應(yīng)該注意的是在接種時要嚴格按照疫苗生產(chǎn)廠家所規(guī)定的要求進行接種，要注意感染口蹄疫病毒的動物的感染時間，發(fā)病的具體情況，以及被感染的動物的年齡，根據(jù)具體的情況具體分析應(yīng)該接種疫苗的量。

在對動物進行疫苗接種時，工作人員要保持嚴謹?shù)墓ぷ鲬B(tài)度，對疫苗的接種過程要嚴格遵守規(guī)定。對于接種環(huán)境也具有嚴格的要求，在進行接種時，要確保接種的針頭清潔干凈，接種的環(huán)境合適。對動物進行接種，多半是進行肌肉注射的方式，在接種時要注意注射的位置正確。

4 結(jié)語

口蹄疫是一種傳染性非常強的病毒，而且口蹄疫在最初感染時不容易被察覺，這一點給口蹄疫的傳播提供了契機。一段口蹄疫病毒爆發(fā)，那么將會給動物生存密集的地方，譬如養(yǎng)殖場帶來巨大不利影響，而且口蹄疫會通過空氣等方式進行傳播，很可能會傳播給人類，給人類的生存生活帶來不必要的災(zāi)難。因此，口蹄疫的預(yù)防工作，對于畜牧業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)都是是一項重要的工作。