規(guī)模場(chǎng)非洲豬瘟綜合防控技術(shù)的應(yīng)用

蔡國(guó)忠

（重慶長(zhǎng)壽溫氏畜牧有限公司，重慶 401231）

非洲豬瘟（Africa swine fever，ASF）是1921年在非洲東部的肯尼亞被發(fā)現(xiàn)，1957年前一直在撒哈拉以南的國(guó)家傳播，1957年后葡萄牙發(fā)現(xiàn)后傳入歐洲國(guó)家，隨后又傳入拉美、北美地區(qū)的國(guó)家。2018年傳入我國(guó)并被列為重點(diǎn)防范的一類動(dòng)物疫（王華等2008）。非洲豬瘟主要傳染源是患病豬，健康豬與患病豬直接接觸后1～9d即可被感染。當(dāng)有圍欄相隔時(shí)，可延遲6～15d(Niederwerder,et al，2019)。此外，由于ASF的致死率高，若撲滅延遲，可導(dǎo)致該病致死性發(fā)生改變并下降，康復(fù)豬增多且這些康復(fù)豬也有傳染性（王華等2008）。ASF的生物傳播媒介主要是蜱蟲(chóng)，蜱蟲(chóng)通過(guò)吸血來(lái)傳播病毒，蜱蟲(chóng)可通過(guò)野豬和人類活動(dòng)來(lái)感染家豬，因此蜱蟲(chóng)也是非洲豬瘟在飼養(yǎng)和野外環(huán)境間傳播的重要媒介（張睿等2019）。ASFV在外界環(huán)境的抵抗力較強(qiáng)，健康豬也可通過(guò)感染豬的排泄物、欄位、水槽及受污染運(yùn)輸車輛和食入污染的飼料、飲水等途徑感染該病。

自2018年非洲豬瘟傳入我國(guó)以來(lái)，已經(jīng)給我國(guó)養(yǎng)豬產(chǎn)業(yè)造成巨大損失，雖然已得到基本控制，但由于沒(méi)有有效疫苗和藥物，非洲豬瘟仍是危害我國(guó)養(yǎng)豬產(chǎn)業(yè)最為嚴(yán)重的疾病，豬場(chǎng)只能過(guò)嚴(yán)密防控，及時(shí)監(jiān)測(cè)來(lái)預(yù)防非洲豬瘟，因此在尚未有疫苗與特效藥物問(wèn)世前，綜合防控技術(shù)是最有效的手段，本研究主要以某豬場(chǎng)為例，通過(guò)對(duì)該豬場(chǎng)非洲豬瘟期間的人員管理、消毒采樣以及分析研究，總結(jié)了一些關(guān)于規(guī)?；i場(chǎng)防控非洲豬瘟的對(duì)策及方法。

1 人員管理

1.1 豬場(chǎng)的基本情況豬場(chǎng)建立在空曠、排風(fēng)通暢遠(yuǎn)離居民生活的郊區(qū)。廠區(qū)內(nèi)主要分為生活區(qū)和生產(chǎn)區(qū)，生活區(qū)主要是包括食堂、倉(cāng)庫(kù)、人員休息區(qū)等。生產(chǎn)區(qū)分為A區(qū)和B區(qū)，每區(qū)各5個(gè)棟舍，生產(chǎn)人員住在棟舍里的休息區(qū)，棟舍分為產(chǎn)房和配懷舍，產(chǎn)房含有5個(gè)房間，每個(gè)房間有56頭豬，配懷舍為一個(gè)整體，一共可容納1152頭豬。

1.2 人員管理

1.2.1 人員進(jìn)出豬場(chǎng)的管理 人員需要規(guī)定日期進(jìn)場(chǎng)或出場(chǎng)，進(jìn)場(chǎng)前3d不要食入豬肉，不要到菜市場(chǎng)或超市的生鮮區(qū)，進(jìn)場(chǎng)前還需要到隔離點(diǎn)采樣，陰性后才可以洗澡換工作服進(jìn)入隔離區(qū)，攜帶的物品也應(yīng)經(jīng)過(guò)消毒后帶入隔離區(qū)，攜帶的物品只能是生活必需品（手機(jī)、充電器等），進(jìn)入隔離區(qū)后仍需要采樣為陰性才可進(jìn)入豬場(chǎng)生活區(qū)，進(jìn)入后仍需要洗澡換衣服采樣，陰性后進(jìn)入棟舍，流程仍是洗澡換衣服。從隔離點(diǎn)到豬場(chǎng)的路上以及生活區(qū)到生產(chǎn)區(qū)的路上均需要穿隔離服戴鞋套。與出場(chǎng)流程基本相似，但不需要采樣。

1.2.2 生活區(qū)人員管理 一般情況下，送飯和物資人員、收死豬、維修設(shè)施的工人外其余人不能進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)，生活區(qū)人員進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)要先穿好防護(hù)服才可進(jìn)入，生產(chǎn)區(qū)出入口設(shè)有垃圾桶，出生產(chǎn)區(qū)前要脫下防護(hù)服。送飯與送物資人員不能進(jìn)入棟舍里面，物資與飯菜放入棟舍耳房里后需立即離開(kāi)。維修棟舍里設(shè)施的工人進(jìn)入棟舍前需要再穿上一層防護(hù)服才可進(jìn)入，出棟舍時(shí)需脫下。

1.2.3 生產(chǎn)區(qū)人員管理 進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)的人員無(wú)特殊情況不能離開(kāi)生產(chǎn)區(qū)，生產(chǎn)區(qū)人員每次進(jìn)入產(chǎn)房或配懷舍均需要穿防護(hù)服，鞋套，出來(lái)后需要脫下。管理產(chǎn)房人員在進(jìn)入每間產(chǎn)房前需要在火堿水溶液中站15s，才可進(jìn)入產(chǎn)房。每次工作完從產(chǎn)房或配懷舍回到休息區(qū)，需要換衣服洗澡，衣服需要用衛(wèi)可水浸泡0.5h后才可以用洗衣機(jī)清洗。人員除工作需要外不得隨意打開(kāi)棟舍聯(lián)通外界的門，丟垃圾時(shí)不得踏出門外。生產(chǎn)區(qū)人員調(diào)整棟舍，除自己從場(chǎng)外帶來(lái)的物品外其余物品不能帶走，離棟和進(jìn)入新棟舍都需要洗澡更衣。

2 消毒、采樣與檢測(cè)

2.1 非洲豬瘟嚴(yán)重期間消毒

2.1.1 制定合理的消毒制度 消毒可以有效的殺滅病原微生物，切斷的傳播。消毒可分為物理性、化學(xué)性以及生物熱性消毒。物理性消毒在豬場(chǎng)主要是通過(guò)打掃來(lái)保持豬舍的干凈，及時(shí)清除掉落的飼料和糞便一方面有利于處理掉病原微生物，一方面防止因長(zhǎng)時(shí)間不清理遇水后粘連在地上難以清除，導(dǎo)致病原微生物滋生。必要時(shí)可采用高壓水槍沖洗?；瘜W(xué)消毒主要有噴灑、浸泡、熏蒸、擦拭。噴灑為最常用、最方便的一種消毒方法，主要適用于休息區(qū)和生活區(qū)的環(huán)境、豬舍地面以及欄位，浸泡法可用來(lái)消毒攜帶進(jìn)入豬場(chǎng)的非電子類產(chǎn)品、工具、飲料及帶皮的水果等，熏蒸主要消毒食物，擦拭可用于消毒電子產(chǎn)品。人員調(diào)整棟舍所攜帶的物品進(jìn)入新棟舍也要消毒，防止帶入。生物法主要用于處理糞便以及廢物。

消毒要做到不留死角，風(fēng)機(jī)、料槽口等地方也要消毒。有效的消毒需要明確不同消毒劑的適用范圍、規(guī)范消毒周期、消毒劑量和消毒時(shí)間，根據(jù)消毒劑性合理保存消毒劑健全消毒制度（王巍等2021）。例如，人員進(jìn)出通道可選擇1：400倍稀釋的過(guò)硫酸氫鉀化合物；宿舍內(nèi)的地面或墻壁可選擇1：400倍稀釋的過(guò)氧乙酸或過(guò)氧化氫；販豬和運(yùn)輸飼料車輛可先用堿性清潔劑清洗，再用1：400倍稀釋的過(guò)氧乙酸或過(guò)氧化氫。根據(jù)消毒劑性合理保存消毒劑健全消毒制，福爾馬林、戊二醛、次氯酸鹽、過(guò)氧化物、臭氧水和苯酚均是ASFV的高效消毒劑。不同的豬場(chǎng)由于氣溫、潮濕程度、氣壓等有所不同，這也使消毒劑對(duì)非洲豬瘟病毒的滅活效果不同，因此豬場(chǎng)在制定消毒制度時(shí)也需要根據(jù)本場(chǎng)環(huán)境選擇消毒劑以及使用的劑量。

2.1.2 不同區(qū)域的消毒 （1）生活區(qū)消毒與生產(chǎn)區(qū)人員休息區(qū)的消毒：采用1：200的衛(wèi)可消毒液進(jìn)行消毒，每次消毒需要保證任何地方都噴灑到衛(wèi)可水。進(jìn)入豬場(chǎng)的車輛要消毒后才可進(jìn)入。（2）產(chǎn)房與配懷舍的消毒：產(chǎn)房與配懷舍消毒2次/d，產(chǎn)房與配懷的過(guò)道用3%的火堿溶液消毒，地面全部要噴灑到并且要保持濕潤(rùn)，噴灑的同時(shí)要保持地面清潔，及時(shí)掃除掉落到地面的飼料以及糞便。過(guò)道消毒完畢后，用1：200的衛(wèi)可對(duì)墻壁及欄位進(jìn)行消毒，每個(gè)欄位要保證消毒到欄桿有水滴滴露的程度。每天消毒完畢后才可喂食。（3）物資、食物的消毒：食物需要先高溫消毒0.5h后可送入棟舍，送入棟舍后用衛(wèi)可噴灑外包裝袋后才可食用，物資類可浸泡的需要用衛(wèi)可水浸泡0.5h后使用，不可浸泡得如防護(hù)服、大件物資可采用噴灑衛(wèi)可，電子產(chǎn)品類主要采用擦拭的方法。（4）處理死豬的消毒：處理死豬也需消毒后才可放到門外，處理死豬的人員需要穿著兩層隔離服，處理死豬前需要用衛(wèi)可噴灑死豬的欄位以及死豬兩邊的欄位，死豬包裹透明塑料布后才可放置到室外，處理死豬的人員需要脫下一層防護(hù)服并用衛(wèi)可消毒鞋底后才可進(jìn)入室內(nèi)，處理死豬的工具也消毒后才放入室內(nèi)，進(jìn)入室內(nèi)后需要將死豬欄位再次消毒。處理死豬人員需要洗澡更衣，室外負(fù)轉(zhuǎn)運(yùn)死豬的車輛，轉(zhuǎn)運(yùn)后也需要消毒。（5）轉(zhuǎn)群過(guò)程的消毒：進(jìn)豬前需要沖洗，進(jìn)豬的路線在進(jìn)豬前后需要用火堿溶液消毒。轉(zhuǎn)運(yùn)小豬前需要在過(guò)道鋪上一層透明塑料，一層彩色塑料，不但地面要覆蓋，兩邊墻壁至少要覆蓋到墻高度的一半。轉(zhuǎn)運(yùn)后仍需要再用火堿消毒一遍。（6）實(shí)驗(yàn)室的消毒：每次檢測(cè)完樣品都要對(duì)桌面以及使用過(guò)的移液槍用84消毒液擦拭，用過(guò)的槍頭及試劑盒需要裝入自封袋后再扔進(jìn)垃圾桶里，定期對(duì)使用的儀器用噴灑上酒精的紙巾或毛巾進(jìn)行擦拭。每天進(jìn)行檢測(cè)工作前，用84消毒液擦拭桌面儀器移液槍以及冰箱門把手地面。晚上檢測(cè)工作結(jié)束后用衛(wèi)可水噴灑地面，84消毒液擦拭桌面儀器；將離心管架浸泡到84消毒液中第二天早上再取出并且倒掉垃圾。此外，實(shí)驗(yàn)室還需要定期進(jìn)行采樣，以防止實(shí)驗(yàn)室污染。

2.2 非洲豬瘟嚴(yán)重期間的采樣采樣的目的主要是檢測(cè)異常豬是否患有，使患病豬及時(shí)淘汰，防止擴(kuò)散。當(dāng)前豬場(chǎng)采用的檢測(cè)辦法為熒光定量，血液、咽喉拭子及環(huán)境樣均可檢測(cè)，因此在對(duì)豬采樣也可選擇尾根血或者咽喉拭子，尾根血采樣需要注意不要讓血液落到地上以防止污染環(huán)境，采尾根血容易因豬疼痛而騷動(dòng)采不到血；咽喉拭子采樣需要確保紗布到達(dá)咽喉部，對(duì)被多天連續(xù)采樣的豬，很難將紗布送入到咽喉部，有的甚至出現(xiàn)不愿張嘴，此時(shí)也可考慮擦拭該欄位的料槽和飲水裝置。采樣少食的豬時(shí)，要考慮該豬是因?yàn)轱暳线^(guò)多還是因?yàn)楫惓?，要及時(shí)調(diào)整飼料量。

2.2.1 異常豬采樣 喂食時(shí)需要觀察豬群，采樣對(duì)象為厭食、少食、分娩的豬以及死亡的仔豬，采樣工具為包裹紗布的輸精管，將其通入豬咽喉處采樣，采樣時(shí)人員要戴長(zhǎng)臂手套，采樣過(guò)程中注意不要碰到欄桿，若是手臂碰到要更換長(zhǎng)臂手套，身體觸碰到欄桿要及時(shí)更換防護(hù)服，采好樣后將紗布放入自封袋內(nèi)，采樣結(jié)束后要進(jìn)行分樣，分樣過(guò)程要在衛(wèi)可水上進(jìn)行，將自封袋內(nèi)注入3mL生理鹽水，充分揉搓紗布，最后將混有豬唾液生理鹽水?dāng)D入離心管中，蓋緊離心管的蓋子。倒入離心管的過(guò)程中最好不要灑到地上。分樣結(jié)束后要用衛(wèi)可消毒地面。每天都不吃食的豬可隔一天采樣一次，如果吃食可以不采。

2.2.2 人員、環(huán)境采樣 人員采樣主要用紗布采樣，將紗布放入自封袋中注入5mL生理鹽水，取出紗布擦拭頭發(fā)、頭皮、暴露在環(huán)境的皮膚、衣服以及衣服上的口袋、鞋底，擦拭完后放自封袋，充分揉搓，將混合液滴入離心管中。環(huán)境主要采集休息區(qū)環(huán)境、產(chǎn)房以及配懷舍環(huán)境、欄位，同樣是用紗布擦拭后將混合液注入離心管中。

2.3 非洲豬瘟嚴(yán)重期間的檢測(cè)非洲豬瘟的診斷方法有多種，但熒光定量PCR是豬場(chǎng)最為常用的方法，該法可用于豬感染早期的檢測(cè)，并且該方法快速、準(zhǔn)確、靈敏性高。在進(jìn)行檢測(cè)的過(guò)程中最重要的一點(diǎn)為防止試劑污染，這要求操作人員在進(jìn)行檢測(cè)過(guò)程中要細(xì)心、認(rèn)真。樣品要放在低溫下保存以防失效。在進(jìn)行DNA純化過(guò)程時(shí)加一個(gè)樣品換一個(gè)槍頭，若出現(xiàn)回槍，需換槍頭處理，防止污染。人員工作過(guò)程中一定要穿實(shí)驗(yàn)服以及戴手套，手套沾染到樣品要及時(shí)更換，貼膜的過(guò)程一定要將膜貼緊、貼平整，以防止離心過(guò)程中漏液或液體跑到其他孔里，導(dǎo)致試劑污染結(jié)果不準(zhǔn)確。

檢測(cè)主要采用熒光定量法，首先將樣品編號(hào)，用移液槍提取300mL加入DNA純化試劑盒中，放入儀器30min中提取核酸，在超凈臺(tái)中將提取的核酸及陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照加入反應(yīng)液中，在裝有混合液的板子上貼上一層膜，然后將其離心15s后，放入儀器中進(jìn)行擴(kuò)增，大約1h后可查看結(jié)果。出現(xiàn)陽(yáng)性需要復(fù)檢并記錄CT值。在加入陽(yáng)性對(duì)照過(guò)程中，陽(yáng)性對(duì)照的蓋子不得接觸桌面，最好用手夾住，在加入陽(yáng)性對(duì)照后先更換手套再將其放入機(jī)器。出現(xiàn)樣品量過(guò)少可向其中加入生理鹽水，注意生理鹽水瓶口不要與離心管接觸；液體過(guò)于渾濁可采用離心。

3 綜合防控措施

3.1 科學(xué)的飼養(yǎng)管理科學(xué)的飼養(yǎng)管理可豬群的抵抗力，減少豬群患病的風(fēng)險(xiǎn)?？茖W(xué)的飼養(yǎng)管理主要是要做到保證科學(xué)飼養(yǎng)保持豬舍內(nèi)清潔干燥。保證科學(xué)飼養(yǎng)要做的固定時(shí)間給予豬群飼料、根據(jù)每個(gè)豬吃食情況調(diào)整飼料量，以防止因?yàn)榱喜壑惺Ｓ嗟娘暳习l(fā)霉變質(zhì)，豬采食后生病，體抗力降低。若料槽中含有過(guò)多的水和飼料要及時(shí)清理，最好在每次喂食前檢查料槽后進(jìn)行喂食。每次有新來(lái)的飼料要先進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)為陰性再放入料塔，以防止飼料中攜帶。保持豬舍在適宜的溫度下（20℃），產(chǎn)房要配有保溫箱，保證小豬生活在25～30℃下。定期對(duì)豬舍進(jìn)行清潔，及時(shí)清除豬舍內(nèi)的糞便和拱到地面上飼料，料槽出現(xiàn)問(wèn)題要及時(shí)維修。定期淘汰長(zhǎng)期不吃食及患病不愈的豬。

3.2 加強(qiáng)人員管理豬場(chǎng)應(yīng)該定期對(duì)人員進(jìn)行防控知識(shí)培訓(xùn)，增強(qiáng)人員生物安全意識(shí)，落實(shí)防控規(guī)章，最好有專門生物安全員進(jìn)行監(jiān)督，防止出現(xiàn)不遵守生物安全制度的現(xiàn)象，可以設(shè)置獎(jiǎng)懲制度，對(duì)違反制度人員采取罰款等措施。規(guī)范生產(chǎn)區(qū)人員的操作，可通過(guò)生產(chǎn)區(qū)人員在采樣、消毒過(guò)程中拍攝視頻的方法來(lái)監(jiān)督，負(fù)責(zé)人員要及時(shí)指出存在的問(wèn)題，防止出現(xiàn)污染等情況。

3.3 保障水源安全豬場(chǎng)用水的消毒對(duì)防控非洲豬瘟也是至關(guān)重要的，豬場(chǎng)的水源一般為地下水或附近河水，這些水源一般情況下達(dá)不到生物安全標(biāo)準(zhǔn)，因此豬場(chǎng)在用水前需要消毒，一般采取漂白粉進(jìn)行殺菌消毒，除消毒外也可定期對(duì)水源檢測(cè)，以保障水源的安全。此外在水中添加酸化劑，可以促進(jìn)水中有益菌的生長(zhǎng)，預(yù)防豬腹瀉病的發(fā)生，從而提高豬群的抵抗力，防止非洲豬瘟的發(fā)生。

3.4 防止風(fēng)險(xiǎn)動(dòng)物進(jìn)入豬場(chǎng)非洲豬瘟病毒可以通過(guò)蜱蟲(chóng)傳播且蜱蟲(chóng)可寄生在多種動(dòng)物身上，因此豬場(chǎng)不但要防止蜱蟲(chóng)進(jìn)入，還要防止其他動(dòng)物如鳥(niǎo)、蚊蠅、鼠、野豬等的進(jìn)入。豬場(chǎng)大門與地距離不能超過(guò)1cm，必要情況下大門應(yīng)保持關(guān)閉狀態(tài)防止老鼠的進(jìn)入；豬場(chǎng)應(yīng)設(shè)置有圍墻，且墻上不要有缺口，若發(fā)現(xiàn)缺口應(yīng)立即維修，墻上也不應(yīng)有爬墻類的植物，以防止野生動(dòng)物或?qū)櫸锏倪M(jìn)入；豬場(chǎng)內(nèi)應(yīng)設(shè)置有防鳥(niǎo)網(wǎng)、防蟲(chóng)網(wǎng)，防止鳥(niǎo)類和蚊蟲(chóng)的進(jìn)入舍內(nèi)，并且定期進(jìn)行滅鼠、滅蟲(chóng)的措施。