牛羊檢疫技術(shù)要點

劉達輝

(山東省濟寧市泗水縣畜牧獸醫(yī)事業(yè)發(fā)展中心，山東 泗水 273200)

0 引言

隨著國內(nèi)畜牧業(yè)的不斷發(fā)展，牛羊養(yǎng)殖量也在不斷增加，但隨之而來的疫病問題也對養(yǎng)殖業(yè)造成嚴重困擾。在動物制品流通中，如果未能發(fā)現(xiàn)隱形患病動物，會加重疫情蔓延傳播。因此，在牛羊養(yǎng)殖中，應(yīng)當(dāng)加強牛羊檢疫工作，確定檢疫要點，保證各環(huán)節(jié)滿足檢疫質(zhì)量要求，方能保證市場流通的動物制品質(zhì)量合格。

1 牛羊檢疫工作流程

1.1 入場檢疫

牛羊進入屠宰場時須索取相關(guān)證明，包括運輸檢疫證明、檢疫合格證明、消毒證明。要檢查是否有免疫標識；核對有效期、證物等數(shù)據(jù)；對運載牛羊進行檢查，發(fā)現(xiàn)異常須隔離觀察，確診后按照相關(guān)規(guī)定妥善處理。

1.2 宰前檢疫

牛羊按照入場批次，分圈、分批開展檢查，包含“三態(tài)檢查”與逐頭測溫，觀察牛群安靜狀態(tài)下是否有異常表現(xiàn)，有無嗜睡、氣喘、咳嗽等病態(tài)，圈內(nèi)牛羊活動中，觀察其運動狀態(tài)，查看生理活動情況及前后順序。牛羊休息一段時間后，即可逐頭開展溫度檢查，羊正常體溫是38℃～39.5℃，牛正常體溫為37.5℃～39.5℃，對于疑似患病牛羊須進行臨床診斷，必要時開展實驗室診斷。

1.3 檢疫處理

牛羊檢疫合格后，符合法律要求即可屠宰，對于確診狂犬病、炭疽、牛痘、惡性水腫等亞傳染性疾病須撲殺后銷毀；牛羊患有一般傳染病，臨床表現(xiàn)急性器質(zhì)性疾病不明顯，需要急宰；牛羊確診一般傳染病及其他疫病，有治療價值，或是未能確診，需要緩宰。

1.4 宰后檢疫

牛羊確定健康后，屠宰后須使用實驗室診斷學(xué)知識、臨床病理解剖學(xué)知識對牛羊酮體開展疫病檢查，通過感官檢查，結(jié)合理化學(xué)、微生物學(xué)檢查方式，主要檢查腸胃、心、肝、脾、腎、酮體、頭部等部位。

2 牛羊檢疫技術(shù)要點

2.1 個體檢疫

2.1.1 牛個體檢疫

對牛開展個體檢疫，要根據(jù)其個體情況，采取針對性檢查。對牛只檢查進行時，需要嚴格檢查口蹄疫、藍舌病、牛傳染性鼻氣管炎、布魯氏菌病等疫病，要仔細觀察牛健康情況，查看牛的體表皮膚、體溫、心跳、脈搏等。牛只如果患有急性傳染病，通常會表現(xiàn)為蹄部、口腔黏膜產(chǎn)生水皰病變，體溫升高，不同傳染性疾病臨床癥狀差異也較大。例如牛乳房皮膚或少毛區(qū)域皮膚出現(xiàn)圓形皰疹，可能患有牛瘟；牛只鼻鏡龜裂、干燥，表現(xiàn)出顯著消化道特征，可能患有惡性卡他熱或瘋牛病。

2.1.2 羊個體檢疫

羊個體檢疫中，檢疫人員須注意藍舌病、口蹄疫、羊痘等，觀察羊的走路姿勢、體貌特征、被毛、體溫、排泄物等，查看個體進食、活動狀態(tài)的表現(xiàn)，如果個體進食過程中出現(xiàn)搶食情況，放牧中精神狀態(tài)良好，則表明羊只較為健康。羊體溫低于正常水平，表明羊可能貧血、營養(yǎng)不良或患有慢性消耗性疾病。通常羊患有疾病時呼吸頻率不穩(wěn)定，口腔會產(chǎn)生異味，羊鼻頭干燥，隨著病情加重，羊反應(yīng)能力也隨之降低，發(fā)生掉毛情況，代表羊處于亞健康狀態(tài)。不同疾病癥狀也有所差異，例如羊乳房、肢蹄內(nèi)側(cè)、尾巴出現(xiàn)膿包結(jié)痂，可能患有羊痘；羊走路姿勢不穩(wěn)，蹄子糜爛有水皰，可能患有羊蹄疫。

2.2 群體檢疫

2.2.1 牛群體檢疫

牛群體檢疫可分為動態(tài)檢疫、靜態(tài)檢疫、飲食檢疫3個環(huán)節(jié)。在靜態(tài)檢疫中，要檢查休息狀態(tài)的牛群，仔細觀察牛睡臥、站立姿勢，檢查牛的肛門及皮毛污染情況，通常健康牛體表皮膚有彈性、呼吸平順、嘴角干凈、毛發(fā)光亮，能夠正常排氣和噯氣。牛如果攜帶致病菌，局部皮膚將會腫脹緊張、噯氣消失、皮毛雜亂，肛門位置能夠觀察到諸多糞便，后軀位置污染嚴重。

動態(tài)檢疫中，牛達到養(yǎng)殖場后，在裝卸或放牧牛的過程中檢查牛群狀態(tài)，或是觀察驅(qū)趕狀態(tài)下牛群健康情況。該環(huán)節(jié)檢查要點在于牛行走精神狀態(tài)、站立姿勢。牛身體健康，則行走平穩(wěn)、雙眼有神、四肢有力、精力充沛；如果患有疾病，則無法行走，正常行走也會發(fā)生左搖右擺的情況，整體精神萎靡，無法敏銳察覺外界刺激。

飲食檢疫中，觀察牛群飲食和采食情況，實際觀察中，牛開展劇烈運動無顯著咳嗽情況，且表現(xiàn)得飲水正常、咀嚼有力，表明牛群身體健康；牛群如果飲水、采食或運動后咳嗽較為嚴重，表現(xiàn)出食欲差、精神萎靡癥狀，通?；加袀魅拘约膊?。

2.2.2 羊群體檢疫

羊群靜態(tài)檢疫中，需要羊群處于休息狀態(tài)，觀察羊的姿態(tài)，如果發(fā)現(xiàn)部分羊只采食后臥地姿態(tài)異常，或無法正常臥地，存在顯著呼吸不順暢、呼吸急促情況，表明羊可能患有疾病。羊如果呼吸平順，被毛整潔，有人走近時羊群反應(yīng)機敏，能夠立即站立，表明羊較為健康。部分患病羊表現(xiàn)為呆立圈舍、精神萎靡、離群獨居，對外界刺激無顯著反應(yīng)。經(jīng)過嚴格觀察，可發(fā)現(xiàn)羊鼻腔、口腔干燥，伴有磨牙、咳嗽癥狀，呼吸急促，肛門附著諸多污染物，即可判定羊患有傳染性疾病，須開展個體檢疫，根據(jù)病情加以處理。

羊群動態(tài)檢疫需要在羊群飲食、放牧?xí)r實施，觀察羊群精神狀態(tài)、飲水情況、生產(chǎn)情況等，如果羊群采食飲水出現(xiàn)爭搶，放牧?xí)r行走輕快，喝水積極、精神飽滿，即可判定羊群身體健康。而部分羊患有傳染病后，會表現(xiàn)出無法正常采食、食欲不振、飲水不積極等情況，則可判定羊群存在傳染疾病。

2.3 病原學(xué)檢查

病原學(xué)檢查是針對未屠宰的牛羊的檢疫方式。需要先采集牛羊血液，將其送至實驗室做好檢查工作，查看血液是否存在導(dǎo)致牛羊發(fā)生疫病的毒素、細菌、病菌等，檢疫中應(yīng)當(dāng)將血樣涂片放在顯微鏡下觀測，部分血樣則需要進行細菌培養(yǎng)；有的血樣需要開展血清凝血試驗、沉淀反應(yīng)、免疫標記等，獲得最終結(jié)果后，方能判定牛羊體內(nèi)是否存在致病細菌。

2.4 血清學(xué)檢疫

血清學(xué)檢疫是指使用試劑盒、試劑卡，利用毛血管虹吸作用，從牛羊耳垂取血，毛細管內(nèi)血管吸血量達到100 μL刻度，將其從毛細管添加至測試卡白色和粉色墊頂部，注意每滴血吸收后，添加第二滴，出血不暢則管尖輕輕按在墊子上，墊子粉紅色浸透血清后關(guān)閉測試卡，1～2 min墊子仍未浸透血清，添加1滴試劑，開始計時，觀察測試結(jié)果。例如在布魯氏桿菌病檢疫中，可采取該方法，牛羊布魯氏桿菌病多表現(xiàn)為隱性或慢性感染，有2周至6個月的潛伏期，母牛癥狀在妊娠6～8個月時易造成流產(chǎn)，表現(xiàn)出陰唇與乳房腫大、黏膜紅腫的癥狀，母牛流產(chǎn)后還會出現(xiàn)子宮內(nèi)膜炎、胎衣停滯，陰道流出有惡臭味、紅褐色分泌物，公牛表現(xiàn)為關(guān)節(jié)炎、關(guān)節(jié)腫脹、睪丸炎、配種能力降低等，屬于慢性疾病，疾病會持續(xù)多年。檢疫通常是利用變態(tài)反應(yīng)和血清學(xué)檢查。

變態(tài)反應(yīng)檢查適合檢疫大群動物，檢測中將布魯氏桿菌水解素，將0.2～0.3 mL量注射至牛羊尾根部位，或是肘關(guān)節(jié)無毛的皮肉位置，完成注射后進行24～48 h的觀察，發(fā)生紅腫代表變態(tài)反應(yīng)為陽性，能夠斷定牛羊感染，選用變態(tài)反應(yīng)法可提高檢出率，結(jié)果更加準確，注射水解素不會生成抗體，對血清學(xué)檢查不會造成影響，廣泛用于臨床。

而血清學(xué)檢查可分為兩種，一種是利用已知抗體檢查病料，查看是否存在布魯氏桿菌抗原，通常采取反向間接凝集試驗、熒光抗體技術(shù)、免疫組化法、間接碳凝集試驗等；另一種是通過感染已知抗原檢測后7～15 d，檢查可疑病畜體內(nèi)，是否有高滴度抗體，利用ELLSA、抗原抗體凝集試驗等方式檢查。

2.5 癥狀檢疫

牛羊癥狀檢疫主要是觀察牛羊群是否存在異常表現(xiàn)，包括精神形態(tài)、營養(yǎng)攝入、活動狀態(tài)等，分析臨床癥狀，確定疫病情況。例如小反芻獸疫是由小反芻獸疫病毒引發(fā)的傳染病，發(fā)病后會造成大規(guī)模感染，為副黏病毒科，化學(xué)物理特性類似于牛瘟病毒，該病毒為球體，核衣殼是中空桿狀，存在囊膜，相比其他病毒，抵抗能力弱，無論是強酸、強堿、高溫環(huán)境均無法正常生存，維持50℃的環(huán)境1 h即可滅活病毒，或是設(shè)置強堿性、強酸性環(huán)境滅活。

該病毒宿主多為綿羊和山羊，牛、豬等也可能攜帶小反芻獸疫病毒，能夠使牛羊細胞病變，生成合胞體，通過排泄物、分泌物排出病毒，須及時清理。按照檢疫實踐，將其分為溫和型與急性型2種，患溫和型多為成年羊，急性型致死率則較高，無有效治療方案。檢疫診斷中，主要采取血清學(xué)試驗和醫(yī)學(xué)臨床診斷的方式，能夠區(qū)分小反芻獸疫病和其他病癥，減少檢測時間，確保檢測方向，以免疫情擴散傳播。血清學(xué)試驗準確性較高，檢疫疫病應(yīng)用廣泛，由于小反芻獸疫危害較大，確診后需要及時撲殺患病牛羊，該病癥診斷要求十分嚴格，采取競爭酶聯(lián)免疫吸附試驗方式采集病料，保證無菌條件下采集羊只血液，分離血清完成疫病檢驗。

2.6 宰后檢疫

宰后牛羊檢疫中，需要做好頭部檢查、腸胃檢查、內(nèi)臟檢查及酮體檢查工作。其中，頭部檢查是觀察牛羊的齒齦、唇，注意是否有潰瘍斑、水皰，上下頜骨狀態(tài)正常與否，剖檢咽喉內(nèi)側(cè)淋巴結(jié)、扁桃體、咽喉黏膜等是否存在異常，剖開內(nèi)外側(cè)咬肌，查看是否有囊尾蚴；腸胃檢查是檢查牛羊食道是否有住肉孢子蟲，檢查胃腸系黏膜、腸系膜淋巴結(jié)、漿膜，查看是否有腸型炭疽；內(nèi)臟檢查是牛羊開膛后，觀察脾臟大小、形態(tài)、色澤，查看是否有變色、腫脹，觸摸彈性，判斷是否感染牛肺疫、布病或炭疽；心肝肺檢查中，查看是否變性腫大，切開肺部組織，查看是否有肺絲蟲病、肺結(jié)核，剖檢食管檢查有無住肉孢子蟲，剖檢心臟查看有無囊尾蚴、虎斑心，注意肝臟的結(jié)節(jié)、壞死、腫脹等情況；酮體檢查是觀察整體肌肉色澤，確定放血狀態(tài)，檢查關(guān)節(jié)、骨骼、腱鞘狀態(tài)等，依次剖檢腹股溝淋巴結(jié)、頸前淋巴結(jié)，剖檢深腹肌。例如牛羊口蹄疫病原體是口蹄疫病毒，在羊、牛動物中均可能發(fā)生，發(fā)病速度快、傳染力強，情況嚴重可能造成動物死亡。幼年期牛羊易感染口蹄疫，死亡率較高，無固定發(fā)病時間，任何時間均可能發(fā)生，冬、春季發(fā)病率高，通過動物消化道、呼吸道感染，有1～7 d潛伏期，發(fā)現(xiàn)不及時會引發(fā)大面積感染，危害性較大。當(dāng)牛羊患有口蹄疫后，蹄部和口腔黏膜會有水皰出現(xiàn)，甚至?xí)斐商悴俊⒖诓繚兓蚋癄€，引發(fā)前胃心肌發(fā)炎或小腸黏膜發(fā)炎。口蹄疫作為檢疫重點，檢疫工作中可對死亡牛羊進行剖檢，咽喉與氣管部位有諸多爛斑存在，伴有多種炎癥，牛羊病情嚴重會在心肌位置生成白色條紋。

3 牛羊檢疫技術(shù)分析

3.1 菌群對比法

該方法依賴大數(shù)據(jù)，測定牛羊健康狀態(tài)下的不同生長時期瘤胃微生物菌群種類結(jié)構(gòu)，進行整體數(shù)據(jù)匯總后，數(shù)據(jù)即可成為健康動物檢疫參考標準，牛羊患有細菌性消化道疾病后，微生態(tài)菌群種類、結(jié)構(gòu)必定會產(chǎn)生變化，通過對比菌群結(jié)構(gòu)，即可迅速判斷牛羊感染菌株種類、疾病類型等，哪種增加數(shù)量明顯菌種，即為感染致病菌，分離保存?zhèn)溆?。致病菌菌株保存后，通常會用于藥敏?shù)據(jù)測定，利用試管法或紙片法，能夠測定分離菌株相應(yīng)的敏感藥物，選擇敏感抗生素完成治療。

還可采取縱橫向藥敏數(shù)據(jù)對比的方式，對牛羊菌株耐藥變化進行判斷，便于調(diào)整用藥模式，避免出現(xiàn)耐藥情況。并且，能夠擴大培養(yǎng)致病菌株，通過化學(xué)或物理方式滅活，制備免疫健康羊，及時控制疫情。例如沙門氏菌感染多體現(xiàn)于牛羊腸道，生殖道也會出現(xiàn)感染情況，檢疫過程中，沙門氏菌可能和大腸桿菌混淆，必須采取生化檢測方式，合理區(qū)分兩者，檢疫人員可使用鑒別培養(yǎng)基方式檢測，主要是大腸桿菌可發(fā)酵生成乳糖，沙門氏菌卻不會發(fā)酵。因此，在麥康凱培養(yǎng)基中，大腸桿菌菌落呈現(xiàn)粉紅色，沙門氏菌菌落為無色狀態(tài)，沙門氏菌代謝時，還會生成硫化氫，遇到亞鐵離子將會生成黑色沉淀物，也可利用三糖鐵培養(yǎng)基區(qū)分兩者，根據(jù)不同生化反應(yīng)現(xiàn)象區(qū)分大腸桿菌和沙門氏菌，有助于準確判斷牛羊病情。

3.2 分子生物學(xué)法

測定基因序列對比基因庫內(nèi)致病微生物序列，重合度相同，代表分離菌株是致病性微生物，代表分離菌株屬于致病性微生物，相反為非致病性。該方法結(jié)果較為準確直觀，但需要構(gòu)建龐大基因數(shù)據(jù)庫，現(xiàn)有數(shù)據(jù)庫不夠完善，仍存在錯誤概率，需要后期大量實驗進行修改和補充，僅能作為參考。

4 結(jié)語

牛羊養(yǎng)殖業(yè)作為我國畜牧業(yè)重要部分，養(yǎng)殖過程中必須做好疫病預(yù)防工作，結(jié)合實際發(fā)展情況開展針對性防控，以免患病牛羊流入市場，危害人類健康。因此，牛羊檢疫中，應(yīng)按照入場檢疫、宰前檢疫、檢疫處理、宰后檢疫的流程，合理采取個體檢疫、群體檢疫、病原學(xué)檢查等方式，做好檢疫工作，確定牛羊患病情況，方能保證肉制品質(zhì)量安全，提高養(yǎng)殖戶經(jīng)濟效益，從而推動畜牧業(yè)實現(xiàn)綠色、健康發(fā)展。