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    丙型肝炎流行病學(xué)的臨床檢驗(yàn)研究進(jìn)展

    2022-11-25 08:18:09盧騰娟
    今日健康 2022年4期
    關(guān)鍵詞:丙肝化學(xué)發(fā)光膠體金

    盧騰娟

    鹿寨縣人民醫(yī)院 廣西 柳州 545600

    丙型肝炎(丙肝)是一種由丙型肝炎病毒引起的急性和慢性傳染病,人群普遍易感,且以丙型肝炎病毒陽性的人為主要傳染源,該病是一類嚴(yán)重危害人類健康的肝臟傳染病,且丙肝的傳播途徑較多,如血液、母嬰、性行為、器官移植等,然而因丙肝較乙肝的發(fā)病率低,人們對丙肝的重視度不夠[1]。丙型肝炎具有慢性化程度高、起病隱匿、傳播途徑明確的特點(diǎn),HCV感染會造成肝纖維化和慢性炎癥壞死,少數(shù)情況會發(fā)展為肝細(xì)胞癌或肝硬化,對患者生命健康產(chǎn)生威脅[2]。因此應(yīng)加強(qiáng)對丙肝的重視,盡早診斷并給予治療,以防疾病的惡性發(fā)展。目前臨床中暫無特效疫苗,主要進(jìn)行抗病毒治療,具有較高的病毒清除率,因此,對丙肝進(jìn)行準(zhǔn)確檢驗(yàn)并盡早治療對維護(hù)患者健康十分重要。本文通過對丙肝病毒生物學(xué)特性、流行病發(fā)展現(xiàn)狀、臨床檢驗(yàn)技術(shù)及效果等進(jìn)行論述,詳細(xì)內(nèi)容如下。

    1.丙型肝炎病毒的生物學(xué)特性

    HCV是引起丙型肝炎的病原體,丙肝的形成與HCV病原的部分生物學(xué)特性存在一定關(guān)聯(lián)。HCV是RNA病毒,基因組是單股正鏈的RNA,可將其分為5'非編碼區(qū)、編碼區(qū)及3'非編碼區(qū),且由于HCV具有的高度變異性會對HCV的基因型產(chǎn)生影響,從而形成不同的基因型及基因亞型[3]。黃超群等[4]學(xué)者、戴俊斌等[5]學(xué)者通過進(jìn)行不同地區(qū)的HCV基因特征分析研究,發(fā)現(xiàn)HCV基因分型具有明顯的地域性,且HCV不同基因型與抗病毒治療效果有密切的關(guān)聯(lián),會對抗病毒治療的應(yīng)答、疾病轉(zhuǎn)歸等產(chǎn)生重要影響。

    2.丙型肝炎流行病學(xué)國內(nèi)外現(xiàn)狀

    目前丙型肝炎病毒感染已呈現(xiàn)世界性分布,嚴(yán)重影響人們的健康,且隨著HCV感染情況的加重,會誘發(fā)慢性肝炎、肝硬化、肝癌等不良后果,因此對丙型肝炎進(jìn)行早診斷、早預(yù)防顯得十分重要。丙肝在全世界流行,且不同國家及地域的流行狀況存在一定差異。相關(guān)研究資料表明,通過對捷克共和國的3000名成年人群進(jìn)行血清檢測,發(fā)現(xiàn)標(biāo)本中陽性率為1.67%、HCV RNA陽性率為0.93%,且經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)男性的陽性率明顯高于女性,另外在不同年齡段的陽性率也存在明顯區(qū)別[6]。另外吳護(hù)華[7]學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)在美國與歐洲供血者中抗-HCV流行率低,約為0.047%-1.2%。

    賈艷艷等[8]學(xué)者研究表明,我國丙型肝炎約占輸血后肝炎的60%-80%,丙型肝炎的感染率僅次于乙型肝炎。相關(guān)研究調(diào)查分析發(fā)現(xiàn),我國2004-2012年丙型肝炎發(fā)病率均呈逐年上升趨勢,發(fā)病率由3.03/10萬上升至14.96/10萬,可見丙型肝炎在我國具有較高的增長率,同時研究表明丙型肝炎無明顯季節(jié)性,但在我國有明顯的地區(qū)差異,且隨著年齡增加發(fā)病率呈現(xiàn)升高趨勢[9]。

    3.丙型肝炎的臨床檢驗(yàn)方法及原理

    目前丙肝的實(shí)驗(yàn)室診斷主要有酶聯(lián)免疫吸附法、膠體金免疫層析法、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法等,能夠通過對HCV抗體、RNA進(jìn)行檢查,從而做出疾病診斷,因此就常見的檢驗(yàn)方法及原理作出以下分析。

    3.1 酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)

    該方式是酶免疫測定技術(shù)中應(yīng)用最廣的技術(shù),主要是通過將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使抗體抗原反應(yīng)在固相載體表面進(jìn)行,并利用洗滌法將液相中的游離成分洗滌,最終酶作用于底物后會出現(xiàn)相應(yīng)的顯色反應(yīng),從而輔助進(jìn)行結(jié)果判斷,且顯色顏色的深淺與標(biāo)本中相應(yīng)抗體或抗原的量之間成正比。

    ELISA檢測主要通過相應(yīng)的試劑盒進(jìn)行,有研究表明,采用試劑盒檢測的效果較優(yōu),且該檢驗(yàn)方式對于免疫功能正常的丙型肝炎病毒-RNA陽性感染患者來說,具有高于99%的抗丙型肝炎病毒檢出率,因此在臨床中的應(yīng)用較多。ELISA檢測法具有價格低廉、檢測方便、敏感度高、標(biāo)記物來源豐富、無放射性污染等優(yōu)點(diǎn),在檢驗(yàn)診斷丙型肝炎中有重要作用[10]。但該檢驗(yàn)方式仍存在局限性,受多種因素的影響可能出現(xiàn)假陽性的結(jié)果,影響臨床診斷及后期治療,因此應(yīng)對相關(guān)風(fēng)險因素進(jìn)行規(guī)避,保證檢驗(yàn)效果的準(zhǔn)確性。陳連旺[11]學(xué)者在研究中指出,由于受到檢測設(shè)備及試劑的多樣化、規(guī)?;纫蛩氐挠绊?,不同生產(chǎn)廠家的試劑對同一項(xiàng)目的檢測結(jié)果也可能會出現(xiàn)偏差情況,從而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室各種血清指標(biāo)的檢測結(jié)果存在一定差異。曾艷華等[12]學(xué)者針對上述問題展開不同試劑對檢測結(jié)果的影響研究,發(fā)現(xiàn)不同檢測系統(tǒng)在檢驗(yàn)丙型肝炎中不存在明顯的差異,對于疾病的診斷均有重要價值,但定性試驗(yàn)中Cut-off值存在一定差異,主要與不同試劑和有關(guān),因此造成檢驗(yàn)結(jié)果的差異。

    臨床中關(guān)于ELISA檢驗(yàn)丙型肝炎抗體的研究較多,其中余燕兒等[13]學(xué)者對ELISA檢測的可行性進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn),應(yīng)用ELISA檢驗(yàn)法能夠獲得較為理想的丙型肝炎抗體檢測結(jié)果,對于提高丙型肝炎診斷準(zhǔn)確性有重要作用,且對患者后期臨床治療有積極效果。

    3.2 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法

    化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法是一種標(biāo)記抗體與被測抗原同時與包被抗體結(jié)合的反應(yīng)形式,主要是通過利用磁性微珠被磁場吸引的原理,在磁場作用下能夠發(fā)生力學(xué)移動,從而迅速捕捉到被測抗原。在進(jìn)行丙型肝炎病毒檢測時,血清標(biāo)本中的抗原與磁性抗體形成復(fù)合物,在磁力作用下快速進(jìn)行復(fù)合物及其他非特異性物質(zhì)的分離效果,再經(jīng)洗滌去掉未結(jié)合的抗體后加入發(fā)光底物,最終各類光子能量被計算機(jī)捕捉記錄并進(jìn)行分析,從而獲取標(biāo)本中的抗體含量?;瘜W(xué)發(fā)光酶免疫分析法雖與ELISA檢測法存在一定的相似性,但前者檢測中所用的包被載體為具有更大表面積的磁性顆粒,能夠在磁力作用下快速下沉,從而便于洗滌和分離,有利于縮短反應(yīng)周期且有效提高了分離效果,使得最大光信號峰值的時間更短,檢測靈敏度更高,因此在檢測丙型肝炎中具有重要作用[14]。

    化學(xué)發(fā)光酶免疫法是利用化學(xué)發(fā)光劑直接標(biāo)記抗原或抗體,通過啟動發(fā)光實(shí)際作用而發(fā)光,該方式具有反應(yīng)簡單、快速、無需催化劑的優(yōu)點(diǎn)。劉天堯[15]研究通過對110例丙型肝炎病毒抗體的患者進(jìn)行化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法及酶聯(lián)免疫吸附法,對比發(fā)現(xiàn)前者檢測陽性率明顯高于后者,且前者對相關(guān)抗體檢測的結(jié)果明顯高于后者,結(jié)果可知上述兩種檢測方法在進(jìn)行丙型肝炎病毒初篩檢測時的效果無明顯差異,但比較發(fā)現(xiàn)酶聯(lián)免疫吸附法的特異性較好,而化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法的靈敏度較高。

    3.3 膠體金免疫層析法

    膠體金免疫層析法作為一種新式檢驗(yàn),具有操作簡便、觀察直觀、不需要特殊設(shè)備、經(jīng)濟(jì)、檢測時間短的優(yōu)點(diǎn),該方式主要是通過將膠體金作為標(biāo)志物,依據(jù)層析作用來進(jìn)行抗原、抗體反應(yīng)的檢測,目前在臨床中應(yīng)用較廣,能夠?qū)Ρ透窝撞《究贵w進(jìn)行有效篩查,從而為疾病診斷提供準(zhǔn)確的依據(jù)。有關(guān)研究通過對比膠體金免疫層析法與酶免疫吸附法,兩種方式的檢測結(jié)果及時間比較發(fā)現(xiàn),兩組在丙型肝炎病毒抗體的檢出率上無明顯差異,但膠體金免疫層析法的檢測時間較酶免疫吸附法短,可見兩種檢測方式均對丙型肝炎病毒有較優(yōu)的檢出率,臨床中可根據(jù)實(shí)際情況選擇相應(yīng)的檢測方式,對于標(biāo)本量大、有時間要求的情況可優(yōu)先選擇膠體金免疫層析法,能夠迅速、準(zhǔn)確的進(jìn)行疾病篩查[16]。

    4.小結(jié)

    丙型肝炎在我國具有較高的發(fā)生率,且疾病可經(jīng)血液、母嬰等方式進(jìn)行傳播,加之丙型肝炎的臨床癥狀并不明顯,患病后人們不容易發(fā)現(xiàn),因此對丙型肝炎的關(guān)注度明顯低于乙型肝炎,因此對丙型肝炎的篩查及診斷不重視,隨著病毒不斷加重對人體的損害,會導(dǎo)致其他相關(guān)嚴(yán)重后果,威脅人們的健康及安全,因此應(yīng)預(yù)防性地進(jìn)行疾病臨床檢驗(yàn),可及時發(fā)現(xiàn)疾病并盡早展開治療,從而獲得較優(yōu)的預(yù)后。臨床檢驗(yàn)的方式較多,均能夠?qū)Ρ透窝撞《具M(jìn)行有效的篩查,但各類方式存在一定的局限性或不足,因此在進(jìn)行臨床檢驗(yàn)時需嚴(yán)格按照規(guī)范操作進(jìn)行,根據(jù)檢驗(yàn)時的實(shí)際情況選擇檢驗(yàn)方式,規(guī)避其他因素對檢驗(yàn)結(jié)果造成的影響。另外可選擇進(jìn)行聯(lián)合檢驗(yàn),能夠彌補(bǔ)檢驗(yàn)中的局限性,從而提升檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性,對患者及臨床工作均有積極意義。

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