南極磷蝦活性肽的研究進(jìn)展

張 倫，駱鑫鑫，王 斌，趙玉勤

（浙江海洋大學(xué)食品與藥學(xué)學(xué)院，浙江舟山 316022）

肽（peptides）是20 種天然氨基酸通過不同組成和排列方式構(gòu)成的，從二肽到線性或環(huán)形結(jié)構(gòu)的多肽的總稱，并且把能夠在人體內(nèi)發(fā)揮生理功能具有活性的多肽稱為活性肽?；钚噪钠浞肿咏Y(jié)構(gòu)都具有特殊的組成結(jié)構(gòu)，不同的組成結(jié)構(gòu)決定了其特有的活性功能，如抗氧化肽，抑菌肽、抗疲勞肽、降壓肽、免疫活性肽等[1-6]。人工獲得肽的方法有多種，主要有微生物發(fā)酵法、酸法、堿法、電法、人工嫁接法、基因表達(dá)法、酶解法等。酶解法就是用生物酶催化蛋白質(zhì)水解獲得的肽。酶法較酸法、堿法、電法溫和、環(huán)保，并且具有生產(chǎn)工藝簡易，投資少、見效快，適宜工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)。

南極磷蝦Euphausia superba 屬于節(jié)肢動(dòng)物門，甲殼綱，磷蝦目，是棲息于南大洋中的甲殼類生物，成體長約40～60 mm，群棲生活，密度達(dá)每立方米10 000～30 000 只，總蘊(yùn)藏質(zhì)量為（3.42～5.36）×108t[7]，是地球上多細(xì)胞動(dòng)物中生物數(shù)量最大、繁衍最成功的單種生物資源之一，是整個(gè)南極生態(tài)系統(tǒng)中能量和物質(zhì)流動(dòng)的基礎(chǔ)環(huán)節(jié)[7-8]，并且南極磷蝦的可持續(xù)捕撈量可達(dá)世界現(xiàn)有漁業(yè)總產(chǎn)量的1 倍以上，是人類重要的動(dòng)物蛋白資源庫，具有巨大的開發(fā)和應(yīng)用潛力[8]。通過對(duì)南極磷蝦的營養(yǎng)成分分析，其肌肉中含有約78%的蛋白質(zhì)，8%的脂肪，27%的脂肪，含有18 種常見氨基酸，其中包括8 種人體必需氨基酸（essential aminoacid，EAA），其中必需氨基酸含量為25.88%，18 種水解氨基酸中，谷氨酸含量最高10.90%，賴氨酸含量次之5.93%，其余含量較高的還有丙氨酸、亮氨酸。同時(shí)富含多種微量元素及EPA 和DHA 等n-3 多不飽和脂肪酸[9]。因此，近年來南極磷蝦研究已成為食品科學(xué)、營養(yǎng)學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)等學(xué)科的熱點(diǎn)之一，為開發(fā)南極磷蝦活性肽作為醫(yī)療保健產(chǎn)品和藥品提供了理論依據(jù)。

1 南極磷蝦活性肽的開發(fā)工藝

南極磷蝦蛋白資源開發(fā)具有巨大的發(fā)展空間，但是阻礙其產(chǎn)業(yè)化發(fā)展的重要的因素之一是南極磷蝦由于其自身體內(nèi)蛋白酶系統(tǒng)的特點(diǎn)，在其死后短時(shí)間內(nèi)蛋白品質(zhì)及營養(yǎng)價(jià)值的會(huì)迅速降低[9]。有研究指出，0～5 ℃條件下，南極磷蝦在15 h 后品質(zhì)會(huì)產(chǎn)生變化，基本失去利用價(jià)值；20 ℃條件下，南極磷蝦在8 h后品質(zhì)會(huì)產(chǎn)生變化，基本失去利用價(jià)值[10]。因此，急需發(fā)展對(duì)南極磷蝦蛋白資源進(jìn)行優(yōu)化利用和高值化加工的新的思路與技術(shù)，近年來通過添加外源酶水解蛋白制備生物活性肽的是其中有效途徑，成為新的研究熱點(diǎn)[11]。

由于化學(xué)水解法其反應(yīng)條件過于劇烈導(dǎo)致氨基酸結(jié)構(gòu)受損嚴(yán)重，從而很少被用于制備活性肽。目前關(guān)于南極磷蝦肽的制備，多采用生物酶法在最適條件下對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行降解得到具備生物活性的二肽、寡肽、多肽等；研究證明，分子質(zhì)量小于1 kDa 的短肽，更易被人體吸收利用[12]，而酶解后的殘?jiān)梢曰厥绽?，安全無害，可用于食品工業(yè)生產(chǎn)，實(shí)現(xiàn)資源的高效利用。

李明杰等[13]通過正交試驗(yàn)優(yōu)化了南極磷蝦活性肽的提取條件，確定了木瓜蛋白酶水解南極磷蝦蛋白在最佳料液比、加酶量、酶解溫度、酶解pH 以及酶解時(shí)間等工藝條件下，水解度可達(dá)24.7%。經(jīng)噴霧干燥后，所獲得活性多肽具有良好的自由基清除能力。吉薇等[14]采用動(dòng)物蛋白水解酶酶解南極磷蝦，優(yōu)化溫度、反應(yīng)時(shí)間、pH、酶添加量等酶解工藝，依據(jù)中心組合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原理，在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，運(yùn)用4 因素3水平的響應(yīng)面分析法，建立二次多項(xiàng)式數(shù)學(xué)模型，并以DPP-IV 抑制率為響應(yīng)值作響應(yīng)面篩選最佳生物酶解工藝。劉云姣等[15]以南極磷蝦蛋白酶解液中的氨基氮含量為指標(biāo)，采用甲醛電位滴定法測(cè)定堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶、胃蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶6 種生物酶在其各自的最適條件下對(duì)南極磷蝦蛋白酶解效果，篩選出酶解南極磷蝦蛋白最佳生物酶。在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，通過三因素三水平Box-Bohnken 響應(yīng)面分析法對(duì)篩選出來的生物酶解工藝進(jìn)行優(yōu)化。進(jìn)一步在優(yōu)化酶解工藝的基礎(chǔ)上，利用SDS-PAGE 凝膠電泳方法分析南極磷蝦酶解蛋白肽及南極磷蝦蛋白的分子量分布范圍。通過模型分析得最佳條件：酶解溫度44.48 ℃、酶解時(shí)間8.52 h、pH 7.88，通過電泳分析得到南極磷蝦蛋白胰蛋白酶解多肽分子量在25 kDa 以下，主要分子量分布在5 kDa 以下。高穎等[16]建立了從脫脂磷蝦粉中高效提取低氟蛋白質(zhì)的工藝，并在此基礎(chǔ)上研究了經(jīng)過不同蛋白酶水解后南極磷蝦肽的體外功能活性。研究確定了3 種低氟磷蝦肽的制備工藝，蛋白回收率均高于70%，并且蛋白含量高于90%，灰分含量均低于7.0%，氟含量低于15 mg·kg-1，分子量在200～2 000 Da 范圍之間，必需氨基酸含量高，堿性蛋白酶水解肽和中性蛋白酶水解肽在分子量分布、氨基酸組成及二級(jí)結(jié)構(gòu)方面一致性較高，并且二者的ACE 抑制作用顯著優(yōu)于胰蛋白酶水解肽；但胰蛋白酶水解肽的抗氧化性顯著高于中性蛋白酶水解肽和堿性蛋白酶水解肽。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)3 種磷蝦活性肽的體外活性與其分子量大小、氨基酸組成和二級(jí)結(jié)構(gòu)具有較高相關(guān)性。

2 南極磷蝦活性肽的研究

2.1 抗氧化肽

抗氧化劑通過清除自由基引發(fā)劑或中間產(chǎn)物、清除單態(tài)氧自由基、鈍化金屬催化劑等途徑干擾氧化反應(yīng)，目前由于合成抗氧化劑存在潛在的安全隱患，對(duì)人體的組織器官可能產(chǎn)生一定的副作用，因此作為無毒副作用風(fēng)險(xiǎn)的蛋白酶解抗氧化肽具備廣闊的開發(fā)利用潛力。同時(shí)抗氧化肽還具有多肽產(chǎn)品的營養(yǎng)和保健作用，可以提高機(jī)體抗衰老、抗疾病能力。研究表明，許多動(dòng)植物的水解蛋白和氨基酸都具有抗氧化活性[15-16]。

海洋生物活性肽主要通過清除體內(nèi)活性氧和自由基或干擾氧化鏈?zhǔn)椒磻?yīng)來抑制氧化損傷[16]。有文獻(xiàn)報(bào)道，分子量在3～10 kDa 的磷蝦多肽清除自由基能力強(qiáng)于天然抗氧化劑維生素E[13]。王繼宏[17]以南極磷蝦蛋白為實(shí)驗(yàn)材料，發(fā)現(xiàn)使用胰蛋白酶-中性蛋白酶復(fù)合酶解，時(shí)間為6 h 時(shí)得到多肽抗氧化活性最好，其DPPH·、超氧陰離子，羥基自由基的清除率分別為72.7%、11.5%、84.8%。通過將南極磷蝦蛋白酶解物分級(jí)分離成分子量不同的5 個(gè)組分，CPH I（10 kDa）、CPHⅡ（5～10 kDa）、CPH Ⅲ（3～5 kDa）、CPH Ⅳ（0.5～3 kDa）和CPH V（0.5 kDa）。5～10 kDa 的南極磷蝦多肽抗氧化活性最好。張?jiān)萚18]發(fā)現(xiàn)以清除超氧陰離子、羥自由基和DPPH 的能力為指標(biāo)木瓜蛋白酶水解制備的多肽抗氧化活性比較好，并用響應(yīng)面法優(yōu)化木瓜蛋白酶水解南極磷蝦制備多肽的工藝參數(shù)，采用凝膠電泳顯示該多肽有3 個(gè)明顯條帶，其分子量大多位于3～7 kDa。張風(fēng)等[19]以凡納濱對(duì)蝦Litopenaeus vannamei 蝦頭、蝦殼為原料，堿法提取蛋白質(zhì)后，采用不同的蛋白酶（胃蛋白酶、胰蛋白酶、堿性蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶、木瓜蛋白酶）酶解，以抗氧化活性和水解度為指標(biāo)，篩選最佳水解用酶，并對(duì)該酶的酶解條件進(jìn)行優(yōu)化，對(duì)優(yōu)化所得酶解物的抗氧化活性進(jìn)行初步研究。結(jié)果表明，風(fēng)味蛋白酶為最佳水解用酶，蝦頭蝦殼蛋白質(zhì)水解制備抗氧化肽的最佳工藝條件為：溫度54 ℃、時(shí)間10.5 h、pH8、加酶量8 000 U·g-1，此條件下5 mg·mL-1該酶解物的DPPH 自由基清除率為82.09%，為相同濃度下維生素C 抗氧化活性的90.50%，0.5 mg·mL-1時(shí)氧化自由基吸收能力為126.16 μmol·L-1，相當(dāng)于相同濃度VC 活性的79.73%。

2.2 抑菌肽

抑菌肽是自然界中天然存在的一類生物活性肽，具有分子量小、活性強(qiáng)、熱穩(wěn)定性好，抗菌譜廣、抗菌機(jī)理獨(dú)特且不易產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點(diǎn)，廣泛存在于各類動(dòng)植物和微生物中,是天然免疫系統(tǒng)的重要組成部分。抑菌肽一般具有抗細(xì)菌或真菌的作用，有些還具有抗原蟲、病毒或癌細(xì)胞的功能，而對(duì)正常細(xì)胞影響較小，因此成為近年來國內(nèi)外抗生素替代品的研發(fā)熱點(diǎn)[20]。

人類首次提取的天然抗菌肽是HULTMARK，et al[21]從北美天蠶蛹Hyalophora cecropia 的免疫血淋巴中提取出P9A 抗菌肽和P9B 抗菌肽；DESTOUMIEUX，et al[22]從凡納濱對(duì)蝦血細(xì)胞中分離出對(duì)蝦肽penaeidin（pen-1、pen-2、pen-3），并通過對(duì)penaeidin 基因表達(dá)和肽分布的分析，發(fā)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌有很強(qiáng)的抑制作用，還具有廣譜抗真菌活性。天然抑菌肽通常是由12～60 個(gè)氨基酸組成的小肽，由于其N-末端富含賴氨酸、精氨酸和組氨酸等陽離子型氨基酸,抗菌肽通常帶有正電荷，等電點(diǎn)大于7，表現(xiàn)出較強(qiáng)陽離子特征。

南極磷蝦抑菌肽的制備通常采用復(fù)合酶酶解南極磷蝦，并對(duì)酶解多肽進(jìn)行多肽含量及分子量分布測(cè)定及抑菌活性檢測(cè)，趙玲等[23]發(fā)現(xiàn)南極磷蝦酶解多肽的含量可達(dá)81.44%，相對(duì)分子質(zhì)量范圍為254～10 000 Da；并采用濾紙片法通過測(cè)定對(duì)枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis、金黃色葡萄球菌Staphylococcus aureus、大腸桿菌Escherichia coli、四聯(lián)微球菌Micrococcus tetragenus、啤酒酵母Saccharomyces cerevisiae 和副溶血性弧菌Vibrio parahaemolyticus 6 種菌的抑菌活性，得出酶解多肽對(duì)金黃色葡萄球菌有明顯的抑菌活性，且組分Ⅲ的抑菌效果明顯優(yōu)于其他組分。但是由于所獲得南極磷蝦抑菌肽分子量較小，增加了在產(chǎn)業(yè)化中分離純化的難度，因此進(jìn)一步發(fā)展其高效的分離純化技術(shù)具有重要的意義。趙玲[24]通過中性蛋白酶和胰蛋白酶雙酶在溫度50 ℃，水解時(shí)間3 h，雙酶加酶量之比2：5，雙酶添加量3 000 U·g-1底物條件下水解制備南極磷蝦抑菌活性肽混合物，采用小型切向流超濾系統(tǒng)、超濾杯和陽離子交換層析初步純化得到一個(gè)分子量范圍在254～709 Da 的混合肽（CMCC-1，其最低抑菌濃度為5 mg·mL-1）并推測(cè)南極磷蝦抑菌肽對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制作用是通過破壞菌體細(xì)胞壁和細(xì)胞膜，改變了細(xì)胞膜的通透性，導(dǎo)致大量胞內(nèi)物質(zhì)外泄，從而引起菌體死亡。

2.3 金屬螯合肽

金屬螯合肽是指能與金屬離子發(fā)生螯合作用，并促進(jìn)機(jī)體對(duì)所需金屬元素的吸收，或其能夠通過與鐵離子、銅離子的結(jié)合從而阻斷自由基的生成，實(shí)現(xiàn)其抗氧化活性的活性肽[25-26]。研究發(fā)現(xiàn)金屬螯合肽可通過肽的吸收途徑被人體所吸收，從而增加金屬離子的吸收利用率，而且相對(duì)于氨基酸金屬元素螯合物具有更高的配合率和穩(wěn)定性，具有很高的開發(fā)價(jià)值和廣闊的應(yīng)用前景。

近幾年，有關(guān)酶解法制備金屬螯合肽的研究主要集中在多肽酶解工藝優(yōu)化等方面，汪嬋等[27]發(fā)現(xiàn)在一定范圍內(nèi)金屬螯合率與水解度呈正相關(guān)性,在底物質(zhì)量濃度5%，酶添加濃度20 U·g-1底物，水解時(shí)間5 h的酶解條件下產(chǎn)物的金屬螯合率最強(qiáng)，與Fe2＋的螯合率為90.9%，與Zn2＋的螯合率為93.5%。WU Haohao，et al[28]以鳳尾魚Engraulis japonicus 肌肉蛋白為原料制備多肽亞鐵螯合物，發(fā)現(xiàn)胰蛋白酶水解物具有最大的鐵螯合活性，水解度和鐵螯合條件對(duì)鐵螯合活性有很大的影響。REN Zhangyan，et al[29]研究了以蝦加工廢棄物為原料制備多肽亞鐵螯合物的酶解工藝，從6 種酶中篩選試驗(yàn)得出胰蛋白酶為最適酶，并利用響應(yīng)面法優(yōu)化得到最佳酶解工藝：酶添加量500 U·mL-1，pH 8.18，酶解時(shí)間120 min。李同剛等[30]以羅非魚Oreochromis mossambicus 下腳料為原料，通過正交試驗(yàn)優(yōu)化中性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的復(fù)合酶解條件，對(duì)酶解液進(jìn)行超濾,比較不同超濾組分的螯合效果,發(fā)現(xiàn)在復(fù)合酶水解條件為溫度55 ℃、加酶量1 500 U·g-1底物、雙酶加酶量之比1∶2、料液比1∶4、自然pH 條件下時(shí)水解度為14.43%，酶解液的螯合率為77.92%，其超濾組分中，10 kDa 以下組分的螯合效果最好，螯合率達(dá)到89.36%，1 kDa 以下組分的螯合率較低為61.45%。何晨[31]通過單酶篩選，得出南極磷蝦胰蛋白酶水解肽的金屬離子結(jié)合能力最強(qiáng)，采用響應(yīng)面分析最佳工藝條件：酶解時(shí)間為3 h，液料比為11.3∶1，酶添加量為3%，發(fā)現(xiàn)南極磷蝦肽具有顯著的金屬離子（Zn2+、Fe2+、Zn2+）結(jié)合活性，并且與金屬離子結(jié)合的能力：Ca2+＜Fe2+＜Zn2+，其中南極磷蝦肽與Fe2+和Zn2+之間表現(xiàn)為特異性結(jié)合，而其與Ca2+之間的表現(xiàn)為非特異性結(jié)合。

2.4 降壓肽

血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶（ACE）可以將無活性的惰性前肽血管緊張素Ⅰ（ATⅠ）轉(zhuǎn)化成具有很強(qiáng)升壓作用的血管緊張素Ⅱ（ATⅡ），并促進(jìn)血管舒緩激肽降解，從而導(dǎo)致血壓升高，故可通過抑制血管緊張素轉(zhuǎn)化酶的活性來發(fā)揮降血壓作用，但常見的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑（ACEI）（卡托普利、西拉普利、賴諾普利等）存在易誘發(fā)過敏等不良反應(yīng)，限制了其臨床應(yīng)用，而研究發(fā)現(xiàn)食源性降壓肽的作用更為溫和、安全，近年來成為研究的熱點(diǎn)[32-33]。

目前，從水產(chǎn)品中酶解提取降壓肽也受到越來越多的關(guān)注，F(xiàn)AHMI，et al[34]用堿性蛋白酶酶解海鯛Sparus sarba 魚鱗，發(fā)現(xiàn)其酶解產(chǎn)物ACE 抑制活性IC50值為0.57 mg·mL-1，采用色譜法分離出4 個(gè)具有高ACE 抑制活性的肽，其ACE 抑制活性是未純化酶解產(chǎn)物的5～20 倍，4 條ACE 抑制肽的氨基酸序列分別為Gly-Tyr、Val-Tyr、Gly-Phe 和Val-Ile-Tyr。陳季旺等[35]研究發(fā)現(xiàn)所制備魚降壓肽經(jīng)DA201-C 型大孔吸附樹脂處理后其灰分由13.89%下降到3.89%，ACE 抑制活性由64.35%增到95.00%，脫鹽后的魚降壓肽分子質(zhì)量分布范圍在200～7 000 Da 之間。張朋等[36]以血管緊張素轉(zhuǎn)換酶（ACE）抑制率為指標(biāo)，通過正交試驗(yàn)L9（34）確定堿性蛋白酶（alcalase）對(duì)金槍魚Katsuwonus pelamis 碎肉蛋白的最佳酶解條件，利用D101 大孔樹脂建立了酶解物的脫鹽工藝，利用超濾、葡聚糖凝膠（G-25）色譜和反相-高效液相色譜（RP-HPLC）分離降壓肽，并確定其純度，利用氨基酸序列分析和ESI-MS 鑒定純化多肽的結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明，堿性蛋白酶酶解金槍魚碎肉蛋白制備降壓肽的最佳酶解條件是：pH 9.5，酶用量1.5%，酶解溫度50 ℃，酶解時(shí)間5 h；酶解物經(jīng)超濾和Sephadex G-25 分離獲得1 個(gè)純度較高的四肽，經(jīng)氨基酸序列分析和ESI-MS 鑒定結(jié)構(gòu)為Phe-Gly-Gly-Val（FGGV）。經(jīng)鑒定，利用堿性蛋白酶酶解并經(jīng)超濾和色譜技術(shù)制備的金槍魚碎肉蛋白降壓肽具有良好的ACE 抑制活性。任艷等[37]通過建立體外測(cè)定ACE 抑制活性的分析方法，發(fā)現(xiàn)胰蛋白酶酶解南極磷蝦蛋白制備ACE 抑制肽的最優(yōu)條件為：初始pH 7.66，溫度37.5 ℃，酶解時(shí)間5.05 h，加酶量0.15%（w/w），并通過超濾膜分離不同分子量片段，活性最強(qiáng)的ACE 抑制肽的分子量處于1～2 kDa 之間。王彥超等[38]發(fā)現(xiàn)南極磷蝦經(jīng)堿性蛋白酶和中性蛋白酶的酶解產(chǎn)物具有較好的ACE 抑制活性，IC50值為0.180 mg·mL-1和0.210 mg·mL-1。趙玉勤等[39]采用超濾和色譜法從南極磷蝦蛋白水解物中分離出8 種降壓肽，并通過測(cè)序確定了它們的結(jié)構(gòu)，其中Trp-Phe 和Phe-Ala-Ser 對(duì)ACE 抑制作用的IC50值分別為0.32、0.15 mg·mL-1。此外，Trp-Phe、Tyr-Arg-Lys、Phe-Gln-Lys 和Phe-Ala-Ser 還可以增加人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）內(nèi)一氧化氮（NO）濃度，降低培養(yǎng)基中內(nèi)皮素-1（ET-1）的含量，糾正去甲腎上腺素誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙，并呈劑量依賴性相關(guān)。

2.5 免疫活性肽

免疫活性肽包括細(xì)胞因子,還有來源于植物和動(dòng)物及微生物的免疫誘導(dǎo)肽，是指一類存在于生物體內(nèi)具有免疫功能的多肽,可調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能，提高機(jī)體的免疫力[40]，以其相對(duì)分子低、活性強(qiáng)、用量少、穩(wěn)定性強(qiáng)、生物活性高的獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，越來越多地引起人們的重視。

目前，通過酶解工藝從天然蛋白中獲得免疫活性肽也逐漸成為當(dāng)前食品和醫(yī)藥行業(yè)的研究熱點(diǎn)。JOLLES，et al[41]首次利用胰蛋白酶水解人乳蛋白,從水解產(chǎn)物中分離得到一種免疫刺激肽。此外，許多研究表明乳蛋白酶解物及分離純化后的短肽對(duì)人體免疫組織器官的生長發(fā)育和促進(jìn)淋巴細(xì)胞的活性等方面有重要作用[42]。侯虎等[43]研究比較了各因素（溫度、pH、吸附物濃度、料液比等）對(duì)樹脂吸附鱈魚排活性肽特性的影響。通過動(dòng)態(tài)吸附與解析實(shí)驗(yàn),探討了DA201-C 樹脂對(duì)鱈魚排活性肽脫鹽的可行性。結(jié)果表明，DA201-C 樹脂對(duì)鱈魚排活性肽吸附能力最強(qiáng),在溫度25 ℃、pH 4.0、溶液濃度10 mg·mL-1、料液比（樹脂質(zhì)量與活性肽體積比）2 g·mL-1的條件下,吸附率最高為84.7%。在動(dòng)態(tài)吸附解析實(shí)驗(yàn)中，多肽的脫鹽率為98.1%，回收率為90.3%.且脫鹽后的多肽具有促進(jìn)脾細(xì)胞增殖活性且呈現(xiàn)明顯劑量依賴關(guān)系。徐愷等[44]采用木瓜蛋白酶（酶量為3 000 U·g-1）制備南極磷蝦活性肽，相對(duì)分子質(zhì)量＜10 000 Da。進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)通過連續(xù)給小鼠灌胃不同劑量南極磷蝦活性肽28 d，發(fā)現(xiàn)小鼠的脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)、NK 細(xì)胞活性、抗體生成細(xì)胞數(shù)和血清溶血素等水平有明顯提高，并且發(fā)現(xiàn)南極磷蝦活性肽能夠顯著增加小鼠的存活時(shí)間、耗氧量和游泳時(shí)間；提高LDH、肝糖原含量、LA 清除率和肝臟、脾臟重量；降低LA 和BUN 含量，根據(jù)《保健食品功能學(xué)評(píng)價(jià)程序和檢測(cè)方法》可以確定南極磷蝦活性肽具有顯著提高小鼠免疫力的功效[44]。

3 結(jié)語

南極磷蝦資源無論在種類和數(shù)量上均極為豐富，然而到目前為止尚未得到充分與科學(xué)的開發(fā)，這就為人類更為充分利用南極磷蝦資源，生產(chǎn)出更能滿足人類需要的產(chǎn)品提供了新的機(jī)遇。隨著人們對(duì)海洋生物資源開發(fā)認(rèn)識(shí)地提高，以及現(xiàn)代生物技術(shù)在海洋活性肽等研究領(lǐng)域中的應(yīng)用，相信在不久的將來，南極磷蝦活性肽的開發(fā)與應(yīng)用將為海洋資源綜合利用開辟新的廣闊的道路。