基于古籍文獻(xiàn)挖掘和網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的《圣濟(jì)總錄·口齒門(mén)》揩齒方用藥規(guī)律及其核心方抗炎機(jī)制探析

武鳳震,劉菁,3,朱敏敏,王振國(guó)

(1.山東中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)文獻(xiàn)與文化研究院,山東 濟(jì)南 250355;2.山東中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥經(jīng)典理論教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,山東 濟(jì)南 250355;3.山東中醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校,山東 煙臺(tái) 264199;4.山東中醫(yī)藥大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院,山東 濟(jì)南 250014)

《圣濟(jì)總錄》又名《政和圣濟(jì)總錄》,是北宋政府征集民間所獻(xiàn)處方并結(jié)合內(nèi)府所藏醫(yī)書(shū)整理編纂而成,全書(shū)共二百卷,載方近二萬(wàn)首[1],以醫(yī)方為主,兼及醫(yī)學(xué)理論,內(nèi)容豐富,集宋及宋以前醫(yī)學(xué)之大成,對(duì)現(xiàn)代中醫(yī)各科疾病的治療具有重要的指導(dǎo)意義[2]?！妒?jì)總錄》第一百一十七卷至一百二十一卷為口齒門(mén),口齒門(mén)中記載的方劑多以外用為主,具有簡(jiǎn)便效廉的特色?？X法是為了達(dá)到養(yǎng)生保健或治療疾病的目的,采用揩齒方來(lái)擦洗牙齒的一種外治療法[3]。有學(xué)者認(rèn)為揩齒法是我國(guó)古代的一種刷牙方法[4],揩齒方可認(rèn)為是現(xiàn)代中藥牙膏的前身[5],《圣濟(jì)總錄·口齒門(mén)》中的揩齒方主要用來(lái)治療齒齦類疾病?？邶X門(mén)共記載牙齒歷蠹、牙齒疼痛等15種齒齦類疾病,其中11種齒齦類疾病的病因與風(fēng)邪有關(guān),3種齒齦類疾病的病因與腎氣虛弱有關(guān),1種齒齦類疾病的病因是嗜肥甘過(guò)多、臟腑壅滯、宿食在齒根[1]1173-1194,由此可知風(fēng)邪是齒齦類疾病的重要病因?，F(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)認(rèn)為炎癥與齒齦類疾病關(guān)系密切[6]。

數(shù)據(jù)挖掘技術(shù)是從海量的數(shù)據(jù)中,提取隱含在其中的信息和知識(shí)的過(guò)程[7],是中醫(yī)藥在保持自身獨(dú)特性的基礎(chǔ)上贏得廣泛認(rèn)同的重要手段,可以為中醫(yī)藥理論的科學(xué)解釋提供有力的證據(jù)[8]。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是運(yùn)用高通量篩選、網(wǎng)絡(luò)可視化等技術(shù)揭示藥物、靶點(diǎn)、疾病之間復(fù)雜的生物網(wǎng)絡(luò)關(guān)系,分析藥物的藥理學(xué)機(jī)制的研究方法[9]。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)可以從整體來(lái)預(yù)測(cè)藥物治療疾病的作用機(jī)制,這與中藥復(fù)方多成分、多靶點(diǎn)的作用機(jī)制類似,符合中醫(yī)整體觀的原則[10]。本研究利用數(shù)據(jù)挖掘技術(shù)對(duì)《圣濟(jì)總錄·口齒門(mén)》揩齒方進(jìn)行描述性統(tǒng)計(jì)分析、高頻藥對(duì)與藥組分析、核心方發(fā)現(xiàn)分析,同時(shí)利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)技術(shù)分析由數(shù)據(jù)挖掘得到的核心方抗炎的分子機(jī)制(圖1)。希望對(duì)于齒齦類疾病的臨床治療、外用藥和中藥牙膏的研發(fā)提供理論支持和數(shù)據(jù)支撐。

圖1 研究流程圖

1 資料與方法

1.1 數(shù)據(jù)來(lái)源

收集整理《圣濟(jì)總錄·口齒門(mén)》中的揩齒方,利用Excel 2019建立《圣濟(jì)總錄·口齒門(mén)》揩齒方分析表。錄入包括編號(hào)、名稱、來(lái)源、主治、藥物組成、制備方法、用法用量等在內(nèi)的方劑信息,剔除重復(fù)出現(xiàn)的數(shù)據(jù),共得102首揩齒方。

1.2 數(shù)據(jù)規(guī)范化處理

對(duì)方劑數(shù)據(jù)進(jìn)行規(guī)范化處理可清除方劑數(shù)據(jù)中的噪聲,提高數(shù)據(jù)挖掘的質(zhì)量。本研究以《中華人民共和國(guó)藥典》[11]以及《中藥大辭典》[12]中記載的中藥正名為標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范方劑中藥物名稱,將藥物的異名、別名規(guī)范為正名。如:蓽撥規(guī)范為蓽茇,芎規(guī)范為川芎,馬牙消規(guī)范為芒硝。

1.3 數(shù)據(jù)挖掘分析

通過(guò)IBM SPSS Statistics 20的描述性統(tǒng)計(jì)功能對(duì)方劑的主治、藥物組成等信息進(jìn)行頻數(shù)、頻率、累積頻率統(tǒng)計(jì)。利用R語(yǔ)言進(jìn)行數(shù)據(jù)挖掘,運(yùn)用Apriori算法對(duì)方劑中的藥物進(jìn)行高頻藥對(duì)與藥組分析、核心方發(fā)現(xiàn)分析。

1.4 核心方活性成分篩選與靶點(diǎn)預(yù)測(cè)

通過(guò)TCMSP[13]、TCMID[14]、ETCM[15]數(shù)據(jù)庫(kù)收集核心方的化學(xué)成分,同時(shí)通過(guò)檢索CNKI、維普、萬(wàn)方、PubMed、Web of Science中的相關(guān)文獻(xiàn)補(bǔ)充數(shù)據(jù)庫(kù)中未收錄的化學(xué)成分,進(jìn)行整合去重得到核心方的初始化學(xué)成分。

利用TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)收集到的初始化學(xué)成分進(jìn)行篩選,篩選條件為口服生物利用度(Oral bioavailability,OB)≥30%、類藥性(Drug-likeness,DL)≥0.18[16]。將篩選出來(lái)的化學(xué)成分作為核心方的活性成分。運(yùn)用SwissTargetPrediction[17]與TCMSP對(duì)活性成分的作用靶點(diǎn)進(jìn)行預(yù)測(cè)。

1.5 炎癥相關(guān)靶點(diǎn)篩選

以“Inflammation”為關(guān)鍵詞,檢索GeneCards[18]、DRUGBANK[19]、OMIM[20]、TTD[21]疾病基因數(shù)據(jù)庫(kù),將結(jié)果合并后刪除重復(fù)值并利用Uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)[22]將所得靶點(diǎn)進(jìn)行規(guī)范化處理,獲得炎癥相關(guān)靶點(diǎn)。

1.6 核心方干預(yù)炎癥潛在作用靶點(diǎn)獲取

使用bioinformatics平臺(tái)(http://www.bioinformatics.com.cn/)jvenn[23]模塊對(duì)核心方靶點(diǎn)和炎癥相關(guān)靶點(diǎn)繪制韋恩圖,所獲得的交集靶點(diǎn)即為核心方抗炎的潛在作用靶點(diǎn)。

1.7 PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

利用STRING11.5[24]構(gòu)建蛋白質(zhì)互作(Protein-proteininteraction,PPI)網(wǎng)絡(luò)。將上述交集靶點(diǎn)分別導(dǎo)入STRING11.5內(nèi),選擇物種為“智人”,設(shè)置“最低交互值”為0.4,獲得PPI網(wǎng)絡(luò)關(guān)系,并通過(guò)CytoScape3.7.2軟件[25]制作PPI網(wǎng)絡(luò)圖。得到PPI網(wǎng)絡(luò)圖后,應(yīng)用Network analysiser功能計(jì)算Degree值。

1.8 GO功能富集和KEGG通路分析

將核心方干預(yù)炎癥的潛在作用靶點(diǎn)導(dǎo)入Metascape平臺(tái)[26]進(jìn)行生物信息富集分析,包括GO分析的生物過(guò)程(Biological process,BP)、分子功能(Molecular function,MF)和細(xì)胞成分(Cellular component,CC)以及基因組百科全書(shū)(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析。設(shè)置物種為“智人”,顯著性水平設(shè)置為P<0.01,分析完畢后,選取排名前10位的GO功能和排名前20位的KEGG通路,保存其結(jié)果并通過(guò)Bioinformatics平臺(tái)進(jìn)行可視化。

1.9 “成分-靶點(diǎn)-通路”網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

將核心方干預(yù)炎癥的活性成分信息、潛在作用靶點(diǎn)信息、評(píng)分排名前20的KEGG通路信息輸入Cytoscape 3.7.2軟件,構(gòu)建核心方干預(yù)炎癥的“成分-靶點(diǎn)-通路”網(wǎng)絡(luò),使用NetworkAnalyzer分析工具分析網(wǎng)絡(luò)特征,包括連接度(Degree)、介度(Betweenness)及緊密度(Closenesss)等,并根據(jù)網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)參數(shù)判斷核心方抗炎的主要活性成分。

2 結(jié)果

2.1 描述性分析結(jié)果

2.1.1 方劑主治頻數(shù)、頻率分析 納入分析的102首揩齒方中主治疾病共有15種,其中頻次≥10的有牙齒黃黑、齒龂宣露、牙齒動(dòng)搖等3種(表1),經(jīng)分析可知,揩齒方主治疾病以齒齦類疾病為主。

表1 揩齒方主治疾病

2.1.2 藥物頻數(shù)、頻率分析 納入分析的102首揩齒方中共包括藥物76種,藥物出現(xiàn)頻數(shù)總計(jì)634次,每首揩齒方平均含有6～7種藥物。頻數(shù)≥5的藥物共有33種,其累積頻率達(dá)到65.32%(表2),這些藥物被定義為高頻藥物。

表2 使用頻數(shù)超過(guò)5的藥物

2.2 關(guān)聯(lián)規(guī)則分析結(jié)果

2.2.1 高頻藥對(duì)與藥組分析 關(guān)聯(lián)規(guī)則可以從大量的數(shù)據(jù)中發(fā)現(xiàn)事物之間隱含的聯(lián)系,反映了事物之間的相互依賴和關(guān)聯(lián)的程度,是中醫(yī)藥數(shù)據(jù)挖掘分析中的經(jīng)典方法。運(yùn)用R語(yǔ)言對(duì)揩齒方進(jìn)行挖掘,調(diào)用Apriori算法對(duì)揩齒方的藥物進(jìn)行關(guān)聯(lián)規(guī)則分析,設(shè)置參數(shù):支持度(Support)≥6%,置信度(Confidence)≥80%,提升度(Lift)≥1,共獲得46條關(guān)聯(lián)規(guī)則(表3)。利用ArulesViz程序包對(duì)關(guān)聯(lián)規(guī)則分析結(jié)果進(jìn)行可視化操作,繪出關(guān)聯(lián)規(guī)則氣泡圖(圖2)。

表3 揩齒方數(shù)據(jù)關(guān)聯(lián)規(guī)則分析表

圖2 關(guān)聯(lián)規(guī)則氣泡圖

2.2.2 基于Apriori算法的核心方劑發(fā)現(xiàn) 在高頻藥對(duì)與藥組分析的基礎(chǔ)上,分別設(shè)置支持度為7%、9%、11%,進(jìn)行揩齒方核心方劑發(fā)現(xiàn)分析,并繪制關(guān)聯(lián)規(guī)則可視化圖(圖3)。

圖3 核心方劑分析圖

經(jīng)分析可知,隨著支持度的提高,外圍藥物逐漸減少,當(dāng)支持度為11%時(shí),獲得藥物組成為升麻、白芷、細(xì)辛、藁本的核心方。

2.3 核心方活性成分篩選與靶點(diǎn)預(yù)測(cè)結(jié)果

通過(guò)多數(shù)據(jù)庫(kù)聯(lián)合分析,共篩選出核心方50個(gè)活性成分(表4)。運(yùn)用Swiss Target Prediction與TCMSP對(duì)活性成分的作用靶點(diǎn)進(jìn)行預(yù)測(cè),將靶點(diǎn)預(yù)測(cè)結(jié)果合并后剔除重復(fù)值,共獲得814個(gè)靶點(diǎn)。

表4 核心方活性成分

2.4 炎癥相關(guān)靶點(diǎn)篩選結(jié)果

檢索GeneCards、DRUGBANK、OMIM、TTD疾病基因數(shù)據(jù)庫(kù),得到炎癥相關(guān)靶點(diǎn)個(gè)數(shù)分別為424、119、108、10,合并去除重復(fù)值后得到610個(gè)靶點(diǎn)。

2.5 核心方干預(yù)炎癥潛在作用靶點(diǎn)獲取

將炎癥相關(guān)的610個(gè)靶點(diǎn)與篩選得到的814個(gè)核心方對(duì)應(yīng)靶點(diǎn)取交集,共獲得178個(gè)共同靶點(diǎn)(圖4)。

圖4 藥物靶點(diǎn)與疾病靶點(diǎn)韋恩圖

2.6 PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

將178個(gè)交集靶點(diǎn)導(dǎo)入String11.0數(shù)據(jù)庫(kù)獲得PPI網(wǎng)絡(luò)信息,將PPI網(wǎng)絡(luò)中蛋白質(zhì)交互信息導(dǎo)入Cytoscape3.7.2進(jìn)行可視化分析(圖5),得到PPI網(wǎng)絡(luò)后,應(yīng)用其中的Network Analysiser功能計(jì)算Degree值。Degree值排名前10靶點(diǎn)有TNF、IL6、AKT1、GAPDH、VEGFA、TLR4、IL10、SRC、STAT3、CXCL8,這些靶點(diǎn)的Degree值分別為123、114、104、97、94、91、89、88、87、87。這些靶點(diǎn)是中心靶點(diǎn),在PPI網(wǎng)絡(luò)中處于中心位置,是連接其他靶點(diǎn)的紐帶。

圖5 藥物-疾病靶點(diǎn)PPI網(wǎng)絡(luò)

2.7 GO功能富集和KEGG通路分析

用Metascape平臺(tái)對(duì)核心方抗炎的178個(gè)潛在靶點(diǎn)進(jìn)行GO分析與KEGG通路富集分析。經(jīng)過(guò)分析,共得到2 206條GO富集分析結(jié)果,其中包括1 894條生物過(guò)程分析結(jié)果、98條細(xì)胞成分分析結(jié)果、214條分子功能分析結(jié)果。選取排名前10位的GO功能保存其結(jié)果并通過(guò)Bioinformatics平臺(tái)進(jìn)行可視化(圖6)。由圖片6可知涉及的生物過(guò)程主要有炎癥反應(yīng)、細(xì)胞因子產(chǎn)生的正調(diào)節(jié)、對(duì)細(xì)菌源性分子的反應(yīng)、對(duì)脂多糖的反應(yīng)、對(duì)細(xì)菌的反應(yīng)等。相關(guān)的細(xì)胞成分主要有膜筏、膜微區(qū)、膜的側(cè)面、質(zhì)膜外側(cè)、囊泡腔等。涉及的分子功能主要有蛋白質(zhì)絲氨酸/蘇氨酸/酪氨酸激酶活性、蛋白激酶活性、磷酸轉(zhuǎn)移酶活性醇基受體、激酶活性、血紅素結(jié)合等。

圖6 GO功能富集分析

KEGG分析共得到188條結(jié)果,選擇排名前20位的KEGG通路信息輸入并通過(guò)Bioinformatics平臺(tái)進(jìn)行可視化操作(圖7)。由圖7可知涉及KEGG通路主要有脂質(zhì)與動(dòng)脈粥樣硬化、癌癥、卡波西肉瘤相關(guān)皰疹病毒感染、糖尿病并發(fā)癥中的AGE-RAGE信號(hào)通路、冠狀病毒病(COVID-19)等。

圖7 KEGG功能富集分析

2.8 “成分-靶點(diǎn)-通路”網(wǎng)絡(luò)分析結(jié)果

運(yùn)用CytoScape3.7.2構(gòu)建核心方抗炎的“成分-靶點(diǎn)-通路”網(wǎng)絡(luò)圖(圖8),并通過(guò)其內(nèi)置工具分析網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)參數(shù),得到核心成分及核心作用靶點(diǎn)。圖中六邊形節(jié)點(diǎn)代表核心方的活性成分,菱形節(jié)點(diǎn)代表潛在活性靶點(diǎn),V形節(jié)點(diǎn)代表潛在信號(hào)通路,連線代表各節(jié)點(diǎn)之間的相互作用;圖中節(jié)點(diǎn)面積越大、顏色越深表明其網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)參數(shù)越高,該節(jié)點(diǎn)在網(wǎng)絡(luò)中發(fā)揮的作用越大。網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)參數(shù)排名前5的活性成分包括山柰酚(Kaempferol)、24-epi-小升麻醇(24-epi-Acerinol)、白芷醇(Byakangelicol)、2-亞油酸甘油(2-Linoleoylglycerol)、隱品堿(Cryptopine)。這些活性成分可能在核心方抗炎過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用。網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)參數(shù)排名前5的靶點(diǎn)包括PTGS2、PIK3CA、MAPK8、PIK3CD、MAPK14。這些靶點(diǎn)可能是核心方抗炎的關(guān)鍵靶點(diǎn)。

圖8 “成分-靶點(diǎn)-通路”網(wǎng)絡(luò)圖

3 討論

3.1 揩齒方總體用藥探討

揩齒方多用風(fēng)藥、香藥、礦物藥,使用頻率較高的風(fēng)藥有細(xì)辛、升麻、白芷、藁本;使用頻率較高香藥有麝香、沉香、丁香、甘松;使用頻率較高的礦物藥有大青鹽、寒水石、白礬、石膏。風(fēng)藥為味薄質(zhì)輕,性升浮發(fā)散,具有風(fēng)木屬性,主要用以治療風(fēng)邪所致疾病的藥物。風(fēng)邪是齒齦疾病的重要致病因素,如《圣濟(jì)總錄·口齒門(mén)》中論述齒龂宣露的病因是氣血不足,揩理無(wú)方,風(fēng)邪襲虛,客于齒間,則令肌寒血弱,龂肉縮落,漸至宣露,永不附著齒根[1]1188;齒風(fēng)腫痛的病因是手陽(yáng)明經(jīng)虛,風(fēng)客其脈,流注齒間[1]1181。風(fēng)藥味辛質(zhì)輕,有升散、托舉、透達(dá)之功,可散邪透表祛風(fēng),對(duì)于由風(fēng)邪引起的口齒病具有很好的治療作用。香藥是具有揮發(fā)性,用于醫(yī)療衛(wèi)生和配制香料食品的含有芳香成分的天然藥物[27]。香藥具有芳香理氣、通絡(luò)止痛、去腐避穢的作用。香藥在揩齒方中多發(fā)揮芳香除臭,通絡(luò)止痛的功效?？X方中的礦物藥多為寒涼藥物,具有清熱瀉火的作用,主要針對(duì)由熱邪引發(fā)的口齒疾病。值得注意的是礦物藥中大青鹽應(yīng)用比較廣泛,大青鹽味咸,性寒,歸心、腎、膀胱經(jīng),具有涼血瀉熱的功效。我國(guó)自古有用鹽清潔牙齒治療齒疾的傳統(tǒng)[28],《備急千金要方》記載每旦以一捻鹽納口中,以暖水含,揩齒及叩齒百遍,為之不絕,不過(guò)五日即牢密[29]。

3.2 揩齒方藥物配伍規(guī)律及機(jī)制淺析

經(jīng)高頻藥對(duì)與藥組分析得到的8個(gè)藥對(duì)和38個(gè)藥組共包含升麻、細(xì)辛、藁本、白芷、寒水石、丁香、沉香、甘草、川芎、朱砂、白石英等11種藥物。以上絕大多數(shù)藥對(duì)與藥組是由風(fēng)藥與風(fēng)藥相配伍，風(fēng)藥與香藥相配伍，風(fēng)藥與礦物藥相配伍，風(fēng)藥、香藥、礦物藥三者相配伍而成。以上結(jié)果表明揩齒方在治療齒齦類疾患時(shí)注重運(yùn)用風(fēng)藥以發(fā)散風(fēng)邪、升陽(yáng)散火,同時(shí)運(yùn)用礦物藥和香藥以清熱瀉火、芳香除臭、通絡(luò)止痛,這符合中醫(yī)整體觀和辨證施治的原則。根據(jù)藥物七情配伍的原則進(jìn)行分析,可將以上46條關(guān)聯(lián)規(guī)則劃分為兩大類。第一類是同類相從,即把具有相同功效的藥物合用,使藥物的療效增強(qiáng),如風(fēng)藥與風(fēng)藥相配伍。第二種是異類相使,兩個(gè)或兩個(gè)以上功用不同的藥物相互配伍,各取所長(zhǎng),可增強(qiáng)藥物的總體療效。如風(fēng)藥配伍香藥，風(fēng)藥配伍礦物藥。利用Apriori算法進(jìn)行核心方分析,獲得了藥物組成為升麻、白芷、細(xì)辛、藁本的核心方,核心方長(zhǎng)于祛風(fēng)止痛,升麻、白芷、細(xì)辛、藁本均為風(fēng)藥,可發(fā)散風(fēng)邪,通絡(luò)止痛?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究證實(shí),升麻可減少細(xì)胞因子的生成,減輕炎癥反應(yīng)[30];白芷和細(xì)辛均具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗菌等多種作用[31-32];藁本具有抗炎、解熱、鎮(zhèn)痛作用[33];故核心方對(duì)于齒齦類疾病有很好的調(diào)治作用。

3.3 核心方抗炎機(jī)制分析

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為炎癥與齒齦類疾病關(guān)系密切,故本研究利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法對(duì)挖掘出的核心方抗炎機(jī)制進(jìn)行分析。研究篩選出山柰酚、白芷醇等核心方抗炎的重要活性成分。山柰酚是一種天然黃酮醇,具有抗炎活性,該成分可以調(diào)節(jié)磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)等與炎癥有關(guān)的靶點(diǎn)的表達(dá)進(jìn)而抑制炎癥細(xì)胞功能、抑制促炎細(xì)胞因子和趨化因子表達(dá)[34]。NF-κB是細(xì)胞內(nèi)重要的核轉(zhuǎn)錄因子,它參與機(jī)體的炎癥反應(yīng),從白芷中分離得到的白芷醇能通過(guò)抑制NF-B的活性、抑制COX-2表達(dá)和COX-2酶的活性進(jìn)而發(fā)揮抗炎的作用[35]。根據(jù)“成分-靶點(diǎn)-通路”網(wǎng)絡(luò)發(fā)現(xiàn)PTGS2、PIK3CA、MAPK8、PIK3CD、MAPK14等為核心方抗炎的關(guān)鍵靶點(diǎn)。由PTGS2基因編碼的前列腺素合酶COX-2在干預(yù)炎癥中起著關(guān)鍵的作用[36]。有研究表明MAPKK/MAPK蛋白可以調(diào)節(jié)NF-κB信號(hào)通路促進(jìn)抗炎因子的產(chǎn)生[37]。KEGG分析結(jié)果表明核心方抗炎的通路主要有脂質(zhì)與動(dòng)脈粥樣硬化[38]、癌癥[39]、卡波西肉瘤相關(guān)皰疹病毒感染[40]、糖尿病并發(fā)癥中的AGE-RAGE信號(hào)通路[41]、冠狀病毒病(COVID-19)[42]等,研究證實(shí)這些疾病通路均與炎癥相關(guān)。故核心方中的山柰酚、白芷醇等關(guān)鍵活性成分可通過(guò)作用于PTGS2、PIK3CA、MAPK8等多個(gè)靶點(diǎn)影響脂質(zhì)與動(dòng)脈粥樣硬化、癌癥、卡波西肉瘤相關(guān)皰疹病毒感染等多條通路起到抗炎的作用。

4 總結(jié)

《圣濟(jì)總錄·口齒門(mén)》中揩齒方注重祛風(fēng)止痛、芳香除臭、清熱瀉火,遣方用藥符合齒齦類疾病的病因病機(jī)。在描述性統(tǒng)計(jì)分析得到高頻藥物中風(fēng)藥占有很大的比例;由關(guān)聯(lián)規(guī)則分析得到的藥對(duì)與藥組基本上都包含風(fēng)藥;關(guān)聯(lián)規(guī)則分析發(fā)現(xiàn)了藥物組成為升麻、白芷、細(xì)辛、藁本的核心方,此四位藥物均為風(fēng)藥;由此可發(fā)現(xiàn)善用風(fēng)藥是揩齒方最顯著的特色。風(fēng)藥味薄質(zhì)輕,性升浮發(fā)散,具有風(fēng)木屬性,主要用以治療風(fēng)邪所致疾病的藥物,是中藥傳統(tǒng)分類中的一大類別。風(fēng)藥臨床應(yīng)用的歷史非常悠久,最早可以追溯到醫(yī)圣張仲景的《傷寒雜病論》[43],北宋時(shí)期風(fēng)藥已經(jīng)廣泛應(yīng)用于臨床各科[44]。風(fēng)邪是齒齦類疾病的重要病因,風(fēng)藥味辛性輕,升散竄透,升陽(yáng)散火,揩齒方中針對(duì)風(fēng)邪配伍使用風(fēng)藥符合齒齦類疾病的病因病機(jī),故在齒齦類疾病的臨床治療中、外用藥和中藥牙膏的研發(fā)中,應(yīng)特別注重風(fēng)藥的使用。

現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)認(rèn)為,炎癥與齒齦類疾病關(guān)系密切,故本研究利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法技術(shù)探究了核心方抗炎的分子機(jī)制。研究認(rèn)為山柰酚、白芷醇等成分是核心方抗炎重要活性成分,此類活性成分或可通過(guò)作用于PTGS2、PIK3CA、MAPK8、PIK3CD、MAPK14等多個(gè)靶點(diǎn)影響脂質(zhì)與動(dòng)脈粥樣硬化、癌癥、卡波西肉瘤相關(guān)皰疹病毒感染、糖尿病并發(fā)癥中的AGE-RAGE信號(hào)通路、冠狀病毒病-COVID-19等多條通路達(dá)到治療炎癥的目的,初步證實(shí)了核心方可以通過(guò)多成分、多靶點(diǎn)、調(diào)節(jié)多條生物通路抗炎的分子機(jī)制。