不同稀釋液對(duì)蛋種鴨受精率的影響

李成鳳，王瑩，屈元啟，汪強(qiáng)，李玲

（湖北神丹健康食品有限公司，湖北 孝感 432600）

由于種公鴨需要經(jīng)過適當(dāng)訓(xùn)練后才能采出精液且精液量較少，因此為了節(jié)省成本，滿足現(xiàn)代鴨群的生產(chǎn)，需要對(duì)原精液進(jìn)行稀釋后再進(jìn)行人工授精更好。在稀釋液加入不同的能源物質(zhì)和具有緩沖作用的弱有機(jī)鹽，不僅為精子在體外存活提供了必要的能量，而且能中和精子代謝過程中產(chǎn)生的有害物質(zhì)，延長(zhǎng)精子在體外的存活時(shí)間，提高種蛋的受精率[1]。過去，常見做法是用生理鹽水對(duì)精液進(jìn)行1:1稀釋后直接輸精，受精率相對(duì)較低。近年來(lái)很多學(xué)者對(duì)稀釋液進(jìn)行了較多研究，同時(shí)也發(fā)現(xiàn)稀釋比例1:1時(shí)對(duì)原精液進(jìn)行稀釋所獲得的受精率有提高趨勢(shì)。沈洪民等利用生理鹽水對(duì)番鴨公鴨的精液進(jìn)行1:1稀釋，平均受精率為73.8%[2]。喻婷等在騾鴨的人工授精中用生理鹽水對(duì)福建番鴨公鴨精液按照1:1稀釋對(duì)麗佳鴨母鴨輸精0.1 mL，種蛋平均受精率為54.28%[3]。林如龍等在使用不同稀釋液和稀釋比例對(duì)半番鴨受精率的影響研究中發(fā)現(xiàn)，相同稀釋比例的情況下自配稀釋液I（谷氨酸鈉1.65 g，檸檬酸鈉0.85 g，果糖0. 85 g，KCl 0.20 g，MgCl20.20 g， 青霉素8萬(wàn)～10萬(wàn)U，蒸餾水100 mL）的受精率（82.24%）要高于生理鹽水（76.85%）和自配稀釋液Ⅱ（77.12%）；相同的稀釋液對(duì)原精液按1:1進(jìn)行稀釋的種蛋授精率（82.30%）最高[4]。段元彬等利用四種不同的稀釋液（生理鹽水、單糖添加量為1 g的1號(hào)稀釋液、單糖添加量為0.2 g的2號(hào)稀釋液、單糖添加量為1.4 g的3號(hào)稀釋液）以及三種不同的稀釋比例（2:1、1:1、1:2）對(duì)黑羽番鴨的原精液進(jìn)行稀釋，結(jié)果發(fā)現(xiàn)1號(hào)稀釋液對(duì)原精液1:1稀釋時(shí)的精子質(zhì)量以及受精率最高[5]。楊勝林等用蛋黃葡萄糖（蛋黃占比20%、5%的葡萄糖占比80%）、葡萄糖氯化鈉（生理鹽水占比50%、5%的葡萄糖占比50%）、5%葡萄糖和生理鹽水4種不同的稀釋液按照2:1的比例對(duì)公鴨原精液稀釋后進(jìn)行人工授精，不同稀釋液對(duì)受精率影響較大，其中以葡萄糖氯化鈉的效果最好（80.5%），其次為生理鹽水（70.8%）、5%葡萄糖（65.9%），最低為蛋黃葡萄糖（58.5%）[6]。辛清武等用自配液B（氯化鉀、氯化鎂、葡萄糖、檸檬酸鈉、谷氨酸鈉等）、生理鹽水、自配液A（葡萄糖、檸檬酸鈉、谷氨酸鈉等）對(duì)優(yōu)質(zhì)中型肉鴨精液1:1稀釋時(shí)，自配液B的受精率最高，為95.5%；自配液A的受精率為82.64%，生理鹽水的受精率為89.29%[7]。

本研究選用縉云麻鴨為研究對(duì)象，通過使用生理鹽水和自配稀釋液對(duì)精液進(jìn)行1:1稀釋，探究不同的精液稀釋液對(duì)蛋種鴨受精率影響，為生產(chǎn)中提高縉云蛋種鴨受精率和胚胎的生長(zhǎng)發(fā)育提供一定的參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)對(duì)象

試驗(yàn)選擇湖北神丹健康食品有限公司種鴨場(chǎng)的39周齡縉云公鴨90只和縉云母鴨720只。母鴨產(chǎn)蛋性能好、精神狀態(tài)好、腹部柔軟；公鴨精神狀態(tài)好，健康、有活力，發(fā)育良好，性反射好、精液質(zhì)量好。

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)鴨按照飼養(yǎng)管理規(guī)程進(jìn)行飼養(yǎng)，單籠養(yǎng)殖，飲水自由，每日自動(dòng)喂料2次，光照時(shí)間為白天8 h強(qiáng)光，晚上及其它時(shí)間弱光。試驗(yàn)前一周進(jìn)行采精訓(xùn)練，每隔一天采精一次。

1.3 人工授精方法

試驗(yàn)公鴨在采精前剪掉泄殖腔周圍的羽毛，以免影響采精。采精時(shí)間為上午9點(diǎn)左右。采精方法為背部按摩法，輸精方法為陰道口外翻法，輸精量為每只母鴨100 μL，輸精深度為4 cm，輸精間隔為4 d。

1.4 精液稀釋液配方

蔗糖4 g，葡萄糖1 g，醋酸鈉（分析純）1 g，碳酸氫鈉0.15 g，加蒸餾水溶解混勻定容至100 mL，pH控制在7.1。

1.5 試驗(yàn)分組

將720只母鴨分成2組，設(shè)為對(duì)照組和試驗(yàn)組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)120只。對(duì)照組，采用生理鹽水對(duì)精液進(jìn)行1:1稀釋；試驗(yàn)組，采用稀釋液對(duì)精液進(jìn)行1:1稀釋。對(duì)各組合格種蛋做好標(biāo)記，同時(shí)放入孵化機(jī)內(nèi)，孵化第6天照檢受精率，并觀察胚胎發(fā)育情況。

1.6 數(shù)據(jù)分析

使用SPSS分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，受精率平均值利用T檢驗(yàn)分析，以P<0.05為差異顯著判斷。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 不同稀釋液對(duì)受精率的影響

受精率數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)見表1。對(duì)照組受精率88.3%，試驗(yàn)組受精率93.8%，較對(duì)照組高5.5個(gè)百分點(diǎn)，且差異顯著，表明與生理鹽水相比，自配稀釋液能顯著提高種蛋受精率。

表1 受精率對(duì)比結(jié)果

2.2 胚胎發(fā)育第6天情況

試驗(yàn)組胚胎發(fā)育第6天，可看見明顯的胚體及血管，對(duì)照組的胚體及血管不明顯，發(fā)育較試驗(yàn)組慢。詳細(xì)見圖1、圖2。

圖1 對(duì)照組胚胎發(fā)育第6天的情況

圖2 試驗(yàn)組胚胎發(fā)育第6天的情況

3 結(jié)論與討論

在家禽人工授精中，精液要經(jīng)過稀釋液稀釋后再使用是生產(chǎn)上的普遍做法[8]。精液稀釋液需要滿足三個(gè)條件，一是給精子提供能量；二是稀釋液的滲透壓與原精液的滲透壓相同；三是pH值在6.5～7.5之間。因此，用稀釋液對(duì)精液進(jìn)行適當(dāng)稀釋可以提高混合后的精液量，以免粘在集精杯上的原精液無(wú)法使用而造成浪費(fèi)；同時(shí)，還能夠有效利用稀釋液給精液補(bǔ)充能量物質(zhì)，而且精液稀釋液還能夠有效中和精子在代謝過程中所分泌的乳酸等多種有害物質(zhì)，增加精子在體外的成活時(shí)間[9]。由于公鴨沒有副性腺，精液中含有的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度相對(duì)較低，精子自身具有的各種內(nèi)源性的能量?jī)?chǔ)備也很少，即使在體外保存的時(shí)間非常短，精液品質(zhì)也會(huì)大打折扣，精子在體外的成活時(shí)間也受到了很大的影響[10]。因此，使用含有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的精液稀釋液無(wú)論對(duì)精液品質(zhì)、受精率還是對(duì)后續(xù)的孵化率的提高都有益處。

精液稀釋液的滲透壓以及pH值應(yīng)該與公鴨精液的滲透壓和pH值保持相近；新鮮的精液pH介于6.5～7.0之間，所以精液稀釋液的pH值也應(yīng)該處于6.5～7.5之間，精子在代謝活動(dòng)中產(chǎn)生的乳酸會(huì)影響精液的pH值，從而對(duì)精液的品質(zhì)有所影響，所以稀釋液中可以適量加入一些具有緩沖功能的如醋酸鹽、檸檬酸鹽等弱有機(jī)鹽[11]。稀釋液的滲透壓應(yīng)該和原精液的滲透壓保持一致。稀釋液的滲透壓如果偏低或偏高均會(huì)影響到精子的質(zhì)量，研究表明與滲透壓高的精液稀釋液相比，滲透壓低的稀釋液對(duì)精子的影響更大。因此，使用含有緩沖鹽的精液稀釋液能更好地保護(hù)精子[12]。

本試驗(yàn)使用蔗糖、葡萄糖、醋酸鈉、碳酸氫鈉配制的精液稀釋液與生理鹽水相比，受精率可提高5.5個(gè)百分點(diǎn)；而且與對(duì)照組相比，第6天的胚胎可看到胚體及血管非常明顯，發(fā)育速度更快。