豬流行性腹瀉的研究進(jìn)展

朱向東 ，高 冉

（1.天津市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，天津 300402；2.天津瑞普生物技術(shù)股份有限公司，天津 300000）

豬流行性腹瀉（PED）是由豬流行性腹瀉病毒（PEDV）引起的一種高度接觸性豬腸道傳染病，以腹瀉、嘔吐、脫水和哺乳仔豬高死亡率為臨床特征。自2010年12月以來(lái)，PED在我國(guó)大面積暴發(fā)，2013年又席卷美國(guó)，給我國(guó)乃至世界的養(yǎng)豬業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。文章總結(jié)了PED的發(fā)現(xiàn)及流行、病原學(xué)、臨床癥狀、致病特征、診斷、疫苗、防控等，為科學(xué)防治豬流行性腹瀉提供參考。

1 PED的發(fā)現(xiàn)及流行

1971年，PED首次發(fā)現(xiàn)于英國(guó)一個(gè)育肥豬場(chǎng)，臨床表現(xiàn)與豬傳染性胃腸炎（TGE）極其相似，發(fā)病豬也表現(xiàn)為水樣腹瀉。隨后，PED在歐洲幾個(gè)國(guó)家發(fā)生流行，但直到1982年，該病才被統(tǒng)一命名為豬流行性腹瀉。從1973年開(kāi)始，中國(guó)陸續(xù)出現(xiàn)關(guān)于PED的報(bào)道。但直到1984年，研究人員才通過(guò)熒光標(biāo)記抗原和血清中和試驗(yàn)首次證實(shí)了PED在中國(guó)的存在。2010年以前，我國(guó)PED主要以區(qū)域性流行和零星暴發(fā)為主。2010年10月開(kāi)始，PED的流行逐漸呈現(xiàn)上升趨勢(shì)。PED疫情首先出現(xiàn)在華南地區(qū)，隨后迅速席卷全國(guó)，仔豬發(fā)病率和死亡率接近100%，給養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。2013-2015年，PED在美國(guó)、加拿大、墨西哥、哥倫比亞等國(guó)暴發(fā)，造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。到目前為止，PED仍在我國(guó)和世界廣泛流行，是影響?zhàn)B豬業(yè)健康發(fā)展的重要疫病之一。

2 病原學(xué)

PEDV屬于尼多病毒目冠狀病毒科冠狀病毒屬成員，基因組為單股正鏈RNA，基因組全長(zhǎng)約為28 kb，主要的結(jié)構(gòu)蛋白為纖突糖蛋白（S蛋白）、小膜蛋白（E蛋白）、膜蛋白（M蛋白）和核衣殼蛋白（N蛋白）。S蛋白是病毒的囊膜蛋白，與病毒的組織嗜性和毒力改變相關(guān)，其中S基因1~2 367 bp（S1）包含病毒主要的中和表位和受體結(jié)合域，這個(gè)區(qū)域的變化最能體現(xiàn)病毒的變異情況，是PEDV遺傳進(jìn)化分析最常用的基因。N基因在各個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白中保守性最高，常被用于病毒鑒定實(shí)驗(yàn)的目的基因。

3 臨床癥狀

豬自然感染PEDV的潛伏期一般為5～8 d，人工感染潛伏期僅為8～24 h。癥狀的嚴(yán)重程度與年齡呈負(fù)相關(guān)，年齡越小，癥狀越嚴(yán)重。保育豬和哺乳期豬感染PEDV的主要癥狀是食欲不振、水樣腹瀉和進(jìn)食后嘔吐，病豬體溫略有升高，腹瀉持續(xù)3～4 d。育肥豬感染PEDV會(huì)出現(xiàn)腹瀉，持續(xù)1周左右，逐漸恢復(fù)正常，少數(shù)豬生長(zhǎng)發(fā)育遲緩后恢復(fù)正常，病死率為1%～3%。母豬感染PEDV后臨床表現(xiàn)為厭食、嗜睡、反應(yīng)遲鈍和持續(xù)腹瀉，約1周后恢復(fù)正常；成年豬感染PEDV后癥狀較輕，有的僅表現(xiàn)為嘔吐，感染較嚴(yán)重時(shí)會(huì)出現(xiàn)水樣腹瀉，一般3～4 d自愈。

4 致病機(jī)制

PEDV主要通過(guò)糞口途徑傳播進(jìn)入豬體，但糞口途徑并不是該病唯一的傳播途徑。一些研究表明，乳汁、精液、含有PEDV的氣溶膠等都是PEDV潛在的傳播途徑。

當(dāng)病毒表面的蛋白質(zhì)吸附在靶細(xì)胞膜上并與特異性受體結(jié)合后，通過(guò)內(nèi)吞作用和膜融合侵入細(xì)胞，完成病毒復(fù)制、病毒顆粒組裝等增殖過(guò)程。病毒在小腸上皮細(xì)胞的復(fù)制過(guò)程中，細(xì)胞器遭到破壞，腸道環(huán)境紊亂，病原體滋生，上皮細(xì)胞丟失增多。小腸是豬體吸收營(yíng)養(yǎng)的主要部分，接觸面積減少，消化吸收功能紊亂，影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收。食物未經(jīng)消化吸收進(jìn)入大腸，大腸內(nèi)滲透壓升高，引起腹瀉、脫水，最終導(dǎo)致病豬死亡。

PEDV感染不同年齡和不同環(huán)境條件的仔豬，不同的毒株有不同的臨床和病理表現(xiàn)。典型的病理變化包括胃內(nèi)未消化的白色凝乳，小腸擴(kuò)張，充滿空氣或充滿淡黃色液體。腸壁擴(kuò)張無(wú)彈性、松弛、變薄和透明，小腸絨毛萎縮、縮短和減少，除胃底黏膜和腸黏膜充血外，絨毛長(zhǎng)度和絨毛長(zhǎng)度與隱窩深度的比值減小。

5 診斷

PED的快速準(zhǔn)確診斷對(duì)于有效控制疾病非常重要。目前臨床癥狀和組織病理學(xué)病變可用于初步診斷，結(jié)合病原學(xué)診斷或血清學(xué)診斷做出最終診斷。病原診斷技術(shù)包括：病毒分離、免疫熒光檢測(cè)（IF）、免疫組化檢測(cè)（IHC）、抗原ELISA檢測(cè)和病毒核酸RT-PCR檢測(cè)。血清學(xué)診斷技術(shù)包括：間接免疫熒光抗體（IFA）試驗(yàn)、病毒中和試驗(yàn)（VNT）、抗體ELISA檢測(cè)、流動(dòng)微球免疫熒光法（FMIA）等。

6 疫苗

疫苗免疫是目前控制豬流行性腹瀉最有效的方法，目前用于豬流行性腹瀉臨床防控的傳統(tǒng)疫苗主要包括細(xì)胞滅活疫苗、組織滅活疫苗和減毒活疫苗等。王明等人最初制備PEDV組織滅活疫苗，經(jīng)后海穴位免疫后豬體可以獲得良好的免疫保護(hù)效果。1995年，馬思奇等制備豬傳染性胃腸炎和豬流行性腹瀉病毒雙重滅活疫苗，仔豬主動(dòng)免疫保護(hù)率達(dá)到88.89%，免疫保護(hù)期也持續(xù)6個(gè)月。佟有恩等成功制備CV777株減毒活疫苗，研制TGEV和PEDV二價(jià)減毒活疫苗，2003-2006年間該疫苗在中國(guó)市場(chǎng)廣泛使用。2015年3月，馮力研究員研制的豬傳染性腸胃炎-豬流行性腹瀉-豬輪狀病毒三聯(lián)活疫苗保護(hù)率可達(dá)96.15%，仔豬被動(dòng)免疫后保護(hù)期可達(dá)斷奶后7 d，主動(dòng)免疫持續(xù)長(zhǎng)達(dá)6個(gè)月。

目前，我國(guó)共有8個(gè)PEDV聯(lián)苗獲得了新獸藥證書(shū)，涉及PEDV疫苗毒株7個(gè)，分別為CV777株及其致弱毒株弱毒CV777株，AJ1102株及其致弱毒株AJ1102-R株，弱毒株ZJ08株，SCSZ-1株和LW/L株。PEDV毒株可以劃分為2個(gè)基因群：GI和GII。其中它們又可進(jìn)一步劃分為GI-a、GI-b、GII-a和GII-b四個(gè)亞群。在這個(gè)分群體系中，經(jīng)典株集中在GI群，流行株主要集中在GII群中。對(duì)PEDV疫苗株基因群進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，CV777株及其致弱毒株弱毒CV777株作為經(jīng)典株，屬于GI-a亞群；ZJ08株屬于GI-b亞群；AJ1102株及其致弱毒株AJ1102-R株則屬于GII-b亞群。目前針對(duì)PEDV經(jīng)典毒株及其致病機(jī)制的疫苗研究已取得階段性進(jìn)展，但PEDV變異毒株頻繁出現(xiàn)，現(xiàn)有商品化疫苗與變異毒株的抗原性不匹配，導(dǎo)致保護(hù)效力和免疫效果不足。如果做的不好，將對(duì)我國(guó)乃至世界的養(yǎng)豬業(yè)造成嚴(yán)重的影響和巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

7 防控

做好豬流行性腹瀉的防控，首先應(yīng)做到確診病因。豬流行性腹瀉病因復(fù)雜，其中病毒性致病因子至少包括豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）、豬流行性腹瀉病毒（PEDV）、豬A群輪狀病毒（PoRA）、豬德?tīng)査跔畈《荆≒DCoV）和豬急性腹瀉綜合征病毒（SADS-CoV）等；細(xì)菌性致病因子至少包括大腸桿菌、沙門(mén)菌和魏氏梭菌等。各種致病因子導(dǎo)致的腹瀉癥狀非常相似，難以通過(guò)臨床表現(xiàn)和病理變化加以區(qū)分。此外，2種以上病因混合感染情況較為普遍。因此，快速、準(zhǔn)確確診病因?qū)τ谪i流行性腹瀉的防控十分重要。

做好豬流行性腹瀉的防控，其次應(yīng)加強(qiáng)診斷能力提升。養(yǎng)豬場(chǎng)戶應(yīng)提高自身檢測(cè)水平或?qū)で髮I(yè)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行技術(shù)支撐。堅(jiān)決避免出現(xiàn)僅憑臨床癥狀進(jìn)行判斷和一次檢測(cè)結(jié)果用幾年的情況出現(xiàn)。應(yīng)建立定期監(jiān)測(cè)和緊急檢測(cè)制度，及時(shí)進(jìn)行場(chǎng)區(qū)內(nèi)新毒株及流行特征分析，及時(shí)更新升級(jí)檢測(cè)方法以免造成變異毒株漏檢帶來(lái)較大風(fēng)險(xiǎn)。

做好豬流行性腹瀉的防控，還要持續(xù)做好免疫和生物安全。堅(jiān)決摒棄將疫苗當(dāng)治療劑和返飼等不科學(xué)的免疫行為。應(yīng)在場(chǎng)區(qū)病原學(xué)和血清學(xué)調(diào)查的基礎(chǔ)上，科學(xué)合理地確定免疫程序，要對(duì)不同豬群的免疫進(jìn)行統(tǒng)一規(guī)劃。嚴(yán)格的生物安全措施要做到多點(diǎn)飼養(yǎng)和全進(jìn)全出，做到嚴(yán)格的消毒與空舍。此外，還要做到產(chǎn)仔舍保溫、避免應(yīng)激等。