淋巴系統(tǒng)再生醫(yī)學(xué)與組織工程的研究進(jìn)展

杜奉舟 龍笑

【提要】 各種原因?qū)е碌牧馨拖到y(tǒng)損害仍然是臨床亟待解決的難題。再生醫(yī)學(xué)和組織工程技術(shù)的發(fā)展為淋巴系統(tǒng)修復(fù)開辟了重要的途徑。近年來，對淋巴系統(tǒng)生理的理解逐漸深入，淋巴系統(tǒng)再生醫(yī)學(xué)展現(xiàn)出許多新的重要進(jìn)展，包括細(xì)胞因子的應(yīng)用、支架系統(tǒng)的開發(fā)、細(xì)胞療法、組織工程淋巴系統(tǒng)的構(gòu)建等。本文將對淋巴系統(tǒng)再生醫(yī)學(xué)、組織工程的現(xiàn)狀及其最新進(jìn)展進(jìn)行綜述。

淋巴系統(tǒng)在維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮著不可替代的作用。淋巴水腫是淋巴系統(tǒng)因各種原因受到破壞以后，組織間液回流受阻，進(jìn)而引起組織腫脹，繼發(fā)慢性炎癥，嚴(yán)重影響患者的生存質(zhì)量。目前，針對淋巴水腫最常用的治療方法是物理治療，通過非手術(shù)方法促進(jìn)組織間液回流[1]。這些療法不但需要長期規(guī)律地維持，而且無法重建損傷的淋巴管系統(tǒng)。手術(shù)治療，包括建立淋巴管旁路、淋巴管－靜脈吻合、血管化淋巴結(jié)移植等，有可能重建淋巴回流通路。隨著顯微外科技術(shù)的發(fā)展，淋巴管吻合的成功率得以提高[2]。但手術(shù)可能導(dǎo)致供區(qū)損傷，甚至引發(fā)供區(qū)淋巴水腫。

組織工程與再生醫(yī)學(xué)研究的高速發(fā)展，包括組織工程淋巴回流系統(tǒng)、生長因子的遞送、細(xì)胞治療、基因編輯等再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的最新成果，均為淋巴管重建提供了新的途徑。本文將綜述近年來再生醫(yī)學(xué)在淋巴水腫中的最新進(jìn)展。

1 淋巴系統(tǒng)的發(fā)生和生理

淋巴系統(tǒng)起源于靜脈，在胚胎期的第1 到7 周由前主靜脈出芽形成[3-4]。淋巴管相關(guān)基因的表達(dá)，如PROX-1、LYVE-1、VEGFR3 等，對于淋巴管結(jié)構(gòu)的分化和形成起到了關(guān)鍵作用[5]，同時也成為鑒別與分離淋巴內(nèi)皮細(xì)胞的標(biāo)記之一。淋巴系統(tǒng)的起始由一側(cè)盲端膨大的淋巴毛細(xì)管廣泛分布、吻合組成。作為淋巴系統(tǒng)營養(yǎng)吸收的基本單元，毛細(xì)淋巴管由單層淋巴內(nèi)皮細(xì)胞組成，借助微絲與胞外基質(zhì)相連接固定，相較毛細(xì)血管缺少平滑肌、內(nèi)皮細(xì)胞、周細(xì)胞及連續(xù)的基底膜覆蓋[4]。淋巴集合管從毛細(xì)淋巴管叢延伸匯集而來，具有相對完整的基底膜和平滑肌覆蓋。淋巴集合管還具有方向瓣膜，在淋巴管平滑肌及相應(yīng)部位骨骼肌收縮時，避免由于淋巴液匯集導(dǎo)致的反流[6]。淋巴集合管會進(jìn)一步合成淋巴干及淋巴導(dǎo)管。淋巴系統(tǒng)在溝通血管和調(diào)節(jié)循環(huán)體液平衡方面有著重要作用。病理條件導(dǎo)致的淋巴管障礙、淋巴液潴留、胞外基質(zhì)重塑及脂質(zhì)沉積等，均會影響淋巴管的功能及再生，引起淋巴性水腫[7-8]。

2 促進(jìn)淋巴管再生的生長因子及其應(yīng)用

血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）C 和D 及其受體VEGFR-3介導(dǎo)了調(diào)節(jié)淋巴管再生的主要信號通路[4]，并在一系列體內(nèi)/外試驗中得到效果驗證。在先天淋巴管缺乏導(dǎo)致的淋巴水腫耳模型中，真皮層注射VEGF-C 表達(dá)的腺病毒可有效促進(jìn)淋巴管的出芽和生長[9]。此外，通過重組蛋白、轉(zhuǎn)染病毒載體及質(zhì)粒等方法補充VEGF-C 蛋白表達(dá)，可在兔、小鼠、大鼠、羊等多種動物模型中促進(jìn)皮瓣切口淋巴組織再生[10]，提高淋巴結(jié)移植治療淋巴水腫的效果[11-12]。除VEGF-C 外，其余血管生長因子，包括FGF（誘導(dǎo)淋巴管生成）、HGF（獨立于VEGF 機制外的促淋巴管增殖）、IGF（刺激淋巴內(nèi)皮細(xì)胞增殖及遷徙）、PDGF、EphB4（調(diào)控淋巴管的重塑及瓣膜形成）等，在淋巴管再生方面的報道較少，需要進(jìn)一步的研究證實。

除了對于促進(jìn)淋巴管修復(fù)效應(yīng)因子的研究外，對于抗淋巴管再生的機制探究，也是該領(lǐng)域的關(guān)鍵問題。在某些病理條件下，淋巴管功能障礙并不伴淋巴管相關(guān)效應(yīng)因子表達(dá)異常，提示存在其他機制直接或間接地介導(dǎo)了淋巴管再生障礙過程。在鼠尾淋巴水腫模型中，內(nèi)源性及依賴細(xì)胞的VEGFC 因子過表達(dá)，不足以促進(jìn)足夠的淋巴系統(tǒng)再生，而同一模型中加入對TGF-β 的局部或系統(tǒng)抑制，可顯著促進(jìn)淋巴管修復(fù)[13]，符合既往TGF-β 抑制淋巴內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移及淋巴管形成的相關(guān)報道[14]。上述研究表明，淋巴管再生是由促修復(fù)機制與抑制修復(fù)機制的平衡決定的。VEGF-C 也被報道了不良反應(yīng)，包括對于腫瘤治療引起的繼發(fā)淋巴管損傷，在修復(fù)淋巴水腫的同時可能促進(jìn)腫瘤新生血管形成，以及由于新生淋巴管結(jié)構(gòu)功能不良導(dǎo)致淋巴性水腫的加重等[15]。因此，在特定情況下，抑制抗淋巴管修復(fù)的機制可能是一種更好的選擇。近期的報道指出，相關(guān)分子，包括IFN-γ、內(nèi)皮素等，均在鼠尾水腫模型中顯示出類似TGF-β 的抗淋巴管再生作用。這些研究展示了通過影響淋巴管再生軸調(diào)控促淋巴系統(tǒng)修復(fù)的可能性。

3 淋巴組織再生中的細(xì)胞療法

3.1 淋巴內(nèi)皮細(xì)胞（Lymphatic endothelial cells，LECs）

淋巴內(nèi)皮細(xì)胞是淋巴毛細(xì)管網(wǎng)的主要組成部分。因此，在淋巴管再生中，LECs 被視為增加細(xì)胞數(shù)量最直接的方法[16]。以裸大鼠構(gòu)建的鼠尾淋巴水腫模型中，注射人LECs 可顯著減少腫脹體積，改善大鼠尾部的淋巴毛細(xì)血管生長[17]。此外，注射36 d 后在新淋巴毛細(xì)血管中檢測到了人源細(xì)胞，這表明外源性LECs 可以直接參與原位淋巴管生成。LECs 也被用來預(yù)構(gòu)淋巴－血管化組織，有研究證明在體內(nèi)移植后，組織整合過程得到了加速。雖然治療有效，但自體LECs 來源有限，而且獲得細(xì)胞需要侵入性的外科手術(shù)。內(nèi)皮集落形成細(xì)胞（Endothelial colony forming cells，ECFCs）可作為LECs 的一種替代。ECFCs 主要來源于外周血和組織中分離出來血管內(nèi)皮，可在體外大量擴增[18]。最重要的是，有一組ECFCs 可以表達(dá)淋巴特異性轉(zhuǎn)錄因子，包括Prox-1、LYVE-1、VEGFR-3 和podoplanin[19]。這些細(xì)胞可以形成脈管系統(tǒng)，或直接參與體內(nèi)新生淋巴管[20]。在免疫缺陷小鼠皮下注射ECFCs，細(xì)胞整合進(jìn)入新形成的毛細(xì)淋巴管，并促進(jìn)了血管和淋巴毛細(xì)血管生長[21]。

3.2 誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（Induced pluripotent stem cells，iPSCs）

由于iPSCs 可以大量產(chǎn)生各種患者特異性細(xì)胞，iPSCs是幾乎所有類型細(xì)胞的潛在來源[22]。iPSCs 可以分化為LECs譜系，并在體外和體內(nèi)參與形成淋巴毛細(xì)血管。當(dāng)與LECs 共培養(yǎng)時，在新形成的毛細(xì)淋巴管中可見iPSC-LECs。體內(nèi)研究還表明，在裸鼠皮膚傷口愈合模型中注射iPSC-LECs 時，能夠通過淋巴管生成和淋巴血管生成來增強傷口愈合。此外，iPSC-LECs 可以減少小鼠尾部淋巴水腫模型中的鼠尾腫脹，這證實了在臨床治療淋巴水腫的應(yīng)用潛力[23]。值得注意的是，畸胎瘤風(fēng)險仍然是iPSCs 來源細(xì)胞的主要關(guān)注點。在iPSC-LEC 的臨床應(yīng)用之前，需要更嚴(yán)格的實驗設(shè)計和全面檢查。

3.3 間充質(zhì)干細(xì)胞（Mesenchymal stem cells，MSCs）

MSCs 由于其獨特和優(yōu)越的性質(zhì)，包括旁分泌效應(yīng)[24]和免疫調(diào)節(jié)性質(zhì)，已被廣泛應(yīng)用于組織工程[25]。MSCs 在損傷部位分泌淋巴管生成因子，如VEGF、HGF、PDGF 和bFGF，可以刺激淋巴管生成[26]。在大鼠后肢及鼠尾模型中，注射脂肪來源間充質(zhì)細(xì)胞可觀察到淋巴水腫的緩解、淋巴管的修復(fù)等[27-28]。此外，ASC 與淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞體外共培養(yǎng)可表現(xiàn)出外周VEGF濃度升高，密集淋巴網(wǎng)絡(luò)形成等協(xié)同作用[29]。這些研究提示了基于可大量獲取的脂肪來源干細(xì)胞誘導(dǎo)淋巴系統(tǒng)修復(fù)，緩解淋巴水腫的可行性，并初步提供了體內(nèi)試驗證據(jù)。將兔MSCs懸浮液注射到兔肢體淋巴水腫部位，術(shù)后28 d 觀察到肢體腫脹改善，淋巴管數(shù)量增加[30]。目前，hMSCs 懸浮液注射已被用于治療淋巴水腫的臨床試驗中[31]。據(jù)報道，乳腺癌相關(guān)淋巴水腫患者腋窩區(qū)域注射hMSCs，在6 個月后半數(shù)患者的保守治療減少，且沒有嚴(yán)重不良反應(yīng)。hMSCs 的治療效果主要歸因于其旁分泌效應(yīng)，通過分泌淋巴管生成因子，如VEGF-A、VEGF-C、VEGF-D、HEG、FGF 和ANG 等，來刺激淋巴管生成。此外，hMSCs 可以向LECs 樣細(xì)胞分化，表明MSCs 還直接參與構(gòu)建新淋巴管系統(tǒng)。盡管MSCs 在治療淋巴水腫方面顯示出巨大的潛力，但其免疫調(diào)節(jié)和分化特性可能因供體差異而不同。因此，制定系統(tǒng)性策略（如預(yù)處理方法等）以增加hMSCs 的穩(wěn)定性、效力和免疫調(diào)節(jié)特性，對于改善其臨床結(jié)果至關(guān)重要。

4 淋巴系統(tǒng)再生的支架

三維環(huán)境為LECs 生長和形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)提供了框架。因此，由天然或合成聚合物和水組成的水凝膠通常用于組織工程研究。這些水凝膠可以容納細(xì)胞和生物活性物質(zhì)，同時可以改變其機械性能。為了找到淋巴毛細(xì)血管生長的理想水凝膠，Helm 等[32]使用了不同量的膠原蛋白和纖維蛋白原，每種膠原蛋白和纖維蛋白原都具有共價結(jié)合的VEGF-121。他們發(fā)現(xiàn)，只有纖維基質(zhì)可以提供合適的環(huán)境，能夠在共聚焦顯微鏡下評估毛細(xì)淋巴管的形成。然而，在另一項研究中，LECs與成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)，膠原-Ⅰ基質(zhì)中毛細(xì)淋巴管的密度略高于纖維基質(zhì)，但并不顯著[33]。

Matrigel 也被用于研究LECs 網(wǎng)絡(luò)，但是通過添加VEGF-C 和/或ADSCs 不能誘 導(dǎo)管形成[34]。Matrigel 是從 小鼠Engelbreth-Holm-Swarm 肉瘤細(xì)胞中獲得的一種液體基底膜基質(zhì)，含有多種生長因子。Dai 等[35]設(shè)計了基于聚乙醇酸支架的血管內(nèi)皮細(xì)胞移植系統(tǒng)，并在體內(nèi)試驗中進(jìn)一步探究其對于淋巴管網(wǎng)絡(luò)形成的作用。與傳統(tǒng)方法所用的膠陣不同，該系統(tǒng)保留了支架的硬度和可塑性，更便于術(shù)中操作，并且具有良好的生物相容性和降解能力。

多面體硅氧烷寡聚物聚氨酯（POSS-PCU），是一種用于重建氣管、淚管、耳和心臟瓣膜的納米材料。Kanapathy 等[36]將該材料作為支架用于構(gòu)建組織工程集化合淋巴管，并以人真皮來源的LECs 作為支架內(nèi)襯。支架在拉伸強度、縫合線保持力和抗扭結(jié)性方面表現(xiàn)出良好的機械性能，但其毛細(xì)管作用低，且不含任何瓣膜。雖然LECs 黏附良好，但最終并未形成內(nèi)皮襯里，并且POSS-PCU 上內(nèi)皮細(xì)胞的代謝活性、細(xì)胞密度顯著低于對照組（玻璃表面）。Wong 等[37]研究了無細(xì)胞真皮基質(zhì)作為生物支架介導(dǎo)的淋巴管內(nèi)生，證實在無細(xì)胞真皮層，血管及淋巴管內(nèi)皮可迅速再生，形成典型真皮脈管系統(tǒng)結(jié)構(gòu)，且無細(xì)胞支架產(chǎn)生了更少的炎癥刺激，為無細(xì)胞基質(zhì)作為生物支架，提供脈管系統(tǒng)內(nèi)生所需結(jié)構(gòu)及刺激因子提供了可行性。

Biobridge 是一種由納米纖維膠原組成并提供空間結(jié)構(gòu)的支架。Hadamitz 等[38]在豬后肢淋巴水腫模型中探究了Biobridge 在淋巴管生成中的效果。實驗分為Biobridge 加淋巴結(jié)，Biobridge 加VEGF-C 及對照3 組進(jìn)行，加入Biobridge 的組顯示出更高的移植后支架周圍淋巴管密度（100 μm 對比2 000 μm）。另外，CT 及電阻率測定顯示，僅Biobridge 加淋巴結(jié)組產(chǎn)生了具有功能的淋巴管系統(tǒng)。最新的一項臨床前研究顯示，在大鼠后肢淋巴水腫模型中，淋巴結(jié)切除時就植入Biobridge，可有效避免淋巴水腫的產(chǎn)生，而對于已經(jīng)產(chǎn)生淋巴水腫的大鼠，移植Biobridge 和脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞可減輕淋巴水腫[39]。

5 組織工程化淋巴系統(tǒng)

隨著對淋巴系統(tǒng)發(fā)生機制和淋巴組織結(jié)構(gòu)認(rèn)識的深入，體外構(gòu)建組織工程化淋巴系統(tǒng)成為可能。組織工程化淋巴系統(tǒng)移植可加速損傷組織的功能恢復(fù)。目前組織工程淋巴系統(tǒng)研究包括組織工程化毛細(xì)淋巴管，淋巴結(jié)和集合淋巴管。

5.1 組織工程化毛細(xì)淋巴管

體外制備的組織工程化毛細(xì)淋巴管比直接使用細(xì)胞懸液更有利于加速淋巴系統(tǒng)的修復(fù)。研究表明，組織工程化毛細(xì)淋巴管移植后可自動與原有淋巴管形成吻合。通過在水凝膠纖維中共培養(yǎng)LECs，內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞，可制備出含毛細(xì)血管和淋巴管的人皮膚移植物[33]。移植至裸鼠后可觀察到移植物中淋巴管與裸鼠的淋巴管網(wǎng)吻合，并可形成淋巴引流。類似的研究還有，采用LECs，內(nèi)皮細(xì)胞，與脂肪來源的基質(zhì)細(xì)胞在纖維支架中共培養(yǎng)，構(gòu)建形成管網(wǎng)結(jié)構(gòu)[40]。

值得注意的是，近年來無支架的細(xì)胞膜片組織工程技術(shù)開始興起。細(xì)胞膜片技術(shù)不使用胰蛋白酶消化細(xì)胞，從而保存了完整的細(xì)胞膜片結(jié)構(gòu)，確保細(xì)胞間以及細(xì)胞和細(xì)胞基質(zhì)之間的連接不被破壞。Gibot 等[41]通過成纖維細(xì)胞和LEC 細(xì)胞膜片，制備出了含有清晰管腔結(jié)構(gòu)的三維組織，其中成纖維細(xì)胞構(gòu)成微管網(wǎng)結(jié)構(gòu)，同時可產(chǎn)生FGF-2 和VEGF-C，有利于毛細(xì)淋巴管的形成。相比添加了合成支架的組織工程材料，細(xì)胞膜片的生物相容性和生物活性更好，為遞送淋巴內(nèi)皮細(xì)胞修復(fù)淋巴管系統(tǒng)提供了一種可行的策略[42]。此外，不同流速的組織間液對淋巴內(nèi)皮細(xì)胞增殖、分化及功能具有重要的調(diào)控作用，淋巴內(nèi)皮細(xì)胞應(yīng)對不同環(huán)境刺激而產(chǎn)生特定的功能分化[43]。有研究在纖維支架中設(shè)計了一種微液體流動裝置，為毛細(xì)淋巴管生成提供適宜的力學(xué)刺激，模擬體內(nèi)微環(huán)境中淋巴管生成機制，結(jié)果發(fā)現(xiàn)毛細(xì)淋巴管芽生增多[44]。因此，在組織工程毛細(xì)淋巴管的構(gòu)建中，不僅需要考慮種子細(xì)胞和細(xì)胞因子，微環(huán)境中合適的機械刺激也對毛細(xì)淋巴管的生成也起到了關(guān)鍵作用。

5.2 組織工程化淋巴結(jié)

自體淋巴結(jié)移植已被證明是治療淋巴水腫的有效手段，但供區(qū)淋巴結(jié)的數(shù)量有限，而且可能造成供區(qū)繼發(fā)淋巴水腫。因此，探索組織工程化淋巴結(jié)是一條有價值的途徑。目前，淋巴結(jié)組織工程的進(jìn)展集中于模擬淋巴結(jié)的微環(huán)境以啟動針對癌癥的免疫應(yīng)答，并治療諸如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的免疫缺陷。Giese 等[45]使用了一個包含瓊脂糖和非織造聚酰胺纖維支架、樹突狀細(xì)胞、外周血單核細(xì)胞的生物反應(yīng)器系統(tǒng)，試圖工程化改造出具有抗原特異性、細(xì)胞因子反應(yīng)性淋巴細(xì)胞的淋巴樣結(jié)構(gòu)。Suematsu 等[46]試圖通過將小鼠胸腺來源的基質(zhì)細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞嵌入由凍干法制備的不溶性牛腱膠原構(gòu)成的膠原海綿中，形成了類淋巴樣組織。將其植入小鼠腎包膜下區(qū)域后，能夠吸引B 細(xì)胞和T 細(xì)胞，形成了具有B 細(xì)胞和T 細(xì)胞簇、高內(nèi)皮小靜脈樣管腔、生發(fā)中心和濾泡樹突細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)的類器官。當(dāng)植入免疫缺陷小鼠時，類器官還能夠誘導(dǎo)抗原特異性抗體產(chǎn)生，證實其治療免疫缺陷疾病的功能。但其不能完全復(fù)制具有輸入和輸出淋巴管的天然淋巴結(jié)結(jié)構(gòu)。Cuzzone 等[47]使用脫細(xì)胞小鼠淋巴結(jié)作為支架來構(gòu)建組織工程化小鼠淋巴結(jié)。結(jié)果表明，脫細(xì)胞的淋巴結(jié)保留了原始組織結(jié)構(gòu)，組織工程淋巴結(jié)成功地將白細(xì)胞輸送到全身。這項工作顯示了在制備組織工程人淋巴結(jié)時使用牛和豬來源的脫細(xì)胞淋巴結(jié)的可能性。然而，將不同的細(xì)胞類型結(jié)合到高度組織化的結(jié)構(gòu)中同時保持細(xì)胞活力仍然是一個挑戰(zhàn)。

5.3 組織工程化集合淋巴管（Tissue engineered lymphatic collecting vessels，TELCV）

盡管組織工程化毛細(xì)淋巴管在小型動物實驗中表現(xiàn)出淋巴水腫修復(fù)的優(yōu)勢，但毛細(xì)淋巴管的低容量限制了其對于液體回流和穩(wěn)態(tài)的控制。因此，修復(fù)集合淋巴管對于淋巴修復(fù)，尤其是嚴(yán)重的淋巴水腫，具有不可或缺的作用。由于自體移植淋巴管來源數(shù)目的限制，探究工程化管狀支架對于淋巴內(nèi)皮細(xì)胞生長的支持顯得十分必要。盡管可以參照工程化血管的研究，但淋巴管系統(tǒng)缺乏連續(xù)基底膜覆蓋，單向運輸及獨特的生理環(huán)境均對傳統(tǒng)脈管工程化提出了更大的挑戰(zhàn)[48]。Rudiger 等在1981 年首次利用聚乙醇酸硅樹脂酮支架工程化改造集合淋巴管，在裸鼠模型中顯著改善了淋巴內(nèi)皮細(xì)胞的黏附、遷徙、生長及穩(wěn)定性，顯示出體外工程化改造集合淋巴管的潛力[35]。另一項研究基于POSS-PCU 促進(jìn)淋巴內(nèi)皮細(xì)胞增殖，并在材料表面形成2 mm 匯合層[49]。Hadamitzk 等[38]在家豬后肢淋巴水腫模型中探究了Biobridge 在淋巴管生成中的效果。實驗分為Biobridge 加淋巴結(jié)，Biobridge 加VEGF-C及對照3 組培養(yǎng)，CT 及電阻率測定顯示僅Biobridge 加淋巴結(jié)組產(chǎn)生了具有功能的淋巴管系統(tǒng)，提示VEGF-C 所誘導(dǎo)的淋巴管生成需要一定的方向梯度。與血管不同，淋巴液壓力非常低，因此開發(fā)功能性集合管腔支架難度較血管低。相比之下，人工集合淋巴管的主要挑戰(zhàn)是制備具有功能瓣膜的模擬結(jié)構(gòu)。功能性TELCV 需要對淋巴液流動有反應(yīng)，并能預(yù)防淋巴液逆向流動。TELCV 內(nèi)部的LECs、平滑肌外層和雙葉瓣對于促淋巴液輸送，防止回流至關(guān)重要[50]，而這種功能性瓣膜尚未在組織工程化淋巴管中進(jìn)行應(yīng)用。

6 展望

相比血管系統(tǒng)，淋巴管系統(tǒng)的重要性經(jīng)常被忽視。針對淋巴系統(tǒng)損傷和缺陷導(dǎo)致的各種疾病，目前臨床的治療方法還遠(yuǎn)無法滿足需求。隨著對淋巴生物學(xué)的進(jìn)一步理解，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了調(diào)節(jié)淋巴再生和改善功能的生長因子。對LECs 的分離和培養(yǎng)使我們能夠在實驗室制備培養(yǎng)系統(tǒng)和支架并產(chǎn)生人工淋巴結(jié)構(gòu)。未來淋巴系統(tǒng)組織工程發(fā)展的關(guān)鍵包括建立淋巴管，促進(jìn)這些淋巴管與全身結(jié)構(gòu)的連接，設(shè)計功能性淋巴結(jié)構(gòu)，如淋巴結(jié)，并促進(jìn)淋巴系統(tǒng)的血管化。理想的淋巴組織工程可以通過支架和人工淋巴器官進(jìn)行淋巴循環(huán)，以及完成通常由淋巴系統(tǒng)負(fù)責(zé)的所有功能，例如脂肪運輸、免疫細(xì)胞運輸和組織間液調(diào)節(jié)等。未來的挑戰(zhàn)將是制備具有功能的淋巴器官并可以在臨床進(jìn)行植入，開發(fā)可以連接并整合到患者自身淋巴網(wǎng)絡(luò)的組織工程淋巴管網(wǎng)。此外，血管組織工程已經(jīng)取得了相當(dāng)大的進(jìn)展，需要將其成果整合到淋巴組織工程中，以再生功能齊全且血供良好的淋巴結(jié)構(gòu)。盡管開發(fā)和植入功能性淋巴結(jié)構(gòu)的目標(biāo)仍然受到很多制約，但隨著再生醫(yī)學(xué)和組織工程技術(shù)的不斷發(fā)展，制備組織工程淋巴組織變得越來越可行，可以期待在未來用于淋巴系統(tǒng)疾病的治療。