動(dòng)物藥蛋白多肽類(lèi)成分抗癲癇作用及機(jī)制的研究進(jìn)展

曾榕，刁麗梅

(1.廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530001；2.廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，廣西 南寧 530023)

癲癇是因腦部神經(jīng)元同步異常放電所導(dǎo)致的慢性大腦功能失調(diào)綜合征，以短暫性、反復(fù)癇性發(fā)作為特征，主要表現(xiàn)為認(rèn)知功能障礙、運(yùn)動(dòng)抽搐、自主神經(jīng)功能紊亂等，其與腦內(nèi)興奮性/抑制性神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)失衡、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞功能失常、病理性神經(jīng)環(huán)路建立、離子通道基因突變、神經(jīng)炎癥、遺傳、免疫等諸多因素相關(guān)[1]。流行病學(xué)資料分析顯示，全球約有7 000萬(wàn)的癲癇患者，活動(dòng)性癲癇的患病率為(4～12)/1 000，同時(shí)每年新發(fā)癲癇的患病率為(16～51)/10 萬(wàn)，癲癇發(fā)病率在欠發(fā)達(dá)國(guó)家是發(fā)達(dá)國(guó)家的兩倍之多[2-3]?，F(xiàn)今癲癇的主要治療手段以抗癲癇藥物(antiepileptic drugs，AEDs)為主，盡管西醫(yī)治療癲癇療效顯著，但長(zhǎng)期應(yīng)用可存在焦慮抑郁障礙、共濟(jì)失調(diào)等副作用，約有30%的患者因療效欠佳、耐受性差而發(fā)展成為難治性癲癇(refractory status epilepticus，RSE)。而中醫(yī)藥治療癲癇具有療效穩(wěn)定、毒副作用少、患者依從性高等優(yōu)勢(shì)，能有效控制癇性發(fā)作及延長(zhǎng)發(fā)作間期?，F(xiàn)代藥理研究表明，動(dòng)物類(lèi)中藥含有豐富的蛋白多肽類(lèi)成分，具有抗炎、抗凝、抗驚厥、抗纖維化、改善腦組織等多方面的作用，有利于改善中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀[4-5]，順應(yīng)臨床亟需副作用更小，效果更穩(wěn)定的抗癇藥物應(yīng)用需求。近年來(lái)，中醫(yī)藥治療越來(lái)越受到抗癲癇研究領(lǐng)域的廣泛關(guān)注，為進(jìn)一步探究中藥在治療癲癇方面的作用，本文對(duì)應(yīng)用于抗癇研究的動(dòng)物藥中蛋白多肽類(lèi)成分的作用機(jī)制進(jìn)行闡述，為研發(fā)新型抗癇藥物和了解癲癇的病理機(jī)制提供新的思路和方法。

1 蛋白多肽類(lèi)成分的來(lái)源與作用機(jī)制

1.1 蛋白多肽類(lèi)成分的來(lái)源

多肽是指100個(gè)氨基酸以下的大分子物質(zhì)，既是多個(gè)氨基酸通過(guò)肽鍵連接而成的短鏈蛋白質(zhì)，也是蛋白質(zhì)水解的中間產(chǎn)物。通常10個(gè)以?xún)?nèi)氨基酸組成的肽叫做寡肽，超過(guò)10個(gè)氨基酸組成的肽稱(chēng)為多肽，50個(gè)以上氨基酸脫水生成的多肽為蛋白質(zhì)。

天然活性多肽主要源自于各類(lèi)動(dòng)植物及海洋生物、微生物，目前在脊椎動(dòng)物研究中最為廣泛。在哺乳動(dòng)物體內(nèi)，肽類(lèi)物質(zhì)主要來(lái)自于外周臟器或中樞神經(jīng)系統(tǒng)(central nervous system，CNS)，如生長(zhǎng)抑素和神經(jīng)肽Y(neuropeptide Y，NPY)共同參與癲癇的發(fā)病機(jī)制，NPY作為重要的神經(jīng)遞質(zhì)調(diào)節(jié)因子可以影響CNS本身的分化與發(fā)育，并在大腦的不同部位發(fā)揮著調(diào)節(jié)作用，在海馬組織內(nèi)以降低神經(jīng)元興奮性為主，而在外周神經(jīng)系統(tǒng)中常與去甲腎上腺素共存，參與心血管活動(dòng)的中樞性調(diào)節(jié)過(guò)程[6]?，F(xiàn)代藥理研究表明，蛋白多肽類(lèi)成分是動(dòng)物藥發(fā)揮獨(dú)特療效的重要物質(zhì)基礎(chǔ)，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病中具有抗驚厥、鎮(zhèn)靜、改善腦代謝等作用[5, 7]。經(jīng)化學(xué)加工后提取的多肽化合物，具有生物活性強(qiáng)、免疫原性低、分子質(zhì)量小、選擇特異性高、易于合成與修飾、不易產(chǎn)生耐藥性等特點(diǎn)。此外，該成分直接來(lái)源的中藥還具有易獲得、毒副作用小、臨床療效確切、炮制工藝完備等優(yōu)勢(shì)，在抗癇新藥的開(kāi)發(fā)與應(yīng)用中具備探索前景。

1.2 蛋白多肽類(lèi)物質(zhì)透過(guò)血腦屏障的作用機(jī)制

血腦屏障(blood-brain barrier，BBB)由腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞、星型膠質(zhì)細(xì)胞、周皮細(xì)胞、基膜緊密連接而成，是維護(hù)中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)性和功能性屏障。該神經(jīng)膠質(zhì)膜的高度致密性使細(xì)胞旁轉(zhuǎn)運(yùn)受到限制，阻礙和控制血液中的物質(zhì)進(jìn)入腦組織，僅有2%的親脂性小分子物質(zhì)(分子量<500 Da)可以穿過(guò)血腦屏障到達(dá)中樞神經(jīng)系統(tǒng)，其余98%的小分子物質(zhì)和近100%的大分子均無(wú)法通過(guò)[8]。這在維持內(nèi)環(huán)境的相對(duì)恒定的同時(shí)，給藥物開(kāi)發(fā)和靶向治療帶來(lái)極大挑戰(zhàn)，因?yàn)樗幬锉仨毷紫饶芡ㄟ^(guò)血腦屏障，并在大腦中達(dá)到一定的血藥濃度方可調(diào)節(jié)相應(yīng)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病治療靶點(diǎn)。而能否透過(guò)血腦屏障阻礙進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)受藥物的分子量大小、親水性強(qiáng)弱、脂溶性高低、蛋白質(zhì)結(jié)合力強(qiáng)弱及特定電荷相互作用的影響。多肽作為內(nèi)源性的生理活性物質(zhì)，具有易于合成和修飾、生物兼容度高、免疫原性低、特定受體親和度高、組織細(xì)胞間穿透力強(qiáng)、成本低廉等特點(diǎn)，僅需很少量的肽類(lèi)物質(zhì)就能跨越血腦屏障轉(zhuǎn)運(yùn)到中樞神經(jīng)系統(tǒng)來(lái)誘發(fā)一系列的生理效應(yīng)[9-10]。以這些多肽作為載體轉(zhuǎn)運(yùn)工具，能夠以非侵入性方式將神經(jīng)治療藥物輸送到腦實(shí)質(zhì)，降低腦損傷或神經(jīng)功能障礙的風(fēng)險(xiǎn)。

大多數(shù)多肽跨越血腦屏障的機(jī)制是非飽和的跨膜擴(kuò)散，其滲透程度主要取決于藥物的脂溶性，如脂溶性較強(qiáng)的δ-促睡眠肽、阿片肽及其類(lèi)似物更容易穿過(guò)血腦屏障，并具有更強(qiáng)的生理活性[9, 11]。如低濃度、強(qiáng)脂溶性的內(nèi)皮-單核細(xì)胞激活多肽Ⅱ釋放入腦實(shí)質(zhì)，可以抑制SE大鼠腦海馬區(qū)的血管生長(zhǎng)，改善內(nèi)皮細(xì)胞間的緊密連接，有利于控制急性期癲癇的發(fā)作[12]。

蛋白多肽類(lèi)成分透過(guò)血腦屏障的轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制主要包括以下幾種。一是載體介導(dǎo)的主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)：載體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白對(duì)化學(xué)修飾結(jié)構(gòu)具有高度選擇性，只能轉(zhuǎn)運(yùn)與內(nèi)源性底物具有相似分子結(jié)構(gòu)和大小的藥物。轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在管腔一側(cè)識(shí)別底物，然后底物-轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白結(jié)合系統(tǒng)觸發(fā)載體蛋白自外而內(nèi)的構(gòu)象變化，底物順濃度梯度輸送到細(xì)胞膜的開(kāi)腔側(cè)以實(shí)現(xiàn)跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)。但有一些小分子肽例如胰島素、亮氨酸腦啡肽、β淀粉樣多肽等，可以通過(guò)飽和轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)來(lái)透過(guò)血腦屏障[13]。二是受體介導(dǎo)的細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)：多種蛋白質(zhì)通過(guò)受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用透過(guò)血腦屏障，常見(jiàn)的內(nèi)源性受體主要有胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、低密度脂蛋白等。受體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)運(yùn)具有強(qiáng)烈親和力、高度選擇性及靶向特異性，在腦內(nèi)皮細(xì)胞管腔側(cè)的循環(huán)中，配體與特定的受體結(jié)合，受體-配體復(fù)合物通過(guò)囊泡運(yùn)輸機(jī)制到達(dá)細(xì)胞內(nèi)腔，配體在溶酶體作用下從復(fù)合物中解離并釋放到腔外間隙完成轉(zhuǎn)運(yùn)，受體則循環(huán)到內(nèi)皮細(xì)胞腔內(nèi)側(cè)。這種機(jī)制的傳輸具有單向性、飽和性、耗能性，可以增強(qiáng)生物制劑在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的富集效應(yīng)，提高血藥濃度[14]。三是吸附介導(dǎo)的細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)：吸附介導(dǎo)轉(zhuǎn)運(yùn)的親和力較低，選擇性較差，但擁有更高的結(jié)合能力。多聚陽(yáng)離子蛋白，或含有陽(yáng)離子序列的合成肽中帶正電荷的部分與腦內(nèi)皮細(xì)胞表面帶負(fù)電荷的部分相互作用，靜電結(jié)合能力的大小決定了胞吞作用的強(qiáng)弱。在阿爾茨海默病中，陽(yáng)離子蛋白作為配體，通過(guò)吸附鐵螯合劑將其轉(zhuǎn)運(yùn)至腦實(shí)質(zhì)中與鐵離子結(jié)合，抑制脂質(zhì)過(guò)氧化和蛋白質(zhì)降解，有效發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用[15]。因此，多肽陽(yáng)離子化可以促使治療藥物透過(guò)血腦屏障，增加腦內(nèi)生理性攝取量。

血腦屏障/多肽/調(diào)節(jié)蛋白相互作用形成了一種腦外周組織通信手段，建立起穩(wěn)定的中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周循環(huán)之間傳遞信息分子的管道，同時(shí)這些分子物質(zhì)受到生理變化的影響，在疾病狀態(tài)下發(fā)生病理改變。針對(duì)這些特異性變化，研發(fā)相應(yīng)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)性藥物，能夠?qū)Πd癇、腦水腫、持續(xù)神經(jīng)功能障礙等神經(jīng)退行性病變產(chǎn)生積極的治療效果。

2 含蛋白多肽類(lèi)成分動(dòng)物藥的抗癇作用與機(jī)制

2.1 全蝎

全蝎(Scorpion)，是鉗蝎科動(dòng)物東亞鉗蝎的干燥全體，歸肝經(jīng)，具有息風(fēng)鎮(zhèn)痙、通絡(luò)止痛和攻毒散結(jié)的功效，常用于治療肝風(fēng)內(nèi)動(dòng)、痙攣抽搐、小兒驚風(fēng)等病癥，是我國(guó)傳統(tǒng)的抗癇中藥材[16]。全蝎的有機(jī)活性組分構(gòu)成多樣，包括蝎毒、硫磺酸、棕櫚酸、膽甾醇、銨鹽等，其中蝎毒是蛋白質(zhì)和多肽的混合物，神經(jīng)毒素多肽成分含量豐富。據(jù)報(bào)道，全蝎提取物肽類(lèi)能夠通過(guò)抑制大腦皮層N-甲基-D-天冬氨酸受體(N-methyl-D-aspartic acid receptor，NMDAR)結(jié)合活性，延緩戊四唑(PTZ) 誘導(dǎo)的癲癇小鼠模型的發(fā)作[17]?？拱d癇肽(anti-epilepsy peptide，AEP)是從蝎毒液中提取的生物活性多肽之一。該多肽由61個(gè)氨基酸殘基組成，分子量為8.3kDa，屬于長(zhǎng)鏈抑制性神經(jīng)毒素。AEP對(duì)電壓門(mén)控鈉離子通道具有調(diào)節(jié)作用，影響動(dòng)作電位的發(fā)生[18]。AEP的分子量較小，可通過(guò)血腦屏障抑制NMDAR的過(guò)度激活，同時(shí)與25kDa突觸體相關(guān)蛋白結(jié)合誘導(dǎo)腦組織中抑制性神經(jīng)遞質(zhì)GABA的釋放，恢復(fù)中樞神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的興奮性/抑制性系統(tǒng)平衡，緩解癲癇的驚厥和痙攣癥狀[19]。現(xiàn)已證實(shí)，全蝎中AEP抗癲癇和預(yù)防復(fù)發(fā)的治療效果佳，藥物依賴(lài)性低，具有潛在的臨床應(yīng)用前景。

2.2 蜈蚣

蜈蚣(Centipede)，是蜈蚣科動(dòng)物少棘巨蜈蚣的干燥體，臨床上可用于治療癲癇、驚厥、抽搐等[16]。蜈蚣毒素提取液預(yù)防癲癇發(fā)作易感性可能與調(diào)控海馬內(nèi)腦啡肽表達(dá)來(lái)降低海馬興奮性有關(guān)[20]。蜈蚣毒素信號(hào)肽Rh Tx可激活感覺(jué)神經(jīng)元痛覺(jué)受體TRPV1，引起細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度升高，介導(dǎo)星形膠質(zhì)細(xì)胞炎癥表達(dá)，從而提高神經(jīng)元興奮性加速癲癇發(fā)作[21-22]。NTX-Ssm97成熟肽是從蜈蚣毒液中分離出來(lái)的一種選擇性抑制哺乳動(dòng)物Nav1.7通道的生物活性肽，可阻斷外周傷害性刺激信息傳入中樞，是開(kāi)發(fā)鎮(zhèn)痛、解痙藥物的良好分子靶標(biāo)[23]。蜈蚣多肽毒素靶向離子通道，參與調(diào)節(jié)機(jī)體多種生理或病理過(guò)程，這可能是應(yīng)用于開(kāi)發(fā)癲癇免疫治療及拓寬抗炎藥物選擇的一種先導(dǎo)途徑。

2.3 地龍

地龍(Earthworm)，是矩蚓科動(dòng)物參環(huán)毛蚓、威廉環(huán)毛蚓等的干燥全體，具有清熱止痙、平肝熄風(fēng)的功效，臨床常用于治療高熱神昏、驚癇抽搐、肢體麻木等癥[16]。地龍中含有豐富的蛋白質(zhì)和多肽，如抗微生物蛋白、鈣調(diào)素結(jié)合蛋白、脂類(lèi)蛋白、抗菌肽等，其中能有效發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用的蛋白多肽類(lèi)成分質(zhì)量分?jǐn)?shù)不低于50%[24]。蚯蚓菌素是一種結(jié)構(gòu)類(lèi)似于防御素的多肽，具有神經(jīng)保護(hù)和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)作用，能夠減輕小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的神經(jīng)炎癥反應(yīng)，抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)治療藥物所誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡[25]。AEDs在治療孕婦、嬰兒和幼兒的癲癇發(fā)作時(shí)，可呈劑量依賴(lài)性產(chǎn)生相應(yīng)的神經(jīng)毒性，誘導(dǎo)大腦發(fā)育過(guò)程中的神經(jīng)細(xì)胞凋亡進(jìn)而發(fā)生腦損傷，或并發(fā)認(rèn)知功能障礙及智力下降[26]。故對(duì)于長(zhǎng)期使用AEDs維持治療的癲癇患者，設(shè)計(jì)針對(duì)不同大腦發(fā)育階段的抗癇治療方案，輔助中藥神經(jīng)保護(hù)療法，促進(jìn)腦內(nèi)神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子信號(hào)傳遞，致使療效最大化，避免或最大限度地減少上述易受傷害年齡組的神經(jīng)毒性副作用。

2.4 僵蠶

白僵蠶(Mulberry Silkworm)，是由球孢白僵菌感染的家蠶(4～5齡家蠶)干燥幼蟲(chóng)，含有蛋白質(zhì)和多肽、脂肪酸、黃酮、甾體、多糖等多種化合物，具有顯著的抗驚厥和抗癲癇作用[16]。僵蠶蛋白提取物具有兩面性，既能通過(guò)抑制脂質(zhì)過(guò)氧化和保護(hù)抗氧化酶，促進(jìn)淀粉樣β蛋白誘導(dǎo)的星形膠質(zhì)細(xì)胞毒性沉淀，引起膠質(zhì)細(xì)胞功能異常，誘導(dǎo)癲癇的發(fā)生發(fā)展[27]；又可通過(guò)調(diào)控γ-氨基丁酸信號(hào)通路，降低谷氨酸對(duì)神經(jīng)生長(zhǎng)因子刺激的PC12神經(jīng)元樣細(xì)胞模型損傷，發(fā)揮神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)和神經(jīng)保護(hù)作用[28]。經(jīng)高效液相色譜法-串聯(lián)質(zhì)譜法分析，僵蠶蛋白酶解多肽由低于10個(gè)氨基酸組成，相對(duì)分子質(zhì)量在500～1 000之間[29]，更易于透過(guò)血腦屏障阻礙進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)揮抗驚厥、抗凝的藥理作用。故隨著對(duì)僵蠶蛋白質(zhì)、多肽組分的深入研究，將其進(jìn)一步應(yīng)用于開(kāi)發(fā)抗癲癇藥物具有廣闊前景。

2.5 羚羊角

羚羊角(Antelope Horn)，是?？苿?dòng)物賽加羚羊的角，屬于貴重中藥材，主入肝經(jīng)，長(zhǎng)于平肝、息風(fēng)、解痙，用于肝風(fēng)內(nèi)動(dòng)之驚厥抽搐者，如妊娠子癇、高熱痙厥、癲癇發(fā)狂等癥[16]。完整的羚羊角包括角殼和骨塞兩部分，羚羊角塞以水煎、濃縮和透析所得的大分子蛋白質(zhì)成分 (分子量16 kDa以上, 主要為68 kDa左右) 具有一定的解熱、鎮(zhèn)痛和鎮(zhèn)驚作用[30]，羚羊角肽主要來(lái)自于角蛋白，動(dòng)物角在胃腸道極端環(huán)境下被降解后析出特異性生物活性肽，通常每個(gè)活性肽分子含有不超過(guò)20個(gè)氨基酸殘基，肽的分子量越低，它們?cè)接锌赡芡ㄟ^(guò)腸道屏障來(lái)發(fā)揮生物學(xué)作用[31-32]。蔡際群[33]在遺傳性癲癇動(dòng)物模型-京都震顫大鼠的海馬和皮質(zhì)安插電極觀察其腦電波變化，發(fā)現(xiàn)羚羊角方可以劑量依賴(lài)性方式抑制震顫大鼠每次癲癇小發(fā)作持續(xù)時(shí)長(zhǎng)，及減少發(fā)作次數(shù)，從而有效改善腦電圖情況。與丙戊酸鈉對(duì)比，停藥后具有藥效半衰期長(zhǎng)，毒副作用小的優(yōu)點(diǎn)，有利于延長(zhǎng)癇性發(fā)作間期。因羚羊數(shù)量銳減，市場(chǎng)價(jià)格居高不下，現(xiàn)臨床多使用山羊角替代，蛋白質(zhì)組學(xué)研究表明二者生物活性高度相似，在胃腸道消化酶作用下釋放多肽或溶解蛋白來(lái)發(fā)揮療效[32]。對(duì)于長(zhǎng)期需依賴(lài)藥物治療的癲癇患者而言，在保證療效的同時(shí)又能有效緩解經(jīng)濟(jì)壓力，并且提高瀕危藥用動(dòng)物替代品的開(kāi)發(fā)力度，對(duì)保護(hù)生物多樣性具有重要意義。

2.6 麝香

麝香(Abelmusk)，是鹿科動(dòng)物林麝成熟雄體香囊中的干燥分泌物，屬芳香開(kāi)竅藥，具有通關(guān)利竅、醒腦通絡(luò)的功效[16]，臨床常與息風(fēng)解痙藥物配伍，共奏熄風(fēng)化痰、開(kāi)竅醒神之功來(lái)改善癲癇患者的精神狀況。麝香的化學(xué)成分極其復(fù)雜，包括麝香酮及其類(lèi)似物、類(lèi)固醇和蛋白質(zhì)。麝香中蛋白質(zhì)多肽類(lèi)化合物通過(guò)減少中性白細(xì)胞及其顆粒內(nèi)容物的釋放、抑制活性脂質(zhì)成分合成、降低游離鈣素水平等方式影響中性粒細(xì)胞的功能，從而發(fā)揮抗炎作用[34]。在天然麝香中可分離出有效抗炎蛋白Mu-a-1[35]，Mu阿片受體能抑制小白蛋白中間神經(jīng)元末梢釋放GABA ，維持海馬體CA1區(qū)神經(jīng)回路穩(wěn)態(tài)[36]，有利于調(diào)節(jié)癲癇發(fā)作引起的免疫炎癥反應(yīng)。因天然麝香稀缺名貴，市售中成藥多采用人工麝香，因缺乏統(tǒng)一的質(zhì)量評(píng)估體系，臨床療效參差不齊，采用高效液相色譜法-串聯(lián)質(zhì)譜法分析對(duì)比天然麝香與人工麝香提取物中的胰蛋白酶多肽，發(fā)現(xiàn)二者含量模式存在顯著差異[37]，將蛋白質(zhì)作為麝香的質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)，有利于開(kāi)發(fā)優(yōu)質(zhì)天然麝香替代品制成中成藥廣泛應(yīng)用臨床。

2.7 牛黃

牛黃(Cow-Bezoar)，是?？苿?dòng)物黃牛或水牛的膽囊、膽管或肝管中的結(jié)石，功善清心豁痰，涼肝熄風(fēng)，開(kāi)竅醒神，常用于治療熱病神昏、中風(fēng)痰迷、驚癇抽搐、癲癇發(fā)狂等[16]。因本品極珍貴，現(xiàn)多以人工牛黃和體外培育牛黃替代品入藥，膽汁酸是牛黃的主要活性成分之一，具有抗炎、抗癌、抗病毒、退熱、免疫功能保護(hù)等作用，是評(píng)價(jià)牛黃及其代用品質(zhì)量的重要指標(biāo)[38]。AEDs丙戊酸及其活性代謝產(chǎn)物能通過(guò)干擾膽汁酸穩(wěn)態(tài)引起肝毒性[39]，牛黃膽汁酸是一種強(qiáng)抗氧化劑，可能通過(guò)中止氧化應(yīng)激反應(yīng)來(lái)修復(fù)肝臟膽汁酸合成和轉(zhuǎn)換途徑，促進(jìn)膽汁排泄，從而起到保護(hù)肝細(xì)胞的作用[40]，與抗癇藥物協(xié)同使用可緩解其肝臟毒性。體外培育牛黃發(fā)揮抗驚厥作用可能通過(guò)保護(hù)CA3區(qū)抑制性神經(jīng)遞質(zhì)作用，抑制苔狀纖維側(cè)支生芽，阻斷異常神經(jīng)回路形成，使癲癇波發(fā)放減少，腦電圖評(píng)分改善，進(jìn)而減少癲癇發(fā)作次數(shù)[41]。天然牛黃多用于臨床急危重癥，千金難求，不作為普適性藥物使用，或可聯(lián)合初期抗癇一線藥物使用于RSE，不失為一種更安全有效的臨床治療手段。

3 小結(jié)

癲癇是世界上第二大中樞神經(jīng)系統(tǒng)性疾病，以早期診斷不及時(shí)、藥物治愈率低、易于反復(fù)發(fā)作等為諸多病患所苦。目前，癲癇的治療以AEDs為主，起效快、藥效強(qiáng)，但容易引起耐藥性癲癇的產(chǎn)生，以及共濟(jì)失調(diào)、焦慮抑郁障礙、肝腎功能損害等不良反應(yīng)的伴生。中藥治療癲癇具有療效穩(wěn)定、毒副作用少、患者依從性高等優(yōu)勢(shì)，能有效控制癇性發(fā)作及延長(zhǎng)發(fā)作間期，提高患者生活質(zhì)量。雖然中藥治療癲癇起效慢，臨床常需協(xié)同AEDs使用，但我國(guó)中藥資源豐富，許多具有抗癇活性的蛋白多肽成分均源自于中藥，以動(dòng)物藥居多，含量高，毒性低，具有顯著的抗癇作用，其抗癇機(jī)制主要包括調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)及受體、調(diào)節(jié)離子通道、抗神經(jīng)元氧化損傷、調(diào)控炎癥因子及凋亡相關(guān)基因的表達(dá)等多重途徑。而蛋白多肽類(lèi)成分因?yàn)橐子诤铣珊托揎?、生物兼容度高、免疫原性低、特定受體親和度高、組織細(xì)胞間穿透力強(qiáng)、成本低廉、性能安全、穩(wěn)定等特點(diǎn)，能夠通過(guò)血腦屏障/多肽/調(diào)節(jié)蛋白相互作用形成一種腦外周組織聯(lián)系管路，將治療藥物高度富集于腦實(shí)質(zhì)內(nèi)，調(diào)控相應(yīng)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病治療靶點(diǎn)，目前在治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病中受到廣泛關(guān)注。因此，隨著多肽技術(shù)、中藥炮制工藝等現(xiàn)代生物技術(shù)的研究與發(fā)展，從中藥中開(kāi)發(fā)具有抗癇活性的蛋白多肽類(lèi)成分用于治療癲癇有良好的前景，能為癲癇的臨床診斷與治療提供有力的佐助。

目前針對(duì)動(dòng)物藥蛋白多肽類(lèi)成分的研究也存在一些問(wèn)題，考慮其成分復(fù)雜，僅有少量能夠被完全分離純化并確定氨基酸序列，空間結(jié)構(gòu)解析不足，且蛋白多肽類(lèi)成分多為親水性大分子，由于胃腸道不穩(wěn)定、滲透性低、血清半衰期短等，直接口服生物利用度不足，難以達(dá)到臨床起效標(biāo)準(zhǔn)。故從動(dòng)物藥中提取該類(lèi)成分作為治療性多肽，提高生物口服利用度具有一定的研究潛力。臨床中多以中藥復(fù)方或中藥復(fù)方聯(lián)合AEDs治療癲癇，少以單藥起效。中藥復(fù)方具有多成分、多靶點(diǎn)、多通路的綜合藥理作用，大部分中藥動(dòng)物藥與諸藥配伍后經(jīng)過(guò)煎煮、濃縮，最終制成相應(yīng)的湯藥或中成藥來(lái)發(fā)揮功效，其是否會(huì)改變動(dòng)物藥中蛋白多肽類(lèi)成分的主要起效方式，從而影響最終的治療效果值得深究，故需要有特定的研究方法和手段去探索動(dòng)物藥中如蛋白多肽類(lèi)成分、小分子化合物等發(fā)揮療效的重要物質(zhì)基礎(chǔ)，以期解決中藥動(dòng)物藥在臨床使用及推廣中的科學(xué)問(wèn)題。