基因修飾豬-非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物異種腎移植面臨的問(wèn)題及挑戰(zhàn)

蔣鴻濤 李濤 何松哲 余一凡 白云昊 馬曉杰 王毅

為了解決供者短缺的問(wèn)題，人們采取了很多措施，例如親屬活體移植，ABO血型不相容移植等，我國(guó)也在2006年開(kāi)展了第1例ABO血型不相容腎移植。即便這樣，仍不能有效地解決器官短缺問(wèn)題。正是在這種背景下，人們開(kāi)始研究將轉(zhuǎn)基因豬作為供體來(lái)源之一[1-2]。在基因修飾豬-非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物（non-human primate，NHP）的異種器官移植模型中，腎和心臟異種移植取得了令人興奮的進(jìn)展。其中移植腎存活時(shí)間＞1年[3-4]，移植心臟（原位移植）存活時(shí)間＞6個(gè)月[5-6]，而異種肝移植和肺移植的進(jìn)展比較緩慢。雖然目前異種移植研究有所突破，但長(zhǎng)期存活的例數(shù)仍較少。接受α-1,3-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶基因敲除（α-1,3-galactosyltransferase gene-knockout，GTKO）供體供腎的受體1、3和12個(gè)月的存活率分別為47.1%、24.2%和7.6%[7]?？梢?jiàn)大部分受體短期內(nèi)就發(fā)生移植腎失功。因此，仍有一些問(wèn)題需要明確并解決。本文就目前異種腎移植所存在的問(wèn)題和面臨的挑戰(zhàn)進(jìn)行歸納。

1 排斥反應(yīng)

1.1 固有免疫

由于供體豬和NHP受體之間的分子差異，固有免疫在異種移植排斥反應(yīng)中的影響明顯強(qiáng)于同種移植。巨噬細(xì)胞通過(guò)識(shí)別異種移植物的激活信號(hào)和干預(yù)抑制信號(hào)來(lái)介導(dǎo)強(qiáng)烈的排斥反應(yīng)，筆者所在團(tuán)隊(duì)前期研究中也發(fā)現(xiàn)豬腎有大量的巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)。CD47是一種膜糖蛋白，在所有組織中都有表達(dá)，并作為“自我標(biāo)記物”與巨噬細(xì)胞中的抑制劑受體信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白α（signal regulatory protein α，SIRPα）相互作用。SIRPα與CD47之間相互作用的缺失可導(dǎo)致異種移植的排斥反應(yīng)。此外，被激活的巨噬細(xì)胞還可以進(jìn)一步調(diào)節(jié)T細(xì)胞反應(yīng)，誘導(dǎo)適應(yīng)性反應(yīng)損傷異種移植物。

與巨噬細(xì)胞相似，自然殺傷（natural killer，NK）細(xì)胞在異種移植中起著關(guān)鍵作用，其作用機(jī)制依賴于激活和抑制信號(hào)之間的平衡。NK細(xì)胞無(wú)法有效識(shí)別異種組織上的抑制信號(hào)，從而損傷異種移植物。然而，一些研究表明NK細(xì)胞在異種移植排斥反應(yīng)中可能未起到關(guān)鍵作用[8]。另外，NK細(xì)胞可能被異種細(xì)胞的激活配體（比如NKG2D或NKp44及其各自的配體）所激活，加重對(duì)移植物的損傷[9]。為了減少NK細(xì)胞的活化，研究者們嘗試了不同基因修飾方案，如轉(zhuǎn)入人類白細(xì)胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）-E，HLA-Cw3或HLA-Cw4。然而相比于野生型豬，人NK細(xì)胞介導(dǎo)的毒性對(duì)導(dǎo)入NK細(xì)胞抑制分子的豬更高。NK細(xì)胞對(duì)異種器官損傷的其他機(jī)制是抗體依賴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用（antibodydependent cell-mediated cytotoxicity，ADCC）。因此，這種先天免疫反應(yīng)在異種器官移植中似乎難以被抑制。有體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)導(dǎo)入CD47能有效延長(zhǎng)異種移植腎存活時(shí)間[10]，這可能是抑制巨噬細(xì)胞吞噬異種組織的重要手段之一，但對(duì)于如何有效抑制NK細(xì)胞的殺傷作用仍需進(jìn)一步研究。

1.2 適應(yīng)性免疫反應(yīng)

異種移植的適應(yīng)性排斥反應(yīng)呈多樣性，包括超急性排斥反應(yīng)（hyperacute rejection，HAR）、抗體介導(dǎo)的排斥反應(yīng)（antibody-mediated rejection，AMR）、T細(xì)胞介導(dǎo)的排斥反應(yīng)（T cell-mediated rejection，TCMR）、亞急性或慢性體液或細(xì)胞排斥反應(yīng)[11]。使用hCD55或GTKO豬作為供腎來(lái)源，基本不會(huì)發(fā)生HAR；以共刺激阻滯劑為基礎(chǔ)的維持免疫方案對(duì)抑制或逆轉(zhuǎn)TCMR有一定的作用；AMR仍是阻礙臨床異種腎移植長(zhǎng)期存活的主要障礙，同時(shí)伴有或不伴有移植腎微循環(huán)血栓形成。為了抑制AMR，人們加大了對(duì)豬的基因改造，目前最新的轉(zhuǎn)基因豬是“12基因”豬[12]。然而并非對(duì)豬的基因改造越多就越有易于異種腎移植，且過(guò)多的基因改造容易造成豬畸形，難以存活。目前存活時(shí)間最長(zhǎng)的異種腎移植受體，其供豬基因型為GTKO/4-N-乙酰半乳糖胺轉(zhuǎn)移酶2敲除（β-1，4-N-acetylg alactosaminyltransferase 2 knockout，β4GalNT2KO）。筆者所在團(tuán)隊(duì)前期研究中即使使用了GTKO/β4GalNT2KO/hCD55/h血栓調(diào)節(jié)蛋白（thrombomodulin，TM）供豬，受體獼猴存活時(shí)間＜30 d，且大部分發(fā)生了AMR，表明確實(shí)存在其它的未知異種抗原。從2003年以來(lái)的基因修飾豬-NHP異種腎移植中，大部分受體都發(fā)生了AMR，其中有小部分發(fā)生了TCMR。因此，克服AMR才能快速地推動(dòng)異種腎移植的臨床應(yīng)用。

目前正在進(jìn)行異種移植研究的藥物包括達(dá)雷木 單 抗（daratumumab，anti-CD38） 和 貝 利 木 單抗[belimumab，B細(xì)胞活化因子（B cell activating factor，BAFF）阻滯劑][13]。另一種新藥imlifidase可能有一定的作用，它能在4 h內(nèi)清除循環(huán)中的IgG[14]。然而，主要問(wèn)題是所有抗體水平會(huì)在移植后的第1周反彈，如何抑制抗體的反彈尤為重要?？赡苄枰M(jìn)一步發(fā)現(xiàn)其它免疫原性較強(qiáng)的異種抗原并敲除。

2 難治性凝血功能紊亂

當(dāng)異種腎移植受體移植腎功能出現(xiàn)惡化時(shí)，往往伴有血小板的迅速下降，發(fā)生嚴(yán)重的凝血功能紊亂，移植腎表現(xiàn)出廣泛的微循環(huán)血栓形成和間質(zhì)出血。即使移植后馬上應(yīng)用抗凝藥物也無(wú)法抑制凝血功能紊亂，主要原因有：（1）低水平的抗豬抗體、補(bǔ)體和先天免疫細(xì)胞損傷或激活移植腎血管內(nèi)皮細(xì)胞；（2）NHP和豬凝血-抗凝血系統(tǒng)之間的分子不相容性。活化的豬血管內(nèi)皮細(xì)胞成為促凝劑，NHP體內(nèi)發(fā)生的凝血過(guò)程不能被豬的抗凝血因子有效抑制，因此將人凝血調(diào)節(jié)基因如TM、內(nèi)皮蛋白C受體（endothelial protein C receptor，EPCR）、組織因子途徑抑制劑（tissue factor pathway inhibitor，TFPI）等轉(zhuǎn)入豬的血管內(nèi)皮細(xì)胞中，可以在一定程度上抑制移植物微循環(huán)血栓的形成，其中導(dǎo)入人TM是克服異種移植凝血功能障礙的最重要手段之一。在體外實(shí)驗(yàn)中，豬血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)人TM可顯著抑制凝血酶原活性，延遲人血漿凝血時(shí)間，誘導(dǎo)人血小板聚集的活性降低[15]。另外在抗凝系統(tǒng)起到關(guān)鍵作用的是EPCR，它同時(shí)也具有抗炎和保護(hù)細(xì)胞信號(hào)的作用。因此，在供體豬中過(guò)表達(dá)人EPCR可能是一種克服相關(guān)障礙的潛在解決方案，提供有效的抗炎、抗凝和細(xì)胞保護(hù)信號(hào)傳導(dǎo)。在體外實(shí)驗(yàn)中，GTKO細(xì)胞表達(dá)人EPCR能減少血小板的聚集。人TFPI的表達(dá)是解決人組織因子（tissue factor，TF）與豬TFPI不結(jié)合的一個(gè)潛在途徑。體外研究表明，人TFPI的表達(dá)可抑制TF活性[16]。在體外實(shí)驗(yàn)中，大部分研究都證實(shí)了豬細(xì)胞導(dǎo)入人凝血調(diào)控基因可以達(dá)到有效抗凝的效果。

體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明，僅用GTKO/hCD55或者GTKO/β4GalNT2KO/hCD55的豬供腎，受體存活時(shí)間＞1年，未發(fā)生嚴(yán)重的微循環(huán)血栓[17]。而有些接受導(dǎo)入了人凝血調(diào)控基因的豬腎發(fā)生了嚴(yán)重的微循環(huán)血栓[18]，而且大部分跟急性排斥反應(yīng)有關(guān)，特別是急性AMR。當(dāng)抗原抗體結(jié)合后，激活補(bǔ)體的經(jīng)典途徑，生成攻膜復(fù)合物，破壞豬腎血管內(nèi)皮細(xì)胞。當(dāng)然，細(xì)胞性排斥反應(yīng)也能激活CD8+T細(xì)胞進(jìn)而損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞。因此筆者認(rèn)為，如果能解決排斥反應(yīng)對(duì)細(xì)胞的損傷，就能大大降低移植腎微循環(huán)血栓形成，如果排斥反應(yīng)仍解決不了，導(dǎo)入2～3個(gè)人凝血調(diào)控基因仍可能無(wú)法有效抑制微循環(huán)血栓形成。然而對(duì)于慢性排斥反應(yīng)，導(dǎo)入更多人凝血調(diào)控基因是否能在一定程度上起到抑制豬腎微循環(huán)血栓形成值得進(jìn)一步研究。

3 持續(xù)存在的炎癥反應(yīng)

異種移植受體發(fā)生持續(xù)的炎癥反應(yīng)，在異種移植失敗中起著重要作用[19-20]。當(dāng)異種移植受體發(fā)生凝血功能紊亂時(shí)，促炎因子和趨化因子能推動(dòng)異種排斥反應(yīng)的發(fā)生，但能否導(dǎo)致炎癥反應(yīng)仍不清楚。在異種移植受體中可以檢測(cè)到干擾素（interferon，IFN）-γ、白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-6、IL-12、IL-8、腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）-α 和單核細(xì)胞趨化蛋白（monocyte chemoattractant protein，MCP）-1水平明顯升高。在接受豬動(dòng)脈片移植的受體狒狒中，以共刺激通路阻滯劑為基礎(chǔ)的免疫抑制方案能有效減少IL-6的釋放。IL-6與炎癥和血栓并發(fā)癥都有關(guān)，其還能促進(jìn)組織因子的表達(dá)[21]，因此，抑制IL-6的釋放可能對(duì)異種移植受體有益。

在異種移植術(shù)后數(shù)日內(nèi)，受體C-反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）水平開(kāi)始升高，且CRP水平升高發(fā)生在受體凝血激活和消耗性凝血功能障礙發(fā)展之前[22]。值得注意的是，CRP水平較高與凝血功能紊亂快速發(fā)展和異種移植腎早期衰竭均有關(guān)。異種器官移植受體全身并發(fā)癥發(fā)生率的不同可能與異種器官的異質(zhì)性和器官特異性血管基因表達(dá)有關(guān)。在異種移植受體猴安樂(lè)死后，移植心臟和腎臟中檢測(cè)到CRP沉積。此外，在異種移植受體的肺中觀察到CRP陽(yáng)性的免疫細(xì)胞，表明發(fā)生了全身炎癥反應(yīng)。IL-6除了促進(jìn)炎癥反應(yīng)，還可以誘導(dǎo)肝細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞產(chǎn)生CRP[23]。在接受豬動(dòng)脈片的狒狒中，IL-6和CRP水平之間存在顯著的正相關(guān)，血液中CRP和纖維蛋白原水平之間也存在顯著的正相關(guān)[18]。CRP和纖維蛋白原都是急性期的反應(yīng)蛋白，在急性炎癥反應(yīng)中產(chǎn)生。

因此，抑制或者減弱炎癥反應(yīng)的發(fā)生，特別是抑制CRP和IL-6的釋放可能對(duì)延長(zhǎng)異種移植腎的存活有一定的作用。IL-6阻滯劑是目前用于異種移植中的一種抗炎藥物，它能有效抑制異種器官移植受體血清CRP升高[24-25]。在同時(shí)接受IL-6阻滯劑和共刺激阻滯劑治療的10例異種腎移植受體中，大部分長(zhǎng)期存活，也有幾例受體存活時(shí)間短，發(fā)生了AMR。在單獨(dú)使用IL-6阻滯劑，而未加用共刺激阻滯劑的異種腎移植受體存活時(shí)間短。由此說(shuō)明抗炎治療對(duì)異種移植可能有一定的積極作用，但單獨(dú)的抗炎治療并不能有效延長(zhǎng)異種移植腎的存活時(shí)間。

4 免疫抑制藥的選擇

免疫抑制藥的使用對(duì)異種腎移植受體存活有很大影響。特別是CD154-CD40共刺激阻滯劑的使用。CD154也稱為CD40配體或CD40L，主要表達(dá)于活化的T細(xì)胞，是TNF超家族分子的成員。它與抗原提呈細(xì)胞上的CD40蛋白結(jié)合，根據(jù)靶細(xì)胞類型產(chǎn)生多種效應(yīng)。總的來(lái)說(shuō)，CD40L有三個(gè)結(jié)合靶點(diǎn)：CD40、α5β1整合素和αIIbβ3。CD154作為一種共刺激分子，對(duì)T細(xì)胞亞群中的濾泡輔助性T細(xì)胞（follicular helper T cell，Tfh）尤其重要。在Tfh上，CD154通過(guò)結(jié)合B細(xì)胞表面的CD40促進(jìn)B細(xì)胞成熟和功能，從而促進(jìn)細(xì)胞間的交流。細(xì)胞表面CD154的缺失也會(huì)阻止生發(fā)中心的形成，從而抑制抗體親和力，這是適應(yīng)性免疫系統(tǒng)中的一個(gè)重要過(guò)程。

在異種器官移植中，有大量證據(jù)證明CD154-CD40共刺激阻滯劑的使用能明顯延長(zhǎng)移植受體的存活時(shí)間。雖然這種免疫抑制藥在異種器官移植中取得了較好的效果，但抗CD154 單抗可能引起血栓并發(fā)癥，其臨床適用性仍然存在問(wèn)題[26-27]。而已經(jīng)有大量研究證實(shí)了抗CD40單抗在NHP同種異體移植和豬-NHP異種移植中的有效性[28-29]，且其在人同種異體移植中也有一定的效果[30-31]。目前，臨床腎移植受者接受了一種新的抗CD40單抗的治療研究，取得了一定的初步療效[32]。另外的研究報(bào)道了一種靶向結(jié)合CD154的新型結(jié)構(gòu)域的抗體，該抗體沒(méi)有發(fā)生血栓栓塞并發(fā)癥，并與其他抗CD154單抗具有類似的療效。盡管CD154-CD40共刺激阻滯劑有很好的進(jìn)展，但尚不清楚何時(shí)以及是否最終批準(zhǔn)抗CD40單抗或抗CD154單抗應(yīng)用于臨床器官移植。

5 臨床受者的選擇

通過(guò)NHP模型能初步驗(yàn)證基因修飾豬的效用、免疫抑制方案的選擇和移植術(shù)后排斥反應(yīng)發(fā)生發(fā)展等科學(xué)問(wèn)題，然而，因NHP模型自身的局限性，目前仍不能達(dá)到穩(wěn)定的移植后移植物和受體長(zhǎng)期存活。那么腦死亡器官捐獻(xiàn)供者是否適合作為連接動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床試驗(yàn)的過(guò)渡？筆者所在團(tuán)隊(duì)前期開(kāi)展的體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)腦死亡器官捐獻(xiàn)供者預(yù)存抗豬抗體水平明顯較低，但具體原因不清楚。且腦死亡器官捐獻(xiàn)供者存在多種不穩(wěn)定因素，導(dǎo)致其難以長(zhǎng)期維持穩(wěn)定的血液循環(huán)。最近，人們已將10基因型豬腎移植至腦死亡器官捐獻(xiàn)者，在3 d后終止實(shí)驗(yàn)，病理活組織檢查未發(fā)現(xiàn)明顯的排斥反應(yīng)和微循環(huán)血栓形成[33]。雖然僅有3 d，但仍給我們提供了寶貴的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。因此，采用腦死亡器官捐獻(xiàn)供者作為異種器官移植受者模型有一定的應(yīng)用價(jià)值，但仍需進(jìn)一步探尋更具有實(shí)驗(yàn)價(jià)值的受者模型。

異種腎移植早期臨床試驗(yàn)的安全性和有效性應(yīng)該與長(zhǎng)期透析治療相比，而不是與同種異體腎移植的安全性和有效性相比較。因此，那些已經(jīng)在等待接受腎移植名單，且接受同種腎移植的可能性不大的那些患者可以考慮進(jìn)行異種腎移植，例如，部分B型或O型血的患者可能會(huì)在等待名單上等待7年甚至更長(zhǎng)時(shí)間，其中年齡超過(guò)55歲的患者在等待腎源期間很有可能因并發(fā)癥而死亡。因此，這部分患者可能是異種腎移植早期臨床試驗(yàn)的最佳受者。

此外，對(duì)于高致敏的患者是否能接受豬腎這一問(wèn)題，有研究發(fā)現(xiàn)HLA高水平患者中抗HLA抗體不會(huì)增加豬腎排斥反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)[34]。然而，又有一些研究證實(shí)抗HLA抗體與豬白細(xì)胞抗原（swine leukocyte antigen，SLA）之間存在交叉反應(yīng)[35-36]。因此，對(duì)于早期的臨床試驗(yàn)，為了避免任何交叉反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)，應(yīng)選擇非高致敏的患者接受豬腎移植。另外重要的是，有少量證據(jù)表明如果患者接受豬腎并產(chǎn)生抗豬抗體（如抗SLA抗體）而發(fā)生排斥反應(yīng)后，并不影響受者繼續(xù)接受同種腎移植[37]。因此臨床試驗(yàn)中，豬腎移植雖然是以治療為主要目的，但也可以有效地作為同種異體腎移植的橋梁。

6 交叉感染

排斥反應(yīng)和感染的平衡是影響移植受體長(zhǎng)期存活的一個(gè)重要因素，前者可以導(dǎo)致移植物失功，后者威脅受者的生命。在異種移植中，如果供體豬是在超潔凈級(jí)的飼養(yǎng)環(huán)境下繁殖和圈養(yǎng)，那么移植的器官將不存外源性致病微生物[38]。因此，異種腎移植術(shù)后感染的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)可能與同種腎移植相似[39]。最近的一項(xiàng)研究表明，異種腎移植受體狒狒接受幾個(gè)月的免疫抑制治療后，未出現(xiàn)巨細(xì)胞病毒激活[40]。在異種移植中使用CD154-CD40共刺激阻滯劑為基礎(chǔ)的免疫維持，同時(shí)加上抗胸腺細(xì)胞球蛋白、利妥昔單抗和糖皮質(zhì)激素的免疫誘導(dǎo)，其免疫抑制強(qiáng)度明顯高于同種腎移植，理論上更易發(fā)生感染。在短期存活的腎移植豬受體中，大部分死亡原因?yàn)榕懦夥磻?yīng)和消耗性凝血功能障礙，長(zhǎng)期存活的受體中，一部分死于感染，但長(zhǎng)期存活的例數(shù)并不多，無(wú)法得到充分的數(shù)據(jù)支持。無(wú)論如何，一旦異種移植受體可以得到長(zhǎng)期穩(wěn)定的存活，可考慮使用CD154-CD40共刺激阻滯劑作為基礎(chǔ)的免疫維持方案。

人類內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒（human endogenous retrovirus，HERV）在人體內(nèi)并不具有致病性，豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒（porcine endogenous retrovirus，PERV）也似乎不會(huì)對(duì)豬的健康造成問(wèn)題。然而，PERV是否在人類中具有致病性，以及是否會(huì)與HERV結(jié)合形成一種新的病毒，目前還不確定，但在目前動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和亞臨床試驗(yàn)中均驗(yàn)證未出現(xiàn)PERV的傳播。在體外實(shí)驗(yàn)中，用于治療獲得性免疫缺陷綜合征的抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物可以有效抑制PERV。如果證實(shí)在異種移植遠(yuǎn)期或其他特殊情況下可能會(huì)出現(xiàn)PERV的傳播，可以通過(guò)基因編輯技術(shù)阻斷這一過(guò)程[41]，但其對(duì)豬腎功能的影響尚不得而知。

7 其它問(wèn)題

7.1 高碳酸氫根

本團(tuán)隊(duì)前期研究發(fā)現(xiàn)異種腎移植獼猴受體均出現(xiàn)了血清碳酸氫根升高，可能是由豬腎和人腎的差異造成，但受體獼猴存活時(shí)間短，長(zhǎng)期存活時(shí)血清碳酸氫根的濃度是否能恢復(fù)正常仍不得而知，需要進(jìn)一步研究。

7.2 貧 血

豬的促紅細(xì)胞生成素（erythropoietin，EPO）在靈長(zhǎng)類動(dòng)物中是否發(fā)揮了充分作用，目前還存在疑問(wèn)[42]。接受豬腎的NHP腎功能穩(wěn)定時(shí)，仍會(huì)發(fā)生血紅蛋白水平降低，可能與CD154-CD40共刺激阻滯劑的作用有關(guān)，對(duì)異種腎移植受者抽血的次數(shù)也比較頻繁也可能是原因之一。即使證實(shí)豬EPO不能刺激NHP或人血紅蛋白生成，也可以通過(guò)外源性的補(bǔ)充人EPO或者通過(guò)基因工程將人EPO導(dǎo)入豬細(xì)胞中。

7.3 豬腎迅速生長(zhǎng)

將一個(gè)正在迅速增長(zhǎng)期的豬腎移植至NHP，豬腎將在受體體內(nèi)快速增長(zhǎng)，就像它仍在豬體內(nèi)一樣。2～3個(gè)月后，其生長(zhǎng)速度下降，并基本與受體狒狒的生長(zhǎng)速度一致，且將一個(gè)正在迅速增長(zhǎng)的豬腎移植到另一個(gè)生長(zhǎng)緩慢的豬體內(nèi)，移植腎的增長(zhǎng)速度仍然很快[43]，表明這不是異種移植特有的問(wèn)題。據(jù)推測(cè)，有一種先天因素導(dǎo)致了這種早期生長(zhǎng)，敲除生長(zhǎng)激素受體基因的豬腎或許可以解決這個(gè)問(wèn)題[44]，但至今未用于豬-NHP腎移植模型中。2022年1月，美國(guó)馬里蘭大學(xué)醫(yī)學(xué)中心將1顆基因修飾豬（敲除了生長(zhǎng)激素受體基因）的心臟移植至1例心力衰竭的患者，受者在移植術(shù)后2個(gè)月后死亡，其具體的死亡原因仍不清楚。因此，對(duì)于移植至人的豬腎究竟能生長(zhǎng)多大，仍然不清楚。筆者總結(jié)的近20年基因修飾豬-NHP異種腎移植體內(nèi)研究情況見(jiàn)附表1（掃描二維碼1可見(jiàn)）[4,10,17-18,45-64]。

掃描二維碼1可見(jiàn)附表1

8 小 結(jié)

綜上所述，雖然基因修飾豬-NHP異種腎移植取得很大的進(jìn)展，但因NHP本身的局限性，未來(lái)研究者們應(yīng)進(jìn)一步探究豬-NHP異種腎移植中存在的排斥反應(yīng)、凝血功能紊亂、炎癥反應(yīng)、交叉感染等問(wèn)題，積極尋找可能解決的方法，選擇最適的免疫抑制藥和臨床受者，促進(jìn)臨床異種腎移植的應(yīng)用，解決更多終末期腎病患者的移植需求。