4種酰胺類合成大麻素在人肝微粒體中Ⅰ相代謝規(guī)律研究

劉生鳳 ，張 嵐 ，劉書丞 ，侯臣之 ，徐 鵬 ，狄 斌 **

（1中國(guó)藥科大學(xué)藥物分析系，南京 210009；2國(guó)家禁毒委員會(huì)辦公室-中國(guó)藥科大學(xué)禁毒關(guān)鍵技術(shù)聯(lián)合實(shí)驗(yàn)室，南京 210009；3公安部禁毒情報(bào)技術(shù)中心，毒品監(jiān)測(cè)管控與禁毒關(guān)鍵技術(shù)公安部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100193）

合成大麻素是最常見的非法制造、販賣及濫用的一類新精神活性物質(zhì)，主要以電子煙、草藥混合物等形式出現(xiàn)，可作用于中樞神經(jīng)大麻素受體CB1和/或CB2，因此也被稱為合成大麻素受體激動(dòng)劑［1-3］。合成大麻素的藥理作用與四氫大麻酚（Δ9-THC，傳統(tǒng)大麻毒品的主要有效成分）相似，然而濫用合成大麻素更易產(chǎn)生嚴(yán)重的不良反應(yīng)，包括癲癇發(fā)作、胃腸道反應(yīng)、心臟毒性甚至死亡等［4-6］。為逃避管制，合成大麻素迅速更新變種，自2008年檢測(cè)到第一代萘甲酰吲哚類JWH-018 以來(lái)，合成大麻素迄今已發(fā)展至第8 代吲哚/吲唑酰胺類合成大麻素，2021 年7 月起，我國(guó)已整類列管合成大麻素以加強(qiáng)立法監(jiān)管［7-8］。

由于合成大麻素進(jìn)入人體后廣泛代謝，尿液中幾乎無(wú)原型，因而針對(duì)毒品原型的檢測(cè)方法極易導(dǎo)致該類毒品無(wú)法被檢出，造成假陰性的結(jié)果［9］。在現(xiàn)階段禁毒工作中，亟需通過(guò)推斷新型酰胺類合成大麻素的代謝過(guò)程確定代謝標(biāo)志物，為建立尿液和污水等生物樣品中該類毒品的檢驗(yàn)方法提供依據(jù)。雖然許多國(guó)內(nèi)外學(xué)者已針對(duì)個(gè)別合成大麻素體內(nèi)外代謝情況開展了深入研究，但合成大麻素結(jié)構(gòu)類似、變異迅速，也應(yīng)該研究合成大麻素類毒品的代謝規(guī)律，給潛在的新型合成大麻素代謝提供一定的參考［10-12］。2020年，蘇格蘭監(jiān)獄和國(guó)內(nèi)案件中相繼出現(xiàn)3 種新型酰胺類合成大麻素N-（1-乙氧基羰基-2-甲基丙基）-1-（5-氟戊基）吲哚-3-甲酰胺（5F-EMB-PICA）、N-（1-氨基-3，3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基）-1-（4-戊烯-1-基）-1H-吲唑-3-甲酰胺（ADB-4en-PINACA）和 2-［1-（4-氟丁基）-1H-吲哚-3-甲酰氨基］-3，3-二甲基丁酸甲酯（4FMDMB-BUTICA），目前國(guó)內(nèi)外對(duì)其代謝產(chǎn)物少有研究，各僅有一篇利用斑馬魚或人肝細(xì)胞實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ脱芯科浯x產(chǎn)物［13-17］。2016年，1-（4-氰基丁基）-N-（1-甲基-1-苯乙基）-1H-吲唑-3-甲酰胺（4CN-CUMYL-BUTINACA）在土耳其查獲的香草藥中首次被檢測(cè)到，目前發(fā)現(xiàn)有濫用的趨勢(shì)，然而國(guó)內(nèi)尚未報(bào)道關(guān)于此物質(zhì)的代謝研究［18-21］。

人肝微粒體體外溫孵法可以模擬人體代謝過(guò)程，目前已應(yīng)用于醫(yī)藥學(xué)領(lǐng)域，具有簡(jiǎn)便、快捷等優(yōu)點(diǎn)，在法庭科學(xué)領(lǐng)域?qū)π滦投酒反x物的研究方面也具有很好的應(yīng)用推廣前景。本研究結(jié)合人肝微粒體體外溫孵法，借助超高效液相色譜-高分辨質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)ADB-4en-PINACA、4CNCUMYL-BUTINACA、5F-EMB-PICA 和 4F-MDMBBUTICA 酰胺類合成大麻素（結(jié)構(gòu)式見圖1）在人肝微粒體中的Ⅰ相代謝物，并推斷其Ⅰ相代謝途徑，總結(jié)4種酰胺類合成大麻素代謝規(guī)律，以期對(duì)潛在的新型酰胺類合成大麻素代謝研究提供一定的參考，為建立生物樣品中該類物質(zhì)的檢驗(yàn)方法提供相關(guān)代謝研究數(shù)據(jù)。

Figure 1 Structures of four amide synthetic cannabinoids4F-MDMB-BUTICA: Methyl (S)-2-(1-(4-fluorobutyl)-1H-indole-3-carboxamido)-3, 3-dimethylbutanoate; 5F-EMB-PICA: N-[[1-(5-fluoropentyl)-1H-indol-3-yl]carbonyl]-L-valine,ethyl ester;4CN-CUMYL-BUTINACA:1-(4-cyanobutyl)-N-(1-methyl-1-phenylethyl)-1H-indazole-3-carboxamide;ADB-4en-PINACA:N-(1-amino-3,3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl)-1-(pent-4-en-1-yl)-1H-indazole-3-carboxamide

1 方 法

1.1 試 劑

ADB-4en-PINACA、4CN-CUMYL-BUTINACA、5F-EMB-PICA 和 4F-MDMB-BUTICA 標(biāo)準(zhǔn)品（公安部禁毒情報(bào)技術(shù)中心提供）。甲醇、乙腈（色譜純，美國(guó)Fisher公司）；甲酸、濃鹽酸（分析純，南京化學(xué)試劑股份有限公司）。男性蒙古人種（混合）人肝微粒體（LM-R-02M）［20 mg/mL，RILD 瑞德肝臟疾病研究（上海）有限公司］；還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）（德國(guó)Roche Diagnostics GmbH公司）；三羥甲基氨基甲烷（Tris）（分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；六水合氯化鎂（MgCl2·6H2O）（分析純，西隴化工股份有限公司）；去離子水由實(shí)驗(yàn)室制備。

1.2 儀 器

LC-30AD 超高效液相色譜串聯(lián)9030 四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用儀（日本Shimadzu 公司）；Auto Science MTN-2800D氮吹儀（天津Auto Science儀器有限公司）；D34135R 低溫冷凍離心機(jī)（瑞士Bio Tool公司）；實(shí)驗(yàn)室超純水系統(tǒng)（南京妙之儀電子科技有限公司）；XPR10 百萬(wàn)分之一天平（瑞士Mettler Toledo公司）。

1.3 分析條件

Waters Acquity UPLC BEH C18色譜柱（2.1 mm×100 mm，1.7μm），柱溫40 ℃；流量0.3 mL/min；進(jìn)樣量10μL；檢測(cè)波長(zhǎng)254 nm。流動(dòng)相：A 為0.1%甲酸水溶液，B 為乙腈；梯度洗脫程序如下（A∶B）：0 min（90∶10）→1 min（90∶10）→17 min（30∶70）→22 min（0∶100）→23 min（0∶100）→23.1 min（90∶10）→26 min（90∶10）。

ESI 電噴霧離子源；正離子模式；毛細(xì)管電壓為3.5 kV；霧化器氣體（N2）流速為3 L/min；加熱氣體（N2）流速為10 L/min；干燥氣體（N2）流速為10 L/min；接口溫度為300 ℃；DL 溫度為250 ℃；加熱塊溫度為400 ℃。各待測(cè)物通過(guò)正離子全掃描模式，掃描范圍：100~1 000 m/z；進(jìn)一步選取特定質(zhì)荷比（m/z）的離子作為目標(biāo)物進(jìn)行二級(jí)子離子掃描，碰撞能量為10~40 eV。

1.4 體外人肝微粒體孵育條件

孵育體系總體積200μL，包含50 mmol/L Tris-HCl 緩沖溶液（pH 7.4），6 mmol/L MgCl2，1 mg/mL肝微粒體，10 μg/mL 合成大麻素（除ADB-4en-PINACA 質(zhì)量濃度為5μg/mL），溫孵體系中有機(jī)溶劑的含量小于總體積的1%，以保證混合人肝微粒體蛋白酶的活性（n = 3）。于37 ℃、150 r/min 預(yù)孵育5 min，加入NADPH溶液（終濃度0.50 mmol/L）啟動(dòng)反應(yīng)，分別于10 min、60 min、3 h加入等體積冰乙腈200μL終止反應(yīng)，劇烈振蕩5 min。將混合人肝微粒體體外溫孵所得混合溶液在4 ℃、13 000 r/min條件下離心 10 min，取上清液 300 μL 在 40 ℃條件下用N2吹干。再用0.1%甲酸水-乙腈溶液（50∶50）120 μL 復(fù)溶，渦旋振蕩5 min，復(fù)溶溶液在4 ℃、13 000 r/min 條件下離心10 min，取上清液立即進(jìn)樣分析，采用Lab Solution 工作站對(duì)樣品進(jìn)行數(shù)據(jù)采集并分析。

將空白溶劑和未加底物的孵育反應(yīng)系統(tǒng)溶液作為陰性對(duì)照1 和2 同時(shí)進(jìn)行分析；同時(shí)將加入高溫滅活的人肝微粒蛋白的反應(yīng)體系（37 ℃，搖床振蕩3 h）作為陰性對(duì)照3 以確證底物孵育過(guò)程中沒(méi)有產(chǎn)生降解。

2 結(jié) 果

2.1 4種酰胺類合成大麻素代謝率分析

5F-EMB-PICA、ADB-4en-PINACA、4CN-CUMYL-BUTINACA 和 4F-MDMB-BUTICA 對(duì) 照 品 的液相色譜保留時(shí)間分別為16.07、14.29、15.33 和15.33 min。圖2 匯總了4 種合成大麻素液相色譜圖，其中每張小圖均疊加了陰性對(duì)照和人肝微粒體孵育10 min、60 min、3 h 的液相色譜圖（其中底物已用紅色方框標(biāo)記）。從圖2 可以得出，人肝微粒體孵育后底物色譜峰明顯下降，且產(chǎn)生了一些新的色譜峰相對(duì)于陰性對(duì)照，說(shuō)明4種酰胺類合成大麻素發(fā)生了代謝，從而可進(jìn)一步篩選并鑒定可能的代謝產(chǎn)物。

以陰性對(duì)照（0 min）中底物色譜峰峰面積為參照，分別用 10 min、60 min、3 h 的底物峰面積與之相比計(jì)算底物剩余百分比（n=3，圖3）。60 min 時(shí)ADB-4en-PINACA、5F-EMB-PICA、4CN-CUMYLBUTINACA 和4F-MDMB-BUTICA 底物剩余百分比均小于50%，分別為42.68%、1.98%、17.14%和25.94%；3 h 時(shí) ADB-4en-PINACA、5F-EMB-PICA、4CN-CUMYL-BUTINACA 和 4F-MDMB-BUTICA 底物剩余百分比均小于20%，分別為19.13%、0.59%、13.25%和12.36%。結(jié)果顯示，4種合成大麻素在人肝微粒體中穩(wěn)定性較低，代謝迅速，3 h近乎代謝完全。

2.2 4 種酰胺類合成大麻素在人肝微粒體中Ⅰ相代謝分析

Figure 2 HPLC chromatograms of 5F-EMP-PICA(A),ADB-4en-PINACA(B),4CN-CUMYL-BUTINACA(C),and 4F-MDMB-BUTICA(D)1:Negative control;2:Incubated for 10 min;3:Incubated for 60 min;4:Incubated for 3 h

Figure 3 Residual percentage of the four amide synthetic cannabinoids after treatment with human liver microsomes(,n = 3)

2.2.1 5F-EMB-PICA 5F-EMB-PICA 在人肝微粒體實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭谐醪借b定出14 種Ⅰ相體外代謝物，圖4 是14 種代謝物的提取離子色譜圖，代謝產(chǎn)物信息列于表1（代謝產(chǎn)物標(biāo)記為M），其中M1-2和M7 在3 h 沒(méi)有檢出，但在10 min 有檢出，因此也列入了表1。圖5 為人肝微粒體中5F-EMB-PICA 及其主要代謝物的二級(jí)質(zhì)譜圖。

從代謝物的提取離子色譜圖峰面積初步推斷，5F-EMB-PICA 主要Ⅰ相代謝產(chǎn)物為酯水解代謝產(chǎn)物（M3）、酯水解合并吲哚環(huán)羥化代謝產(chǎn)物（M4-2）和酰胺水解代謝產(chǎn)物（M10），羥基化代謝反應(yīng)優(yōu)先發(fā)生在吲哚環(huán)和氟戊烷側(cè)鏈上。根據(jù)原型化合物及代謝產(chǎn)物的質(zhì)譜裂解信息，推測(cè)5F-EMBPICA的代謝途徑示于圖6。

2.2.2 ADB-4en-PINACA ADB-4en-PINACA 在人肝微粒體實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭谐醪借b定出12種Ⅰ相體外代謝物，圖7 是12 種代謝物的提取離子色譜圖，代謝產(chǎn)物信息列于表2。圖8 為人肝微粒體中ADB-4en-PINACA及其主要代謝物的二級(jí)質(zhì)譜圖。

從代謝物的提取離子色譜圖峰面積初步推斷，ADB-4en-PINACA 主要Ⅰ相代謝產(chǎn)物為雙鍵氧化成鄰二醇代謝產(chǎn)物（M3）、戊烯側(cè)鏈單羥基化代謝產(chǎn)物（M1-1）和吲唑環(huán)單羥基化代謝產(chǎn)物（M1-2）。根據(jù)原型化合物及代謝產(chǎn)物的質(zhì)譜裂解信息，推測(cè)ADB-4en-PINACA 可能的代謝途徑示于圖9。

2.2.3 4CN-CUMYL-BUTINACA 4CN-CUMYLBUTINACA 在人肝微粒體實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭谐醪借b定出14 種Ⅰ相體外代謝物，圖10 是14 種代謝物的提取離子色譜圖，代謝產(chǎn)物信息列于表3，其中M2-2 在10 min有檢出，因此也列入了表3。圖11為人肝微粒體中4CN-CUMYL-BUTINACA 及其主要代謝物的二級(jí)質(zhì)譜圖。

Figure 4 Combined extracted ion chromatograms of 5F-EMB-PICA's metabolites identified in human liver microsomes

Table 1 Phase I metabolites of 5F-EMB-PICA

從代謝物的提取離子色譜圖峰面積初步推斷，4CN-CUMYL-BUTINACA 主要的Ⅰ相代謝產(chǎn)物為氧化脫氰羧基化代謝產(chǎn)物（M9）、氰基丁基側(cè)鏈單羥基化代謝產(chǎn)物（M1-2）和1-甲基-苯乙基單羥基化代謝產(chǎn)物（M1-1）。根據(jù)原型化合物及代謝產(chǎn)物的質(zhì)譜裂解信息，推測(cè)4CN-CUMYL-BUTINACA可能的代謝途徑示于圖12。

2.2.4 4F-MDMB-BUTICA 4F-MDMB-BUTICA在人肝微粒體實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭谐醪借b定出21種Ⅰ相體外代謝物，圖13 是21 種代謝物的提取離子色譜圖，代謝產(chǎn)物信息列于表4，其中M2、M3-1 和M3-2在10 min有檢出，因此也列入了表4。圖14為人肝微粒體中4F-MDMB-BUTICA 及其主要代謝物的二級(jí)質(zhì)譜圖。

從代謝物的提取離子色譜圖峰面積初步推斷，4F-MDMB-BUTICA 主要的Ⅰ相代謝產(chǎn)物為酯水解代謝產(chǎn)物（M7）、N-脫烷基代謝產(chǎn)物（M14）和酯水解合并脫氫代謝產(chǎn)物（M9），且羥基化代謝反應(yīng)優(yōu)先發(fā)生在吲哚環(huán)上。根據(jù)原型化合物及代謝產(chǎn)物的質(zhì)譜裂解信息，推測(cè)4F-MDMB-BUTICA 可能的代謝途徑見圖15。

Figure 5 Mass spectrum and fragmentation information of 5F-EMB-PICA and its main metabolites in human liver microsomesA:5F-EMB-PICA;B:Ester hydrolysis metabolite(M3);C:Ester hydrolysis and hydroxylation metabolite(M4-2);D:Ester hydrolysis,oxidative defluorination and hydroxylation metabolite(M5);E:Ester hydrolysis and dehydrogenation metabolite(M6);F:Amide hydrolysis metabolite(M10)

Figure 6 Metabolic pathways of 5F-EMB-PICA in human liver microsomes

Figure 7 Combined extracted ion chromatograms of ADB-4en-PINACA's metabolites identified in human liver microsomes

Table 2 Phase Ⅰmetabolites of ADB-4en-PINACA

3 討 論

3.1 體外人肝微粒體孵育底物濃度優(yōu)化

在人肝微粒體蛋白質(zhì)量濃度為1 mg/mL，孵育時(shí)間為60 min條件下，分別考察了3種酰胺類合成大麻素質(zhì)量濃度（1，5，10 μg/mL）對(duì)其代謝的影響，結(jié)果見圖16。

結(jié)果顯示，除ADB-4en-PINACA 濃度為10μg/mL 時(shí)，底物剩余百分比為64.8%，其余均小于25%。在不顯著影響代謝率的情況下，當(dāng)?shù)孜餄舛冗x擇更高時(shí)，潛在的代謝物的響應(yīng)也會(huì)更高，更容易被檢出?；谝陨峡紤]，本研究酰胺類合成大麻素的孵育質(zhì)量濃度選擇為10 μg/mL（除ADB-4en-PINACA質(zhì)量濃度為5μg/mL）。

3.2 4種酰胺類合成大麻素代謝規(guī)律

Figure 8 Mass spectrum and fragmentation information of ADB-4en-PINACA and its main metabolites in human liver microsomesA: ADB-4en-PINACA; B: Hydroxylation metabolite (M1-1); C: Hydroxylation metabolite (M1-2); D: Dihydroxylation metabolite (M2); E: Dihydrodiol(N-pentenyl tail)metabolite(M3);F:Amide hydrolysis and dihydrodiol(N-pentenyl tail)metabolite(M6)

Figure 9 Metabolic pathways of ADB-4en-PINACA in human liver microsomes

Figure 10 Combined extracted ion chromatograms of 4CN-CUMYL-BUTINACA's metabolites identified in human liver microsomes

Table 3 Phase Ⅰmetabolites of 4CN-CUMYL-BUTINACA

根據(jù)表1 ~ 4，匯總統(tǒng)計(jì)出4 種酰胺類合成大麻素在人肝微粒體中一共存在27 種Ⅰ相代謝途徑，包括羥基化、羰基化、羧基化、N-脫烷基和酯水解等。首先，從27種代謝途徑發(fā)生的頻率可知，單羥基化、雙羥基化、N-脫烷基、N-脫烷基合并羥基化、酯/酰胺水解、酯水解合并羥基化和酯水解合并脫氫在4 種酰胺類合成大麻素中普遍發(fā)生。羥基化反應(yīng)位點(diǎn)普遍發(fā)生在烷基側(cè)鏈、吲哚/吲唑環(huán)和酰胺N 端，羥基化的目的是使分子極性增大，更有利于體內(nèi)通過(guò)代謝后排出體外，是非常常見的一種代謝方式。其次，根據(jù)提取離子色譜圖的峰面積，初步得出4 種酰胺類合成大麻素主要的Ⅰ相代謝途徑為酯水解、雙鍵氧化成鄰二醇、氧化脫氟羧基化、單羥基化和N-脫烷基，其中羥基化代謝反應(yīng)優(yōu)先發(fā)生在烷基側(cè)鏈和吲哚/吲唑環(huán)上。以上4 種酰胺類合成大麻素代謝規(guī)律的總結(jié)，希望能給新出現(xiàn)的酰胺類合成大麻素代謝研究提供參考。

3.3 4種酰胺類合成大麻素代謝標(biāo)志物分析

從代謝物的提取離子色譜圖峰面積得知，ADB-4en-PINACA、5F-EMB-PICA、4CN-CUMYLBUTINACA 和4F-MDMB-BUTICA 的峰度最大代謝產(chǎn)物分別為酯水解、雙鍵氧化成鄰二醇、氧化脫氰羧基化和酯水解代謝產(chǎn)物。在溫孵10 min，60 min和3 h 過(guò)程中，4 種合成大麻素對(duì)應(yīng)的峰度最大代謝產(chǎn)物的峰面積均逐漸增大，這與圖3底物剩余百分比逐漸降低結(jié)論相對(duì)應(yīng)。綜上，酯水解代謝產(chǎn)物可推薦作為5F-EMB-PICA 和4F-MDMB-BUTICA的代謝標(biāo)志物，雙鍵氧化成鄰二醇和氧化脫氰羧基化代謝產(chǎn)物可分別推薦作為ADB-4en-PINACA和4CN-CUMYL-BUTINACA的代謝標(biāo)志物。

Figure 11 Mass spectrum and fragmentation information of 4CN-CUMYL-BUTINACA and its main metabolites in human liver microsomesA: 4CN-CUMYL-BUTINACA; B:Hydroxylation metabolite (M1-1); C: Hydroxylation metabolite (M1-2);D: Dihydroxylation metabolite (M2-1); E: NDealkylation metabolite(M5);F:Oxidative decyanation,hydroxylation and carboxylation metabolite(M9)

Figure 12 Metabolic pathways of 4CN-CUMYL-BUTINACA in human liver microsomes

Figure 13 Combined extracted ion chromatograms of 4F-MDMB-BUTICA's metabolites identified in human liver microsomes

Table 4 Phase I metabolites of 4F-MDMB-BUTICA

Figure 14 Mass spectrum and fragmentation information of 4F-MDMB-BUTICA and its main metabolites in human liver microsomesA: 4F-MDMB-BUTICA; B:Hydroxylation metabolite (M1-1);C: Ester hydrolysis metabolite (M7); D: Ester hydrolysis and dehydrogenation metabolite(M9);E:N-Dealkylation metabolite(M14);F:N-Dealkylation and ester hydrolysis metabolite(M16)

通過(guò)分析4 種酰胺類合成大麻素原型及其61種代謝物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，得出吲唑酰胺類合成大麻素（ADB-4en-PINACA 和 4CN-CUMYL-BUTINACA）具有m/z 145 的骨架結(jié)構(gòu)，其代謝物具有m/z 145 或161（吲唑環(huán)單羥基化）的骨架結(jié)構(gòu)；吲哚酰胺類合成大麻素（5F-EMB-PICA 和4F-MDMB-BUTICA）具有m/z 144 的骨架結(jié)構(gòu)，其代謝物具有m/z 144 或160（吲哚環(huán)單羥基化）的骨架結(jié)構(gòu)。在基層公安實(shí)踐中，可通過(guò)掃描特征碎片m/z 144、145、160 和161，來(lái)初步篩選酰胺類合成大麻素。

4 總 結(jié)

本研究應(yīng)用UHPLC-HRMS技術(shù)篩選并初步鑒定了4 種酰胺類合成大麻素在人肝微粒體孵育模型中的61 種Ⅰ相代謝產(chǎn)物，推測(cè)了其化學(xué)結(jié)構(gòu)及27 種Ⅰ相代謝途徑。該研究結(jié)果為新型酰胺類合成大麻素代謝研究提供了參考，為4種酰胺類合成大麻素常規(guī)尿液樣本分析和污水中該類毒品毒情評(píng)估提供了潛在的檢測(cè)標(biāo)志物。此外，后續(xù)工作一方面可以制備主要代謝物的標(biāo)準(zhǔn)品，進(jìn)一步對(duì)本研究代謝物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行確證；另一方面，在禁毒實(shí)踐中亟需針對(duì)合成大麻素類毒品的Ⅱ相代謝及排泄展開研究，為該類毒品的認(rèn)定及生物檢材中該類毒品檢驗(yàn)方法的建立提供依據(jù)。

Figure 15 Metabolic pathways of 4F-MDMB-BUTICA in human liver microsomes

Figure 16 Residual percentage of substrate after treatment with different concentration of four amide synthetic cannabinoids （,n = 3）