不同硒源對(duì)濟(jì)寧青山羊生長(zhǎng)性能、抗氧化能力及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

康永剛，廖云瓊，呂顏枝

(徐州生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇 徐州 221006)

目前飼糧中硒源分為無機(jī)硒和有機(jī)硒兩種，常用的無機(jī)硒是亞硒酸鈉(Sodium selenite，SS)，其含硒量高，毒性強(qiáng)，利用率低[1]，而有機(jī)硒如蛋氨酸硒、半胱氨酸硒、富硒酵母、硒代蛋氨酸和富硒藻類等，其適口性好、毒性小、吸收率高，因此有機(jī)硒作為飼料添加劑應(yīng)用廣泛。酵母硒(Selenium yeast，SY)是酵母在培養(yǎng)過程中同化培養(yǎng)基中的無機(jī)硒，得到有機(jī)硒富集在酵母細(xì)胞中的一種微生物發(fā)酵產(chǎn)物[2]，而硒代蛋氨酸(Selenomethionine，Se-Met)被認(rèn)為是酵母硒中有機(jī)硒的主要存在形式，因此，一般認(rèn)為硒代蛋氨酸的功能可能好于酵母硒[3]。研究報(bào)道，飼糧中添加有機(jī)硒既能提高日增重，又能改善機(jī)體的抗氧化能力[4]，Gong等[5]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加酵母硒可以顯著提高血清中谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及總抗氧化能力(T-AOC)，王建等[6]認(rèn)為，有機(jī)硒組(蛋氨酸硒羥基類似物)粗蛋白質(zhì)、粗脂肪的表觀消化率顯著優(yōu)于無機(jī)硒組(亞硒酸鈉)。目前，酵母硒在飼料生產(chǎn)中應(yīng)用較多，而硒代蛋氨酸大多應(yīng)用于豬、禽飼糧中?；诖?，本試驗(yàn)旨在研究飼糧中添加不同水平硒代蛋氨酸和酵母硒對(duì)濟(jì)寧青山羊生長(zhǎng)性能、抗氧化能力及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響，為硒代蛋氨酸和酵母硒在山羊生產(chǎn)中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)時(shí)間和地點(diǎn)

試驗(yàn)于2020年6月11日至2020年8月24日在徐州大草原牧業(yè)有限公司進(jìn)行。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼糧

試驗(yàn)選取體重9.59～14.06 kg、健康的濟(jì)寧青山羊50只，隨機(jī)分為5組，每組10只，每組2個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5只，對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組飼糧中分別添加以硒含量計(jì)算的0.3 mg/kg亞硒酸鈉(0.3 SS組)、0.3 mg/kg酵母硒(0.3 SY組)、0.3 mg/kg硒代蛋氨酸(0.3 SM組)和0.5 mg/kg硒代蛋氨酸(0.5 SM組)，各組飼糧中硒含量的實(shí)測(cè)值分別為0.05 mg/kg(C組)、0.31 mg/kg(0.3 SS組)、0.30 mg/kg(0.3 SY組)、0.32 mg/kg(0.3 SM組)和0.51 mg/kg(0.5 SM組)。亞硒酸鈉(純度為44.7%)、酵母硒(硒濃度為2 000 mg/kg)、硒代蛋氨酸(純度為99%)由某公司提供?；A(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.3 飼養(yǎng)管理

各組飼養(yǎng)管理模式相同，半開放式舍飼，試驗(yàn)前打掃圈舍衛(wèi)生、消毒，預(yù)飼期進(jìn)行健康檢查、編號(hào)、稱重、分組、免疫、驅(qū)蟲和飼料過渡；進(jìn)入試驗(yàn)期后，定時(shí)(08:00和16：00)、定量飼喂，自由飲水，適當(dāng)運(yùn)動(dòng)，保持圈舍衛(wèi)生，每天清理飼槽，定期消毒圈舍。

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 生產(chǎn)性能測(cè)定 分別于試驗(yàn)前和最后一天測(cè)量空腹體重作為始重和末重，每天記錄投喂量和剩料量，計(jì)算平均日采食量(ADFI)、日增重(ADG)、料重比(F/G)。

1.4.2 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率測(cè)定 試驗(yàn)結(jié)束前5 d，每組隨機(jī)挑選4只羊(每個(gè)重復(fù)2只)，單欄飼喂，采用全收糞法進(jìn)行消化試驗(yàn)，晨飼后1 h收集糞便，連續(xù)收集5 d，采集的糞便樣品用10%稀硫酸進(jìn)行固氮處理后，按照《飼料分析與飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)》進(jìn)行粗蛋白質(zhì)(CP)、粗脂肪(EE)、中性洗滌纖維(NDF)和酸性洗滌纖維(ADF)的測(cè)定[7]，計(jì)算各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率。

1.4.3 抗氧化指標(biāo)測(cè)定 試驗(yàn)結(jié)束次日08:00稱重后，從被抽取的試驗(yàn)羊靜脈采集血液10 mL，收集血清放置于-20 ℃冰箱中保存待測(cè)。使用南京建成生物工程研究所提供的試劑盒并嚴(yán)格按照操作說明測(cè)定總抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。

1.5 數(shù)據(jù)處理

采用Excel進(jìn)行初步統(tǒng)計(jì)處理，SPSS 17.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，試驗(yàn)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同硒源對(duì)濟(jì)寧青山羊生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，各組羊初始體重、平均日采食量無顯著差異(P>0.05)。平均日增重0.3 SM組最高，分別比對(duì)照組、0.3 SS組、0.3 SY組和0.5 SM組提高19.8%、13.1%、8.1%、6.8%，與各組差異顯著(P<0.05)；料重比0.3 SM組最低，顯著低于對(duì)照組、0.3 SS組、0.3 SY組和0.5 SM組(P<0.05)。

表2 不同硒源對(duì)濟(jì)寧青山羊生長(zhǎng)性能的影響

2.2 不同硒源對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

由表3可知，各試驗(yàn)組CP、EE、NDF和ADF表觀消化率均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。0.3 SM組最高，NDF表觀消化率顯著高于其它各組(P<0.05)，CP、ADF表觀消化率與0.5 SM組差異不明顯(P>0.05)，但顯著高于其它各組，EE表觀消化率顯著高于對(duì)照組、0.3 SS組(P<0.05)。

表3 不同硒源對(duì)濟(jì)寧青山羊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

2.3 不同硒源對(duì)濟(jì)寧青山羊抗氧化能力的影響

由表4可知，飼糧中添加硒代蛋氨酸和酵母硒對(duì)血清抗氧化能力有著顯著影響，其中GSH-Px、T-AOC、SOD活性值0.3 SM組最高，MDA含量0.3 SM組最低，上述各指標(biāo)0.3 SM與對(duì)照組、0.3 SS組差異顯著(P<0.05)，但與0.3 SY組、0.5 SM組差異不顯著(P>0.05)。

表4 不同硒源對(duì)濟(jì)寧青山羊抗氧化能力的影響

3 討 論

3.1 不同硒源對(duì)濟(jì)寧青山羊生長(zhǎng)性能的影響

研究表明，補(bǔ)硒能提高絨山羊羔羊的平均日增重[8]，在飼糧中添加0.3 mg/kg酵母硒可顯著增加湖羊的日增重，降低料重比[1]。本試驗(yàn)研究表明，飼糧中添加0.3 mg/kg酵母硒比0.3 mg/kg亞硒酸鈉增重效果好，再次驗(yàn)證酵母硒對(duì)羊的生長(zhǎng)有促進(jìn)作用，與張永翠等[9]研究結(jié)果一致。王永俠等[3]研究認(rèn)為硒代蛋氨酸可以提高肉雞的生長(zhǎng)性能，郭永清等[10]研究認(rèn)為飼糧中添加硒代蛋氨酸顯著降低了斷奶仔豬22～42 d的料重比，改善了斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能。本試驗(yàn)中，通過對(duì)比發(fā)現(xiàn)，0.3 mg/kg硒代蛋氨酸平均日增重最高，料重比最低，說明0.3 mg/kg硒代蛋氨酸增重效果優(yōu)于0.3 mg/kg酵母硒和0.3 mg/kg亞硒酸鈉，這可能是由于硒代蛋氨酸能夠促進(jìn)瘤胃微生物的生長(zhǎng)，進(jìn)而提高瘤胃消化飼糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的能力，促進(jìn)羊只生長(zhǎng)。本試驗(yàn)中，當(dāng)硒代蛋氨酸添加量為0.5 mg/kg時(shí)，試驗(yàn)組部分羊只出現(xiàn)食欲下降、輕微腹瀉，導(dǎo)致采食量、平均日增重低于0.3 mg/kg硒代蛋氨酸，按文獻(xiàn)[11]所示，20～50 kg肉用育肥羊硒的推薦量為0.18～0.31 mg/kg，稍微超過最適劑量就會(huì)導(dǎo)致羊的生長(zhǎng)性能下降，說明0.5 mg/kg硒代蛋氨酸適不利于動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育。

3.2 不同硒源對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

硒既能促進(jìn)瘤胃微生物的發(fā)酵效率，改善瘤胃微生態(tài)內(nèi)環(huán)境，又能調(diào)節(jié)胃腸道的發(fā)酵功能，促進(jìn)乳酸菌、纖維素菌群繁殖，從而提高飼糧中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率[12]。劉敏[13]研究表明，在妊娠后期的母羊飼糧中添加適量酵母硒和維生素E，能提高成年羊粗脂肪、粗蛋白質(zhì)、粗纖維表觀消化率，朱翱翔等[1]研究認(rèn)為飼糧中添加0.3 mg/kg酵母硒可以顯著提高NDF、ADF、CP和EE的表觀消化率，張永翠等[9]在飼糧中添加酵母硒對(duì)杜寒雜交羊也有相同的發(fā)現(xiàn)。本試驗(yàn)中，0.3 mg/kg酵母硒對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率均高于0.3 mg/kg亞硒酸鈉，與上述結(jié)果一致。目前，關(guān)于硒代蛋氨酸對(duì)羊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率的報(bào)道較少。本試驗(yàn)中，0.3 mg/kg硒代蛋氨酸CP、EE、NDF、ADF表觀消化率都高于0.3 mg/kg酵母硒，說明飼糧中添加硒代蛋氨酸可以提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率，這可能由于硒代蛋氨酸改善了瘤胃微生態(tài)內(nèi)環(huán)境，提高了飼料在胃腸道的降解率，從而提高了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率。研究表明，富硒地區(qū)的家畜補(bǔ)硒可能會(huì)引起慢性中毒，高劑量的硒會(huì)導(dǎo)致豬發(fā)生硒中毒癥狀[10]，會(huì)直接影響到瘤胃和消化道微生物菌群失去動(dòng)態(tài)平衡。本試驗(yàn)研究表明，當(dāng)硒代蛋氨酸添加量為0.5 mg/kg時(shí)，NDF、ADF、EE和CP的表觀消化率出現(xiàn)下降，這可能是因?yàn)槲砑恿窟^多導(dǎo)致慢性中毒，但與張永翠等[9]研究的硒添加量為0.8 mg/kg時(shí)，杜寒雜交羊出現(xiàn)體溫升高、呼吸困難、大量飲水、尿頻皮下出血等癥狀不一樣，因此也有可能是因?yàn)樘砑恿窟^多改變了瘤胃微生態(tài)內(nèi)環(huán)境，影響了瘤胃的發(fā)酵功能，結(jié)論有待進(jìn)一步證實(shí)。

3.3 不同硒源對(duì)抗氧化能力的影響

在飼糧中添加一定量的硒可以提高GSH-Px的活性，進(jìn)一步提高機(jī)體抗氧化能力[6]。硒缺乏時(shí)會(huì)使GSH-Px活性降低、細(xì)胞內(nèi)自由基積累，進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞和線粒體膜破壞、機(jī)體活性氧水平升高、氧化應(yīng)激增強(qiáng)[14]。研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加酵母硒可提高蒙古羊血清中GSH-Px和SOD活性，降低血清中氧化產(chǎn)物MDA的含量[4]。孫計(jì)桃等[15]研究認(rèn)為，在飼糧中添加0.05、0.10 mg/kg硒能提高蒙古公羊血液中GSH-Px和超氧化物歧化酶(SOD)活性。本試驗(yàn)研究表明，0.3 mg/kg酵母硒與0.3 mg/kg亞硒酸鈉相比顯著提高了濟(jì)寧青山羊血清T-AOC水平、GSH-Px和SOD活性，顯著降低了血清MDA含量，與上述研究結(jié)果一致。

GSH-Px、硫氧還蛋白還原酶(TrxR)、甲狀腺素脫碘酶(DIOs)等作為硒蛋白參與構(gòu)成的典型硒酶，在機(jī)體抗氧化抗應(yīng)激方面發(fā)揮重要作用[16]。蔣宗勇等[17]研究發(fā)現(xiàn)，硒添加劑量為0.3 mg/kg時(shí)，Se-Met可提高肥育豬血漿GPX活性、SOD活性和總抗氧化能力，降低MDA含量。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，與0.3 mg/kg亞硒酸鈉和0.3 mg/kg酵母硒相比，0.3 mg/kg硒代蛋氨酸顯著提高了血清GSH-Px、SOD活性，與蔣宗勇等[17]研究結(jié)果相似，當(dāng)硒代蛋氨酸添加為0.5 mg/kg時(shí)GSH-Px、SOD活性有所下降，說明0.3 mg/kg硒代蛋氨酸對(duì)機(jī)體的抗氧化功能有明顯的增強(qiáng)作用，這可能是由于飼糧添加硒代蛋氨酸可以促進(jìn)機(jī)體清除自由基，提高血清GSH-Px活性，從而提高機(jī)體的抗氧化能力。

T-AOC可以反映機(jī)體對(duì)外來刺激的代償能力，MDA是膜脂過氧化的重要產(chǎn)物之一，由自由基作用于脂質(zhì)發(fā)生過氧化反應(yīng)生成，可引起蛋白質(zhì)、核酸等生命大分子的交聯(lián)聚合，從而對(duì)機(jī)體造成損傷，其含量高則機(jī)體受脂質(zhì)過氧化的損傷程度大[18]。郭永清等[10]研究表明，0.2、0.4 mg/kg硒代蛋氨酸組仔豬血清中T-AOC活力最高，MDA含量最低。本試驗(yàn)中，飼糧中添加0.3 mg/kg硒代蛋氨酸提升了T-AOC活力，抑制了MDA的生成，說明飼糧中添加硒提高了機(jī)體的抗氧化能力，降低脂質(zhì)過氧化對(duì)機(jī)體的損傷，且硒代蛋氨酸抗氧化效果優(yōu)于酵母硒。

4 結(jié) 論

在飼糧中添加硒代蛋氨酸和酵母硒改善了濟(jì)寧青山羊的生長(zhǎng)性能，提高了血清抗氧化水平，促進(jìn)了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。綜合生長(zhǎng)性能、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率及抗氧化能力等指標(biāo)，在濟(jì)寧青山羊飼糧中添加0.3 mg/kg(以硒計(jì))硒代蛋氨酸效果較好。