細胞塊切片和常規(guī)細胞涂片免疫組化染色對胸腔積液的診斷研究

高艷華，陳鳳，董云虹

（遼陽市中心醫(yī)院婦產(chǎn)科，遼寧 遼陽 111000）

胸腔積液主要由胸膜通透性增加、胸部損傷、毛細血管內(nèi)的靜水壓增高等引起，患者多會出現(xiàn)胸悶、呼吸困難等癥狀，具有極高的發(fā)病率與病死率，給患者及家屬帶來極大痛苦[1]。常規(guī)細胞涂片檢測是篩查腫瘤最常用的手段之一，操作簡單便利，對于診斷胸腔積液具有一定價值，但此檢測方法具有一定局限性，難以準確鑒別疾病類型，檢出率不佳，診斷敏感度、特異度較低，影響患者后續(xù)治療，預后較差[2]。因此，探討更有效的檢測方法準確判斷胸腔積液患者良惡性具有重要意義，有助于臨床醫(yī)師選擇更準確、有效的治療方案，及時控制患者病情發(fā)展。近年來，細胞塊切片法因其對鑒別間皮性腫瘤、轉(zhuǎn)移性癌的敏感度較高，而逐漸被臨床推廣，并取得了良好的效果[3-4]?；诖耍狙芯窟x取2018年10 月至2020 年10 月本院收治的100 例胸腔積液患者作為研究對象，旨在進一步分析細胞塊切片法檢測的臨床應用價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2018 年10 月至2020 年10 月本院收治的100例胸腔積液患者作為研究對象，其中男48例，女52例；年齡38～60歲，平均（49.00±3.12）歲；體重指數(shù)19～24 kg/m2，平均（21.50±1.12）kg/m2。納入標準：具有胸悶、呼吸困難、明顯胸痛等癥狀；對本研究知情并簽署知情同意書；本研究經(jīng)本院醫(yī)學倫理委員會審核批準。排除標準：合并其他嚴重肝腎功能不全者；合并其他惡性腫瘤疾??；嚴重心、腦、血管疾??；合并免疫系統(tǒng)、感染性疾??；合并精神類疾病者，無法進行正常的溝通交流；依從性較差；無法耐受本研究檢測者；臨床資料不完整者；依從性較差者。

1.2 方法

1.2.1 細胞塊切片 抽取患者清晨空腹狀態(tài)下的胸腔積液50 ml，將其分裝至5個試管內(nèi)，以3 000 r/min離心15 min。離心處理后，使用移液槍吸出上清液，于沉渣中，抽取部分液體，對其進行細胞涂片學檢查，在剩余的沉渣中加入2.5 ml的戊二醛，將其進行固定后，以3 000 r/min 離心5 min，并使用移液槍吸出上層清液，取出沉渣，并包于濾紙中，進行常規(guī)脫水，做成石蠟細胞塊，將細胞塊切成厚度為3 μm 的切片，于60 ℃環(huán)境下烘干1 h，閱片方式：將涂片及細胞切片置于光鏡下進行觀察，若觀察到10個及以上具有惡性特征的細胞則診斷為陽性，若未觀察到異型細胞，則診斷為陰性，若診斷不明確，則需結(jié)合臨床進行綜合性判斷[5]。

1.2.2 常規(guī)細胞涂片 采集患者10～20 ml 漿膜腔積液標本，迅速送至病理檢驗室，應用高速離心機，以2 000 r/min 離心5 min，將沉渣取出，以推拉法制片，每例5～7 片，待其自然風干后，應用瑞特-吉姆薩雙染色法進行染色處理，對于血型混濁的標本，進行離心處理后，進行相應核細胞層制片，對于疑似癌細胞，縮短其染色時間。

1.2.3 胸膜組織病理檢查（金標準）方法 對患者進行全麻后，將胸腔鏡置入胸膜腔，發(fā)現(xiàn)胸膜病變明顯的部位，應用腔鏡操作器械，切取部分壁層胸膜或表面臟層胸膜，切取時注意避免損傷肋間血管與神經(jīng)，切除胸膜后送至病理檢查。

1.3 觀察指標 比較兩種檢測方法的診斷準確度、敏感度、特異度。準確度=（真陽性+真陰性）例數(shù)/總例數(shù)×100%；敏感度=真陽性例數(shù)/（假陰性+真陽性）例數(shù)×100%；特異度=真陰性例數(shù)/（假陽性+真陰性）例數(shù)×100%。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 21.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料以[n（%）]表示，采用χ2檢驗，計量資料以“”表示，采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種方法檢查結(jié)果比較 胸膜組織病理檢查結(jié)果顯示：100 例胸腔積液患者中陽性68 例、陰性32例；細胞塊切片檢查結(jié)果顯示：真陽性65例，假陽性6 例，真陰性26 例，假陰性3 例；常規(guī)細胞涂片免疫組化染色檢查結(jié)果顯示：真陽性58 例，假陽性12例，真陰性20例，假陰性10例。見表1。

表1 各方法檢查結(jié)果比較（n）

2.2 兩種方法診斷價值比較 常規(guī)細胞涂片免疫組化染色與細胞塊切片準確度與敏感度比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），特異度比較差異無統(tǒng)計學意義，見表2。

表2 兩種方法診斷價值分析[%（n/N）]

3 討論

胸腔膜主要是一個潛在的腔隙，位于肺和胸壁之間，正常情況下，臟層胸膜與壁層胸膜之間有一層很薄的液體，患者進行呼吸時，可發(fā)揮潤滑的作用，且每次呼吸時，其胸腔膜形狀、壓力會發(fā)生一定的變化，使胸膜腔內(nèi)的液體持續(xù)濾出、吸收，從而使其保持平衡狀態(tài)，而由于多種因素導致患者胸膜腔內(nèi)的液體形成較快或吸收過緩，從而導致發(fā)生胸腔積液[6]。胸腔積液以滲出性胸膜炎最常見，若積液量＜0.3 L 時，患者癥狀多不明顯；但若超過0.5 升，患者可感到胸悶，隨著積液的進一步增大，會出現(xiàn)明顯的心悸、呼吸困難、胸悶、呼吸困難、胸痛等不良表現(xiàn)，且呼氣時會加重，若此病持續(xù)發(fā)展，會導致病情惡化，嚴重威脅患者身體健康與生命安全[7]。但該病患者具有多種的類型，難以治愈，因此，采取有效的檢測方法準確檢測出患者病因及疾病分型情況，有助于及時采取對應性干預措施進行治療，以控制病情進一步發(fā)展，保證患者的生命安全。常規(guī)細胞涂片檢測、胸腔積液細胞學檢驗均為臨床常見檢測胸腔積液的方法，后者的檢驗方法采集樣本及制備簡單，應用較廣泛，但間皮腫瘤與轉(zhuǎn)移性癌的細胞形態(tài)相似性較高，在檢驗過程中還可能受細胞量少、背景不清晰等外界因素的影響，增加鑒別的難度，降低診斷的敏感度[8-9]。

王雙珠等[10]研究指出，細胞涂片易出現(xiàn)數(shù)據(jù)差異性、厚薄不均勻等不良現(xiàn)象，極易形成假陽性，導致誤診；而細胞塊法檢測過程中，細胞塊可均勻分布，從而可完整保存其脫落細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)，在對其進行診斷過程中，有助于明確分辨細胞的具體形態(tài)特征，對疾病的診斷準確率及敏感度較高，從而可為臨床醫(yī)師采取正確的治療方案提供依據(jù)，有助于改善患者預后。趙業(yè)等[11]研究提出，細胞塊包埋切片為檢測胸腔積液的最佳材料，其具有染色背景干凈、較接近外科病理標本等優(yōu)勢，診斷價值較高。張功學等[12]報道顯示，PECB 檢查可有效鑒別患者胸腔積液的性質(zhì)，還可有效明確腫瘤的原發(fā)部位、分型診斷，對胸腔積液的診斷價值較高，且細胞塊更易保存，重復性好，應用價值良好。

本研究結(jié)果顯示，常規(guī)細胞涂片免疫組化染色與細胞塊切片準確度與敏感度比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；特異度比較差異無統(tǒng)計學意義。表明與常規(guī)的細胞涂片檢測相比，細胞塊切片法診斷的準確度、敏感度均較高，臨床診斷價值更高。主要是由于細胞塊切片法主要使用已經(jīng)標記特異性抗體，對細胞中的未知抗原進行檢測，從而可有效反映其活性、位置、分布等情況，利用細胞塊切片法，使用石蠟進行包埋、切片，操作簡單，且便于進行長期儲存，其重復性也比較好，還可有效避免在檢測過程中發(fā)生交叉反應，具有較高的敏感性。細胞塊切片可使其更多的細胞呈現(xiàn)，且分布較為均勻，并將原有的細胞排列、組織結(jié)構(gòu)進行完整保持，對其進行診斷的過程中，有助于醫(yī)師較清晰的了解細胞形態(tài)，從而進行準確診斷與分析。此外，該檢測方法還可有效避免診斷出現(xiàn)假陽性的情況，提高診斷的準確率，為后續(xù)臨床醫(yī)師制定有效的治療方案提供可靠依據(jù)。

綜上所述，采用常規(guī)細胞涂片檢測法檢測胸腔積液具有一定的診斷價值，但采用細胞塊法診斷準確度、敏感度均較高，臨床應用價值更高，可有效避免漏診、誤診情況，診斷陽性率較高，且細胞蠟塊可長期儲存，可重復性較好，應用價值顯著，值得臨床進一步推廣。但本研究仍存在一定不足，如所選取的樣本數(shù)量相對較少，樣本研究時間相對較短，關(guān)于細胞塊切片和常規(guī)細胞涂片免疫組化染色對胸腔積液的診斷價值，需加大樣本量，延長樣本研究時間進行進一步的探討。