胃癌患者ANXA2、ANXA7水平的變化及其與臨床病理因素和腫瘤標志物水平的關系

阮穩(wěn)穩(wěn)，陳永軍，黃咪

1.安康市人民醫(yī)院腫瘤內科，陜西 安康 725000；

2.空軍軍醫(yī)大學第一附屬醫(yī)院整形外科，陜西 西安 710000；

3.安康市人民醫(yī)院消化內科，陜西 安康 725000

胃癌常發(fā)于胃黏膜上皮，居于消化道惡性腫瘤首位，在胃各個部位均能發(fā)生病變[1]。胃癌早期多無明顯癥狀，只有輕微上腹部疼痛，多數患者表現出食欲減退，部分患者進食過多腹部脹痛明顯[2]。病癥到達晚期時，癌腫擴散，患者會出現持續(xù)性劇烈疼痛，可放射至腰背部，患者全身癥狀進一步加重，日漸消瘦、疲乏、貧血，嚴重危害機體健康[3-4]。膜聯蛋白A2(annexin A2，ANXA2)在外周血中分泌，是一種外分泌形式蛋白，在病毒感染與膽囊腺癌診斷中有一定價值[5]。膜聯蛋白A7(annexin A7，ANXA7)為具有相結合型的蛋白，能夠與Ca2+相結合產生對磷脂的依賴性，其亞細胞水平異常結合與很多腫瘤發(fā)生、轉移以及浸潤有著密切關系，其能夠促進癌細胞增生，癌腫的分化程度越低，ANXA7表達水平越少[6]。腫瘤標志物是細胞在血液里釋放出來的物質，每一種腫瘤都有相關的腫瘤標志物，當人體內出現惡性腫瘤時，其水平會升高，對于癌腫的預測有很好的價值?；诖耍狙芯繉ξ赴┗颊逜NXA2、ANXA7表達水平的變化及其與臨床病理因素和腫瘤標志物水平的關系進行研究，以期為胃癌的診斷與后續(xù)治療提供參考，現報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料選取安康市人民醫(yī)院2019年6月至2021年6月收治的80例胃癌患者作為觀察組。納入標準：(1)經過臨床診斷，病理組織檢查確診為胃癌者；(2)既往從未治療，首次在本院開始治療者；(3)臨床資料完整者；(4)患者及其家屬均簽署知情同意書。排除標準：(1)合并其他惡性腫瘤者；(2)精神異常無法配合者；(3)不同意提供其癌旁組織標本者；(4)合并有感染性疾病者。80例胃癌患者中男性46例，女性34例；年齡54～75歲，平均(58.46±6.20)歲；癌腫直徑≥5 cm 35例，＜5 cm 45例；組織分化程度：高分化12例，中分化25例，低分化43例；TNM分期Ⅰ～Ⅱ期32例，Ⅲ～Ⅳ期48例。所有患者均行手術治療，術中取胃癌癌腫組織標本作為癌癥組，同時取癌旁組織標本作為癌旁組。另選取同時間來我院體檢的健康者80例作為對照組。對照組中男性45例，女性35例；年齡53～76歲，平均(57.64±7.01)歲。觀察組和對照組受檢者的性別和年齡比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。本研究經我院醫(yī)學倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 ANXA2、ANXA7表達水平測定觀察組檢測癌組織標本與癌旁組織標本，對照組健康群體僅檢測血清。癌組織標本、癌旁組織標本經過4%的中性緩沖甲醛浸泡，浸泡之后用常規(guī)的石蠟包埋，所有標本均要裹上石蠟，包埋之后加入多克隆抗體進行克隆，按照1∶400的比例進行稀釋后用免疫組SP法染色試劑盒相關操作說明進行染色，以磷酸鹽緩沖液(PΒS)替代一抗作為陰性去對照。結果判讀：利用顯微鏡隨機用5個視野來觀察，利用陽性表達細胞的著色強度，計數陽性細胞百分率。陽性表達細胞著色強度：沒有著色-0分，淺黃色-1分，棕黃色-2分，棕褐色-3分；百分率：陽性細胞＜25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，76%以上為4分，兩種標準相乘結果＞1為陽性，≤1為陰性。

1.2.2 腫瘤標志物水平測定在清晨空腹抽取所有患者(治療前)外周血5 mL，對照組于體檢當日清晨空腹狀態(tài)下抽取外周血5 mL，所有血液標本通過離心分離出血清，用酶聯免疫吸附法檢測血清中ANXA2、ANXA7、癌胚 抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)、甲胎蛋白(alpha-fetoprotein，AFP)、糖抗原19-9(carbohydrate antigen 19-9，CA19-9)及 糖抗原24-2(carbohydrate antigen 24-2，CA24-2)。

1.3 觀察指標(1)比較癌癥組和癌旁組標本的ANXA2、ANXA7表達水平；(2)分析胃癌組織ANXA2、ANXA7表達與臨床病理因素的關系；(3)比較觀察組和對照組血清ANXA2、ANXA7表達水平及腫瘤標志物水平的差異；(4)分析胃癌患者血清ANXA2、ANXA7水平與腫瘤標志物的關系。

1.4 統計學方法應用SPSS22.0統計軟件分析數據。計數資料比較采用χ2檢驗，等級資料比較采用秩和檢驗；計量資料符合正態(tài)分布，以均數±標準差(±s)表示，組間比較采用t檢驗；血清ANXA2、ANXA7與腫瘤標志物的關系采用Pearson相關性分析。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組標本的ANXA2、ANXA7表達水平比較癌癥組標本ANXA2、ANXA7的陽性率明顯高于癌旁組，差異均具有統計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 兩組標本的ANXA2、ANXA7表達水平比較[例(%)]

2.2 胃癌組織ANXA2、ANXA7表達與臨床病理因素的關系ANXA2、ANXA7表達與患者性別、年齡、腫瘤直徑均無關(P＞0.05)，與腫瘤分化程度、TNM分期有關(P＜0.05)，見表2。

表2 胃癌組織ANXA2、ANXA7表達與臨床病理因素的關系(例)

2.3 兩組受檢者的血清ANXA2、ANXA7和腫瘤標志物水平比較觀察組患者血清ANXA2、ANXA7水平與CEA、AFP、CA19-9、CA24-2水平明顯高于對照組，差異均具有統計學意義(P＜0.05)，見表3。

表3 兩組受檢者的血清ANXA2、ANXA7和腫瘤標志物水平比較(±s)

表3 兩組受檢者的血清ANXA2、ANXA7和腫瘤標志物水平比較(±s)

組別觀察組對照組t值P值例數80 80 ANXA2(μg/L)23.1±6.2 4.3±1.8 26.046 0.001 ANXA7(ng/L)75.2±16.4 61.3±13.2 5.906 0.001 CEA(μg/L)9.7±2.4 2.8±1.3 22.611 0.001 AFP(μg/L)17.2±7.3 13.9±6.8 2.959 0.004 CA19-9(U/mL)48.4±6.3 27.5±5.4 22.529 0.001 CA24-2(U/L)3.3±1.5 2.1±1.6 4.894 0.001

2.4 血清ANXA2、ANXA7水平與腫瘤標志物的相關性將胃癌患者血清ANXA2、ANXA7與CEA、AFP、CA19-9、CA24-2水平進行Pearson相關分析發(fā)現，血清ANXA2、ANXA7水平與CEA、AFP、CA19-9、CA24-2呈正相關(P＜0.01)，見表4。

表4 ANXA2、ANXA7水平與腫瘤標志物的相關性

3 討論

胃癌多發(fā)于45歲以上人群，可按照其形態(tài)特點和浸潤方式分為四種類型：Ⅰ型，結節(jié)型，呈菜花樣；Ⅱ型，潰瘍局限性，似胃潰瘍；Ⅲ型：浸潤潰瘍型，占50%；Ⅳ型：彌漫浸潤型，胃壁顯著增厚變硬[7-8]。胃癌主要治療手段是手術切除，輔以化學療法和放射療法。免疫治療是臨床常用療法之一，能夠有效提高癌細胞擴散抵抗力[9-10]。由于胃癌早期無明顯癥狀，當疾病被檢出時，癌腫已發(fā)生擴散、轉移，導致手術療效差，蛋白水平變化在多種惡性腫瘤早期診斷與預后評估中發(fā)揮了重要作用，將蛋白水平與胃癌相關生物因素結合或可為疾病診斷與治療提供支撐[11-12]。

既往有研究發(fā)現ANXA2、ANXA7等蛋白生物分子可用于胃癌的診斷，而國內對于蛋白類研究甚少[13-14]。ANXA7的表達缺失與腫瘤發(fā)展有著密切的關系，在胃癌中分化越差ANXA7表達越少[15]。ANXA2是一種有著多種生物效能的蛋白質，能夠與細胞跨膜實現運輸，與細胞外受體產生一定活性，還有信號之間轉換傳導功能[16-17]；謝小龍等[18]研究胰腺癌患者血清ANXA2及與臨床病理特征和預后的關系時發(fā)現，胰腺癌患者血清ANXA2水平異常升高，血清ANXA2在評估病情程度和預后中具有一定價值，這與本研究結論相符合。本研究結果中，癌癥組的ANXA2、ANXA7的陽性率(62.5%、65.9%)高于癌旁組(21.3%、18.8%)，說明ANXA2、ANXA7在胃癌組織中陽性表達率占比很大。萬愛民等[19]研究提出臨床病理因素、癌腫的大小、其所在位置、組織學類型、病理分期以及淋巴結是否轉移與胃癌標本的生存和預后有著密切關系。本研究中發(fā)現，ANXA2、ANXA7表達水平與患者性別、年齡、腫瘤直徑均沒有關系，與腫瘤分化程度、TNM分期有關，這說明腫瘤的分化程度越高，TNM分期越高，ANXA2、ANXA7越高，說明ANXA2、ANXA7高表達影響著胃癌發(fā)生、蔓延、浸潤和轉移。

此外，CEA、AFP、CA19-9、CA24-2是腫瘤明顯標志物。在本研究中，觀察組患者血清ANXA2、ANXA7水平高于對照組，進一步證實了ANXA2、ANXA7對早期胃癌的檢測有著極大的意義。同時，本研究采用Pearson相關結果顯示，胃癌患者血清ANXA2、ANXA7水平與CEA、AFP、CA19-9、CA24-2呈明顯正相關，這說明ANXA2、ANXA7或可與腫瘤標志物相同，在胃癌診斷與評估中發(fā)揮一定價值。

綜上所述，胃癌患者血清ANXA2、ANXA7存在異常高表達，與血清腫瘤標志物水平有一定聯系。同時，與癌旁組織相比，胃癌患者癌組織中ANXA2、ANXA7陽性率更高，其表達與腫瘤分化程度、TNM分期等臨床病理因素有關。但本研究不足之處在于未對ANXA2、ANXA7表達進行多因素分析，未排除其他影響ANXA2、ANXA7表達的因素，仍有待后期完善研究再進一步加以證實。