柴桂沙麥湯對(duì)肺陽虛小鼠炎癥細(xì)胞因子和脾臟T淋巴細(xì)胞亞群的影響*

郭澤樂，何麗清，儲(chǔ)開博，尹煉

（山西中醫(yī)藥大學(xué)，山西 晉中 030619）

肺陽虛證是指肺臟陽氣不足，溫煦失職引起機(jī)體功能衰退及一系列臨床表現(xiàn)的概稱，多見于外感及其他內(nèi)傷雜病后期[1]。究其成因，多責(zé)之于外感寒邪，內(nèi)傷生冷或久居陰寒之地。以往研究表明[2]，肺陽虛證會(huì)使機(jī)體免疫能力下降，增加機(jī)體感染的風(fēng)險(xiǎn)。目前西醫(yī)多采用抗炎抗病毒聯(lián)合抗生素進(jìn)行治療[3]，但該治療手段所采用藥物多屬寒涼之品，在治療的同時(shí)也可能造成嚴(yán)重的副作用，不僅肺臟本體受損，更牽連到其他臟器，加重對(duì)機(jī)體的損害。中醫(yī)藥在治療肺陽虛證方面具有較好療效，在提高機(jī)體免疫力的同時(shí)能預(yù)防其他感染，能夠安全、高效地治療呼吸系統(tǒng)疾病[4]。柴胡桂枝湯是《傷寒論》中的經(jīng)典名方，具有外散風(fēng)寒、通調(diào)三焦氣機(jī)之功效。方中桂枝、生姜清太陽表寒，柴胡、黃芩通暢氣機(jī)，人參、炙甘草、大棗益氣健脾。肺為嬌臟，不耐寒燥，因此在選方治療方面，應(yīng)著重考慮肺的功能屬性。柴桂沙麥湯是在柴胡桂枝湯的基礎(chǔ)上加沙參、麥冬而成，全方溫散但不傷正氣，升陽但無燥熱之弊。前期臨床觀察發(fā)現(xiàn)該方治療肺陽虛疾病具有很好的療效[5]，但是目前對(duì)于柴桂沙麥湯的免疫作用機(jī)制未深入了解。因此，本實(shí)驗(yàn)擬探討柴桂沙麥湯對(duì)肺陽虛小鼠血清炎癥細(xì)胞因子和T淋巴細(xì)胞亞群水平的影響，研究柴桂沙麥湯可能的免疫作用機(jī)制，為臨床治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 8周齡SPF級(jí)Bal b/c小鼠60只，雌雄各半，體質(zhì)量18～22 g，購于北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（京）2016-0006。本實(shí)驗(yàn)小鼠飼養(yǎng)于山西中醫(yī)藥大學(xué)科研樓動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心動(dòng)物房，飼養(yǎng)條件為室內(nèi)溫度22～26 ℃，濕度40%～60%，自然光照，自由飲食，飼養(yǎng)條件符合《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l件》要求，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后開始實(shí)驗(yàn)。本實(shí)驗(yàn)研究方案獲得山西中醫(yī)藥大學(xué)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，批準(zhǔn)編號(hào)：2020DW068。

1.2 藥物與試劑 柴桂沙麥湯（方藥組成：桂枝6 g，柴胡9 g，黃芩6 g，人參5 g，半夏6 g，白芍3 g，炙甘草3 g，大棗3 g，生姜3 g，麥冬5 g，沙參5 g）由山西中醫(yī)藥大學(xué)國醫(yī)堂藥房提供。APC Anti-mouse CD3 [17A2]（批號(hào)：20200311）、FITC Anti-mouse CD4[GK1.5]（批號(hào)：20201215)、PerCP-Cyanine5.5 Anti-mouse CD8a[53-6.7]（批號(hào)：20200607）均購自Tonbo Biosciences公司；小鼠白細(xì)胞介素-2（IL-2）ELISA檢測試劑盒（批號(hào)：20210319）、小鼠白細(xì)胞介素-6（IL-6）ELISA檢測試劑盒（批號(hào)：20210117）、小鼠TNF-α ELISA檢測試劑盒（批號(hào)：20210216）均購自上海江萊生物科技有限公司。

1.3 主要儀器 BSM120.4電子分析天平（上海卓精公司）；Infinite F50酶標(biāo)分析儀（瑞士帝肯公司）；FACS Calibur流式細(xì)胞儀（美國BD公司）；HW-1500A切片機(jī)（德國LEICA公司）；DHG干燥箱（上海一恒公司）；TG16-W離心機(jī)（湖南湘儀公司）。

1.4 造模與分組 60只Bal b/c小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，采用完全隨機(jī)分組法分為空白組、模型組、柴桂沙麥湯低劑量組、柴桂沙麥湯中劑量組、柴桂沙麥湯高劑量組，每組12只。除空白組外，其余各組復(fù)制肺陽虛小鼠模型[6]。提前用冰塊制造0～4 ℃低溫環(huán)境，小鼠每日在此環(huán)境中冰凍1 h，結(jié)束后對(duì)小鼠實(shí)施冰水力竭游泳，此過程持續(xù)30 d。造模期間各組小鼠給予8%低蛋白飼料喂養(yǎng)，除空白組以外，其他各組小鼠給予冰水灌胃，2次/d，0.2 mL/次。若小鼠出現(xiàn)體質(zhì)量下降、行動(dòng)遲緩、拱背、反應(yīng)力下降、愛扎堆、食欲不振并伴隨咳嗽、打噴嚏等情況，說明造模成功。

1.5 實(shí)驗(yàn)給藥 柴桂沙麥湯低、中、高劑量組給藥濃度按照《藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》[7]中人和動(dòng)物間體表面積折算的等效劑量比計(jì)算，柴桂沙麥湯低、中、高劑量組的藥物劑量分別為2.7、5.4、10.8 g/（kg·d）。造模成功后，柴桂沙麥湯低、中、高劑量組小鼠分別灌胃給予不同劑量的柴桂沙麥湯?？瞻捉M和模型組小鼠給予等體積生理鹽水[6]，1次/d，連續(xù)30 d。

1.6 觀察指標(biāo)

1.6.1 小鼠體質(zhì)量、脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)[8]分別于第1、15、30天給藥前（禁食不禁水）測量小鼠體質(zhì)量；第31天脫頸椎處死小鼠，用75%酒精對(duì)小鼠表皮進(jìn)行消毒處理，在無菌環(huán)境下取出小鼠脾臟和胸腺，用生理鹽水沖洗器官表面殘血并用濾紙清理器官表面多余的水分，稱取器官濕質(zhì)量，并按照公式分別計(jì)算脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)。脾臟（胸腺）指數(shù)=脾臟（胸腺）質(zhì)量/體質(zhì)量×10。

1.6.2 小鼠外周血清IL-2、IL-6和TNF-α水平 小鼠行眼球采血，室溫條件下靜置4 h，以4 000 r/min離心20 min，取上層血清，并按照ELISA試劑盒說明書進(jìn)行操作，上機(jī)檢測血清IL-2、IL-6和TNF-α水平。

1.6.3 小鼠脾臟T淋巴細(xì)胞亞群 無菌條件取出脾臟，用PBS沖洗表面血污，將小鼠脾臟移入培養(yǎng)皿中，用5 mL注射器針?biāo)ㄑ心ィ?00目過濾網(wǎng)過濾，制成脾臟淋巴細(xì)胞懸液，定容至5 mL，混勻收集。在1 000 r/min的條件下離心8 min，棄上清液，加入紅細(xì)胞裂解液，室溫條件下靜置5 min后，以1 000 r/min的條件離心8 min，棄上清液，加入5 mL PBS重懸混勻，同等條件下離心8 min，棄上清液，調(diào)整細(xì)胞濃度并用PBS清洗后定容至100μL，同時(shí)加入CD3、CD4、CD8三種抗體各1μL，避光染色20 min后加入500 μL PBS終止反應(yīng)，以1 000 r/min的條件離心8 min，棄上清液，之后再加入500 μL PBS，以相同的條件離心后棄上清液，PBS定容至500 μL混勻上機(jī)檢測。實(shí)驗(yàn)中所有樣本均制備陰性樣本。

1.6.4 小鼠肺組織形態(tài)學(xué)觀察 處死小鼠后，在無菌環(huán)境下取出小鼠肺組織，用生理鹽水沖洗表面血污，用濾紙擦干表面水分，在4%多聚甲醛中固定，石蠟包埋并切片，HE染色后鏡下觀察。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 26.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。計(jì)量資料以“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”（）表示，首先對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)和方差齊性檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，重復(fù)測量數(shù)據(jù)采用重復(fù)測量方差分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組小鼠體質(zhì)量比較 由于造模影響，各組小鼠體質(zhì)量整體比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），存在分組效應(yīng)，與空白組比較，模型組和柴桂沙麥湯低、中、高劑量組小鼠體質(zhì)量均明顯降低（P＜0.05）。給藥第15、30天，柴桂沙麥湯低、中、高劑量組小鼠體質(zhì)量均明顯高于模型組（P＜0.05）。所有小鼠不同時(shí)間點(diǎn)體質(zhì)量比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），即存在時(shí)間效應(yīng)，空白組和柴桂沙麥湯低、中、高劑量組均如此，存在時(shí)間效應(yīng)；時(shí)間因素與組別因素存在交互效應(yīng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（見表1、圖1）

表1 各組小鼠體質(zhì)量比較（）

表1 各組小鼠體質(zhì)量比較（）

注：F時(shí)間主效應(yīng)=100.476，P時(shí)間主效應(yīng)=0.000；F分組主效應(yīng)=85.889，P分組主效應(yīng)=0.000；F交互效應(yīng)=15.204，P交互效應(yīng)=0.000；與空白組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05

2.2 各組小鼠脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)比較 與空白組比較，模型組小鼠脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)均明顯降低（P＜0.05）；與模型組比較，柴桂沙麥湯低、中、高劑量組小鼠脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)均明顯升高（P＜0.05）；柴桂沙麥湯低、中、高劑量組間小鼠脾臟指數(shù)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；柴桂沙麥湯高劑量組小鼠胸腺指數(shù)高于柴桂沙麥湯低劑量組（P＜0.05）。（見表2）

表2 各組小鼠脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)比較（）

表2 各組小鼠脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)比較（）

注：與空白組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05；與柴桂沙麥湯低劑量組比較，cP＜0.05

2.3 各組小鼠外周血清IL-2、IL-6和TNF-α水平含量比較 與空白組比較，模型組小鼠血清IL-2水平明顯降低（P＜0.05），IL-6、TNF-α水平均明顯升高（P＜0.05）；與模型組比較，柴桂沙麥湯低、中、高劑量組小鼠血清IL-2水平明顯升高（P＜0.05），IL-6、TNF-α水平均明顯降低（P＜0.05），且柴桂沙麥湯低、中、高劑量組小鼠血清IL-2和IL-6水平呈劑量依賴性，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；柴桂沙麥湯中劑量組小鼠血清TNF-α水平低于柴桂沙麥湯低劑量組（P＜0.05）；柴桂沙麥湯高劑量組小鼠血清TNF-α水平與柴桂沙麥湯中劑量組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。（見表3）

表3 各組小鼠外周血清IL-2、IL-6、TNF-α 水平比較（）

表3 各組小鼠外周血清IL-2、IL-6、TNF-α 水平比較（）

注：與空白組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05；與柴桂沙麥湯低劑量組比較，cP＜0.05；與柴桂沙麥湯中劑量組比較，dP＜0.05

2.4 各組小鼠脾臟CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞百分比及CD4+/CD8+比值比較 與空白組比較，模型組小鼠CD3+T淋巴細(xì)胞百分比明顯降低（P＜0.05）；與模型組比較，柴桂沙麥湯低、中、高劑量組小鼠CD3+T淋巴細(xì)胞百分比均明顯升高（P＜0.05），其中以柴桂沙麥湯高劑量組升高最為明顯，柴桂沙麥湯低、中劑量組之間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。（見表4、圖2）

與空白組比較，模型組小鼠CD4+T淋巴細(xì)胞百分比和CD4+/CD8+比值均明顯降低（P＜0.05），CD8+T淋巴細(xì)胞百分比明顯升高（P＜0.05）；與模型組比較，柴桂沙麥湯中、高劑量組小鼠CD4+T淋巴細(xì)胞百分比明顯升高（P＜0.05），CD8+T淋巴細(xì)胞百分比明顯降低（P＜0.05），CD4+/CD8+比值明顯升高（P＜0.05），其中以柴桂沙麥湯高劑量組最為明顯。柴桂沙麥湯低劑量組小鼠CD4+T淋巴細(xì)胞百分比、CD8+T淋巴細(xì)胞百分比、CD4+/CD8+比值與模型組比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。（見表4、圖3）

表4 各組小鼠脾臟CD3+T 淋巴細(xì)胞百分比比較（）

表4 各組小鼠脾臟CD3+T 淋巴細(xì)胞百分比比較（）

注：與空白組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05；與柴桂沙麥湯低劑量組比較，cP＜0.05；與柴桂沙麥湯中劑量組比較，dP＜0.05

表5 各組小鼠脾臟CD4+、CD8+T 淋巴細(xì)胞百分比及CD4+/CD8+比值比較（）

表5 各組小鼠脾臟CD4+、CD8+T 淋巴細(xì)胞百分比及CD4+/CD8+比值比較（）

注：與空白組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05；與柴桂沙麥湯低劑量組比較，cP＜0.05；與柴桂沙麥湯中劑量組比較，dP＜0.05

2.5 各組小鼠肺組織病理形態(tài)比較 空白組小鼠肺組織無明顯異樣，肺泡及終末支氣管上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整排列整齊，無明顯炎癥細(xì)胞浸潤。模型組小鼠肺泡出現(xiàn)明顯炎癥細(xì)胞浸潤，肺泡組織結(jié)構(gòu)破壞，間隔縮小。柴桂沙麥湯低、中、高劑量組小鼠肺組織結(jié)構(gòu)明顯好轉(zhuǎn)；柴桂沙麥湯低劑量組小鼠肺泡腔塌陷好轉(zhuǎn)，腔隙內(nèi)炎癥細(xì)胞浸潤減少。柴桂沙麥湯中劑量組小鼠肺泡腔進(jìn)一步好轉(zhuǎn)，腔內(nèi)間隙明顯增寬；柴桂沙麥湯高劑量組小鼠肺組織改善最為明顯，但未恢復(fù)至空白組水平。（見圖4）

3 討 論

肺陽虛證先賢多有論述，從《難經(jīng)·四十九難》中提到的“形寒飲冷則傷肺”和《黃帝內(nèi)經(jīng)》中提到的“重寒傷肺”及《金匱要略》中記載的“肺中冷”可以看出，本證成因系外傷風(fēng)寒，肺先受病，內(nèi)傷飲冷，脾陽不振，母病及子，致內(nèi)外皆傷[9]。因此，本實(shí)驗(yàn)以此為理論基礎(chǔ)，并且根據(jù)相關(guān)經(jīng)驗(yàn)[10-11]采用每日冰凍1 h模擬外邪犯肺，每日冰水力竭游泳模擬形寒勞倦，每日冰水灌胃以及低蛋白飲食模擬內(nèi)飲生冷，陽氣不振，采用多種因素方法復(fù)制肺陽虛小鼠模型。結(jié)果顯示，小鼠行動(dòng)能力變差，喜扎堆，鉆于墊料中，大便稀軟，體質(zhì)量明顯降低，表明小鼠肺陽虛模型復(fù)制成功。外感寒邪，肺衛(wèi)失固，因此出現(xiàn)惡寒等陽虛的表現(xiàn)；肺受寒則氣化不行，水液不布，脾陽不振，故大便溏。灌胃柴桂沙麥湯后，小鼠體質(zhì)量逐漸恢復(fù)，精神狀態(tài)好轉(zhuǎn)，咳嗽、打噴嚏次數(shù)減少，行動(dòng)能力改善，大便性狀改善。說明柴桂沙麥湯能改善小鼠肺陽虛癥狀。

相關(guān)研究表明，陽虛證候會(huì)引起機(jī)體免疫功能減退[12]。本實(shí)驗(yàn)中模型組小鼠脾臟CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞百分比和CD4+/CD8+比值明顯降低，CD8+T淋巴細(xì)胞百分比水平升高，IL-2細(xì)胞因子降低，這表明肺陽虛證會(huì)使機(jī)體免疫能力減退。柴胡桂枝湯由小柴胡湯、桂枝湯二方合成。根據(jù)相關(guān)報(bào)道[13-14]，臨床上依據(jù)肺陽虛患者外感風(fēng)寒，營衛(wèi)失和，內(nèi)傷飲冷，傷正日久，邪氣內(nèi)陷，陽氣虧虛的病機(jī)，選用柴胡桂枝湯治療肺陽虛患者具有較好療效。方中桂枝湯可以外散風(fēng)寒，調(diào)和營衛(wèi)，而小柴胡湯主要和解半表半里之邪，固護(hù)正氣，待大氣一轉(zhuǎn)，則機(jī)體陽氣升發(fā)，溫煦功能自然恢復(fù)。中國北方地區(qū)冬季多寒冷而干燥，飲食習(xí)慣多為膏粱厚味，容易形成虛實(shí)夾雜、寒熱錯(cuò)雜之證，因此，本課題組將柴胡桂枝湯化裁，加入沙參和麥冬，改良成為柴桂沙麥湯[5]。柴桂沙麥湯以桂枝為君藥，發(fā)表散寒，辛溫通陽；人參、生姜、半夏為臣藥，益氣健脾，溫肺化痰，同時(shí)可助桂枝祛邪透表；方以柴胡、黃芩為佐藥，兩藥相合調(diào)理三焦氣機(jī)，肺胃得安；然肺為嬌臟，肺陽虛一證中以正氣虧虛為主，但若純用辛溫發(fā)散之品，恐溫燥傷肺，暗耗陰津，因而勤求古訓(xùn)，“善補(bǔ)陽者，陰中求陽”，故于本方中加入甘涼清潤之沙參、麥冬與白芍，以上潤肺體，下滋腎陰。另以炙甘草為使，益氣和胃，配伍桂枝、生姜辛溫化陽，助解表散寒，配伍白芍、沙參和麥冬，以酸甘堅(jiān)陰，同時(shí)可以制約桂枝、半夏之溫燥。全方配伍得當(dāng)，調(diào)暢營衛(wèi)與三焦，同時(shí)散寒升陽但無溫燥之弊，可做到標(biāo)本兼顧。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，脾臟和胸腺是重要的免疫器官，是衡量機(jī)體免疫能力的重要指標(biāo)[15]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，模型組小鼠脾臟、胸腺指數(shù)明顯低于空白組，可能由于外寒內(nèi)飲的刺激，導(dǎo)致模型組小鼠免疫器官指數(shù)下降。柴桂沙麥湯低、中、高劑量組小鼠免疫器官指數(shù)明顯高于模型組，可能為方中人參、炙甘草等藥聯(lián)合作用的結(jié)果。同時(shí)，柴桂沙麥湯可以增加肺陽虛小鼠的體質(zhì)量。MOSMANN T R等[16]將Th細(xì)胞分為Th1和Th2兩種功能不同的細(xì)胞因子亞群，IL-2、TNF-α主要由Th1細(xì)胞分泌，參與細(xì)胞免疫。IL-6主要由Th2細(xì)胞分泌，參與體液免疫。IL-2可促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖、分化、生長，誘導(dǎo)免疫細(xì)胞分泌細(xì)胞因子發(fā)揮免疫效應(yīng)，對(duì)機(jī)體抗病毒感染和增強(qiáng)免疫應(yīng)答有重要作用，因此，IL-2水平是反映機(jī)體細(xì)胞免疫的重要標(biāo)志。IL-6是一種作用廣泛的細(xì)胞因子，具有抗感染、調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的作用，當(dāng)單核巨噬細(xì)胞受到病毒的刺激時(shí)會(huì)產(chǎn)生大量的IL-6。同時(shí)，IL-6是機(jī)體炎癥反應(yīng)最先出現(xiàn)的細(xì)胞因子，對(duì)于判斷急性炎癥具有重要作用。TNF-α主要是由單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的內(nèi)源性細(xì)胞因子。研究表明，少量的TNF-α具有抗炎屬性，可抑制機(jī)體炎癥反應(yīng)和殺滅癌細(xì)胞，但是大量的TNF-α則變成促炎因子，會(huì)促進(jìn)T細(xì)胞產(chǎn)生各種炎癥因子，進(jìn)而誘發(fā)炎癥反應(yīng)，引起機(jī)體器官組織的壞死[17-19]。IL-2可以反映機(jī)體免疫功能，IL-6和TNF-α都屬于促炎因子。當(dāng)肺陽虛患者機(jī)體免疫能力降低時(shí)，易誘發(fā)炎癥反應(yīng)，因此檢測炎癥細(xì)胞因子的表達(dá)，對(duì)于疾病的診療有著至關(guān)重要的作用。本研究發(fā)現(xiàn)，柴桂沙麥湯低、中、高劑量組小鼠血清IL-2水平明顯高于模型組，IL-6、TNF-α水平明顯低于模型組，并且以柴桂沙麥湯中、高劑量組更為顯著，由此可以說明柴桂沙麥湯具有調(diào)節(jié)機(jī)體血清細(xì)胞因子、抑制炎癥反應(yīng)、提高細(xì)胞免疫的作用。T淋巴細(xì)胞亞群主要用于監(jiān)測機(jī)體細(xì)胞免疫功能。其中CD3+T淋巴細(xì)胞作用于成熟細(xì)胞表面，參與機(jī)體抗原應(yīng)激反應(yīng)。CD4+T淋巴細(xì)胞主要發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，可抑制免疫細(xì)胞的活化，從而避免機(jī)體發(fā)生免疫性疾病。CD8+T淋巴細(xì)胞是一種細(xì)胞毒性的T淋巴細(xì)胞，具有抗感染功能，可以殺滅被感染的靶細(xì)胞[20-21]，同時(shí)，CD4+/CD8+比值也可反映機(jī)體當(dāng)前的免疫狀態(tài)。本研究發(fā)現(xiàn)，與空白組比較，模型組小鼠CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞百分比明顯降低，CD8+T淋巴細(xì)胞百分比明顯升高，說明肺陽虛小鼠免疫功能下降；柴桂沙麥湯低、中、高劑量組小鼠CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞百分比、CD4+/CD8+比值均明顯升高，CD8+T淋巴細(xì)胞百分比降低，并且以柴桂沙麥湯高劑量組效果更為明顯。

綜上所述，柴桂沙麥湯具有緩解肺陽虛小鼠癥狀的功效，能提高肺陽虛小鼠脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)及體質(zhì)量，升高血清IL-2水平，降低血清IL-6、TNF-α水平，改善肺部形態(tài)結(jié)構(gòu)，其作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞亞群的平衡，增強(qiáng)機(jī)體細(xì)胞免疫有關(guān)。