綿羊人工授精技術(shù)流程和操作要點

王鑫悅

（新疆昌吉市佃壩鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)工作站 新疆昌吉 831100）

綿羊人工授精技術(shù)是指利用輸精器械，將采集到的符合輸精要求的公羊精液通過一定比例的稀釋后，輸入到發(fā)情母羊子宮頸口內(nèi)，實現(xiàn)母羊受孕的非自然交配配種技術(shù)。綿羊人工授精技術(shù)可通過操作前的場地、器械消毒減少因自然交配出現(xiàn)的交叉感染，降低母羊陰道、子宮炎癥的發(fā)病率。同時，人工授精技術(shù)可以通過人為控制輸精量，提高精子利用率。對綿羊良種繁育來講，人工授精技術(shù)可以提高綿羊譜系的可靠性，加速綿羊品種改良工作進(jìn)程。但由于該技術(shù)容易受人為因素的影響，出現(xiàn)受胎率低問題。因此工作人員要熟練掌握綿羊人工授精操作流程，注意到各個操作環(huán)節(jié)的技術(shù)要點，進(jìn)而保障人工授精受胎率。

1 場地準(zhǔn)備

綿羊人工授精需要配置專門的房間，一般包括采精室、精液品質(zhì)檢測室、輸精室，其面積分別控制在18～22、9～11 和18～22m，使用時的溫度分別控制在18±2、20± 2 和18± 2℃。

2 器械衣物準(zhǔn)備

2.1 物品標(biāo)簽

精液品質(zhì)檢測室內(nèi)配有專門的器械柜櫥、藥品柜櫥、操作臺（含防塵罩）、顯微鏡等。藥品柜櫥內(nèi)的所有藥品、試劑都需要標(biāo)注名稱、配置時間、濃度、有效期限等信息，每次使用前要核實信息。

2.2 器械清洗

采精前要準(zhǔn)備好采精工具，為防交叉感染，每個公羊使用的假陰道、采精杯（或集精瓶）是不同的，要根據(jù)采精公羊的數(shù)量多準(zhǔn)備出1～2 套。首先對采精的用具進(jìn)行清洗，清洗時可用洗衣粉浸泡30min 后再用毛刷反復(fù)洗刷，用清水沖洗殘留物或泡沫，直到無污物后再用蒸餾水沖洗2～3 次，然后將這些器械置于無菌的紗布上，自然晾干。

注意事項：假陰道內(nèi)部的彎曲結(jié)構(gòu)可用試管刷清洗，保障無殘留物，清洗過程中檢測是否有漏水問題，若有漏水需要更換。

1.3 器械消毒

①將假陰道、采精杯、輸精器、溫度計和相關(guān)的玻璃器皿可以浸泡到75%酒精內(nèi)，或用75%酒精棉球反復(fù)擦拭，待酒精自然揮發(fā)后，依次用蒸餾水、生理鹽水各浸泡2 次；②金屬開腔器可用75%酒精棉球反復(fù)擦拭2 次后置于4℃蒸餾水內(nèi)，然后再用生理鹽水浸泡的無菌抹布反復(fù)擦拭2 次；③采集或輸精用的衛(wèi)生紙可用錫箔紙包好后，高壓滅菌后置于50℃烘箱自然烘干；④操作人員的衣物、操作中使用的毛巾都需要高壓滅菌后，通過烘干處理再使用。

3 精液采集方法

3.1 采精室衛(wèi)生要求

采精室內(nèi)不得進(jìn)行抽煙、進(jìn)食、飲酒等活動，采精前3d 用高壓水槍全面沖刷地面，通風(fēng)讓地面干燥，使用前1h 打開紫外消毒燈，消毒30min 后再使用。采集過程中切勿多人圍觀、吵鬧等，操作人員工作前不得有抽煙、飲酒或進(jìn)食任何帶刺激味道的食物。

3.2 采精前準(zhǔn)備

1）母羊準(zhǔn)備。對發(fā)情母羊的后軀干進(jìn)行清水沖洗。

2）公羊準(zhǔn)備。公羊牽入到采精室后，對其生殖器官進(jìn)行清水清潔，此時要讓公羊和母羊保持距離，切勿直接爬跨，然后逐步靠近來刺激公羊產(chǎn)生性欲。

3）物品準(zhǔn)備。準(zhǔn)備好已消毒的假陰道、采精杯、凡士林、水盆、溫開水等。

假陰道處理：①注水打氣，將開水倒入到盆內(nèi)，水溫至45℃時將溫水注入到假陰道的夾層內(nèi)，假陰道內(nèi)部溫度控制在39±2℃，注入到外殼和內(nèi)胎容積的1/2 處即可，用打氣槍注入適量空氣，若假陰道另一端出現(xiàn)三塊相互擠壓的凸起停止打氣，關(guān)閉氣咀活塞；②潤滑，用對假陰道的內(nèi)胎和陰莖進(jìn)口處涂抹適量的凡士林，深度一般到假陰道的1/2 處，采精杯處不能涂抹上凡士林；③檢測內(nèi)壓，涂抹凡士林后再次檢查假陰道的內(nèi)壓，若不足可再注入適量空氣。

公羊包皮清潔：用清水沖洗公羊包皮處的污物，然后用無菌干抹布擦干。

3.3 采集操作

將母羊固定在保定架上，牽入主配公羊，待公羊有爬跨動作時，采集人員以半蹲的姿勢處于母羊后方，右手橫拿假陰道，假陰道的陰莖進(jìn)口處朝下，公羊爬跨時左手輕輕抓住公羊的陰莖根部，公羊伸出陰莖時迅速且輕柔地將陰莖導(dǎo)入到假陰道內(nèi)。一般陰莖在假陰道內(nèi)抽搐幾秒后就會射精，整個射精過程不到1min。待公羊射精結(jié)束后，采集人員將假陰道豎起，將采集杯的一面向下，放出空氣，蓋好采集杯杯蓋，在采精杯上標(biāo)記公羊編號，置于20～30℃且無太陽直射的地方，然后進(jìn)行下一只公羊采集操作。

3.4 注意事項

①采集過程要快速、輕柔，減少對公羊的驚嚇刺激；②采集人員采集時切勿手碰公羊的龜頭；③采集后要將假陰道內(nèi)的水放出，浸泡到含有洗衣粉的溫水中，待采集結(jié)束后立即沖洗。④成年種公羊每天最多可采集1～2 次，連續(xù)采精3d 后休息1d。公羊配種期間要提高日糧中蛋白飼料供給量，每天補充2 個雞蛋。配種結(jié)束后逐漸降低精料飼喂量和營養(yǎng)水平。

4 精液品質(zhì)的檢查方法

4.1 檢測室要求

精液檢測室要求清潔，工作時的環(huán)境溫度維持在20± 2℃，工作時避免強燈照射。

4.2 精液量、色澤、氣溫

公羊一次的射精量約為0.5～2mL，精液由精子（30%）和精清（70%）組成。

正常公羊精液顏色呈乳白色，肉眼觀察為云霧狀，若呈鮮黃色、褐色、綠色、紅色，這些精液均不符合輸精精液要求。

正常公羊精液無氣味，若出現(xiàn)腐敗、酸臭味，則不符合輸精精液要求。

4.3 精子活力

檢測設(shè)備為顯微鏡（300～600 倍），用無菌的玻璃棒蘸取一小滴精液，滴落到載玻片中央，輕輕蓋上蓋玻片，要求覆蓋后的載玻片上無氣泡。精子常見的運動方式有“前進(jìn)直線”“繞圈”和“搖擺”運動，只有“前進(jìn)”運動的精子具備受精能力，以此計算精子活力。若顯微鏡視野下精子全部呈“前進(jìn)直線”運動，評定為1.0 分，若50%呈“前進(jìn)直線”運動則為0.5 分，根據(jù)精子活力進(jìn)行0～1.0 評分[2]。

4.4 精液密度

精子密度評定分3 個級別，分別為密（精子間的距離小于1 個精子長度）、中（精子間有1 個精子長度的孔隙）、?。ň娱g有1～2個精子長度的孔隙或視野內(nèi)精子數(shù)量少量）。若視野內(nèi)無精子則標(biāo)記為“無”。

4.5 輸精精子要求

精子活力0.7 以上，冷凍精液精子活力大于0.3；且精液密度為中、密。

5 精液稀釋

5.1 稀釋方法

新鮮精液在品質(zhì)檢測后需要盡快稀釋、輸精，若時間過長會影響精液品質(zhì)。稀釋液配方：枸櫞酸鈉2.3g、葡萄糖10g，加入100mL 蒸餾水，充分溶解后過濾，高壓滅菌消毒，液體溫度降低到40℃時加入10mL 卵黃、0.3g 磺胺粉末、10 萬IU 青霉素、10IU 鏈霉素。稀釋比例為2～3 倍。

5.2 保存與運送

將稀釋好的精子分裝到2mL 的玻璃管內(nèi)，盡可能裝滿，減少震蕩對精液品質(zhì)的損害。裝滿后要做好密封，如用消毒后的醫(yī)用石蠟油密封，然后用蠟封口，再套上一次性塑料薄膜。輸新鮮精液時，一般采精到輸精結(jié)束整個流程控制在6h 內(nèi)，若是采精后低溫保存，降溫過程應(yīng)控制在60～80min，以防迅速降溫造成精子失活，4℃低溫保存的精液應(yīng)在12h 內(nèi)完成輸精。

6 輸精操作

6.1 母羊準(zhǔn)備

授精的母羊應(yīng)為發(fā)情母羊，因此養(yǎng)殖人員要做好發(fā)情鑒定，為做好綿羊的同期發(fā)情工作，一般經(jīng)過放栓-取栓-注射孕馬血清等流程后，母羊會有發(fā)情癥狀。將發(fā)情母羊趕到授精室，在輸精架上保定好，然后用酒精棉球擦拭母羊外陰部。

6.2 輸精操作

輸精人員左手持金屬開腔器，將其緩慢、柔和的插入到母羊陰道內(nèi)，確定好子宮頸位置，此時可見陰道內(nèi)殘留黏液且無陰道炎癥、子宮頸管松弛開張（表明母羊處于發(fā)情中、后期）可進(jìn)行輸精。右手持輸精器，將其插入到子宮頸口處1cm 深度，拇指按壓輸精器的活塞，輸入1mL 精液，輸精結(jié)束后取出，更換輸精針。

6.3 復(fù)配操作

為保障人工授精受胎率，一般在上午8～10 點進(jìn)行第一次輸精，然后間隔6～8h 后進(jìn)行第二次輸精。授精未成功的母羊一般在第一次輸精后的2～3 周出現(xiàn)返情。返情原因可能與母羊陰道感染、母羊假發(fā)情、精液品質(zhì)不佳有關(guān)。返情母羊要做好標(biāo)記，并按照生產(chǎn)計劃進(jìn)行再次配種。

6.4 注意事項

輸精時要保障精液溫度，因此在更換母羊時，輸精員要手握輸精針，減少溫度散失。每次更換母羊時要更換輸精針，保障一針一羊，使用后的輸精針立即噴灑75%酒精消毒，然后統(tǒng)一清洗、消毒。輸精人員配搭長款手套、口罩和白大褂。

7 輸精記錄

在完成輸精后，要準(zhǔn)確做好每項記錄工作，分別為：采精時間、采精數(shù)量、精子活力、輸精時間、被輸精母羊號等，為接下來開展的綿羊繁殖、品種改良等工作提供重要參考依據(jù)。

8 結(jié)語

人工授精技術(shù)可實現(xiàn)不同體型綿羊的雜交配種工作，減少因自然配種出現(xiàn)的公母羊體重差距大造成的傷害或生殖器官病原菌感染問題。但該技術(shù)的應(yīng)用有一定的操作難度，對操作人員有較高技術(shù)要求，因此在人工授精過程中要嚴(yán)格遵守操作流程，做好上述各方面的操作要點，保障綿羊人工授精質(zhì)量。此外，在日常管理中，凡是參加配種的母羊要進(jìn)行分群管理和發(fā)情鑒定，采集、輸精前后要對公羊、母羊進(jìn)行合理的營養(yǎng)供給和適量運動，配種期間要做好羊群健康檢疫工作，保持圈舍干凈，給受精后的母羊提供舒適環(huán)境，公羊要合理采集，減少因過度采集縮短利用年限。通過規(guī)范綿羊人工授精技術(shù)操作，有利于促進(jìn)養(yǎng)羊業(yè)的良好發(fā)展。