L 型氨基酸運(yùn)載體1 與實(shí)體腫瘤轉(zhuǎn)移發(fā)生的關(guān)系meta 分析

吳思慧 周旭林 黃文康 徐岷

1.江蘇大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院，江蘇鎮(zhèn)江 212000；2.江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院消化科，江蘇鎮(zhèn)江 212000

隨著對(duì)腫瘤細(xì)胞的研究深入，越來(lái)越多的研究證實(shí)增加氨基酸和葡萄糖的消耗是惡性腫瘤細(xì)胞的特征[1]，L 系統(tǒng)在腫瘤細(xì)胞負(fù)責(zé)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的運(yùn)輸，主要運(yùn)輸中性氨基酸，而L 型氨基酸運(yùn)載體1（L-type amino acid transporter 1，LAT1），在其中是不可或缺的一種分子。根據(jù)研究，LAT1 往往在胚胎組織和腫瘤細(xì)胞中表達(dá)，并且參與細(xì)胞的增殖過(guò)程[2]。LAT1 與程序性細(xì)胞死亡1 配體1（programmed cell death 1 ligand 1，PD-L1）協(xié)同作用于肺癌細(xì)胞，增強(qiáng)肺癌細(xì)胞干性，從而促進(jìn)肺癌細(xì)胞的增殖，并且相比于非耐藥肺癌細(xì)胞，LAT1 在對(duì)培美曲塞耐藥的肺癌細(xì)胞中顯著上調(diào)[3]，隨著LAT1 在各類(lèi)腫瘤細(xì)胞和臨床標(biāo)本中被發(fā)現(xiàn)，LAT1對(duì)腫瘤發(fā)生發(fā)展的影響及其機(jī)制受到了廣泛的關(guān)注及研究。本研究采用meta 分析方法，對(duì)既往臨床研究進(jìn)行綜合分析處理，探討LAT1 與實(shí)體腫瘤轉(zhuǎn)移發(fā)生的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 文獻(xiàn)檢索

兩名作者分別獨(dú)立對(duì)Medline/PubMed、EMbase、EBSCO、The Cochrane Library、Springerlink、Web of Science 核心合集數(shù)據(jù)庫(kù)、Wiley Onlinelibary 及中國(guó)知網(wǎng)和Cochrane 臨床對(duì)照試驗(yàn)中心注冊(cè)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行文獻(xiàn)檢索，文獻(xiàn)檢索時(shí)間為建庫(kù)至2021 年5 月，英文的檢索單詞有L-type amino-acid transporter 1、LAT1、cancer 及相關(guān)同義詞。中文檢索詞包括L 型氨基酸運(yùn)載體1、腫瘤及相關(guān)同義詞。

1.2 文獻(xiàn)選入標(biāo)準(zhǔn)

①文獻(xiàn)中患者臨床病理資料完整，腫瘤診斷明確；②病理組織中的LAT1 已進(jìn)行表達(dá)檢測(cè)；③文獻(xiàn)提供足量的病例數(shù)；④文獻(xiàn)需包含LAT1 表達(dá)與腫瘤臨床病理特征之間關(guān)系的相關(guān)研究，尤其是腫瘤轉(zhuǎn)移。

1.3 排除標(biāo)準(zhǔn)

①研究非腫瘤患者的文獻(xiàn)；②采用動(dòng)物模型或細(xì)胞系的研究；③綜述、meta 分析、個(gè)案病例報(bào)告等。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用RevMan 5.4 軟件對(duì)文獻(xiàn)偏倚風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行評(píng)價(jià)，并對(duì)有相同結(jié)局指標(biāo)的文獻(xiàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。二分類(lèi)資料效應(yīng)量采用比值比（OR）表示，用95%CI，OR ＞1，P ＜0.05 表示LAT1 為導(dǎo)致腫瘤預(yù)后差的各項(xiàng)研究指標(biāo)的危險(xiǎn)因素，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。采用I2檢驗(yàn)對(duì)研究結(jié)果行異質(zhì)性檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)學(xué)同質(zhì)性（I2<50%，P ＞0.10），采用固定效應(yīng)模型分析；異質(zhì)性（I2≥50%，P ≤0.10），采用隨機(jī)效應(yīng)模型分析。若異質(zhì)性過(guò)大且無(wú)法分析其來(lái)源，則僅描述性分析。以P ＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 研究文獻(xiàn)收集情況及質(zhì)量評(píng)價(jià)

根據(jù)文獻(xiàn)納入和排除標(biāo)準(zhǔn)，最終納入15篇[4-18]，其中均為英文文獻(xiàn)，涉及患者1 786 例（圖1）。所篩選的文獻(xiàn)質(zhì)量見(jiàn)圖2。

圖1 文獻(xiàn)篩選流程圖

圖2 納入研究的風(fēng)險(xiǎn)偏倚評(píng)估

表1 納入研究的基本特征

2.2 meta 分析結(jié)果

2.2.1 LAT1 陽(yáng)性與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系 8 篇文獻(xiàn)[4-5,8-9,13,15-17]，共1 035 例患者。對(duì)LAT1 表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移進(jìn)行了報(bào)道對(duì)比，其中6 篇文獻(xiàn)[4-5,13,15-17]對(duì)皮膚黑色素瘤、胰腺癌、非小細(xì)胞肺癌、肺多形性癌、乳腺癌進(jìn)行了相關(guān)病例研究，行異質(zhì)性分析I2=49%，P=0.08，異質(zhì)性較小，采用固定效應(yīng)模型分析，行meta 分析結(jié)果示LAT1 表達(dá)對(duì)于以上所述腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移為危險(xiǎn)因素，有顯著關(guān)系（OR=2.03，95%CI：1.44～2.86，P ＜0.000 1），而將結(jié)腸癌作為亞組進(jìn)行分析[8-9]，行異質(zhì)性分析I2=92%，P=0.000 4，異質(zhì)性較大（圖3），此次meta 分析對(duì)LAT1 在結(jié)腸癌患者中腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的影響意義不大。

圖3 腫瘤患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與L 型氨基酸運(yùn)載體1表達(dá)關(guān)系的森林圖

2.2.2 LAT 陽(yáng)性與腫瘤血管侵犯的關(guān)系10 篇文獻(xiàn)[4-6,8-12,14,18]（共1 226 例患者）對(duì)LAT1 表達(dá)與血管侵犯進(jìn)行了報(bào)道，其中1 篇文獻(xiàn)[11]對(duì)大細(xì)胞肺癌與小細(xì)胞肺癌均進(jìn)行了報(bào)道。其中8 篇文獻(xiàn)[4-6,10-12,14,18]分別對(duì)胰腺癌、非小細(xì)胞及小細(xì)胞肺癌、大細(xì)胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌、肝細(xì)胞癌、舌癌進(jìn)行了相關(guān)研究，行異質(zhì)性分析I2=37%，P=0.13，異質(zhì)性較小，采用固定效應(yīng)模型分析。meta 分析結(jié)果示，LAT1 表達(dá)對(duì)于以上所述腫瘤的血管侵犯為危險(xiǎn)因素，有顯著關(guān)系（OR=2.92，95%CI：2.16～3.96，P ＜0.000 01），而將結(jié)腸癌作為亞組進(jìn)行分析[8-9]，行異質(zhì)性分析I2=89%，P=0.002，異質(zhì)性較大（圖4），此次meta 分析對(duì)LATI 在結(jié)腸癌患者中對(duì)其腫瘤血管侵犯的影響意義不大。

圖4 腫瘤患者血管侵犯與L 型氨基酸運(yùn)載體1 表達(dá)關(guān)系的森林圖

2.3 發(fā)表偏倚及敏感性分析

分別納入上述研究的文獻(xiàn)均超過(guò)8 篇，漏斗圖顯示各因素的發(fā)表偏倚除去亞組外均較小，其中淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與LAT1 表達(dá)關(guān)系的漏斗圖見(jiàn)圖5，血管侵犯與LAT1 表達(dá)關(guān)系的漏斗圖見(jiàn)圖6，本研究在LAT1 表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和淋巴管侵犯meta 分析中，均表現(xiàn)出一定的偏倚，這可能是因?yàn)楸狙芯考{入的文獻(xiàn)所使用的樣本例數(shù)偏少或發(fā)表本身所具有的偏倚性，可待相關(guān)病例研究更新后再行分析。

圖5 腫瘤患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與L 型氨基酸運(yùn)載體1 表達(dá)關(guān)系的漏斗圖

圖6 腫瘤患者血管侵犯與L 型氨基酸運(yùn)載體1 表達(dá)關(guān)系的漏斗圖

3 討論

腫瘤轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致患者預(yù)后差的主要原因之一，本研究對(duì)多種實(shí)體腫瘤的LAT1 的表達(dá)與其相應(yīng)的轉(zhuǎn)移方式進(jìn)行了meta 分析，重點(diǎn)包括了實(shí)質(zhì)腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和血管侵犯。在本研究中，結(jié)果提示在多數(shù)腫瘤中，LAT1 的高表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、血管侵犯均具有顯著關(guān)系。值得注意的是，在結(jié)腸癌患者中，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、血管侵犯與LAT1 表達(dá)的meta 分析異質(zhì)性過(guò)大，提示分析無(wú)意義，可能是由于結(jié)腸癌患者的樣本數(shù)過(guò)少、納入文獻(xiàn)不足。由此本研究得出結(jié)論，對(duì)于多數(shù)實(shí)體腫瘤，LAT1 的高表達(dá)與其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，血管侵犯有一定關(guān)系。在既往研究中，LAT1 也被報(bào)道與腫瘤轉(zhuǎn)移存在一定關(guān)系，LATI 過(guò)表達(dá)被認(rèn)為是癌癥腦轉(zhuǎn)移的共同特性[19]，除此以外，多數(shù)腫瘤的轉(zhuǎn)移灶中可以發(fā)現(xiàn)LAT1 的表達(dá)高于原發(fā)灶，如胃癌[20]，卵巢癌[21]。在膽管癌細(xì)胞系中，通過(guò)對(duì)LAT1 進(jìn)行干擾敲減，可以下調(diào)4F2hc 在細(xì)胞中的表達(dá)，并隨后下調(diào)ERK1/2 信號(hào)通路以及磷酸化[22]。在胃癌中，LAT1 是CRKL 蛋白的下游靶點(diǎn)之一，通過(guò)在細(xì)胞系中對(duì)CRKl 的表達(dá)進(jìn)行干擾，會(huì)下調(diào)LAT1 的表達(dá)并進(jìn)一步干擾胃癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力[23]。LAT1 在腫瘤血管生成中是一個(gè)新的關(guān)鍵角色，其調(diào)節(jié)增殖、翻譯和促血管生成VEGF-A信號(hào)，治療性抑制LAT1 可能為增強(qiáng)抗血管生成治療提供一個(gè)理想的選擇，從而抑制腫瘤血行轉(zhuǎn)移的能力[24]。

綜上，本研究探討了LAT1 的表達(dá)與實(shí)體腫瘤中轉(zhuǎn)移因素的關(guān)系，通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)的分析，顯示LAT1表達(dá)與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、淋巴管侵犯和血管侵犯之間存在一定的關(guān)系，提示LAT1 是多種實(shí)體腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移的促進(jìn)因素之一，提示干擾或抑制LAT1 表達(dá)有望抑制腫瘤轉(zhuǎn)移或減緩許多腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移的速度，從而改善腫瘤患者的預(yù)后。