• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    源于中高溫大曲的米根霉制備米曲工藝優(yōu)化及應用

    2022-10-20 04:58:10黃科屹衛(wèi)春會黃治國石選超任志強
    食品與機械 2022年9期
    關鍵詞:酒率糖化酶大曲

    黃科屹 鄧 杰,2 衛(wèi)春會,2 黃治國,2 石選超,2 任志強,2

    (1. 四川輕化工大學釀酒生物技術及應用四川省重點實驗室,四川 宜賓 644000;2. 中國輕工業(yè)釀酒生物技術及智能制造重點實驗室,四川 宜賓 644000)

    濃香型白酒是近幾個世紀以來最受歡迎的酒精飲料之一,是采用中高溫大曲作為糖化發(fā)酵劑進行泥窖固態(tài)發(fā)酵、固態(tài)蒸餾、陳釀、勾調而成的[1-2]。糖化發(fā)酵是中高溫大曲發(fā)酵生產(chǎn)濃香型白酒的一道重要工序,即淀粉水解為葡萄糖。其關鍵為中高溫大曲中豐富多樣的微生物(如霉菌、細菌等)分泌的糖化酶、淀粉酶、液化酶等各類水解酶系的相互作用[3-4]。糖化酶是發(fā)酵過程中淀粉轉化為葡萄糖的重要酶系之一,通常分布在米曲霉、根霉、黑曲霉等霉菌微生物中[5-7]。張杰等[8]從中溫大曲中篩選出一株高產(chǎn)糖化酶的霉菌Mxzd-001并制備成霉菌麩曲,優(yōu)化麩曲工藝后麩曲糖化酶活力為1 032 U/g;將該麩曲應用至濃香型白酒釀造生產(chǎn)中,平均可提高出酒率4.9%左右。宋克偉等[9]從清香型大曲中篩選出一株高產(chǎn)糖化酶的米根霉9#,并添加至牛欄山清香大曲白酒的釀造環(huán)境中,提高了優(yōu)質酒的出酒率。大曲白酒相較于小曲白酒具有醇香濃郁、回味悠長的特點[10-11],但也存在出酒率低、成本高的缺陷,這與大曲白酒體系中的糖化酶活力較小曲白酒體系低下具有一定的相關性。因此以添加高產(chǎn)糖化酶的微生物強化劑為試驗組,探究高產(chǎn)糖化酶的微生物強化劑對大曲白酒出酒率的影響,對大曲白酒的出酒率提升具有重要意義。

    研究擬從中高溫大曲中分離出10株根霉并選出產(chǎn)糖化酶活力最高的一株,通過形態(tài)學鑒定方法以及分子生物學鑒定方法確定該根霉至種水平。將該根霉制作成米曲,從制曲原料、培養(yǎng)時間、加水量、干燥溫度4個條件優(yōu)化根霉米曲的糖化酶活力,并將優(yōu)化后的米曲作為微生物強化劑添加至中高溫大曲的釀造環(huán)境中,以期提高大曲白酒的出酒率。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    中高溫大曲:取自川南某濃香型酒廠,4 ℃冰箱貯藏用于篩選根霉菌;

    蛋白酶K、DNA瓊脂糖凝膠回收試劑盒:日本Takara公司;

    可溶性淀粉培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基:廣東環(huán)凱微生物科技有限公司。

    1.2 儀器和設備

    顯微鏡:DM3000型,德國Leica公司;

    高速冷凍離心機:5430R型,德國Eppendorf公司;

    PCR儀:C1000Touch型,美國Bio-Rad公司;

    酒精度測試儀:Super Alcoma型,德國Julabo公司。

    1.3 菌株的篩選及鑒定

    1.3.1 霉菌的分離純化 稱取10 g大曲樣品,經(jīng)研缽研磨后(無菌條件下)加90 mL蒸餾水,150 r/min振蕩30 min,取上清液,得到10-1的稀釋液,依次稀釋至10-2~10-6,使用PDA固體培養(yǎng)基進行平板涂布培養(yǎng),挑取少量各霉菌孢子點接入PDA斜面培養(yǎng)基,低溫保存[12]。

    1.3.2 形態(tài)學鑒定 將純化菌株點植入選擇培養(yǎng)基,30 ℃ 恒溫培養(yǎng)72 h后,滴入3 mL碘液并使碘液均勻鋪滿整個平板。檢測透明圈直徑D,菌落直徑d,計算D/d值,選擇D/d值最大的菌株作為出發(fā)菌株;將純化菌株點植入PDA固體培養(yǎng)基,28 ℃恒溫培養(yǎng)72 h,觀察菌落形態(tài),挑取菌絲,染色后于顯微鏡下觀察菌株形態(tài)特征,對菌株進行形態(tài)學鑒定[13]。

    1.3.3 分子生物學鑒定 采用真菌基因組DNA試劑盒提取M-1菌株的DNA,以ITS1:5′-TCCGTAG-GTGAACCTGCGG-3′和ITS4:5′-TCCTCCGCTTATT-GATATGC-3′為引物擴增ITS序列。PCR反應體系:引物ITS1、ITS4各1 μL;模板(基因組)0.5 μL;Taq PCR Master Mix 25 μL;超純水22.5 μL;PCR反應條件:94 ℃預變性3 min;94 ℃變性30 s;55 ℃退火30 s;72 ℃延伸45 s;循環(huán)30次;72 ℃總延伸10 min。用DNA瓊脂糖凝膠回收試劑盒回收擴增出的糖化酶基因產(chǎn)物并送至上海生物工程公司測序,測序結果于NCBI數(shù)據(jù)庫比較分析,利用MEGA7.0軟件構建發(fā)育樹。

    1.3.4 酒精度、糖化酶活力測定方法

    (1) 霉菌米曲糖化酶活力:參照QB/T 4257—2011《釀酒大曲通用分析方法》。

    (2) 酒精度:參照QB/T 4257—2011《釀酒大曲通用分析方法》。

    1.4 米曲的制作及應用

    1.4.1 米曲制作工藝

    (1) 純種霉菌麩曲的制作:稱取50.0 g麩皮加入50 mL 去離子水,充分攪拌,121 ℃滅菌20 min,冷卻。向無菌麩皮接種5×106的孢子懸浮液(用無菌水將試管斜面上的霉菌孢子洗下,150 r/min振蕩10 min,25×16型血球計數(shù)板計數(shù)),28 ℃培養(yǎng)5 d??販睾娓?,貯藏,制得霉菌的一級擴大培養(yǎng)產(chǎn)物——霉菌麩曲。

    (2) 霉菌的二級擴大培養(yǎng)產(chǎn)物——純種霉菌米曲的制作:工藝流程見圖1[14]。以糖化酶活力為指標,考察m麩皮∶m米粉、培養(yǎng)時間、米曲含水量和干燥溫度對米曲糖化酶活力的影響。

    圖1 純種霉菌米曲工藝流程圖

    1.4.2 米曲在大曲白酒釀造中的應用 將米曲應用至中高溫大曲釀造中,以添加米曲為試驗組,等質量的米粉、麩皮的混合物為對照組(見表1),探究米曲對固態(tài)釀造出酒率的影響[15]。

    表1 釀造用曲配比表(100 g糧食計)

    綜合考慮生產(chǎn)成本、出酒率來選定釀造用曲,隨后擴大釀造規(guī)模進行驗證實驗。如圖2所示,以100 kg粳高粱為原料,M-1米曲2 kg,大曲20 kg,放入發(fā)酵罐中發(fā)酵60 d,待發(fā)酵完成后取出糟醅蒸酒,測定出酒率。

    圖2 固態(tài)發(fā)酵釀造工藝圖

    1.5 數(shù)據(jù)處理

    試驗數(shù)據(jù)用“平均值±標準差”表示,運用SPSS 16.0軟件對試驗結果進行多重比較和顯著性分析,每組試驗重復3次。

    2 結果與分析

    2.1 菌株篩選及鑒定

    由表1可知,從中高溫大曲中共篩選出10株根霉,將D/d最高的菌株M-1作為米曲的出發(fā)菌株[16]。

    表2 高產(chǎn)糖化酶菌株篩選結果

    將菌株M-1接入PDA固體培養(yǎng)基中,發(fā)現(xiàn)菌落呈白色,孢子多為黑色,菌絲密集,呈網(wǎng)狀,生長迅速。鏡檢下觀察到菌落孢子梗不分枝,從假根處長出。由圖3可知菌株M-1的rDNA-ITS序列基因片段全長約850 bp,其序列與RhizopusoryzaestrainFSU 6160的同源性達99.75%,與米根霉菌株(Rhizopusoryzae)(序列號EU484234.1)相似度為100%。

    綜合形態(tài)學鑒定和分子生物學結果,將M-1菌株鑒定為接合菌綱(Zygomycetes)、毛霉目(Mucorales)、毛霉科(Mucoraceae)、根霉屬(Rhizopus)、米根霉(Rhizopusoryzae)。Xiang等[16]將印度毛霉(MucorindicusXH025)與米根霉(RhizopusoryzaeXH028)應用至米酒釀造中,獲得的米酒相較于工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)的米酒香氣更濃郁、口感更和諧[17];米根霉能產(chǎn)生2-甲基-1-丁醇、3-甲基-1-丁醇等揮發(fā)性化合物,因此也常被用于米酒及黃酒釀造中[18-19]。米根霉M-1來源于中高溫大曲,具有制備成適于大曲白酒釀造的微生物強化劑的潛能。

    圖3 菌株的篩選與鑒定

    2.2 制曲條件優(yōu)化

    2.2.1 制作M-1米曲條件優(yōu)化 糖化酶是參與淀粉轉化為葡萄糖的關鍵酶系之一[20]。添加麩皮可以提高原料的疏松度,有利于微生物的生長繁殖。但麩皮也會給酒體帶來雜味,影響酒質[21]。由圖4(a)可知,隨著麩皮的增加,該米曲的糖化酶活力呈先增后降的趨勢,當m麩皮∶m米粉為2∶8時,糖化酶活力最高為861 U/g。隨后糖化酶活力呈下降趨勢,是因為增加麩皮的同時,米粉的含量相應減少,供微生物利用的營養(yǎng)物質也相應縮減。故最終確定m麩皮∶m米粉為2∶8。

    字母不同表示差異顯著(P<0.05)

    由圖4(b)可知,隨著培養(yǎng)時間的延長,M-1米曲的糖化酶活力先迅速增加后緩慢下降。當培養(yǎng)時間為72 h時,微生物的代謝活動最為活躍,糖化酶活力也達到峰值,為863 U/g,顯著高于72 h前的(P<0.05),72 h后糖化酶活力有所下降??紤]到培養(yǎng)時間過長容易滋生雜菌,確定培養(yǎng)時間為72 h。

    水分是米曲培養(yǎng)階段微生物生長繁殖的基本營養(yǎng)物質之一。含水量低容易引起曲藥通氣性差、氧氣缺乏;含水量高容易延滯菌株的生長,生成孢子[22]。由圖4(c)可知,隨著米曲含水量的增加,糖化酶活力呈先上升后略微下降的趨勢。當米曲含水量為45%時,糖化酶活力達到峰值858 U/g??紤]到含水量過高不僅需要更長的時間來干燥米曲,而且染菌的風險也會增加。故確定米曲含水量為45%。

    為使M-1米曲具有較長的保質期,培育完成的米曲需進行干燥處理。由圖4(d)可知,隨著干燥溫度的增加,米曲的糖化酶活力變化不明顯。考慮到米曲的干燥時間與干燥溫度呈負相關,從節(jié)約能源、時間的角度出發(fā),確定干燥溫度為40 ℃。

    2.2.2 成品米曲檢測 綜合制曲條件優(yōu)化結果,最終確定M-1米曲的制作工藝條件為m麩皮∶m米粉為2∶8,培養(yǎng)時間72 h,米曲含水量45%,干燥溫度40 ℃。此條件下制作的米曲有利于米根霉M-1糖化酶活力的保持。

    由表3可知,M-1成品米曲的酸度、淀粉、水分處于正常范圍,糖化酶活力達864.50 U/g。相較于1#米曲(1 150 U/g)和M1米曲(1 246.9 U/g)的還存在差距[23-24]。然而米根霉M-1是直接從中高溫大曲中篩選獲得的,相較于原中高溫大曲,M-1成品米曲的糖化酶活力提升顯著(P<0.05),應用該米曲至大曲白酒釀造中能較好地發(fā)揮糖化性能。

    表3 成品米曲的理化檢測結果?

    2.3 M-1米曲的應用

    2.3.1 對大曲白酒出酒率的影響 由圖5可知,隨著M-1米曲的增加,大曲白酒的出酒率呈先快速上升后趨于平穩(wěn)的趨勢。釀造用曲配方為試驗號2時,出酒率達43.17%,顯著高于對照組(38.13%)。隨后大曲白酒的出酒率變化不明顯,說明添加該米曲能一定程度上提高大曲白酒的出酒率。從節(jié)約成本的角度考慮,選擇糧食質量的2%為該米曲的添加量。

    字母不同表示差異顯著(P<0.05)

    2.3.2 驗證實驗 為驗證實驗結果,將原料由5 kg擴大至100 kg,按圖2的釀造工藝,以添加2 kg M-1米曲,20 kg 大曲為試驗組;2 kg麩皮米粉(m麩皮∶m米粉為2∶8)混合的糧谷粉,20 kg大曲為對照組進行驗證實驗。

    由圖6可知,試驗組的出酒率(44.61%)顯著高于對照組(38.64%)(P<0.05),提高了5.91%,與圖5的結果一致,證明了大曲白酒的出酒率與大曲體系的糖化酶活力呈正相關[25]。

    字母不同表示差異顯著(P<0.05)

    3 結論

    從中高溫大曲中篩選出一株產(chǎn)糖化酶能力較強的根霉M-1,通過形態(tài)學及分子生物學方法鑒定其為米根霉。

    將該菌株制作成米曲,其糖化酶活力為864.50 U/g。添加米曲至大曲白酒釀造中,餾出酒的出酒率提升明顯,說明出酒率與大曲體系的糖化酶活力呈正相關。米根霉M-1是從大曲中篩選獲得的,應用該菌株制作的米曲(微生物強化劑)于大曲白酒的釀造中能更好的兼容,產(chǎn)糖化酶能力受環(huán)境的影響較小。然而該米曲對出酒率的提升存在限制性,其糖化酶活力尚未達到1 000 U/g,從中高溫大曲中還能篩選出產(chǎn)糖化酶能力更強的微生物,應用該微生物的強化劑至大曲白酒釀造中,出酒率可能進一步提高。后續(xù)將從擴大試驗規(guī)模、酒體風味等方向解決問題,以進一步完善理論支撐數(shù)據(jù)。

    猜你喜歡
    酒率糖化酶大曲
    TIPS 2十斤糧出一斤酒,是真的嗎?
    兩宋大曲異同考
    戲曲研究(2020年2期)2020-11-16 01:21:10
    自動化生產(chǎn)線酒醅發(fā)酵溫度與原酒產(chǎn)量關聯(lián)性研究
    釀酒科技(2020年9期)2020-11-02 09:42:30
    唐雅樂大曲存辭考略
    中華戲曲(2020年1期)2020-02-12 02:28:10
    澳新擬批準一種糖化酶作為加工助劑
    黑曲霉突變菌株產(chǎn)糖化酶的酶學特性表征
    活性干酵母在濃香型大曲酒生產(chǎn)中的應用
    釀酒科技(2018年7期)2018-07-25 03:09:04
    多糧生料釀酒工藝的研究
    中國釀造(2017年6期)2017-07-18 11:33:40
    貴州大曲
    遵義(2017年1期)2017-07-12 17:57:38
    貴州大曲
    遵義(2017年5期)2017-07-05 13:50:16
    av中文乱码字幕在线| 露出奶头的视频| 男插女下体视频免费在线播放| 欧美极品一区二区三区四区| 丁香六月欧美| 日本黄大片高清| 精品国产三级普通话版| 日本 欧美在线| 成年免费大片在线观看| 91狼人影院| 又粗又爽又猛毛片免费看| 五月玫瑰六月丁香| 欧美一区二区亚洲| 毛片女人毛片| 色av中文字幕| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 亚洲国产精品sss在线观看| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 国产欧美日韩一区二区精品| 啦啦啦韩国在线观看视频| 国产精品久久久久久久电影| 国产精品一区二区三区四区久久| av女优亚洲男人天堂| 精品久久久久久成人av| 一级黄色大片毛片| 国产精品,欧美在线| 免费搜索国产男女视频| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 日本熟妇午夜| 一区二区三区高清视频在线| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 免费观看的影片在线观看| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 亚洲美女搞黄在线观看 | 99久久精品一区二区三区| 黄色日韩在线| 精品一区二区免费观看| 毛片一级片免费看久久久久 | 国产又黄又爽又无遮挡在线| 999久久久精品免费观看国产| 91麻豆精品激情在线观看国产| 夜夜爽天天搞| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 日韩欧美 国产精品| 国产成年人精品一区二区| 俺也久久电影网| 色尼玛亚洲综合影院| 欧美高清成人免费视频www| 国产乱人视频| 18禁在线播放成人免费| 又爽又黄无遮挡网站| 91狼人影院| 国产三级在线视频| 丝袜美腿在线中文| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 亚洲色图av天堂| 午夜a级毛片| 久久久久久久精品吃奶| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 国语自产精品视频在线第100页| 少妇被粗大猛烈的视频| 在线看三级毛片| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 国产极品精品免费视频能看的| 久久久久久久久久黄片| 亚洲人成电影免费在线| 国产熟女xx| 午夜影院日韩av| 超碰av人人做人人爽久久| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 国产激情偷乱视频一区二区| 最好的美女福利视频网| 午夜亚洲福利在线播放| 亚洲av电影不卡..在线观看| 国产精品亚洲一级av第二区| 九色成人免费人妻av| 成人性生交大片免费视频hd| 亚洲成av人片在线播放无| 久久欧美精品欧美久久欧美| 嫩草影院精品99| 99久久精品国产亚洲精品| 国产精品不卡视频一区二区 | 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 他把我摸到了高潮在线观看| 国产人妻一区二区三区在| 国产伦精品一区二区三区四那| 国产乱人视频| 两个人视频免费观看高清| 精品日产1卡2卡| 激情在线观看视频在线高清| 精品乱码久久久久久99久播| 麻豆国产av国片精品| 国产探花在线观看一区二区| 午夜福利在线在线| 一区二区三区四区激情视频 | 亚洲经典国产精华液单 | 精品国内亚洲2022精品成人| 国产精品影院久久| 欧美在线一区亚洲| 亚洲人成网站高清观看| 亚洲精品在线观看二区| 天美传媒精品一区二区| 如何舔出高潮| 亚洲国产高清在线一区二区三| 国产成年人精品一区二区| 一级作爱视频免费观看| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产真实伦视频高清在线观看 | 欧美成人免费av一区二区三区| 国产白丝娇喘喷水9色精品| www.色视频.com| 一本久久中文字幕| 国产精品人妻久久久久久| 国产野战对白在线观看| 91久久精品国产一区二区成人| 99久久成人亚洲精品观看| 一区二区三区激情视频| 我要看日韩黄色一级片| 亚洲欧美精品综合久久99| 黄色日韩在线| 国产亚洲欧美在线一区二区| 国产v大片淫在线免费观看| 激情在线观看视频在线高清| 亚州av有码| 熟女人妻精品中文字幕| 国产成+人综合+亚洲专区| 日韩中字成人| 一本一本综合久久| 91狼人影院| 一a级毛片在线观看| 一区二区三区免费毛片| 麻豆一二三区av精品| 久久人人精品亚洲av| 99国产精品一区二区蜜桃av| 高潮久久久久久久久久久不卡| 精品人妻偷拍中文字幕| а√天堂www在线а√下载| 别揉我奶头 嗯啊视频| 日韩中文字幕欧美一区二区| 黄色视频,在线免费观看| 一级av片app| 黄色日韩在线| 露出奶头的视频| 精品午夜福利视频在线观看一区| 在线天堂最新版资源| 九色成人免费人妻av| 亚洲成a人片在线一区二区| 亚洲国产精品合色在线| 国产成人福利小说| 欧美中文日本在线观看视频| 色哟哟哟哟哟哟| 我要看日韩黄色一级片| 最近最新中文字幕大全电影3| 国内精品美女久久久久久| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 如何舔出高潮| 久久热精品热| 日本免费a在线| 国产精品久久电影中文字幕| 大型黄色视频在线免费观看| 狠狠狠狠99中文字幕| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 两个人的视频大全免费| 欧美在线一区亚洲| 亚洲中文日韩欧美视频| 高清日韩中文字幕在线| 51国产日韩欧美| 国产午夜精品论理片| 国产主播在线观看一区二区| 午夜激情福利司机影院| 亚洲色图av天堂| 国产欧美日韩精品亚洲av| 99久久精品国产亚洲精品| 亚洲色图av天堂| www.999成人在线观看| 久久99热6这里只有精品| 婷婷精品国产亚洲av| 亚洲内射少妇av| 欧美3d第一页| 人妻夜夜爽99麻豆av| 偷拍熟女少妇极品色| 内地一区二区视频在线| 久久欧美精品欧美久久欧美| 久久午夜福利片| 99久久精品一区二区三区| 欧美在线黄色| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 又黄又爽又免费观看的视频| 变态另类丝袜制服| 国产久久久一区二区三区| 不卡一级毛片| 成人午夜高清在线视频| 少妇的逼水好多| 美女大奶头视频| 男人的好看免费观看在线视频| 亚洲中文日韩欧美视频| 国产欧美日韩一区二区三| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 国产精品国产高清国产av| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 亚洲一区高清亚洲精品| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 久久精品国产亚洲av天美| 精品人妻偷拍中文字幕| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 亚洲真实伦在线观看| 亚洲七黄色美女视频| 欧美一级a爱片免费观看看| 亚洲真实伦在线观看| 日韩高清综合在线| 国产精品乱码一区二三区的特点| 国产欧美日韩精品亚洲av| 中出人妻视频一区二区| 嫩草影视91久久| 国产精品久久视频播放| 日本熟妇午夜| 舔av片在线| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 亚洲真实伦在线观看| 99riav亚洲国产免费| 91在线观看av| 国产欧美日韩精品亚洲av| 欧美极品一区二区三区四区| 亚洲精品一区av在线观看| 午夜老司机福利剧场| 18+在线观看网站| 他把我摸到了高潮在线观看| 99久国产av精品| 12—13女人毛片做爰片一| 丝袜美腿在线中文| 国产精品亚洲美女久久久| 精品乱码久久久久久99久播| 亚洲久久久久久中文字幕| 日韩人妻高清精品专区| 青草久久国产| 欧美乱色亚洲激情| 长腿黑丝高跟| 亚洲天堂国产精品一区在线| 色噜噜av男人的天堂激情| 欧美xxxx性猛交bbbb| 免费av不卡在线播放| 丰满乱子伦码专区| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 日韩中字成人| 国产成人av教育| 国产老妇女一区| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 国产av麻豆久久久久久久| 热99在线观看视频| 精品无人区乱码1区二区| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 亚洲av一区综合| 高潮久久久久久久久久久不卡| 男人舔女人下体高潮全视频| 国产精品伦人一区二区| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 天天躁日日操中文字幕| 99精品在免费线老司机午夜| 亚洲,欧美精品.| 中出人妻视频一区二区| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 亚洲五月天丁香| 免费一级毛片在线播放高清视频| 99久久精品热视频| 色综合欧美亚洲国产小说| 国产爱豆传媒在线观看| 亚洲精品久久国产高清桃花| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 天堂√8在线中文| 别揉我奶头 嗯啊视频| 国产野战对白在线观看| 精品无人区乱码1区二区| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 免费大片18禁| netflix在线观看网站| 亚洲av美国av| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 精品一区二区免费观看| 亚洲av不卡在线观看| 九九在线视频观看精品| 成人午夜高清在线视频| 一个人看视频在线观看www免费| 床上黄色一级片| av黄色大香蕉| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 欧美色欧美亚洲另类二区| 国产免费一级a男人的天堂| 精品久久久久久久末码| 亚洲av五月六月丁香网| 两个人视频免费观看高清| 国产精品人妻久久久久久| 欧美精品国产亚洲| 淫妇啪啪啪对白视频| 国产主播在线观看一区二区| 校园春色视频在线观看| 91av网一区二区| 在线免费观看不下载黄p国产 | 亚洲激情在线av| 午夜激情福利司机影院| 中文字幕av成人在线电影| 午夜福利视频1000在线观看| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 欧美成人性av电影在线观看| 亚洲最大成人中文| 午夜亚洲福利在线播放| 9191精品国产免费久久| 色哟哟·www| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 欧美高清成人免费视频www| 国产欧美日韩精品亚洲av| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 亚洲成人中文字幕在线播放| 欧美中文日本在线观看视频| 国产真实伦视频高清在线观看 | 日日摸夜夜添夜夜添av毛片 | 三级毛片av免费| 国产一级毛片七仙女欲春2| 欧美黑人巨大hd| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 国产精品久久久久久久久免 | 国产成人影院久久av| 欧美不卡视频在线免费观看| 狠狠狠狠99中文字幕| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 久久久久久大精品| 国产精品野战在线观看| 床上黄色一级片| 淫妇啪啪啪对白视频| 国产91精品成人一区二区三区| 欧美成人免费av一区二区三区| 亚洲美女黄片视频| 国产亚洲欧美98| 欧美又色又爽又黄视频| 99久久精品国产亚洲精品| 欧美+亚洲+日韩+国产| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 熟女电影av网| 午夜免费激情av| 麻豆成人av在线观看| 夜夜爽天天搞| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 亚洲av一区综合| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片 | 国产日本99.免费观看| 国产乱人视频| 能在线免费观看的黄片| 又粗又爽又猛毛片免费看| 成人性生交大片免费视频hd| 又粗又爽又猛毛片免费看| 亚洲人成电影免费在线| 国产三级中文精品| 很黄的视频免费| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 波多野结衣巨乳人妻| 99在线人妻在线中文字幕| 久久久精品大字幕| 久久人人爽人人爽人人片va | 婷婷六月久久综合丁香| 久久久久精品国产欧美久久久| 热99在线观看视频| av黄色大香蕉| 亚洲自偷自拍三级| 国产探花在线观看一区二区| 国产精品日韩av在线免费观看| 成人一区二区视频在线观看| 亚洲内射少妇av| 久久人人精品亚洲av| 在线观看午夜福利视频| 国产精品久久久久久久电影| 亚洲七黄色美女视频| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 哪里可以看免费的av片| 成人精品一区二区免费| 我要看日韩黄色一级片| 一个人看视频在线观看www免费| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 亚洲国产欧美人成| 麻豆一二三区av精品| 国产成人福利小说| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产三级黄色录像| 色综合婷婷激情| 亚洲av电影在线进入| 国产精品不卡视频一区二区 | 在线a可以看的网站| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产免费男女视频| 69av精品久久久久久| 亚洲av五月六月丁香网| 99riav亚洲国产免费| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 成人性生交大片免费视频hd| 午夜免费成人在线视频| 成年女人毛片免费观看观看9| 一级a爱片免费观看的视频| 如何舔出高潮| www.色视频.com| 最近最新中文字幕大全电影3| 亚州av有码| 看免费av毛片| 中文字幕熟女人妻在线| 99国产精品一区二区三区| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 久久午夜亚洲精品久久| 大型黄色视频在线免费观看| 首页视频小说图片口味搜索| 国内揄拍国产精品人妻在线| 最近最新中文字幕大全电影3| 五月玫瑰六月丁香| 赤兔流量卡办理| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 搞女人的毛片| 色精品久久人妻99蜜桃| 亚洲精品在线美女| 国产成人aa在线观看| 欧美又色又爽又黄视频| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 国产伦精品一区二区三区视频9| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 国产91精品成人一区二区三区| 亚洲在线自拍视频| 九九热线精品视视频播放| 在线观看舔阴道视频| 亚洲av第一区精品v没综合| 亚洲色图av天堂| 十八禁人妻一区二区| 日本黄大片高清| 可以在线观看的亚洲视频| 日本五十路高清| 成年女人毛片免费观看观看9| 久久亚洲精品不卡| 亚洲在线自拍视频| 中文字幕熟女人妻在线| 成人国产综合亚洲| 免费观看的影片在线观看| ponron亚洲| 欧美色欧美亚洲另类二区| av国产免费在线观看| 国产精品久久电影中文字幕| 日本精品一区二区三区蜜桃| 色综合婷婷激情| 亚洲av第一区精品v没综合| 黄色日韩在线| 久久久国产成人免费| 日本五十路高清| 精品日产1卡2卡| 国产欧美日韩一区二区三| 麻豆久久精品国产亚洲av| 欧美乱妇无乱码| 日本免费一区二区三区高清不卡| 国产成人欧美在线观看| 日本 av在线| 精品久久久久久久久久免费视频| 午夜福利免费观看在线| 成人国产综合亚洲| 欧美成狂野欧美在线观看| 91字幕亚洲| 女人被狂操c到高潮| 国产主播在线观看一区二区| 日韩大尺度精品在线看网址| 黄色视频,在线免费观看| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 精品欧美国产一区二区三| 欧美+亚洲+日韩+国产| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 丰满人妻一区二区三区视频av| 十八禁国产超污无遮挡网站| 嫩草影院精品99| 99久久九九国产精品国产免费| 国产亚洲av嫩草精品影院| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 欧美成人免费av一区二区三区| 亚洲激情在线av| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 观看美女的网站| 在线a可以看的网站| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 村上凉子中文字幕在线| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 国产一区二区在线av高清观看| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 午夜老司机福利剧场| 国产乱人视频| 欧美另类亚洲清纯唯美| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 9191精品国产免费久久| 色精品久久人妻99蜜桃| 日韩免费av在线播放| 欧美中文日本在线观看视频| 免费电影在线观看免费观看| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 岛国在线免费视频观看| 永久网站在线| 久久久国产成人精品二区| 他把我摸到了高潮在线观看| 久久久久久久久中文| 免费人成视频x8x8入口观看| 三级国产精品欧美在线观看| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 国产91精品成人一区二区三区| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 听说在线观看完整版免费高清| 国产精品国产高清国产av| 久久午夜亚洲精品久久| 日韩成人在线观看一区二区三区| 久久人妻av系列| 久久久精品欧美日韩精品| 亚洲色图av天堂| 99精品久久久久人妻精品| 亚洲成人中文字幕在线播放| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 99国产精品一区二区蜜桃av| 免费在线观看影片大全网站| 国产v大片淫在线免费观看| 丰满人妻一区二区三区视频av| 亚洲午夜理论影院| 久久午夜福利片| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 欧美最新免费一区二区三区 | 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 人人妻人人看人人澡| 欧美黑人巨大hd| 国产乱人视频| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 精品熟女少妇八av免费久了| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 99精品在免费线老司机午夜| 丝袜美腿在线中文| 日本免费一区二区三区高清不卡| 国产成人啪精品午夜网站| 国产亚洲欧美在线一区二区| 黄色日韩在线| x7x7x7水蜜桃| 久久精品国产清高在天天线| 韩国av一区二区三区四区| 性色avwww在线观看| 国产男靠女视频免费网站| av黄色大香蕉| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 成年免费大片在线观看| 亚洲av免费在线观看| 老司机深夜福利视频在线观看| 久久久色成人| 亚洲精品成人久久久久久| 欧美最黄视频在线播放免费| 一个人观看的视频www高清免费观看| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 欧美高清性xxxxhd video| 国产亚洲欧美在线一区二区| 亚洲专区国产一区二区| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 91麻豆精品激情在线观看国产| 91狼人影院| 亚洲av免费高清在线观看| 精华霜和精华液先用哪个| 精品国内亚洲2022精品成人| 一个人观看的视频www高清免费观看| 好男人电影高清在线观看| 亚洲第一电影网av| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 成年女人看的毛片在线观看| 一级av片app| 变态另类丝袜制服| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 高清日韩中文字幕在线| 国产免费男女视频| 国产真实乱freesex| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 好男人电影高清在线观看| 国产精品永久免费网站| 亚洲最大成人av| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 婷婷丁香在线五月| 久久久久久久午夜电影| 欧美日韩综合久久久久久 | 精品久久久久久久久久久久久| 18禁在线播放成人免费| 国内精品美女久久久久久| 亚洲人成网站在线播| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 久久精品91蜜桃| 欧美极品一区二区三区四区| 午夜福利免费观看在线| 国产精品久久久久久久电影| 欧美成人免费av一区二区三区| 欧美一区二区国产精品久久精品| 国产视频一区二区在线看| 国产精品伦人一区二区| 国产一区二区激情短视频| av福利片在线观看| 国产精品亚洲av一区麻豆| 亚洲精品粉嫩美女一区| 国产老妇女一区| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 国产精品日韩av在线免费观看| 九九在线视频观看精品| 国产精品久久久久久久久免 | 淫妇啪啪啪对白视频| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 精品人妻1区二区| 国产色婷婷99| 亚洲黑人精品在线| 神马国产精品三级电影在线观看|