泮托拉唑聯(lián)合氨甲環(huán)酸對(duì)急性上消化道出血患者免疫功能、氧化應(yīng)激反應(yīng)的影響*

周芳鳴, 金毅, 張小紅

麗水市人民醫(yī)院急診醫(yī)學(xué)科(浙江麗水 323000)

急性上消化道出血是急診臨床中常見病種，患者臨床表現(xiàn)常出現(xiàn)嘔血、黑便、貧血等情況，且病因復(fù)雜、發(fā)病急。不同患者的臨床表現(xiàn)、病變位置存在差異，診斷難度因此增加。且一旦治療不及時(shí)，就會(huì)直接危及患者生命，因此分析急性上消化道出血的病因及相關(guān)因素是十分重要且必要的[1-2]。有報(bào)道顯示，消化道除了分泌各種激素保持和調(diào)節(jié)內(nèi)部穩(wěn)定，還是一個(gè)重要的免疫器官，急性上消化道出血破壞了胃黏膜，而胃腸道又是免疫系統(tǒng)的第一道屏障[3]。有研究表明，氧化應(yīng)激反應(yīng)產(chǎn)生大量的氧自由基會(huì)造成組織器官損傷，加重患者病情[4]。泮托拉唑是目前臨床治療胃酸常用藥物，能有效阻斷胃酸分泌，達(dá)到迅速止血的效果[5]；氨甲環(huán)酸可以抑制新形成的纖維蛋白凝塊的降解，減少出血[6]。本研究通過探索此兩種藥物聯(lián)合治療的方法來分析其對(duì)急性上消化道出血患者免疫功能、氧化應(yīng)激反應(yīng)的影響，以期為臨床診治提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機(jī)選擇2019年3月至2021年3月我院接診的78例急性上消化道出血患者為研究對(duì)象，用數(shù)字表法分為對(duì)照組39例，包括男21例，女18例，年齡25～68歲，平均(46.52±17.28)歲，體質(zhì)指數(shù)(body mass index,BMI)(22.76±2.35)kg/m2；觀察組39例，包括男22例，女17例，年齡21～65歲，平均(43.12±17.62)歲，BMI(22.78±2.36)kg/m2。兩組患者基本資料均衡完整，具有可比性。患者家屬均知情同意，并取得本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(LLW-FO-403)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合《急性上消化道出血急診診治流程專家共識(shí)》中急性上消化道出血判斷標(biāo)準(zhǔn)[7]；自愿參加研究者。

排除標(biāo)準(zhǔn)：心、腎功能器官損壞者；對(duì)泮托拉唑和氨甲環(huán)酸藥物不適用；泮托拉唑和氨甲環(huán)酸藥物用藥禁忌者。

1.2 治療方法 兩組患者入院后均給予低熱量吸氧、禁食、補(bǔ)液、補(bǔ)血等常規(guī)治療，并保持絕對(duì)臥床休息。對(duì)照組：采用泮托拉唑(南京博安藥業(yè)股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字：H20074147,規(guī)格:40 mg)加入0.9%氯化鈉溶液100 mL稀釋，靜脈滴注,40 mg/次，2次/d。觀察組：泮托拉唑聯(lián)合氨甲環(huán)酸治療。靜脈注射氨甲環(huán)酸(重慶安仁藥業(yè)股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字：H31020040，規(guī)格：25 mg)10 mg/次，1次/d。兩組治療時(shí)間均為14 d。泮托拉唑使用劑量與對(duì)照組一致。

1.3 指標(biāo)檢測(cè)

1.3.1 病情恢復(fù)情況 對(duì)比兩組患者治療前、治療后14 d的止血有效率、再出血情況，記錄患者治療后的不良反應(yīng)及再復(fù)發(fā)情況。

1.3.2 流式細(xì)胞術(shù)對(duì)T淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)(CD3+、CD4+、CD8+)檢測(cè) 空腹?fàn)顟B(tài)下抽取患者治療前、治療后14 d靜脈血5 mL，對(duì)待測(cè)標(biāo)本做抗凝處理，分為2管，分別加入20 μL單克隆抗體，在室溫環(huán)境下孵育30 min后在各管中加入融血?jiǎng)渫耆苎筮M(jìn)行離心處理，棄上清液，經(jīng)充分洗滌后在各管中加入150 μL固定劑，使用0.5 mL磷酸緩沖鹽溶液(phosphate buffer saline,PBS)混合均勻制備為懸液，使用FACACalibur流式細(xì)胞儀測(cè)定免疫功能指標(biāo)CD3+、CD4+、CD8+細(xì)胞的含量。

1.3.3 免疫比濁法檢測(cè)IgG、IgA、IgM水平 抽取患者治療后靜脈血5 mL，離心后-50℃保存。以IgG為例：準(zhǔn)備IgG待測(cè)試劑，取3支潔凈試管分別標(biāo)記為空白管、校準(zhǔn)管、樣本管，每支試管添加IgG試劑1 mL，搖勻后37℃水溫箱靜置5 min，之后3支試管中依次加10 μL蒸餾水、10 μL校準(zhǔn)品、10 μL樣品血清，震蕩均勻后37℃水溫箱保存10 min，在波長(zhǎng)340 nm處測(cè)定吸光度(optical density，OD)，根據(jù)OD值計(jì)算IgG水平。IgA、IgM檢測(cè)操作同上。

1.3.4 以酶聯(lián)免疫法檢測(cè)SOD、MDA、GSH-Px水平 空腹條件下抽取患者治療后靜脈血5 mL，靜置30 min后離心分離出血清。將稀釋的待檢樣品置于酶標(biāo)反應(yīng)板中，37℃水溫箱靜置1 h，充分洗滌，同時(shí)做空白孔、陰性對(duì)照孔和陽性對(duì)照孔，各反應(yīng)孔中加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體0.1 mL,經(jīng)37℃溫浴震蕩反應(yīng)45 min，棄去反應(yīng)液，經(jīng)過徹底洗滌后，加入底物腫瘤基因突變負(fù)荷(tumor mutational burden,TMB)顯色。在酶的催化作用下，TMB轉(zhuǎn)化為藍(lán)色，最終在酸的作用下變成黃色。波長(zhǎng)450 nm處測(cè)定吸光度,計(jì)算超氧化物歧化酶(auperoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、還原型谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)水平。

1.3.5 療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 顯效：臨床表現(xiàn)和不良反應(yīng)等癥狀消失，各指標(biāo)水平恢復(fù)正常；有效：臨床癥狀有所緩解，不良反應(yīng)有所減少，各指標(biāo)水平有所改善；無效：臨床癥狀無改變，各指標(biāo)水平無變化。

2 結(jié)果

2.1 兩組臨床療效比較 相比對(duì)照組，觀察組的止血有效率較高，再出血情況較低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組臨床療效比較 例(%)

2.2 T淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)細(xì)胞含量變化 治療前，T淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)水平比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后，與對(duì)照組比較，觀察組CD3+、CD4+水平較高，CD8+較低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組治療前后T淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)比較

2.3 兩組免疫球蛋白指標(biāo)水平變化 治療前IgG、IgA、IgM水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后，觀察組IgG、IgA、IgM水平與高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 兩組患者治療前后免疫球蛋白水平變化

2.4 氧化應(yīng)激反應(yīng)指標(biāo)SOD、MDA、GSH-Px水平變化 治療前，兩組氧化應(yīng)激反應(yīng)指標(biāo)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，治療后，觀察組SOD及GSH-Px比對(duì)照組較高，MDA水平較低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

表4 兩組各氧化應(yīng)激反應(yīng)指標(biāo)水平

2.5 兩組不良反應(yīng)與再復(fù)發(fā)情況 與對(duì)照組相比，治療后患者的不良反應(yīng)較高，再復(fù)發(fā)率降低，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表5。

表5 兩組不良反應(yīng)和再復(fù)發(fā)情況 例(%)

3 討論

聯(lián)合用藥主要是為增強(qiáng)藥物的療效或減輕藥物的毒副作用。研究表明，免疫組織細(xì)胞和氧化應(yīng)激作用都可造成急性上消化道出血[8-9]。臨床實(shí)驗(yàn)指出，泮托拉唑聯(lián)合氨甲環(huán)酸不僅有效治療纖維蛋白溶解亢進(jìn)造成的出血，還可以促進(jìn)患者免疫功能的恢復(fù)和抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)[10-11]。本研究結(jié)果表明，泮托拉唑聯(lián)合氨甲環(huán)酸可以有效止血，患者再出血情況減少。這一研究結(jié)果說明，泮托拉唑聯(lián)合氨甲環(huán)酸治療急性上消化道出血，可以改善機(jī)體的免疫功能，抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)，有利于患者恢復(fù)。

有研究表示，T淋巴細(xì)胞在細(xì)胞免疫方面起著重要作用，CD3+直接反映機(jī)體細(xì)胞免疫功能；CD4+通過輔助其他免疫細(xì)胞達(dá)到調(diào)控免疫功能的作用；CD8+具有拮抗其他免疫細(xì)胞的免疫功能[12-13]。本研究結(jié)果顯示，泮托拉唑聯(lián)合氨甲環(huán)酸治療的急性上消化道出血患者T細(xì)胞亞群中CD3+、CD4+水平升高，CD8+降低，說明此方案的臨床應(yīng)用可以維持免疫功能穩(wěn)定，提高患者的抗感染能力，增強(qiáng)患者機(jī)體的免疫功能。

有研究表示IgG是血清免疫球蛋白的主要成分，具有吞噬細(xì)胞、中和毒素的作用；IgA可以抑制微生物在呼吸道上皮附著，減緩病毒繁殖，是黏膜重要屏障；IgM是高效能的抗生物抗體，其殺菌、溶菌、促吞噬和凝集作用比IgG高500～1 000倍[14-15]。本研究結(jié)果顯示，泮托拉唑聯(lián)合氨甲環(huán)酸治療的急性上消化道出血患者免疫球蛋白IgG、IgA、IgM水平升高，說明泮托拉唑聯(lián)合氨甲環(huán)酸治療急性上消化道出血的方法可以調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，提升患者自身免疫力，減緩病情。

大量臨床結(jié)果表明，氧化應(yīng)激反應(yīng)是指機(jī)體或細(xì)胞內(nèi)活性氧(reactive oxygen species，ROS)過度產(chǎn)生或抗氧化防御功能減弱導(dǎo)致兩者平衡受到嚴(yán)重破壞而造成組織、細(xì)胞損傷的狀態(tài)[16-17]。臨床研究發(fā)現(xiàn)，MDA的產(chǎn)生是由于ROS大量釋放激活氧化反應(yīng)，可反映機(jī)體組織損傷的程度[18]；SOD和GSH-Px均是機(jī)體內(nèi)重要的抗氧化酶，可以調(diào)節(jié)氧化和抗氧化平衡[19-20]。本研究結(jié)果顯示，泮托拉唑聯(lián)合氨甲環(huán)酸治療的急性上消化道出血患者SOD及GSH-Px水平明顯升高，MDA水平明顯降低，表明應(yīng)用此兩種藥物聯(lián)合治療可以促進(jìn)組織、細(xì)胞的恢復(fù)，調(diào)節(jié)機(jī)體抗氧化平衡水平，增加機(jī)體防御功能。

有報(bào)道發(fā)現(xiàn)，免疫受損與氧化應(yīng)激相互作用會(huì)嚴(yán)重影響患者預(yù)后[21-22]。本研究結(jié)果顯示，泮托拉唑聯(lián)合氨甲環(huán)酸治療的急性上消化道出血患者不良反應(yīng)和再復(fù)發(fā)情況較低，說明應(yīng)用此治療方法可以抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)，降低再復(fù)發(fā)率，改善預(yù)后。

綜上所述，泮托拉唑、氨甲環(huán)酸聯(lián)合應(yīng)用可以提高急性上消化道出血患者機(jī)體免疫功能，調(diào)節(jié)抗氧化平衡水平，抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)的發(fā)生，改善預(yù)后。

利益相關(guān)聲明：本研究不存在任何利益沖突。

作者貢獻(xiàn)說明：周芳鳴負(fù)責(zé)設(shè)計(jì)研究方案，實(shí)施研究過程，論文撰寫；金毅負(fù)責(zé)提出研究思路，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析、課題設(shè)計(jì)，論文撰寫和審核；張小紅負(fù)責(zé)實(shí)施研究過程，資料搜集整理，論文修改。