前列腺特異性膜抗原與前列腺癌Gleason評(píng)分的相關(guān)性分析及在早期診斷及預(yù)后中的價(jià)值

季金濤 康波 蘇燕勝

前列腺癌早期癥狀不明顯，多數(shù)病人就診時(shí)屬中晚期，總體預(yù)后差[1-2]。目前，直腸指診，血清中前列腺特異性抗原(prostate specific antigen，PSA)檢測(cè)及經(jīng)直腸超聲檢查(Transrectal ultrasound，TRUS)是前列腺癌主要的篩查手段[3]。血清PSA檢測(cè)已被廣泛應(yīng)用于臨床，但是其特異性較差，易出現(xiàn)過(guò)度診斷和不必要的前列腺穿刺活檢操作[4]。前列腺特異性膜抗原(prostate specific membrane antigen，PSMA)是一種跨膜糖蛋白,在前列腺腫瘤組織中的表達(dá)高于正常前列腺組織，且腫瘤組織中PSMA蛋白的高表達(dá)與病人生化復(fù)發(fā)相關(guān)，提示PSMA可能具有預(yù)后作用[5-6]。有研究通過(guò)ROC曲線(xiàn)對(duì)于PSMA的診斷價(jià)值進(jìn)行了評(píng)估，但對(duì)于PSMA的預(yù)后價(jià)值仍存在爭(zhēng)議[7-8]。本研究探討PSMA在前列腺癌早期診斷及預(yù)后評(píng)估中的價(jià)值。

對(duì)象與方法

一、對(duì)象

2015年3月～2020年6月我院診治的前列腺癌病人270例，前列腺增生病人50例。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)經(jīng)影像學(xué)及病理檢查確診為前列腺癌，均為初治病人；(2)術(shù)前未行放化療及抗雄激素等內(nèi)分泌治療；(3)可獲得相應(yīng)的石蠟切片標(biāo)本；(4)可獲得相應(yīng)的血清標(biāo)本。所有病人及家屬已簽署知情同意書(shū)。

二、方法

1.組織中PSMA檢測(cè)：采用免疫組織化學(xué)方法，在低倍鏡下觀(guān)察免疫組織化學(xué)染色結(jié)果，對(duì)于具有陽(yáng)性染色的切片，以高放大倍數(shù)確定在每個(gè)選定視野中顯示高和低染色的腫瘤細(xì)胞的染色強(qiáng)度和比例。強(qiáng)度類(lèi)別等級(jí)：0(藍(lán)紫色)，1(淡黃色)，2(棕黃色)和3(棕褐色)。著色比例等級(jí)：0，小于1%；1，1%～5%；2，5%～25%；3，25%～50%；4，50%以上。將強(qiáng)度類(lèi)別等級(jí)與比例類(lèi)別等級(jí)相乘得到最終得分，范圍從0到12。<5為陰性表達(dá)，≥5為陽(yáng)性表達(dá)。

2.血清中PSMA檢測(cè)：收集所有病人的凍存血清，采用ELISA法對(duì)血清中的PSMA含量進(jìn)行檢測(cè)。

3.隨訪(fǎng) ：術(shù)后2年內(nèi)，每3～6個(gè)月進(jìn)行1次復(fù)查，2年后1年1次隨訪(fǎng)，直至病人出現(xiàn)生化復(fù)發(fā)(血清中PSA水平>0.2 ng/mL或出現(xiàn)兩次連續(xù)的PSA水平升高)或死亡。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用SPSS 26.0軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料用例(%)表示，用χ2檢驗(yàn)。采用Kaplan-Meier方法比較PSMA陰性表達(dá)與陽(yáng)性表達(dá)兩組病人的OS和BRFS差異。應(yīng)用ROC法評(píng)價(jià)血清中PSMA作為前列腺癌診斷標(biāo)志物的價(jià)值，并尋找截?cái)嘀?。P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

1.PSMA在前列腺癌和前列腺增生組織中的表達(dá)：在270例前列腺癌組織中，PSMA表達(dá)陽(yáng)性221例(81.9%)；50例前列腺增生組織中，PSMA表達(dá)陽(yáng)性24例(48.0%)，兩組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。免疫組化見(jiàn)圖1。

A為典型染色區(qū)域之一(細(xì)胞漿及細(xì)胞膜均呈現(xiàn)棕褐色強(qiáng)染色)，B為A的局部放大圖片，HE×20

2.PSMA與前列腺癌患Gleason評(píng)分的關(guān)系 Gleason評(píng)分>7分的病人PSMA陽(yáng)性表達(dá)率(87.0%)較Gleason評(píng)分≤7分(76.5%)高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 前列腺癌組織中PSMA表達(dá)與Gleason評(píng)分的關(guān)系

3.PSMA的表達(dá)與病人預(yù)后的關(guān)系:PSMA陽(yáng)性表達(dá)組的中位OS為24個(gè)月，中位BRFS為17個(gè)月，PSMA陰性表達(dá)組分別為52個(gè)月和45個(gè)月，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)圖2，3。

圖2 PSMA陽(yáng)性組與陰性組病人OS比較

圖3 PSMA陽(yáng)性組與陰性組病人BRFS比較

4.血清中PSMA含量對(duì)于前列腺癌的診斷價(jià)值：前列腺癌病人血清PSMA含量為(17.97±6.66)μg/L，前列腺增生組為(7.90±5.03)μg/L，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。ROC結(jié)果顯示，以血清PSMA>17.50 μg/L為截?cái)嘀禃r(shí)，曲線(xiàn)下面積(AUC)為0.845)，診斷靈敏度為71.1%，特異度為82%。見(jiàn)圖4。

圖4 血清PSMA診斷前列腺癌的ROC曲線(xiàn)

討論

本研究結(jié)果顯示，PSMA蛋白在前列腺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率高于前列腺增生組織，且Gleason評(píng)分>7分的前列腺癌病人PSMA陽(yáng)性表達(dá)率較Gleason評(píng)分≤7分高。表明在良惡性前列腺組織中均存在PSMA不同程度表達(dá)，但在前列腺癌組織中的表達(dá)明顯升高，且腫瘤分化程度越差，PSMA越容易出現(xiàn)陽(yáng)性表達(dá)，提示PSMA在前列腺癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中可能發(fā)揮著重要作用。黃文斌[9]等通過(guò)免疫組化EnVision法在前列腺癌、前列腺上皮內(nèi)瘤變以及良性前列腺增生癥病人組織中檢測(cè)了PSMA的表達(dá)情況，結(jié)果顯示，PSMA在三者中均存在表達(dá)，但在前列腺上皮內(nèi)瘤變和前列腺癌中PSMA表達(dá)強(qiáng)度明顯高于良性前列腺增生癥,且PSMA染色強(qiáng)度和Gleason評(píng)分密切相關(guān)。以上結(jié)果均證實(shí)，PSMA在前列腺癌中的表達(dá)上升，且其表達(dá)水平與腫瘤分化程度密切相關(guān)。

組織中PSMA的表達(dá)水平可以作為前列腺癌病人的預(yù)后指標(biāo)。按PSMA表達(dá)情況將病人分組，結(jié)果顯示，PSMA陽(yáng)性表達(dá)組的中位OS中位BRFS均低于PSMA陰性表達(dá)組。有研究證實(shí)，PSMA的高表達(dá)可以進(jìn)一步活化絲裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(Mitogen-activated protein kinase，MAPK)信號(hào)通路，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移[10-12]。Perner等[13]采用免疫組化通分析了450例前列腺癌病人的PSMA表達(dá)情況與病人預(yù)后相關(guān)性，根據(jù)染色強(qiáng)度分為高PSMA表達(dá)和低PSMA表達(dá)組，結(jié)果顯示，高PSMA水平更容易出現(xiàn)生化復(fù)發(fā)，與本研究結(jié)果一致。另外，本研究證實(shí)，PSMA陽(yáng)性表達(dá)組的OS低于PSMA陰性性表達(dá)組，可能與PSMA陽(yáng)性組越容易出現(xiàn)生化復(fù)發(fā)相關(guān)。

血清PSMA可以作為前列腺癌診斷標(biāo)志物。本研究通過(guò)ROC曲線(xiàn)分析發(fā)現(xiàn)，以血清PSMA>17.50 μg/L為截?cái)嘀禃r(shí)，曲線(xiàn)下面積為0.845)，診斷靈敏度達(dá)到71.1%，特異度達(dá)到82%。祁蕙燕等[14]采用ELISA法對(duì)前列腺癌組、前列腺炎組和健康受試者血清PSMA水平進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表明，前列腺癌組病人血清中PSMA水平高于健康受試者和前列腺炎組。丁海雍等[15]通過(guò)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)了前列腺癌和前列腺增生病人血清中PSMA含量，結(jié)果顯示，前列腺癌組血清中PSMA表達(dá)高于良性前列腺增生組。徐楓等[7]研究結(jié)果顯示，前列腺癌組和非前列腺癌組病人血清中PSMA的含量存在差異，且其ROC曲線(xiàn)分析顯示，PSMA的診斷敏感度和特異度均高于PSA，提示血清PSMA檢測(cè)對(duì)于提高前列腺癌早期診斷的敏感度和特異度具有重要的價(jià)值。

總之，前列腺癌組織中PSMA呈現(xiàn)高表達(dá)，與Gleason評(píng)分密切相關(guān)，且其表達(dá)與病人更差的預(yù)后相關(guān)，血清PSMA檢測(cè)可以提高前列腺癌早期診斷的敏感度和特異度。