慢性丙型肝炎患者外周血白細(xì)胞介素-21水平與干擾素治療效果的關(guān)系

黃彬彬，石 毅

（1.欽州市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科；2.欽州市第一人民醫(yī)院消化科一區(qū)，廣西欽州 535000）

慢性丙型肝炎是一種丙型肝炎病毒（HCV）感染所引起的慢性肝臟疾病。感染HCV后大部分患者不會(huì)表現(xiàn)出臨床癥狀，只有通過驗(yàn)室指標(biāo)或后期表現(xiàn)出相應(yīng)癥狀才能確診[1]。慢性丙型肝炎的常見臨床表現(xiàn)為四肢無力、發(fā)熱等，后期可能出現(xiàn)黃疸等癥狀[2]。慢性丙型肝炎需及時(shí)治療，否則將會(huì)發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。現(xiàn)階段，臨床對(duì)于慢性丙型肝炎患者主要采取干擾素抗病毒治療及對(duì)癥支持治療。白細(xì)胞介素-21（IL-21）主要由活化的CD4+T淋巴細(xì)胞分泌，與相關(guān)免疫細(xì)胞的增殖有密切關(guān)系，由此推測IL-21水平與慢性丙型肝炎存在一定聯(lián)系[3]。因此，本研究對(duì)慢性丙型肝炎患者外周血IL-21水平與干擾素治療效果的相關(guān)性進(jìn)行分析，探索IL-21作為療效檢測指標(biāo)的可能性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年1月至2021年10月欽州市第一人民醫(yī)院收治的72例慢性丙型肝炎患者為研究對(duì)象，按照隨機(jī)數(shù)字表法分為觀察組和對(duì)照組，各36例。觀察組患者中男性23例，女性13例；年齡20～72歲，平均年齡（46.59±9.32）歲；體質(zhì)量 45～70 kg，平均體質(zhì)量（58.62±10.79）kg；丙型肝炎病毒核糖核酸（HCV RNA）4～9 log10 copies/mL， 平 均HCV RNA（6.48±1.69）log10 copies/mL； 病程4～6年，平均病程（5.21±0.46）年。對(duì)照組患者中男性22例，女性14例；年齡21～72歲，平均年齡（47.18±9.41）歲；體質(zhì)量46～73 kg，平 均 體 質(zhì) 量（59.34±10.81）kg；HCV RNA 4～10 log10 copies/mL，平均 HCV RNA（6.45±1.72）log10 copies/mL；病程4～7年，平均病程（5.42±0.53）年。兩組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），組間具有可比性。本研究經(jīng)欽州市第一人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者及其家屬均對(duì)研究知情并簽署知情同意書。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《丙型肝炎防治指南（2015更新版）》[4]中慢性丙型肝炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②年齡19～72歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：①2個(gè)月內(nèi)接受過干擾素治療；②合并有其他炎癥性疾病的患者；③合并有其他肝臟疾病的患者；④患有免疫性疾病的患者；⑤妊娠或哺乳期婦女；⑥對(duì)本研究藥物過敏者。

1.2 治療方法 兩組患者均給予護(hù)肝等常規(guī)基礎(chǔ)治療。對(duì)照組患者予普通重組人干擾素α-2b（北京凱因科技股份有限公司，國藥準(zhǔn)字S20030030，規(guī)格：3 mL∶300萬IU），500萬IU/次，2天1次；口服利巴韋林[世貿(mào)天階制藥（江蘇）有限責(zé)任公司，國藥準(zhǔn)字H19993856，規(guī)格：0.1 g/片]0.1 g/次，3次/d。觀察組患者給予聚乙二醇α-2a干擾素（廈門特寶生物工程股份有限公司，國藥準(zhǔn)字S20174005，規(guī)格：90 μg/支）180 μg/次，1次/周；口服利巴韋林0.1 g/次，3次/d。兩組患者均治療6個(gè)月。

1.3 觀察指標(biāo) ①兩組患者療效比較。持續(xù)應(yīng)答：治療結(jié)束后，患者外周血IL-21及肝功能指標(biāo)恢復(fù)到正常水平，HCV RNA呈陰性；無應(yīng)答：治療結(jié)束后，患者外周血IL-21、肝功能指標(biāo)及HCV RNA水平均未恢復(fù)到正常水平[5]。②比較治療前后兩組患者IL-21及肝功能指標(biāo)水平。采集患者空腹外周血3 mL，離心半徑13 cm，以5 000 r/min轉(zhuǎn)速離心10 min，取上清液，置于-70 ℃環(huán)境下保存。采用酶標(biāo)儀（上?？迫A實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有限公司，型號(hào)：ST-960）以酶聯(lián)免疫吸附法檢測IL-21水平，試劑盒購自上?？道噬锟萍加邢薰?。同法取上清液，采用全自動(dòng)生化分析儀（迪瑞醫(yī)療科技股份有限公司，型號(hào)：CS-1200）檢測谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、總膽紅素（TBIL）、直接膽紅素（DBIL）及間接膽紅素（IBIL）水平；采用速率法檢測ALT、AST，采用釩酸鹽氧化法檢測TBIL、DBIL及IBIL，試劑盒購自上?？迫A生物工程股份有限公司。③比較觀察組患者治療后持續(xù)應(yīng)答及無應(yīng)答患者IL-21及肝功能指標(biāo)水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計(jì)量資料以（）表示，組間比較行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，組內(nèi)比較行配對(duì)樣本t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以[例(%)]表示，組間比較行χ2檢驗(yàn)，等級(jí)資料比較采用秩和檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者療效比較 治療后，觀察組患者療效顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組患者療效比較 [例(%)]

2.2 治療前后兩組患者IL-21及肝功能指標(biāo)水平比較 治療后，兩組患者IL-21及肝功能指標(biāo)水平低于治療前，且觀察組低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 治療前后兩組患者IL-21及肝功能指標(biāo)水平比較（）

表2 治療前后兩組患者IL-21及肝功能指標(biāo)水平比較（）

注：與同組治療前比較，*P＜0.05；IL-21：白細(xì)胞介素-21；ALT：谷丙轉(zhuǎn)氨酶；AST：谷草轉(zhuǎn)氨酶；TBIL：總膽紅素；DBIL：直接膽紅素；IBIL：間接膽紅素。

組別 例數(shù) IL-21(μg/L) ALT(U/L) AST(U/L)治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后觀察組 36 36.45±10.24 25.67±7.31* 162.24±40.36 43.29±12.36* 118.34±21.68 38.95±9.82*對(duì)照組 36 36.17±10.63 32.72±8.29* 162.65±39.85 79.67±20.39* 119.16±21.51 59.47±12.59*t值 0.114 3.827 0.043 9.155 0.161 7.711 P值 0.910 0.015 0.966 0.008 0.873 0.007組別 例數(shù) TBIL(μmol/L) DBIL(μmol/L) IBIL(μmol/L)治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后觀察組 36 54.36±12.94 18.91±6.12* 21.37±6.29 8.64±2.51* 34.68±9.32 18.72±5.36*對(duì)照組 36 55.27±12.84 33.92±8.63* 21.72±6.32 12.57±3.62* 34.92±9.24 27.54±7.82*t值 0.300 8.512 0.236 5.353 0.110 5.582 P值 0.765 0.022 0.815 0.027 0.913 0.005

2.3 觀察組患者治療后持續(xù)應(yīng)答及無應(yīng)答患者IL-21及肝功能指標(biāo)水平比較 治療后，觀察組持續(xù)應(yīng)答患者IL-21及肝功能指標(biāo)水平顯著低于無應(yīng)答患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表3。

表3 觀察組治療后持續(xù)應(yīng)答及無應(yīng)答患者IL-21及肝功能指標(biāo)水平比較（）

表3 觀察組治療后持續(xù)應(yīng)答及無應(yīng)答患者IL-21及肝功能指標(biāo)水平比較（）

注：IL-21：白細(xì)胞介素-21；ALT：谷丙轉(zhuǎn)氨酶；AST：谷草轉(zhuǎn)氨酶；TBIL：總膽紅素；DBIL：直接膽紅素；IBIL：間接膽紅素。

組別 例數(shù) IL-21(μg/L) ALT(U/L) AST(U/L) TBIL(μmol/L) DBIL(μmol/L) IBIL(μmol/L)持續(xù)應(yīng)答 31 22.47±6.52 37.92±10.65 28.68±8.29 16.84±5.19 6.68±1.51 16.32±4.36無應(yīng)答 5 34.84±7.35 85.37±13.46 68.32±15.38 37.59±9.34 15.36±4.72 35.65±6.39 t值 3.875 8.936 8.745 7.381 8.368 8.635 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

3 討論

慢性丙型肝炎是一種患病率較高的疾病，主要傳播途徑有血液傳播及母嬰傳播等[6]。多數(shù)患者在感染HCV后不會(huì)表現(xiàn)出明顯癥狀，故慢性丙型肝炎只能通過抗-HCV及HCV RNA兩種指標(biāo)檢測進(jìn)行早期確診并在治療過程中觀察療效。這兩種檢測方法雖然檢測結(jié)果較為準(zhǔn)確，但仍存不足，如抗-HCV檢測不能直接檢測HCV抗原水平，且抗-HCV在患者體內(nèi)出現(xiàn)較晚，不能及時(shí)檢測出其在體內(nèi)的水平，有可能耽誤患者病情，同時(shí)HCV RNA檢測也存在步驟較為復(fù)雜的缺點(diǎn)。因此，探索能夠更方便評(píng)估干擾素治療效果的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)具有重要價(jià)值。IL-21是主要的免疫調(diào)節(jié)劑之一，參與調(diào)節(jié)B細(xì)胞增殖，促進(jìn)骨髓前體細(xì)胞增殖、分化，增強(qiáng)免疫細(xì)胞的抗原特異性反應(yīng)，能夠通過影響多種免疫細(xì)胞來調(diào)節(jié)各種免疫應(yīng)答。而患者感染HCV后，機(jī)體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生一系列免疫反應(yīng)以保護(hù)機(jī)體。由此推測體內(nèi)IL-21可能與體內(nèi)HCV水平有關(guān)，或可作為評(píng)估干擾素療效的指標(biāo)。

本研究結(jié)果顯示，經(jīng)6個(gè)月治療后，觀察組患者療效顯著高于對(duì)照組，且觀察組患者IL-21及肝功能指標(biāo)水平顯著低于對(duì)照組，提示IL-21及肝功能指標(biāo)水平會(huì)隨著治療降低。IL-21是一種主要由活化的CD4+T淋巴細(xì)胞、自然殺傷（NK）細(xì)胞等細(xì)胞分泌的多效細(xì)胞因子[7]，有研究表明，其在各種免疫反應(yīng)中起著重要調(diào)節(jié)作用，能夠增強(qiáng)免疫細(xì)胞的抗原特異性，在抗腫瘤及抗病毒治療方面有重要作用，還可以介導(dǎo)炎癥反應(yīng)[8-9]。IL-21在抗病毒治療中的主要作用機(jī)制是調(diào)節(jié)CD8+T淋巴細(xì)胞功能，從而減慢病毒感染速度[3]。同時(shí)，IL-21可顯著提高B淋巴細(xì)胞的增殖、分化和免疫球蛋白水平。另外，IL-21還可以刺激抗體生成，以達(dá)到抵抗病毒的目的。在接受干擾素治療后，干擾素刺激體內(nèi)細(xì)胞生成抗病毒蛋白，抑制HCV RNA表達(dá)水平，使體內(nèi)病毒數(shù)量降低，IL-21及肝功能指標(biāo)水平也隨之降低[10]。

本研究結(jié)果還顯示，經(jīng)6個(gè)月治療后，觀察組持續(xù)應(yīng)答患者IL-21及肝功能指標(biāo)水平顯著低于無應(yīng)答患者，提示IL-21及肝功能指標(biāo)可以作為慢性丙型肝炎療效的評(píng)估指標(biāo)。有研究表明，IL-21可以刺激NK細(xì)胞分泌促炎癥因子[11]。接受干擾素治療后，人體內(nèi)淋巴細(xì)胞等的細(xì)胞毒作用增強(qiáng)，能夠?qū)Σ《靖腥炯?xì)胞進(jìn)行清除，從而降低IL-21表達(dá)水平，減輕炎癥反應(yīng)。而ALT、AST、TBIL、DBIL及IBIL大量存在于肝臟中，當(dāng)肝臟細(xì)胞出現(xiàn)感染或壞死時(shí)，會(huì)刺激其大量釋放[12]。因此，接受干擾素治療后，療效顯著，肝細(xì)胞壞死數(shù)量大幅減少，ALT、AST、TBIL、DBIL及IBIL水平也顯著降低[13]。

綜上所述，慢性丙型肝炎患者經(jīng)干擾素治療后IL-21及肝功能指標(biāo)明顯降低，且持續(xù)應(yīng)答患者低于無應(yīng)答患者，因此，IL-21及肝功能指標(biāo)對(duì)慢性丙型肝炎患者臨床療效的評(píng)估具有重要意義，值得在臨床應(yīng)用。