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    服務(wù)區(qū)污水處理設(shè)施長期運(yùn)行效果及菌群特性

    2022-10-17 08:09:24陳瑤黃學(xué)文孔祥燕劉學(xué)欣孫圣凱
    交通運(yùn)輸研究 2022年4期
    關(guān)鍵詞:格室濾池服務(wù)區(qū)

    陳瑤,黃學(xué)文,孔祥燕,劉學(xué)欣,孫圣凱

    (1.交通運(yùn)輸部科學(xué)研究院,北京 100029;2.安徽省交通控股集團(tuán)有限公司,安徽 合肥 230088;3.山東省金鄉(xiāng)縣交通運(yùn)輸局,山東 濟(jì)寧 272200)

    0 引言

    高速公路服務(wù)區(qū)為司乘人員提供檢修、餐飲、如廁等基本服務(wù)[1-2],會產(chǎn)生大量以生活污水為主的廢水[3]。服務(wù)區(qū)污水受日人流量和季節(jié)氣候影響較大[4],具有水質(zhì)波動(dòng)大、成分復(fù)雜、有機(jī)污染濃度高、氮磷含量高等特點(diǎn)[5-6]。尤其服務(wù)區(qū)污水中氨氮濃度顯著高于生活污水[7],如未達(dá)標(biāo)排放會引發(fā)一系列環(huán)境問題。因此,服務(wù)區(qū)污水能否達(dá)標(biāo)排放是公路行業(yè)環(huán)保督察的重點(diǎn),開展高速公路服務(wù)區(qū)污水高效穩(wěn)定處理的研究迫在眉睫。

    國內(nèi)外關(guān)于高速公路服務(wù)區(qū)污水處理技術(shù)的研究已有很多。國際上,美國、日本、德國等發(fā)達(dá)國家大多采用小型、分散式污水處理工藝,目前主流處理技術(shù)為化糞池-土壤吸收系統(tǒng)、砂濾系統(tǒng)[8]、凈化槽系統(tǒng)[9]、膜生物反應(yīng)器和PKA 濕地污水處理系統(tǒng)。經(jīng)過多年研究與實(shí)踐,一些發(fā)達(dá)國家高速公路服務(wù)區(qū)污水處理與回用技術(shù)已經(jīng)較為成熟,能夠適應(yīng)水質(zhì)水量波動(dòng)大等特點(diǎn),且大部分污水經(jīng)處理后可用于綠化灌溉或沖洗廁所等。上述污水處理技術(shù)因具有良好的處理效果,現(xiàn)已引入我國并得到應(yīng)用[10]。但受水質(zhì)差異大、我國服務(wù)區(qū)污水量大等影響,此類技術(shù)的應(yīng)用存在一些制約,如因水質(zhì)差異和技術(shù)專利等原因造成的工藝建設(shè)投資成本較高、凈化槽處理規(guī)模較小、PKA 濕地污水處理系統(tǒng)占地面積較大等,需經(jīng)改良方可適用于我國。在國內(nèi),專家學(xué)者們主要基于試驗(yàn)和實(shí)體工程開展大量研究。部分學(xué)者通過試驗(yàn)探究服務(wù)區(qū)污水處理工藝的可行性,如張龍等[11]通過對運(yùn)行的中試A/O 工藝進(jìn)行200d 水質(zhì)監(jiān)測,發(fā)現(xiàn)出水水質(zhì)均達(dá)到《城市污水再生利用城市雜用水質(zhì)》(GB/T 18920—2002)排放標(biāo)準(zhǔn),滿足回用要求;肖志偉等[12]采用生物膜-連續(xù)超濾膜工藝對高速公路生活污水進(jìn)行處理,處理出水可用于綠化等。大部分學(xué)者基于服務(wù)區(qū)污水處理實(shí)體工程展開研究,并嘗試污水處理工藝的有機(jī)組合,如劉學(xué)欣[13]采用多介質(zhì)生物濾池和生態(tài)濕地組合工藝;郭冀峰等[14]采用MBR/人工濕地組合工藝,均經(jīng)過一個(gè)多月的調(diào)試運(yùn)行,出水水質(zhì)達(dá)到《城市污水再生利用城市雜用水質(zhì)》(GB/T 18920—2002)要求??傮w上,無論試驗(yàn)研究還是工程應(yīng)用研究,對于處理效果的監(jiān)測時(shí)間一般僅短短數(shù)月,而且僅關(guān)注COD,TN,NH3-N,TP 等表觀水質(zhì)指標(biāo)。關(guān)于深層次的污水處理微生物群落結(jié)構(gòu)及耐低溫菌方面,目前國內(nèi)的研究大多關(guān)注普通生活污水領(lǐng)域,尚無關(guān)于服務(wù)區(qū)污水處理系統(tǒng)的菌群特性及耐低溫菌的研究,如Deng等[15]、曾妮[16]、Li等[17]對生活污水或城鎮(zhèn)污水處理廠的模擬研究發(fā)現(xiàn),生活污水處理系統(tǒng)內(nèi)的關(guān)鍵菌門主要為變形菌門、擬桿菌門、綠彎菌門等;楊麗紅[18]研究發(fā)現(xiàn),主要耐低溫菌為芽孢桿菌屬、假單胞菌屬、微球菌屬等。

    服務(wù)區(qū)污水處理設(shè)施的核心需求是能夠長期穩(wěn)定達(dá)標(biāo)地運(yùn)行,系統(tǒng)內(nèi)菌群結(jié)構(gòu)變化對其有重要影響,但目前研究多聚焦于短期處理效果的表觀水質(zhì)監(jiān)測,缺乏對處理設(shè)施的長期處理效果跟蹤觀測和深層分子生物學(xué)機(jī)制研究。為此,本研究選取吉林省某低溫地區(qū)高速公路服務(wù)區(qū)污水處理設(shè)施作為研究對象,開展了長達(dá)6 年、覆蓋不同季節(jié)的污水處理效果跟蹤監(jiān)測評估,并采用宏基因組測序法研究處理設(shè)施各單元的微生物特性,分析種群結(jié)構(gòu)與處理效能之間的關(guān)系,為保證服務(wù)區(qū)污水處理設(shè)施長期穩(wěn)定運(yùn)行的優(yōu)勢菌種篩選、定殖提供理論依據(jù)。

    1 研究區(qū)概況

    污水處理微生物正常發(fā)揮作用的適宜溫度一般為20~35℃,溫度過低會抑制微生物活性,影響生化處理效果,因此導(dǎo)致服務(wù)區(qū)污水冬季很難達(dá)標(biāo)排放[19],也使得低溫環(huán)境下服務(wù)區(qū)污水處理達(dá)標(biāo)排放成為生化法污水處理設(shè)施推廣的瓶頸。為此,本研究選取縱貫東北三省的鶴大高速公路(G11)的中部吉林省某服務(wù)區(qū)污水處理設(shè)施作為研究對象,開展低溫地區(qū)污水處理效果跟蹤監(jiān)測試驗(yàn)。該區(qū)域年平均氣溫為2.9℃,極端最低氣溫為-41.9℃,最大凍土深度為121cm,具有典型的低溫地區(qū)氣候特征。該服務(wù)區(qū)南側(cè)設(shè)有餐廳、商店、公廁、加油站、維修車間等,產(chǎn)生的污水COD 濃度為113.62~790.86mg/L,TN 濃度為18.79~208.79mg/L,NH3-N濃度為12.07~152.00mg/L。

    為提高低溫處理效果,適應(yīng)服務(wù)區(qū)污水處理低成本、低管養(yǎng)的實(shí)際需求,該服務(wù)區(qū)從生物載體、專屬微生物強(qiáng)化、保溫增溫等方面對曝氣生物濾池污水處理工藝進(jìn)行優(yōu)化改良,形成新型多介質(zhì)生物濾池工藝[20]。在南側(cè)服務(wù)區(qū)建設(shè)多介質(zhì)生物濾池污水處理工程,設(shè)計(jì)處理能力為60m3/d,由缺氧格室、好氧格室1 和好氧格室2 組成,如圖1 所示。缺氧格室采用微曝氣,好氧格室采用常規(guī)曝氣,濾池內(nèi)部填充功能化網(wǎng)狀載體。初期向系統(tǒng)投加高效微生物菌劑,運(yùn)行過程中每2~3年排泥以維持系統(tǒng)穩(wěn)定的污泥濃度。采用序批式進(jìn)水和間歇曝氣方式,穩(wěn)定運(yùn)行后曝氣時(shí)間為10~15min/h。為提高低溫期微生物活性,設(shè)置濾池加熱保溫措施,使溫度始終維持在15℃以上,加溫時(shí)間根據(jù)水溫情況而定。該服務(wù)區(qū)設(shè)施于2013 年10 月開工建設(shè),2013 年11 月建成完工,并于2014 年3 月啟動(dòng),經(jīng)35d 的調(diào)試后,設(shè)施進(jìn)入運(yùn)營階段,一直穩(wěn)定運(yùn)行至今。

    2 試驗(yàn)材料與方法

    2.1 采樣及水質(zhì)監(jiān)測方法

    在2014—2020 年設(shè)施穩(wěn)定運(yùn)行的6 年間,每年4 個(gè)季度各采集1 次水樣,采樣點(diǎn)固定在多介質(zhì)生物濾池各格室末端、進(jìn)水口處和出水口處,樣品經(jīng)過濾后現(xiàn)場測定COD,TN,NH3-N,等指標(biāo)濃度,測定過程中每個(gè)樣品取3 個(gè)平行樣,每個(gè)平行樣各測定1 次,以保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。其中,COD 采用重鉻酸鹽法測定,TN采用堿性過硫酸鉀消解紫外分光光度法測定,NH3-N 采用水楊酸分光光度法測定,采用N-(1-萘基)-乙二胺光度法測定,采用麝香草酚光度法測定。

    2.2 宏基因組測序

    系統(tǒng)內(nèi)載體表面附著有高度復(fù)雜的微生物群落,在污水處理中起著至關(guān)重要的作用。為了解不同時(shí)期多介質(zhì)生物濾池菌群結(jié)構(gòu)變化及系統(tǒng)內(nèi)去除氮素的關(guān)鍵菌屬,分別于2020年1月12日和2020 年9 月30 日從多介質(zhì)生物濾池各格室的微生物載體中采集實(shí)驗(yàn)樣本。采集的樣品經(jīng)低溫運(yùn)輸(0℃以下)送往實(shí)驗(yàn)室后,提取DNA,然后保存在-20℃環(huán)境中。首先對各DNA 樣品分別提取80μL 進(jìn)行檢測,使用瓊脂糖凝膠電泳(Agarose Gel Electrophoresis,AGE)分析DNA 的純度和完整性,使用核酸蛋白熒光定量儀(Qubit Fluorometer)對DNA 濃度進(jìn)行精確定量,用Covaris 超聲波破碎儀將DNA 隨機(jī)打斷成長度約為350bp 的片段,再經(jīng)末端修復(fù)、加A 尾、加測序接頭、純化、PCR 擴(kuò)增等步驟后采用Illumina HiSeq 高通量測序平臺進(jìn)行測序。采用宏基因組組裝軟件MEGAHIT(v1.0.6)對測序樣本進(jìn)行組裝,使用diamond 比對nr 數(shù)據(jù)庫,并結(jié)合megan6 解析進(jìn)行物種組成分析,從注釋總結(jié)果拆分出古生菌、細(xì)菌、真核生物、真菌、病毒5 大類以及界、門、綱、目、科、屬、種7個(gè)分類水平信息。

    3 結(jié)果與討論

    3.1 水質(zhì)凈化效果分析

    選取典型數(shù)據(jù)分析多介質(zhì)生物濾池的處理效果。從2017年開始,系統(tǒng)進(jìn)入穩(wěn)定運(yùn)行階段,平均出水COD,TN 和NH3-N 分別達(dá)到27.72mg/L,10.54mg/L和3.66mg/L。該多介質(zhì)生物濾池對COD的去除效果如圖2(a)所示,盡管進(jìn)水COD 波動(dòng)較大,但該工藝對COD 去除效率一直較為穩(wěn)定,出水COD 均在50mg/L 以下,達(dá)到《城市污水處理廠污染物排放標(biāo)準(zhǔn)》(GB/T 18918—2002)一級A 標(biāo)準(zhǔn),平均去除率達(dá)90.86%,表明該工藝具有較強(qiáng)的耐沖擊能力。系統(tǒng)進(jìn)出水TN 及NH3-N 去除情況如圖2(b)所示,由于服務(wù)區(qū)人流量變化較大,不同季節(jié)用水量存在差異,導(dǎo)致產(chǎn)生的污水量及進(jìn)水水質(zhì)波動(dòng)較大,可以看出工藝運(yùn)行初期(2014 年)出水水質(zhì)不穩(wěn)定,出水TN 達(dá)18.98mg/L,而后出水TN 濃度呈逐年下降趨勢,2020 年9 月系統(tǒng)的總氮去除率達(dá)76.69%,表明系統(tǒng)曝氣量充足,硝化及反硝化菌活性良好。綜上所述,該工藝可有效去除污水中的COD,TN,NH3-N,使出水水質(zhì)穩(wěn)定達(dá)標(biāo)。

    3.2 氮素去除途徑分析

    為了進(jìn)一步分析多介質(zhì)生物濾池工藝的氮素去除途徑,以2020年9月28日濾池沿程氮素變化情況為例,測定其NH3-N,濃度,如圖3 所示。廢水中主要污染物NH3-N 首先進(jìn)入系統(tǒng)缺氧格室,在微曝氣環(huán)境中通過硝化作用部分被轉(zhuǎn)化為,而后經(jīng)反硝化作用進(jìn)一步還原為N2,使部分氮素從水中脫除,充足的基質(zhì)NH3-N 及微氧環(huán)境為該格室反硝化脫氮菌提供了較好的生存環(huán)境,也為厭氧氨氧化菌的富集提供了可能。相比于傳統(tǒng)脫氮途徑,厭氧氨氧化脫氮途徑被認(rèn)為是更加經(jīng)濟(jì)高效的脫氮方式[21]。接著,廢水進(jìn)入好氧格室,經(jīng)正常曝氣,NH3-N 被進(jìn)一步氧化,TN濃度大幅降低,使出水水質(zhì)達(dá)標(biāo),出水NH3-N,濃度分別為2.56mg/L,0.01mg/L,2.78mg/L。經(jīng)氮素轉(zhuǎn)化分析可知,系統(tǒng)共去除TN約14.41mg/L,去除NH3-N約9.51mg/L,全程基本無剩余,缺氧格室、好氧格室1及好氧格室2 對TN 去除的貢獻(xiàn)率分別為68.36%,18.67%和13.95%,可見TN 主要在缺氧格室被去除。值得注意的是,缺氧格室處于微曝氣環(huán)境,而好氧格室1 和好氧格室2 處于正常曝氣環(huán)境,但是NH3-N 在缺氧格室中被消耗最多(降低了4.71mg/L),此時(shí)幾乎未檢測到,若不考慮厭氧氨氧化作用,則認(rèn)為缺氧格室中氮素是通過全程硝化和全程反硝化去除的,即反硝化去除4.32mg/L的。不過,由于缺氧格室在微曝氣環(huán)境下NH3-N 濃度的降低量較大,猜測可能存在厭氧氨氧化菌[22-23],即通過厭氧氨氧化過程(NH3-N+)消耗了部分NH3-N和。因無法確定厭氧氨氧化菌的存在及其脫氮貢獻(xiàn)率,需進(jìn)一步開展系統(tǒng)菌群結(jié)構(gòu)特性分析。

    3.3 菌群特性分析

    3.3.1 系統(tǒng)內(nèi)菌群總體特性分析

    研究測定了秋冬兩季多介質(zhì)生物濾池在門水平上的菌群相對豐度(見圖4),發(fā)現(xiàn)多介質(zhì)生物濾池系統(tǒng)內(nèi)主要菌門為變形菌門、硝化螺旋菌門、浮霉菌門、擬桿菌門、放線菌門、綠彎菌門和厚壁菌門等,與城鎮(zhèn)污水處理系統(tǒng)優(yōu)勢菌門相近,可能由于服務(wù)區(qū)污水和城鎮(zhèn)污水的主要成分接近。系統(tǒng)內(nèi)變形菌門和綠彎菌門為具有反硝化功能的菌門[24-25],其中綠彎菌門為兼性厭氧菌,常在富集有厭氧氨氧化菌的系統(tǒng)中被發(fā)現(xiàn)[26];硝化螺旋菌門含有能夠?qū)⒀趸癁榈膩喯跛猁}氧化菌[27];浮霉菌門為厭氧氨氧化菌相關(guān)菌門,主要由Candidatus Brocadia和Candidatus Kuenenia菌屬組成[28],該菌門在缺氧環(huán)境中,以CO2為唯一碳源,NH3為電子供體,為電子受體,生成N2實(shí)現(xiàn)系統(tǒng)低能耗脫氮;擬桿菌門為厭氧菌,能夠?qū)?fù)雜大分子有機(jī)物降解為簡單小分子有機(jī)物,主要存在于低氧或缺氧環(huán)境中[29];放線菌門能夠分解纖維素等復(fù)雜有機(jī)物[30];厚壁菌門具有硝化或反硝化功能[31]。正因?yàn)橄到y(tǒng)內(nèi)存在大量硝化菌和反硝化菌,浮霉菌門可能有助于TN 去除,故系統(tǒng)表觀氮素處理效果很好。此外,擬桿菌門和放線菌門有利于降解系統(tǒng)內(nèi)復(fù)雜有機(jī)物,因此系統(tǒng)對COD 去除效果一直高效穩(wěn)定。由于變形菌門、擬桿菌門、厚壁菌門均為耐低溫菌[32-33],進(jìn)一步從分子生物學(xué)角度解釋了本系統(tǒng)在低溫環(huán)境下處理效果好的原因。

    圖4(a)和圖4(b)所示分別為系統(tǒng)2020年1 月12 日和9 月30 日的菌門相對豐度情況。對比可知,從冬季到秋季硝化螺旋菌門相對豐度由6.39%提高至11.07%,經(jīng)菌屬相對豐度統(tǒng)計(jì)可知,系統(tǒng)內(nèi)亞硝酸鹽氧化關(guān)鍵菌屬為硝化螺菌屬,其相對豐度由18.69%提高至32.60%,硝化作用明顯增強(qiáng),為反硝化菌提供了更多的基質(zhì),所以系統(tǒng)的總氮去除率由57.51%提高至76.69%。

    3.3.2 系統(tǒng)各格室菌群特性分析

    為進(jìn)一步探究多介質(zhì)生物濾池不同格室內(nèi)菌群結(jié)構(gòu)變化對系統(tǒng)脫氮的影響,選取2020 年9 月30 日的菌門相對豐度占比情況進(jìn)行分析,如圖5所示。缺氧格室、好氧格室1 及好氧格室2 中具有反硝化功能的變形菌門相對豐度分別為45.74%,48.10%和54.45%,即好氧格室2 的反硝化相關(guān)菌門相對豐度最大。而圖3 所示的沿程數(shù)據(jù)顯示好氧格室2 基本沒有反硝化作用,這可能是由于該格室曝氣量過大,導(dǎo)致反硝化活性受到抑制,因此應(yīng)適當(dāng)降低曝氣量以提高反硝化活性。此外,圖5所示的硝化螺旋菌門在缺氧格室、好氧格室1 及好氧格室2 中相對豐度逐漸降低,分別為23.02%,8.16%和2.02%,可能是由于缺氧格室進(jìn)水NH3-N 濃度較高,在該格室經(jīng)硝化作用積累的-N 濃度較高,為硝化螺旋菌門提供了更多的-N 基質(zhì),從而富集了硝化螺旋菌門。值得注意的是,在菌屬統(tǒng)計(jì)中發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)存在自富集厭氧氨氧化菌屬Candidatus Brocadia,其相對豐度均值為0.08%,其中在缺氧格室的相對豐度為0.06%,比以往研究的Anammox菌豐度占比要高,如Wang等[34]通過qPCR 測定系統(tǒng)絮凝污泥中Anammox菌的相對豐度,發(fā)現(xiàn)其小于0.003%;Guo等[35]通過宏基因組測序發(fā)現(xiàn)Anammox菌的相對豐度小于0.01%,可能是由于本系統(tǒng)內(nèi)長期同時(shí)存在NH3和基質(zhì),為厭氧氨氧化菌提供了適宜的底物環(huán)境,使厭氧氨氧化菌不斷富集,結(jié)合工藝沿程數(shù)據(jù)分析可知,TN 在缺氧格室中共去除9.85mg/L,即對TN 去除的貢獻(xiàn)率為68.36%,說明厭氧氨氧化菌對系統(tǒng)TN的去除有一定的貢獻(xiàn)。

    3.4 工藝優(yōu)化建議

    針對上述微觀菌群特性研究,從設(shè)施的處理效果和運(yùn)行成本的宏觀角度,提出工藝優(yōu)化建議:①好氧格室2 的進(jìn)水NH3-N 濃度較低,無需提供過大的曝氣量,否則會造成反硝化菌活性降低與曝氣能耗成本增加,因此可適當(dāng)降低好氧格室2 的曝氣量,并輔以投加有機(jī)碳源的措施,以提高工藝的脫氮效果;②增設(shè)污泥回流管,污泥由沉淀池底部以一定比例流至缺氧格室首端,增大了缺氧格室污泥濃度,出水NH3-N 可進(jìn)一步得到降解,通過強(qiáng)化反硝化及厭氧氨氧化活性,充分發(fā)揮缺氧格室脫氮作用,進(jìn)一步提高服務(wù)區(qū)污水特征污染物氮素的去除效果。

    4 結(jié)論

    本文以吉林省某服務(wù)區(qū)多介質(zhì)生物濾池污水處理工程為研究對象,通過6 年不同季節(jié)的長期跟蹤水質(zhì)處理效果監(jiān)測,發(fā)現(xiàn)該工藝平均出水COD,TN 和NH3-N 分別為27.72mg/L,10.54mg/L 和3.66mg/L,達(dá)到了《城鎮(zhèn)污水處理廠污染物排放標(biāo)準(zhǔn)》(GB 18918—2002)一級A 標(biāo)準(zhǔn),處理出水效果良好。通過分析處理系統(tǒng)內(nèi)微生物群落分布情況,研究得出系統(tǒng)內(nèi)沿程氮素去除途徑,并確定了對TN 去除貢獻(xiàn)率(68.36%)最大的為缺氧區(qū),該區(qū)域自富集了0.06%的厭氧氨氧化菌屬Candidatus Brocadia,可同時(shí)消耗NH3-N和-N基質(zhì),促進(jìn)TN去除;研究確定了促進(jìn)系統(tǒng)脫氮的關(guān)鍵菌,系統(tǒng)反硝化耐寒關(guān)鍵菌門為變形菌門,相對豐度為49.43%,亞硝酸鹽氧化關(guān)鍵菌屬為硝化螺菌屬,相對豐度為32.60%,耐低溫菌為變形菌門、擬桿菌門、厚壁菌門。研究結(jié)果可為多介質(zhì)生物濾池工藝優(yōu)化及耐低溫菌屬篩選提供依據(jù),從而縮短處理系統(tǒng)調(diào)試時(shí)間,提高系統(tǒng)抗沖擊能力。

    受工程現(xiàn)場和實(shí)驗(yàn)條件所限,本研究采用分子生物學(xué)手段揭示了服務(wù)區(qū)污水處理效果與菌群特性之間的關(guān)系,但欠缺對微生物表面物理特性及內(nèi)在作用機(jī)理等全方位的探究。后續(xù)可采用掃描電鏡、關(guān)鍵功能酶活性測定[36]、熒光原位雜交[37]及宏基因組測序等新技術(shù),深入探究多介質(zhì)生物濾池系統(tǒng)內(nèi)存在的新型脫氮菌株及其演替規(guī)律,并拓展應(yīng)用于類似水質(zhì)的船舶、高鐵站、機(jī)場等污水處理領(lǐng)域,以實(shí)現(xiàn)分子生物學(xué)研究價(jià)值[38]。此外,在服務(wù)區(qū)層面今后還可考慮將新型氣水連通LID 結(jié)構(gòu)與服務(wù)區(qū)污水處理相結(jié)合,實(shí)現(xiàn)服務(wù)區(qū)雨污協(xié)同處理,完善服務(wù)區(qū)水污染防治與水資源利用技術(shù)體系。

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