PD-1 在預(yù)測(cè)卵巢癌患者預(yù)后中的作用

王洋 孫娜 鞠策

卵巢癌是臨床上女性常見(jiàn)的一種惡性腫瘤,對(duì)于女性的生命健康與心理健康造成嚴(yán)重影響［1］。當(dāng)前,對(duì)卵巢癌常用的治療方法是手術(shù)治療,并在術(shù)后對(duì)患者進(jìn)行經(jīng)腹腔灌注化療,通過(guò)手術(shù)能夠?qū)⒒颊叩牟≡钋宄?在手術(shù)之后應(yīng)用化療能夠清除患者術(shù)中擴(kuò)散的腫瘤細(xì)胞,減少?gòu)?fù)發(fā)率,提高生存率。研究發(fā)現(xiàn)［2］,卵巢癌免疫逃逸機(jī)制和患者的預(yù)后具有一定相關(guān)性,因此,免疫治療成為了卵巢癌的新型治療方法。目前多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn),程序性死亡配體2(PD-L2)和程序性死亡配體1(PD-L1)與卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展具有一定相關(guān)性,可以考慮作為卵巢癌的新治療靶點(diǎn),但是對(duì)于程序性死亡受體在預(yù)測(cè)卵巢癌患者預(yù)后中的作用尚無(wú)明確定論［3］。因此,本研究選取本院2019 年1 月～2020 年1 月收治的70 例卵巢癌患者及70 例良性卵巢腫瘤患者作為研究對(duì)象,探討PD-1 在預(yù)測(cè)卵巢癌患者預(yù)后中的作用,具體報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2019 年1 月～2020 年1 月收治的70 例卵巢癌患者作為研究對(duì)象,并作為惡性組。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者經(jīng)過(guò)病理學(xué)檢查確診為卵巢癌［4］；對(duì)本研究知情并簽署同意書(shū)；治療方式為腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)或根治手術(shù),并在手術(shù)中取得腫瘤組織標(biāo)本。排除標(biāo)準(zhǔn)：存在嚴(yán)重臟器功能障礙的患者；不能配合隨訪(fǎng)的患者；合并其他惡性腫瘤的患者。另選取70 例同期良性卵巢腫瘤患者作為良性組。惡性組患者年齡45～72 歲,平均年齡(55.25±4.55)歲；病程5 個(gè)月～2 年,平均病程(1.24±0.25)年。良性組患者年齡48～70 歲,平均年齡(56.22±3.51)歲；病程6 個(gè)月～3 年,平均病程(1.28±0.67)年。兩組患者的一般資料比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),具有可比性。對(duì)惡性組患者進(jìn)行1 年隨訪(fǎng),根據(jù)預(yù)后結(jié)果分為死亡組(17 例)和存活組(53 例)。

1.2 方法 應(yīng)用免疫組化檢測(cè)良性組患者良性上皮性卵巢腫瘤組織和惡性組患者上皮性卵巢癌組織的PD-1表達(dá)水平,具體方法為：主要應(yīng)用免疫組織化學(xué)原理,利用化學(xué)標(biāo)記顯示,從而分析不同組織中PD-1 的表達(dá)水平。并在顯微鏡下觀(guān)察良性組和惡性組卵巢組織切片染色情況,以400 倍視野,根據(jù)染色強(qiáng)度和染色陽(yáng)性細(xì)胞進(jìn)行綜合評(píng)分。染色強(qiáng)度評(píng)分：棕褐色為3 分,棕黃色為2 分,淡黃色為1 分,無(wú)色為0 分。陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＞75%為4 分,50%～75%為3 分,25%～49%為2 分,5%～24%為1 分,＜5%為0 分。陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)與染色強(qiáng)度評(píng)分乘積為總積分,以此判定PD-1 蛋白陽(yáng)性情況,其中9～12 分為強(qiáng)陽(yáng)性(+++),5～8 分為陽(yáng)性(++),2～4 分為弱陽(yáng)性(+),0～1 分為陰性(-)。并收集兩組患者的性別、年齡等人口學(xué)資料和FIGO 分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及組織分化程度等病理學(xué)資料。

1.3 觀(guān)察指標(biāo) 對(duì)比惡性組與良性組患者PD-1 蛋白陽(yáng)性表達(dá)率,存活組與死亡組患者臨床特征；并采用Logistic 回歸分析卵巢癌預(yù)后的影響因素。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS23.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)；采用Logistic 回歸分析卵巢癌預(yù)后的影響因素。P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 惡性組與良性組患者PD-1 蛋白陽(yáng)性表達(dá)率對(duì)比惡性組患者PD-1 蛋白陽(yáng)性率62.86%明顯高于良性組的28.57%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表1。

表1 惡性組與良性組患者PD-1 蛋白陽(yáng)性表達(dá)率對(duì)比［n,n(%)］

2.2 存活組與死亡組患者臨床特征對(duì)比 存活組與死亡組患者年齡、絕經(jīng)情況對(duì)比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；存活組與死亡組患者FIGO 分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、組織分化程度、PD-1 表達(dá)情況對(duì)比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表2。

表2 存活組與死亡組患者臨床特征對(duì)比(n)

2.3 卵巢癌預(yù)后的多因素Logistic 回歸分析 對(duì)上述單因素分析中P＜0.05 的指標(biāo)進(jìn)行賦值：FIGO 分期Ⅲ～Ⅳ期為1,Ⅰ～Ⅱ期為0；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移為1,未轉(zhuǎn)移為0；組織分化程度高分化為2,中分化為1,低分化為0；PD-1 表達(dá)陽(yáng)性為1,陰性為0。Logistic 回歸分析結(jié)果顯示,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況與PD-1 表達(dá)情況為卵巢癌預(yù)后獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P＜0.05)。見(jiàn)表3。

表3 卵巢癌預(yù)后的多因素Logistic 回歸分析

3 討論

卵巢癌患者隨著疾病的發(fā)展,待出現(xiàn)癥狀后可能已經(jīng)處于晚期。雖然通過(guò)手術(shù)與化療等治療方案能夠提升患者遠(yuǎn)期生存率,但是不能完全根治,因此改善卵巢癌預(yù)后的關(guān)鍵在于提升患者的早期檢出率與早期預(yù)后判斷［5］。因此,臨床上需要對(duì)卵巢癌進(jìn)行穩(wěn)健的診斷檢測(cè),以確保對(duì)卵巢癌患者進(jìn)行迅速、正確的治療。PD-1 又稱(chēng)為分化簇279,在腫瘤領(lǐng)域引發(fā)廣泛關(guān)注。最初PD-1 是1992 年從藥物處理小鼠雜交瘤細(xì)胞與造血祖細(xì)胞中克隆出來(lái)的,主要參與細(xì)胞凋亡過(guò)程［6］。PD-1 在NK 細(xì)胞、單核細(xì)胞、B 細(xì)胞以及外周活化的T 細(xì)胞等多種免疫細(xì)胞中表達(dá)［7］。因此,本研究探討了PD-1 在預(yù)測(cè)卵巢癌患者預(yù)后中的作用,希望能夠?yàn)槁殉舶┑脑\斷與靶向治療提供參考。

本研究結(jié)果表明,惡性組患者PD-1 蛋白陽(yáng)性率62.86%明顯高于良性組的28.57%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。這是因?yàn)?當(dāng)PD-1 與其配體PD-L1 結(jié)合時(shí),免疫受體酪氨酸基的開(kāi)關(guān)基序區(qū)域被磷酸化,激活細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路,導(dǎo)致免疫細(xì)胞被激活,減少免疫細(xì)胞分泌抗體與細(xì)胞因子,甚至將免疫細(xì)胞消耗殆盡,形成免疫抑制。但是目前對(duì)卵巢癌中PD-1 表達(dá)的相關(guān)研究較少,有研究發(fā)現(xiàn)［8］,PD-1 表達(dá)與腫瘤的分化程度、淋巴結(jié)節(jié)轉(zhuǎn)移具有密切關(guān)系；本研究結(jié)果顯示,存活組與死亡組患者年齡、絕經(jīng)情況對(duì)比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；存活組與死亡組患者FIGO 分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、組織分化程度、PD-1 表達(dá)情況對(duì)比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。由此證明,FIGO 分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、組織分化程度、PD-1 表達(dá)情況可能與卵巢癌的預(yù)后有關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)［9］,上皮卵巢癌組織中PD-1陽(yáng)性表達(dá)率與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和FIGO分期相關(guān)。本研究結(jié)果與其研究相似。由此表明,PD-1 與卵巢癌患者的生存期密切相關(guān),主要是PD-L1 多在巨噬細(xì)胞、T 細(xì)胞和B 細(xì)胞上呈現(xiàn)多表達(dá),與PD-1 結(jié)合后可促使免疫逃逸,促進(jìn)T 細(xì)胞的增殖與分化,因此PD-1 陽(yáng)性表達(dá)率越高,患者的生存期越長(zhǎng)；Logistic 回歸分析結(jié)果顯示,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況與PD-1 表達(dá)情況為卵巢癌預(yù)后獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P＜0.05)。有研究［10］使用Kaplan-Meier 法對(duì)卵巢癌患者進(jìn)行分析研究,發(fā)現(xiàn)PD-1 陰性表達(dá)患者生存期更長(zhǎng),與本研究結(jié)果相符。因此證明,PD-1 與卵巢癌患者生存率具有明顯關(guān)系。PD-L1 在活化的巨噬細(xì)胞和T 細(xì)胞表面與PD-1 結(jié)合后出現(xiàn)免疫逃逸,PD-1 陽(yáng)性的腫瘤細(xì)胞與T 細(xì)胞結(jié)合之后,抑制T 細(xì)胞增殖與分化,形成抗腫瘤效應(yīng)［11-13］。

綜上所述,卵巢癌患者組織中PD-1表達(dá)明顯增高,且PD-1 表達(dá)與卵巢癌患者病理特征中的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況具有一定關(guān)系,而且是患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。