雞心包積液-肝炎綜合癥近6 年發(fā)病情況調(diào)查

尹衛(wèi)衛(wèi)，元娜，袁萬哲

（1.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 北京 100094；2.廊坊職業(yè)技術(shù)學(xué)院 河北廊坊 065000；3.北京大偉嘉生物技術(shù)股份有限公司 北京10085；4.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 河北保定 071000）

雞心包積液-肝炎綜合征（hydropericardium syndrome，HPS），又稱雞安卡拉病，是由Ⅰ群禽腺病毒血清4 型感染引起的一種以心包積液與包涵體肝炎為主要病理變化的禽類傳染病。主要發(fā)生于3～5 周齡的肉雞、麻黃雞、蛋雞，有的禽腺病毒還可以感染鴨，死亡率可達(dá)到20%～80%。1987 年，巴基斯坦卡拉奇附近的安卡拉地區(qū)首次暴發(fā)HPS，接著印度、日本、朝鮮、韓國等國家發(fā)生了該病的流行。2015 年，我國山東、江蘇、河南等地區(qū)發(fā)生HPS的流行，隨后向遼寧、山西、吉林、黑龍江等地區(qū)蔓延，給我國養(yǎng)禽業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。本研究對(duì)近6 年來全國各地區(qū)不同養(yǎng)雞場中HPS 的流行情況進(jìn)行了調(diào)查分析，以期為HPS 的流行病學(xué)及綜合防控提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

1 全國流調(diào)情況

1.1 樣品來源

自2015 年12 月—2020 年7 月臨床疑似HPS 患病雞來源于山東德州、山東濟(jì)寧、江蘇句容、山西長治、江蘇淮北、遼寧丹東、黑龍江東港、湖北襄陽、陜西西安、內(nèi)蒙古通遼、山西運(yùn)城、山西晉中、河北唐山、陜西延安、天津、山西繁峙、貴州紅河州、山西高平、江蘇宿遷、江西宜昌、安徽濉溪、河北霸州、陜西渭南、陜西銅川、江蘇淮安、遼寧熊岳、陜西咸陽、西安戶縣、湖南婁底、寧夏、陜西渭南、吉林長春等地，養(yǎng)殖規(guī)模為5,000～30,000 羽。采集的樣品為病雞的肝臟樣本，共采集333 份樣本。

1.2 檢測

1）利用Primer Premier5 設(shè)計(jì)引物。雞心包積液-肝炎綜合癥P1：CCT CAA CCA ACA AGG ACC CA；P2：TCC AGG CAC CCG TTA CCA。其他疾病的引物由于保密原因，省略。

2）PCR 試驗(yàn)：反應(yīng)體系：模板1μL；上游引物1μL；下游引物1μL；MIX（Taq 酶，dNTP,Mg）12.5μL；ddHO 9.5μL；反應(yīng)程序：94℃預(yù)變性5min，94℃變性45s，56℃退火30s，72℃延伸45s；30個(gè)循環(huán)。

1.3 結(jié)果

所采集樣品的雞心包積液-肝炎綜合癥病例的陽性率（表1，圖1）。

表1 近6年雞心包積液-肝炎綜合癥病例的陽性率

圖1 近6 年HPS 陽性率趨勢

圖1 顯示：從時(shí)間縱軸上看，連續(xù)6 年對(duì)HPS 的監(jiān)測顯示，2016 年出現(xiàn)了頂峰，隨后逐年下降，2018 年微弱上升。

2 典型病例報(bào)告

典型病例一：吉林長春市某養(yǎng)殖場，養(yǎng)殖總量100,000 只，均為海蘭品種，于2020 年送檢肝臟病料組織2 份，可見澄明淡黃色的心包積液，肝臟顏色發(fā)黃。預(yù)做Ⅰ群禽腺病毒4 型雞心包積液-肝炎綜合癥、馬立克、禽白血病的檢測，見圖2-1。

圖2-1 病例1

典型病例二：2016 年淮北市濉溪縣某養(yǎng)殖場60 日齡的青年雞，100 日齡時(shí)發(fā)病，雞群怕冷、精神萎靡，拉黃色稀糞采食正常；剖檢心包有積液、心冠脂肪出血；器官環(huán)狀出血；肺臟充血、出血；肝臟水腫，有淡黃色膠凍樣物滲出，表面有條帶樣出血；脾臟腫大，表面有灰白色壞死灶；腎臟腫大、出血；輸卵管萎縮，表面充血出血；卵泡充血、出血；免疫情況為：進(jìn)欄后先后免疫了新城疫Ⅳ系疫苗和新流二聯(lián)、傳喉、禽流感H5-6-7-8；預(yù)做Ⅰ群禽腺病毒4 型雞心包積液-肝炎綜合癥、流感H9 株的抗原檢測。預(yù)做Ⅰ群禽腺病毒4型雞心包積液-肝炎綜合癥、禽流感的病原檢測和新城疫抗體檢測，見圖2-2。

圖2-2 病例2

2.1 病理變化

剖檢典型病例，無菌取典型病例的雞的內(nèi)臟，制作石蠟切片后用HE 染色。病理變化為：

圖2-3：肝臟中央靜脈和竇狀隙廣泛淤血、肝細(xì)胞嚴(yán)重脂肪變性，局灶性肝細(xì)胞壞死，同時(shí)細(xì)胞漿和細(xì)胞核內(nèi)可見嗜堿性包涵體；

圖2-3 肝臟

圖2-4：心臟局灶性壞死，心外膜充血，淋巴管擴(kuò)張；

圖2-4 心臟

圖2-5：肺臟充血淤血嚴(yán)重，肺泡上皮細(xì)胞脫落，肺泡腔內(nèi)有大量滲出液，淋巴細(xì)胞浸潤，彌散性含鐵血黃素沉著；

圖2-5 肺臟

圖2-6：脾臟白髓中淋巴細(xì)胞廣泛壞死，彌散性含鐵血黃素沉著；

圖2-6 脾臟

圖2-7：腎臟廣泛淤血，腎小管上皮細(xì)胞變性壞死，腎小管內(nèi)出現(xiàn)大量尿管型。

圖2-7 腎臟

2.2 典型病例的PCR 檢測結(jié)果

圖2-8、2-9、2-10 顯示：典型病例1：HPS 陽性，馬立克陰性、禽白血病陰性。圖2-11、2-12 顯示：典型病例2：HPS 陽性，禽流感亞型陰性。

圖2-8 HPS（1 號(hào)為陽性；2 號(hào)為陰性）

圖2-9 馬立克（1 號(hào)為陰性；2 號(hào)為陰性）

圖2-10 禽白血?。? 號(hào)為陰性；2 號(hào)為陰性）

圖2-11 HPS（1 號(hào)為陽性；2 號(hào)為陽性）

圖2-12 禽流感H9 亞型（1 號(hào)為陰性；2 號(hào)為陰性）

3 分析與討論

從空間上，HPS 縱向由山東、江蘇、河南等地向東北三省遼寧、吉林、黑龍江及內(nèi)蒙古東北部蔓延，橫向向安徽、湖北湖南等地蔓延。

6 年的監(jiān)測曲線顯示：2015 年雞心包積液-肝炎綜合癥疾病開始被發(fā)現(xiàn)，2016 年全國各地均有此病的發(fā)生，在調(diào)研的6 年間達(dá)到峰值。隨后幾年中，由于全國對(duì)本病認(rèn)知和防治手段的提升，樣本數(shù)量和陽性樣本均下降。2018 年，養(yǎng)殖戶對(duì)此病稍有輕視，導(dǎo)致指標(biāo)略有升高。隨著各種疫苗、防控手段的進(jìn)一步實(shí)踐，2019、2020 年呈下降趨勢。

鑒別診斷顯示疾病初期，癥狀較輕微，一線養(yǎng)殖人員對(duì)HPS 了解較少，在HPS、馬立克、禽白血病中徘徊；隨著疾病的發(fā)生發(fā)展，癥狀病理變化相對(duì)嚴(yán)重，引起與其他傳染病如雞新城疫、禽流感混合感染的誤解，通過對(duì)病原進(jìn)行檢測，最終確定為HPS。

上所述，6 年來通過對(duì)HPS 的監(jiān)測，體現(xiàn)了隨著HPS 的發(fā)生發(fā)展，全國獸醫(yī)部門全心全德，共同努力抗擊疫情，研制出了各種疫苗，加強(qiáng)生物安全與管理，使疾病最終被控制在可控階段的局面。