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    超微粉催情散提高產(chǎn)后奶牛發(fā)情受胎效果的研究

    2022-10-12 13:18:10胡婷婷王翌翀余斯炅陳良雷閆俊亮郭凱軍
    中國畜牧雜志 2022年10期
    關(guān)鍵詞:催情超微粉受胎率

    胡婷婷,王翌翀,余斯炅,陳良雷,王 峰,閆俊亮,郭凱軍*

    (1.北京農(nóng)學(xué)院動物科技學(xué)院,北京 102206;2.河南康星藥業(yè)有限公司,河南鄭州 450000)

    目前奶牛場普遍使用同期發(fā)情提高奶牛發(fā)情配種效率,即對奶牛注射某些激素人為調(diào)整發(fā)情周期,使之在預(yù)定時間集中發(fā)情,以便有計劃地組織配種,集中進行輸精,減少發(fā)情鑒定工作。為提高奶牛受胎率,很多牧場在產(chǎn)后50~60 d 開展同期發(fā)情,以期縮短空懷天數(shù)。但由于同期發(fā)情頻繁使用,許多牧場奶牛對同期發(fā)情處理的敏感性降低,牧場空懷天數(shù)仍較高,有的甚至超過120 d,實踐中同期發(fā)情的效率有待提高。

    中草藥催情散是中獸藥典的經(jīng)典驗方,對促進奶牛發(fā)情具有很好的效果。催情散使血漿中促卵泡素(Follicle Stimulating Hormone,F(xiàn)SH)增高,誘導(dǎo)奶牛發(fā)情。研究表明,催情散對治療各種家畜的不孕癥具有良好療效,催情散可以調(diào)節(jié)促炎和抗炎因子,達到治療持久性黃體的作用,還可使血液FSH、促黃體素(Luteinizing Hormone,LH)等激素顯著升高,催情散對不發(fā)情奶牛具有很好的催情效果。

    超微粉技術(shù)是對中藥材進行微粉化,將超微粉碎技術(shù)與中藥理論結(jié)合能夠在低劑量下取得較好的中藥效果。目前超微粉催情散對奶牛促發(fā)情效果及同期發(fā)情的影響未見報道。本文通過監(jiān)測試驗前期奶牛服用催情散后的發(fā)情、受胎率、血清中FSH、LH、孕酮(Progesterone,P)、雌二醇(Estradiol,E)4 種激素水平的變化及試驗后期對不發(fā)情牛只進行牧場同期發(fā)情后的受孕效果,研究催情散超微粉對產(chǎn)后奶牛發(fā)情受胎效果的影響,以期解決長期使用同期發(fā)情處理導(dǎo)致奶牛同期發(fā)情效果低下的問題。

    1 材料與方法

    1.1 實驗藥品 實驗藥品主要包括催情散(河南康星藥業(yè)有限公司,主要含淫羊藿、羊紅膻、陽起石、黃芪、黨參、巴戟天、肉蓯蓉等)、促性腺激素釋放激素(Gonadotropin Releasing Hormone,GHRH,素仕生物科技有限公司)、前列腺激素(Prostaglandin,PG,素仕生物科技有限公司)。

    1.2 實驗動物 隨機選取60 頭產(chǎn)后50 d 未發(fā)情的健康奶牛(直腸檢查無子宮炎癥,牛無其他疾病等),按照胎次(2 胎和3 胎牛各30 頭)、體況評分(2.75±0.25)相近的原則,隨機分為3 組,分別為催情散低劑量組(250 g/次)、高劑量組(500 g/次)和對照組(PG),每組2 胎和3 胎牛各10 頭。

    1.3 試驗時間、地點 2020 年10 月—2020 年11 月在寧夏回族自治區(qū)銀川市賀蘭縣洪廣鎮(zhèn)新榮村奶牛養(yǎng)殖基地,最高氣溫(14.4±2.3)℃,最低氣溫(1.3±2.1)℃。

    1.4 實驗方法 實驗分前期(試驗開始1~18 d)和后期(試驗開始后18~63 d)2 個階段。在試驗前期,低劑量組和高劑量組在產(chǎn)犢后50 d 時選擇沒有發(fā)情的牛只分別灌服催情散250 g/ 次和500 g/ 次,1 d 1 次,連續(xù)灌服3 d,對照組(20 頭)在試驗開始時注射一針PG。試驗后期:試驗第18 天,對照組和試驗組不發(fā)情牛只實施牧場同期發(fā)情處理,同期發(fā)情后第10 天人工授精,人工授精后35 d 后進行妊娠檢查。

    PG 同期發(fā)情技術(shù):采用前列腺素及其類似物處理母牛,主要是誘導(dǎo)黃體溶解,黃體期縮短,導(dǎo)致新的卵泡期出現(xiàn),達到同期發(fā)情的效果。主要方法:第1針注射GHRH,第2 針和第3 針注射PG,第4 針注射GHRH,每次注射劑量均為0.4 mg/頭,注射時間分別為0、7、8、9 d,最后在第10 天定時輸精。

    本次實驗的奶牛均采用相同的營養(yǎng)標準即牛只管理制度、飼喂程序、飼喂環(huán)境均相同,并按常規(guī)進行預(yù)防消毒工作。飼料、飼養(yǎng)用具及其他用品均由養(yǎng)牛場提供。同時,給予奶牛充足的運動空間。

    1.4.1 發(fā)情判定和人工授精 試驗前期:從用藥開始到用藥后的第18 天以內(nèi)利用計步器和尾根涂蠟法共同進行判定奶牛發(fā)情。對發(fā)情母牛適時進行人工授精,計算發(fā)情率和配種率。

    1.4.2 檢測受胎率 配種后35 d 用高清獸用B 超機(V20,恒錦萊科技有限公司)檢查確定試驗牛只是否妊娠,計算受胎率。

    1.4.3 采集血樣 在第1 次用藥之前(記為第0 天)以及在用藥后第3、6、9、12、15 天進行尾靜脈采血。采血后,將收集于采血管里的全血室溫放置2 h,然后3000 r/min 離心20 min,取上清即可,將上清置于-20℃保存,避免反復(fù)凍融。檢測指標包括FSH、LH、P和E。檢測方法:通過放免儀(北京北方生物技術(shù)研究所有限公司,XH6080)進行放射免疫檢測(利用同位素標記的與未標記的抗原同抗體發(fā)生競爭性抑制反應(yīng)的放射性同位素體外微量分析方法)。

    1.5 統(tǒng)計分析 試驗數(shù)據(jù)采用SPSS21 軟件對發(fā)情率和受胎率進行卡方檢驗。對血液激素含量進行ANOVA 方差分析,采用Duncan′s 方法對各組間平均數(shù)進行多重比較,血液激素結(jié)果用平均值± 標準差表示。<0.05表示差異顯著,>0.05 表示差異不顯著。

    2 結(jié)果

    2.1 試驗前期催情散對奶牛發(fā)情受胎效果觀察 試驗前期,低劑量組奶牛的發(fā)情率顯著低于對照組,2 個劑量組間以及高劑量組和對照組間差異不顯著,對照組受胎率顯著高于低劑量組和高劑量組(表1)。

    表1 試驗前期發(fā)情受胎效果

    在試驗后期,同期發(fā)情后高劑量組受胎率顯著高于低劑量組和對照組,對照組和低劑量組之間差異不顯著(表2)。

    表2 試驗后期同期發(fā)情受胎效果

    綜合考慮試驗前期和后期,高劑量組的受胎率顯著高于低劑量組、對照組(表3)。

    表3 試驗全期發(fā)情和受胎效果比較

    2.2 服用催情散前后奶牛血液生殖激素的變化 由表4 可知,試驗前期,3 組奶牛血清中FSH、LH 含量無顯著差異。試驗前期,在第3~6 天試驗組奶牛血清中P含量顯著或趨于顯著高于對照組(<0.05 或0.05<<0.1),第12 天低劑量組奶牛血清中P含量顯著低于對照組,第15 天2 個試驗組均趨于顯著高于對照組(0.05<<0.1)。試驗第12 天,高劑量組E含量顯著高于低劑量組,其余各組在任何時間內(nèi)均不顯著。

    表4 試驗前期奶牛血清中生殖激素含量變化

    3 討 論

    3.1 催情散對奶牛發(fā)情受胎率的影響 劉立山等研究表明牧場奶牛的同期發(fā)情受胎率為60%~80%,然而,隨著同期發(fā)情處理普遍應(yīng)用,部分牧場同期發(fā)情受胎率較為低下。梁小軍等研究表明,部分牧場奶牛產(chǎn)犢間隔為400~410 d,配準天數(shù)為120~130 d。一般牧場在產(chǎn)后60 d 開始同期發(fā)情,照此推算,牧場同期發(fā)情受胎率僅有30%~40%,影響奶牛的繁殖性能和牧場經(jīng)濟效益。中草藥催情散是中獸藥典的經(jīng)典驗方,近年來,在家畜養(yǎng)殖生產(chǎn)中應(yīng)用比較廣泛,尤其是對促進奶牛發(fā)情具有顯著效果。唐斯嘎等研究表明催情散具有解決母畜乏情、卵巢機能疾病的作用,用量適宜時不會對家畜造成毒副作用,但用時較長,起效慢。

    本實驗所用的超微粉催情散在試驗前期的效果不如PG 組,但在試驗后期高劑量組能顯著提高奶牛的發(fā)情受胎率,結(jié)果與張建各的試驗結(jié)果相似。張建各對比了催情散和激素類藥物(PG)作用于奶牛后的發(fā)情效果,結(jié)果顯示催情散組作用于奶牛發(fā)情的時間明顯長于PG,但是奶牛的發(fā)情受胎率高于PG(89.6% VS 53.8%)。

    3.2 催情散對奶牛血液激素的影響 動物生殖功能是通過生殖激素的調(diào)控實現(xiàn)的,在奶牛發(fā)情過程中生殖活動的調(diào)節(jié)主要受FSH、LH、P、E等激素控制。對正常奶牛來講,當機體P濃度較低時高濃度的E可對下丘腦起正反饋的調(diào)節(jié),導(dǎo)致下丘腦釋放促性腺激素釋放激素(GnRH),通過下丘腦-垂體系統(tǒng)作用到垂體,刺激垂體分泌 FSH 和 LH,隨著 LH 濃度的增加產(chǎn)生 LH峰,并在少量 P協(xié)同下使奶牛發(fā)情,促使卵泡排卵。

    催情散是傳統(tǒng)的促進發(fā)情的中藥方劑,其中肉蓯蓉具有補腎陽、益精血作用,具有較強的雌激素作用,促進FSH 分泌;方劑中菟絲子、淫羊藿等聯(lián)合應(yīng)用促進LH 的分泌,淫羊藿的主要有效成分是淫羊藿苷,常用于治療陽痿遺精、偏風(fēng)不遂、小兒雀目等癥;中藥巴戟天具有補腎壯陽的作用,被譽為“補腎壯陽之要藥”;《藥性歌訣》中記載:“黃芪入藥,為強壯劑,對血虛萎黃、浮腫等疾病療效顯著”。藥物聯(lián)合使用能夠使垂體釋放LH 的脈沖頻率和濃度升高,與FSH共同促進卵泡分泌雌激素,這也是誘發(fā)排卵的基礎(chǔ);雌二醇E的增加主要由于方劑中淫羊藿具有小劑量外源雌激素的作用;P下降主要是總黃酮具有外源雌激素的作用,可增加子宮肌對催產(chǎn)素的敏感性,促進子宮收縮,促使前列腺素F2的分泌,起到溶解黃體降低P水平的作用。

    劉偉等報道對奶牛使用催情散后,奶牛血液激素E、FSH、LH 含量與PG 組相比顯著增加,P含量顯著降低。本研究在試驗后期均采用相同的同期發(fā)情處理,沒有研究生殖激素的變化,試驗前期各組牛只血液FSH、LH、P和E含量有增加或降低的趨勢,個別時間點差異顯著,但總體上沒有取得顯著效果。造成該結(jié)果的原因可能有兩個方面,一是催情散作為中草藥方,其作用主要在于調(diào)理,功效見效較慢,而本試驗?zāi)康氖茄芯看咔樯ν诎l(fā)情的調(diào)節(jié)作用,沒有給催情撒發(fā)揮作用留有足夠的時間;二是由于采用了超微粉工藝,使用劑量與祁生旺相比劑量較低,因此對生殖激素的影響沒有達到顯著水平。

    3.3 超微粉催情散對奶牛發(fā)情的影響 祁生旺等對奶牛使用催情散觀察奶牛發(fā)情情況,所用試驗劑量630 g 和950 g,對奶牛發(fā)情效果良好。本實驗所用的催情散使用超微粉工藝,該工藝對所選用的中藥材進行微粉化,從而大大提高中草藥的溶出率和利用率。李德成等研究表明中草藥經(jīng)超微粉碎后,減少劑量仍可獲得原處方的效果,一般可節(jié)省30%~70%的藥材。本實驗結(jié)果表明,當超微粉催情散劑量為500 g 時對奶牛同期發(fā)情受胎率的效果顯著高于對照組,但是對奶牛生殖激素的影響與對照組相比無顯著差異,具體原因有待進一步研究。

    4 結(jié) 論

    本研究結(jié)果表明,試驗前期兩劑量組的發(fā)情率與對照組無顯著差異,后期高劑量組奶牛同期發(fā)情受胎率顯著提高,說明超微粉催情散促進發(fā)情效果與PG 相似,但能夠顯著改善奶牛對同期發(fā)情處理的敏感性,從而提高奶牛的同期發(fā)情受胎率,這在實踐中具有一定的意義,一方面可以減少化學(xué)激素的用量,另一方面對恢復(fù)奶牛繁殖機能有積極的作用。

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