■鄭博予 王永志 祁宏偉*
(1.吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究所,吉林公主嶺 136100;2.乾安縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局,吉林乾安 131400)
抗生素飼用添加劑能夠有效減少動(dòng)物的致死率與患病率,并且能夠在一定程度上改善動(dòng)物的生產(chǎn)性能。但隨著抗生素添加劑的濫用,人類(lèi)的安全受到威脅,因此尋求能夠替代抗生素且具有相近效果并且安全健康的產(chǎn)品成為養(yǎng)殖業(yè)的迫切需求。微生態(tài)制劑,是在微生態(tài)理論的指導(dǎo)下,利用對(duì)宿主有益無(wú)害的活的正常微生物或正常微生物的促生長(zhǎng)物質(zhì)經(jīng)特殊工藝制成的制劑[1]。微生態(tài)制劑可以調(diào)節(jié)動(dòng)物因更換環(huán)境或應(yīng)激反應(yīng)而造成的腸道菌群紊亂,其中的益生菌還能夠促進(jìn)動(dòng)物健康,提高對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收與利用,且能夠保證其在體內(nèi)不會(huì)殘留[2]。研究表明,微生態(tài)制劑不僅能夠降低動(dòng)物的病死率,還能提高養(yǎng)殖產(chǎn)量,同時(shí)又可以保障畜產(chǎn)品的質(zhì)量與安全,最終可以很好地維護(hù)生態(tài)安全[3]。試驗(yàn)旨在研究微生態(tài)制劑(植物乳桿菌及酶制劑)對(duì)西門(mén)塔爾雜交肉牛生產(chǎn)性能、養(yǎng)分消化率、抗氧化和肝功能的影響,以期為微生態(tài)制劑在肉牛育肥中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。
菌粉制劑為植物乳桿菌(從健康的肉牛糞便中篩選鑒定出一株植物乳桿菌Z11,保藏編號(hào):M20211493,活菌數(shù)2.0×1010個(gè)/g);酶制劑為復(fù)合酶制劑,購(gòu)自寧夏夏盛實(shí)業(yè)集團(tuán)有限公司,其主要成分為纖維素酶(酶活≥300 U/g)、木聚糖酶(酶活≥1 000 U/g)和β-葡聚糖酶(酶活≥1 500 U/g)。
基礎(chǔ)飼糧配方參考《肉牛飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 815—2004)設(shè)計(jì),精粗比為50∶50,其組成及營(yíng)養(yǎng)水平如表1所示。
表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))
選擇20頭性別相同,體重接近(340±20)kg的西門(mén)塔爾雜交肉牛,隨機(jī)分4 個(gè)處理,每個(gè)處理5 個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)1 頭牛。對(duì)照組只飼喂基礎(chǔ)飼糧,不添加任何添加劑;試驗(yàn)Ⅰ組每頭牛添加3 g/d菌粉制劑;試驗(yàn)Ⅱ組每頭牛添加3 g/d 酶制劑;試驗(yàn)Ⅲ組每頭牛添加菌粉制劑和酶制劑各3 g/d。
試驗(yàn)預(yù)試期14 d,正試期30 d。試驗(yàn)牛栓系飼養(yǎng),試驗(yàn)前對(duì)牛場(chǎng)進(jìn)行消毒,并對(duì)試驗(yàn)牛進(jìn)行健胃驅(qū)蟲(chóng),每天8:00 與16:00 定時(shí)兩次飼喂日糧和飲水,自由采食,每日記錄精粗料采食量。定期對(duì)試驗(yàn)牛進(jìn)行健康檢查,做好防護(hù)工作,按時(shí)消毒,保證牛舍環(huán)境整潔衛(wèi)生。
1.5.1 生長(zhǎng)性能測(cè)定
記錄每天投料量和剩料量,計(jì)算干物質(zhì)采食量(DMI)。于試驗(yàn)正式開(kāi)始和結(jié)束的清晨空腹稱(chēng)重,得到的數(shù)據(jù)按以下公式進(jìn)行計(jì)算平均日增重(ADG)及料重比(F/G)。
ADG(kg/d)=(終末體重-初始體重)/試驗(yàn)天數(shù)
DMI(kg)=平均日采食量×飼糧干物質(zhì)含量
F/G=DMI/ADG
1.5.2 養(yǎng)分表觀消化率的測(cè)定
在試驗(yàn)結(jié)束前2 周,每周取試驗(yàn)日糧300 g,混合均勻后按四分法取樣,65 ℃烘箱烘干48 h,再回潮24 h,隨后進(jìn)行粉碎,再分裝入自封袋中冷凍保存。在試驗(yàn)結(jié)束前5 d,每隔4 h 隨機(jī)采糞樣25 g 作點(diǎn)收糞,將每天所收集的糞樣混勻,每頭牛收集120 g 糞便,固氮加入10%的硫酸,65 ℃烘干、粉碎、過(guò)篩、回潮,密封袋保存?zhèn)溆谩?/p>
飼糧和糞樣中的干物質(zhì)(DM)、粗蛋白(CP)、中性洗滌纖維(NDF)、酸性洗滌纖維(ADF)以及鈣和磷的養(yǎng)分及其表觀消化率參照張麗英[4]方法進(jìn)行檢測(cè),采用酸不溶灰分(AIA)作為內(nèi)源指示劑,計(jì)算營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率。
某營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率(%)=100×[1-(RAIA/MAIA×Mn/Rn)]
式中:RAIA——飼糧中AIA含量(%);
MAIA——糞樣中AIA含量(%);
Mn——糞樣中某營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量(%);
Rn——飼糧中某營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量(%)。
1.5.3 血液的采集及指標(biāo)測(cè)定
于試驗(yàn)結(jié)束的清晨,每頭牛空腹頸靜脈采血10 mL,3 000 r/min離心10 min,血清-20 ℃冷凍保存?zhèn)溆?。利用邁瑞(bs-420)全自動(dòng)生化儀測(cè)定血清中丙二醛(MDA)含量,總抗氧化能力(T-AOC),過(guò)氧化氫酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)和乳酸脫氫酶(LDH)酶活,試劑盒均購(gòu)于上海勁馬試驗(yàn)設(shè)備有限公司。
試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)用Excel 進(jìn)行初步整理后用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析,最后用Duncan’s 法進(jìn)行多重比較。顯著性差異的判斷標(biāo)準(zhǔn)為P<0.05。
表2 微生態(tài)制劑對(duì)肉牛生長(zhǎng)性能的影響
由表2可知,所有組的初始體重間并無(wú)顯著性差異(P>0.05),符合完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì);與對(duì)照組相比,試驗(yàn)組平均日增重分別提高了10.77%、11.40%、12.45%,均達(dá)到顯著水平(P<0.05);試驗(yàn)組平均日采食量均比對(duì)照組有顯著提高(P<0.05),而料重比分別顯著降低8.34%、8.70%和9.28%(P<0.05)。
由表3 可知,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組的DM 分別顯著增加了3.79%、3.25%和4.15%(P<0.05);NDF 分別顯著增加了4.91%、3.51%和5.25%(P<0.05);ADF 分別顯著增加了2.54%、3.38%和3.30%(P<0.05);試驗(yàn)Ⅱ組、Ⅲ組的CP 比對(duì)照組分別增加了4.16%和4.46%(P<0.05),試驗(yàn)Ⅰ組與對(duì)照組相比有提高的趨勢(shì)但差異不顯著(P>0.05)。
表3 微生態(tài)制劑對(duì)肉牛營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響(%)
表4 微生態(tài)制劑對(duì)肉牛抗氧化指標(biāo)的影響
由表4 可知,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)Ⅰ組MDA 顯著降低了24.43%(P<0.05),CAT顯著提高了12.05%(P<0.05),T-AOC 顯著增加了6.65%(P<0.05);試驗(yàn)Ⅱ組MDA 顯著降低了23.42%(P<0.05),CAT 顯著增加了8.56%(P<0.05),T-AOC 顯著增加了4.50%(P<0.05);試驗(yàn)Ⅲ組MDA 顯著降低了25.16%(P<0.05),CAT 顯著 增 加 了14.15%(P<0.05),T-AOC 顯 著 增 加 了12.52%(P<0.05);試驗(yàn)組與對(duì)照組之間的SOD差異均不顯著(P>0.05)。
由表5 可知,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)組的谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶及乳酸脫氫酶酶活差異均不顯著(P>0.05)。
表5 微生態(tài)制劑對(duì)肉牛肝功能的影響(U/L)
微生態(tài)制劑中含有的對(duì)動(dòng)物機(jī)體有益的益生菌,能夠促進(jìn)動(dòng)物機(jī)體對(duì)飼糧中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化與吸收,改善機(jī)體的生長(zhǎng)性能;可以誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答從而提高機(jī)體的免疫功能;因益生菌是微生物,不會(huì)有殘留,在減少對(duì)飼養(yǎng)環(huán)境污染方面具有一定優(yōu)勢(shì)[5]。增重效果作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收的直接表現(xiàn),一直以來(lái)都是人們關(guān)注的重點(diǎn)[6]。任海睿[7]的研究表明,添加復(fù)合微生物制劑可以顯著提高肉牛平均日增重,降低料重比,并且還有提高采食量的趨勢(shì)。本試驗(yàn)中,試驗(yàn)組干物質(zhì)采食量均比對(duì)照組有顯著提高,試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組的平均日增重比對(duì)照組分別提高了10.77%、11.40%和12.45%(P<0.05),料重比顯著低于對(duì)照組,這與上述研究結(jié)果相同。其中添加菌酶復(fù)合組促生長(zhǎng)效果更好,原因可能與植物乳桿菌對(duì)瘤胃的發(fā)酵起到了一定的正向調(diào)控作用,而酶制劑加強(qiáng)了對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收利用有關(guān)。
作為動(dòng)物生長(zhǎng)的直接因素,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率能夠反映動(dòng)物機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化情況。與單胃動(dòng)物相比,反芻動(dòng)物更耐粗飼料的原因在于其擁有一個(gè)強(qiáng)大的瘤胃。飼糧先經(jīng)瘤胃發(fā)酵后才會(huì)到其他胃室進(jìn)行消化[8]。肖怡[9]在肉羊的日糧中加入不同劑量的植物乳桿菌,DM 和NDF 的表觀消化率顯著提高(P<0.05)。本試驗(yàn)中,試驗(yàn)組的DM、CP、NDF以及ADF分別較對(duì)照組有顯著提升(P<0.05),這與前人試驗(yàn)結(jié)果相符,其原因可能是因?yàn)樵囼?yàn)所用微生態(tài)制劑中的植物乳桿菌對(duì)肉牛瘤胃中的有益菌起到積極的促進(jìn)作用。
通常情況下,動(dòng)物機(jī)體內(nèi)氧自由基的形成與抗氧化酶對(duì)其的清除之間始終會(huì)處于一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡的狀態(tài),但是當(dāng)動(dòng)物機(jī)體受到外界環(huán)境的影響而產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)或其他條件時(shí)就會(huì)打破這種動(dòng)態(tài)平衡,這時(shí)體內(nèi)的生物大分子物質(zhì)就會(huì)被未被清理掉以及體內(nèi)重新產(chǎn)生的氧自由基攻擊,從而導(dǎo)致機(jī)體的氧化損傷[10]。秦順義等[11]關(guān)于添加富硒益生菌的研究發(fā)現(xiàn),血清TAOC與SOD呈現(xiàn)顯著或極顯著的上升趨勢(shì),同時(shí)血清中的MDA含量呈現(xiàn)顯著或極顯著的降低趨勢(shì)。從本試驗(yàn)的結(jié)果中可以看出,試驗(yàn)組的CAT 與T-AOC 含量均顯著性增加(P<0.05);MDA含量也呈現(xiàn)顯著性降低(P<0.05),這與王子苑等[12]的研究結(jié)果相似,說(shuō)明微生態(tài)制劑能夠幫助機(jī)體提高抗氧化能力。
ALT是肝損傷后最先釋放的酶,是被用來(lái)評(píng)價(jià)特異性肝損傷的指標(biāo);AST存在于干細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)與線粒體中,這兩種酶在血液中的含量會(huì)因肝細(xì)胞被破壞而增加,因此ALT與AST是反映肝功能損傷的最敏感指標(biāo)[13]。ALP 是存在于骨骼、肝臟、腸道、腎臟、白細(xì)胞和胎盤(pán)中的一種酶,是膽汁淤積性肝病中最先升高的酶,并能夠釋放在血清中[14]。LDH是糖酵解過(guò)程中的重要酶,其在血液中的含量能夠反映機(jī)體在無(wú)氧條件下的代謝能力[15]。本試驗(yàn)中ALT、AST、ALP與LDH含量與對(duì)照組相比,均無(wú)顯著性差異(P>0.05),說(shuō)明本試驗(yàn)中使用的微生態(tài)制劑對(duì)肉牛機(jī)體的肝細(xì)胞沒(méi)有損傷與副作用。
本試驗(yàn)中微生態(tài)制劑的使用對(duì)肉牛的采食量以及增重效果具有良好的促進(jìn)作用,能夠提高部分營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率,且在一定程度上能夠改善機(jī)體的抗氧化能力,對(duì)機(jī)體肝功能雖未表現(xiàn)出積極作用,但也并未出現(xiàn)副作用,其中以植物乳桿菌與酶制劑組合利用效果最好。