不同檢驗(yàn)方法篩查妊娠合并梅毒的臨床價(jià)值比較

陳亞娟

(許昌市婦幼保健院 檢驗(yàn)科，河南 許昌 461000)

梅毒是臨床上較為常見的一種傳染性疾病，可導(dǎo)致機(jī)體所有組織器官受累。近年來，妊娠合并梅毒的發(fā)病率逐漸上升，患者隨病情進(jìn)展，發(fā)生流產(chǎn)、早產(chǎn)、新生兒病死及各類并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)逐漸增加，嚴(yán)重影響母嬰結(jié)局[1]。因此，如何盡早篩查及治療妊娠合并梅毒具有重要的臨床意義。酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)與甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)(tolulized red unheated serum test，TRUST)是臨床上篩查妊娠合并梅毒的兩種主要方式，其中ELISA是在固相載體表面吸附已知抗原或抗體并進(jìn)行酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)，之后洗除液相中游離成分[2]。TRUST的抗原是牛心肌心類脂，測定患者血清中反應(yīng)素[3]。兩種方式均對妊娠合并梅毒具有一定的診斷價(jià)值，但目前臨床上關(guān)于兩種檢驗(yàn)方法在妊娠合并梅毒篩查中的臨床價(jià)值尚未統(tǒng)一觀點(diǎn)。基于此，本研究旨在分析不同檢驗(yàn)方法在妊娠合并梅毒篩查中的臨床價(jià)值，以期為臨床早期篩查妊娠合并梅毒提供客觀的參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2020年1月至2021年12月許昌市婦幼保健院收治的105例高度疑似妊娠合并梅毒患者作為研究對象。年齡23～37(30.58±4.25)歲；孕周10～20(15±1.08)周；初產(chǎn)婦70 例，經(jīng)產(chǎn)婦35 例；受教育程度初中及以下37例，高中/中專及以上68例；在職44例，非在職61例。患者及其家屬均知情同意。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn)(1)納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)相關(guān)病史、體格檢查、鍍銀染色顯微鏡檢查法等初步判斷為高度疑似妊娠合并梅毒；②肝腎功能正常、精神正常，可獨(dú)立完成相關(guān)量表評估；③為單胎妊娠。(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他類型的傳染性、感染性或血液系統(tǒng)疾??；②合并惡性腫瘤、明顯出血傾向、自身免疫系統(tǒng)疾病等；③有免疫球蛋白制品服用史的皮膚??；④合并妊娠并發(fā)癥。

1.3 檢驗(yàn)方法

1.3.1ELISA檢驗(yàn) 患者空腹時(shí)，采集肘靜脈血5 mL，離心處理(3 000 r·min-1速率，10 cm半徑)10 min后，取上層血清在4 ℃冰箱中保存待檢。檢測時(shí)將待檢血清標(biāo)本放置室溫后，在分別預(yù)包被板條孔中加入100 μL血清樣本及陰陽性質(zhì)控，并在恒溫箱(江蘇新康醫(yī)療器械有限公司，蘇械注準(zhǔn)20162220405，型號600-B)中培養(yǎng)1 h，應(yīng)用洗板機(jī)(上?？迫A實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有限公司，滬械注準(zhǔn)20162400768，型號ST-36W)進(jìn)行洗板，然后分別在樣品孔及陽性、陰性對照孔中加入酶標(biāo)試劑100 μL，振蕩混勻后，在恒溫箱中培養(yǎng)30 min，應(yīng)用洗板機(jī)(上?？迫A實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有限公司，滬械注準(zhǔn)20162400768，型號ST-36W)進(jìn)行洗板，在每孔中加入50 μL顯色劑A/B，振蕩混勻后，在恒溫箱中培育20 min，并在每孔中加入50 μL終止液混勻后，應(yīng)用酶標(biāo)儀(上?？迫A實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有限公司，滬械注準(zhǔn)20162400701，型號ST-360)判讀結(jié)果。ELISA試劑盒購自北京萬泰生物藥業(yè)有限公司。

1.3.2TRUST檢驗(yàn) 患者空腹時(shí)，采集肘靜脈血5 mL，離心處理后，取上層血清在4 ℃冰箱中保存待檢。檢測時(shí)將待檢血清標(biāo)本放置室溫后，在加樣卡圈中加入50 μL血清樣本，并涂抹均勻，搖勻抗原液，針頭加抗原液1 滴，在立體脫色搖床放置卡片后，振蕩搖勻8 min(100 r·min-1速率)后即刻在亮光下觀察結(jié)果。TRUST試劑盒購自北京萬泰生物藥物有限公司。

1.3.3梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)檢驗(yàn) 患者空腹時(shí)，采集肘靜脈血5 mL，離心處理后，取上層血清在4 ℃冰箱中保存待檢。將所有待檢樣本均做9孔，將標(biāo)本稀釋液加入U(xiǎn)型反應(yīng)板，第1孔100 μL，其余8孔均為25 μL，采用移液器取25 μL血清至第1孔，混勻后取25 μL，加入第2孔，依次稀釋至第9孔，在第3孔中加入25 μL未致敏粒子D液，第4～9孔加入致敏粒子C液，振蕩器振蕩微量反應(yīng)板30 s后，在恒溫箱中培育2 h，觀察結(jié)果。TPPA試劑盒日本富士瑞必歐株式會社。

1.4 評價(jià)指標(biāo)(1)以TPPA檢測結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，分析ELISA與TRUST兩種檢驗(yàn)方法篩查妊娠合并梅毒的敏感度、特異度、準(zhǔn)確度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值。(2)比較ELISA與TRUST兩種檢驗(yàn)方法的檢測費(fèi)用。

2 結(jié)果

2.1 TPPA篩查結(jié)果經(jīng)TPPA篩查，105例高度疑似患者中妊娠合并梅毒共80例，占比76.19%。

2.2 兩種檢驗(yàn)方法對妊娠合并梅毒的篩查價(jià)值ELISA與TRUST檢驗(yàn)方法篩查妊娠合并梅毒的特異度、陽性預(yù)測值比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；ELISA檢驗(yàn)方法篩查妊娠合并梅毒的敏感度、準(zhǔn)確度、陰性預(yù)測值均高于TRUST檢驗(yàn)方法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1～3。

表1 ELISA檢驗(yàn)方法與TPPA篩查結(jié)果比較(n)

表2 TRUST檢驗(yàn)方法與TPPA篩查結(jié)果比較(n)

表3 ELISA及TRUST檢驗(yàn)方法篩查妊娠合并梅毒的價(jià)值比較(%)

2.3 ELISA與TRUST檢驗(yàn)方法的篩查費(fèi)用比較ELISA法篩查妊娠合并梅毒的費(fèi)用為每人20元，總費(fèi)用為2 100元，TRUST法篩查費(fèi)用為每人38元，總費(fèi)用3 990元，ELISA法篩查費(fèi)用低于TRUST法。

3 討論

梅毒螺旋體感染是梅毒的發(fā)病機(jī)制，梅毒的傳染率極高，且人體是唯一的傳染源，其主要通過性交、母嬰、血液等方式傳播。梅毒的危害性極大，其病變幾乎可以累積機(jī)體所有的組織器官。妊娠合并梅毒的高危因素較多，包括忽略孕前檢查、配偶是否有梅毒感染史、吸毒史或其他性病史等，且近年來，妊娠合并梅毒的發(fā)生率呈上升趨勢[4]。妊娠合并梅毒的潛伏期較長，并發(fā)癥狀較不明顯，加之妊娠期患者免疫系統(tǒng)處于一種抑制狀態(tài)，其感染后往往無明顯的癥狀體征，致使其常被忽略。隨病情進(jìn)展，患者會出現(xiàn)自身機(jī)體組織器官損傷，且梅毒會經(jīng)臍靜脈、胎盤組織感染胎兒，增加胎兒宮內(nèi)窘迫、胎兒畸形、流產(chǎn)等風(fēng)險(xiǎn)，且在分娩過程中新生兒在經(jīng)過產(chǎn)道時(shí)也可因?yàn)轭^部、肩部擦傷而發(fā)生感染，嚴(yán)重影響患者及圍生兒的生命安全。因此，如何盡早篩查及治療妊娠合并梅毒對妊娠結(jié)局改善至關(guān)重要。

目前，實(shí)驗(yàn)室檢測是臨床篩查妊娠合并梅毒的主要手段之一，其中TPPA是妊娠合并梅毒篩查的確診試驗(yàn)，但該種檢驗(yàn)方式步驟較多、操作較為復(fù)雜，易受待檢者主觀因素影響，且價(jià)格較為高昂，不適合大樣本篩查且在基層醫(yī)院梅毒篩查中難以推廣，限制了其應(yīng)用范圍[5-6]。因此，需探尋其他實(shí)驗(yàn)室檢測方法。目前，ELISA與TRUST檢驗(yàn)方式是臨床篩查梅毒較為常用的兩種方式，其中ELISA檢驗(yàn)方法是通過將已知抗體、抗原在待檢載體上吸附，利用酶標(biāo)過程，記錄目標(biāo)物質(zhì)，在通過洗滌方式取出其他成分，并通過光譜分析酶標(biāo)記反應(yīng)過程，測定吸收值，獲取量化結(jié)果，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)梅毒篩查[7-8]。TRUST檢驗(yàn)方法對機(jī)體內(nèi)梅毒螺旋體刺激免疫系統(tǒng)產(chǎn)生反應(yīng)素后實(shí)施的非梅毒螺旋體抗原檢驗(yàn)方法，抗原為二磷酸腺苷油衍生物，測定抗心磷脂抗體反應(yīng)素，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)梅毒篩查[9]。

本研究結(jié)果顯示，ELISA檢驗(yàn)方法篩查妊娠合并梅毒的敏感度、準(zhǔn)確度、陰性預(yù)測值均高于TRUST檢驗(yàn)方法，提示相較TRUST檢驗(yàn)方法，ELISA法篩查妊娠合并梅毒的準(zhǔn)確度更高，可提高臨床梅毒篩查的準(zhǔn)確度。分析其原因?yàn)椋篢RUST檢驗(yàn)方法主要測定的是梅毒非特異性抗體，具有操作便捷、檢驗(yàn)過程快等特點(diǎn)，但其檢測的是非特異性抗原，部分存在病毒性肝炎、自身免疫性疾病等患者可能出現(xiàn)假陽性情況，而部分并發(fā)人乳頭瘤病毒(Human papilloma virus，HPV)的梅毒感染患者可能出現(xiàn)假陰性情況，降低了其篩查的準(zhǔn)確性[10]。ELISA檢驗(yàn)方法在篩查梅毒的過程中，僅在抗原抗體結(jié)合位點(diǎn)及抗原決定簇中發(fā)生抗原、抗體結(jié)合，從而提高ELISA檢驗(yàn)方法篩查梅毒的特異性[11]。本研究中ELISA檢驗(yàn)方法篩查妊娠合并梅毒的費(fèi)用低于TRUST法，提示相較TRUST檢驗(yàn)方法，ELISA檢驗(yàn)方法的經(jīng)濟(jì)性更好。

綜上所述，相比TRUST檢驗(yàn)方法，采用ELISA檢驗(yàn)方法篩查妊娠合并梅毒的敏感度、準(zhǔn)確度、陰性預(yù)測值更高，且價(jià)格更為合理，可在臨床大批量妊娠合并梅毒篩查中推廣應(yīng)用。