飼糧中添加雨生紅球藻對(duì)DHA富集鵪鶉蛋蛋品質(zhì)和蛋黃中丙二醛含量的影響

夏可心，楊海華，趙晨東，蔣錦楓，史楠楠，劉靜，王智超*

（1塔里木大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，新疆 阿拉爾 843300）

（2塔里木盆地生物資源保護(hù)利用兵團(tuán)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，新疆 阿拉爾 843300）

隨著我國經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展以及生活水平的不斷提高，人們在解決溫飽問題的同時(shí)，更加關(guān)注食品的健康以及營養(yǎng)價(jià)值，DHA富集禽蛋的研究與開發(fā)也越來越受到關(guān)注。二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid，DHA）是脂肪酸家族一員，屬ω-3長鏈多不飽和脂肪酸（PUFA），對(duì)胎兒、嬰兒腦發(fā)育和視網(wǎng)膜發(fā)育至關(guān)重要，若機(jī)體缺乏DHA會(huì)影響細(xì)胞膜的穩(wěn)定性和神經(jīng)遞質(zhì)的傳遞［1-2］。有相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，目前市面上常見的幾種DHA補(bǔ)劑中，禽蛋DHA中的吸收率最好，可達(dá)90%以上［3-6］。常用的DHA富集飼糧添加劑主要有裂壺藻、魚油以及亞麻籽油等。相對(duì)于魚油中的DHA和亞麻籽油中的DHA而言，裂壺藻中的DHA更易吸收，魚腥味等異味淡、無海洋污染、更加安全［3］。但是，由于DHA內(nèi)含有多個(gè)不飽和鍵，很容易被氧化產(chǎn)生過氧化物，其產(chǎn)物一旦進(jìn)入到機(jī)體中，就會(huì)氧化細(xì)胞中的脂質(zhì)，致使細(xì)胞的正常結(jié)構(gòu)被破壞，加快機(jī)體的衰老過程［7］，所以在DHA富集鵪鶉蛋的生產(chǎn)過程中預(yù)防產(chǎn)品的氧化是目前亟待解決的問題。

雨生紅球藻是一種淡水單胞綠藻，因能夠大量累積蝦青素呈現(xiàn)紅色而得名，是公認(rèn)的天然蝦青素來源之一。蝦青素又名蝦黃素、蝦黃質(zhì)，是一種酮式類胡蘿卜素，其化學(xué)名為3，3'-二羥基-4，4'-二酮基-β，β'-胡蘿卜素，具有抗炎、著色、預(yù)防糖尿病腎病、提高免疫力、抑制脂過氧化等功能［8］。蝦青素內(nèi)存在三種旋光異構(gòu)體，其中天然的左旋型蝦青素具有最強(qiáng)的抗氧化能力，其抗氧化能力是維生素E的500～1 000倍，因此天然的左旋型蝦青素被稱為“超級(jí)維生素E”［9］。目前，國內(nèi)外關(guān)于蝦青素應(yīng)用的研究大多集中在魚［10-11］、蛋雞［12］和豬［13］等畜禽中，主要用于魚的增色、改善肉雞和豬的皮膚、肌肉色澤以及提高其繁殖性能，然而對(duì)于我國另外一種重要的蛋禽——鵪鶉卻鮮有報(bào)道。因此，針對(duì)當(dāng)前DHA富集禽蛋中DHA易氧化造成貨架期短的問題，本試驗(yàn)以DHA富集鵪鶉蛋為研究對(duì)象，通過向白羽鵪鶉的日糧中添加雨生紅球藻，研究其對(duì)DHA富集鵪鶉蛋蛋品質(zhì)和蛋黃中 丙二醛（Malondialdehyde，MDA）含量的影響（MDA是脂質(zhì)氧化終產(chǎn)物，其含量是反映機(jī)體或組織抗氧化潛在能力的重要參數(shù)［14］），以期為延長DHA富集鵪鶉蛋貨架期提供一定的參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所用雨生紅球藻購自鄂托克旗德榮藻業(yè)有限責(zé)任公司，蝦青素含量為3%。

商品化基礎(chǔ)飼糧購自河南賽東飼料有限公司，由玉米、麩皮、小麥次粉、豆粕、豆油、石粉、磷酸氫鈣、氯化鈉、微量元素、維生素、植物酶、微生態(tài)制劑等組成，營養(yǎng)成分見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧營養(yǎng)成分 %

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選用40周齡白羽鵪鶉160只，隨機(jī)分為4組，每組2個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20只。對(duì)照組（CK）飼喂DHA富集飼糧（添加2%裂壺藻的基礎(chǔ)飼糧），試驗(yàn)組（Ⅰ～Ⅲ）飼喂在對(duì)照組的飼糧基礎(chǔ)上分別添加0.4 g/kg、2.0 g/kg、10.0 g/kg雨生紅球藻的飼糧（折合蝦青素的含量分別為0.012 g/kg、0.060 g/kg、0.300 g/kg）。預(yù)飼期2周，正飼期6周。

1.3 試驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)采用室內(nèi)籠養(yǎng)，呈上下兩層籠養(yǎng)結(jié)構(gòu)。采用自然光照和人工補(bǔ)光兩種方式相結(jié)合，自由飲水。每日早上10：00飼喂，開窗通風(fēng)，晚上23：00收蛋。每3 d清理一次糞便并對(duì)籠舍進(jìn)行消毒。

1.4 檢測指標(biāo)及方法

1.4.1 DHA富集鵪鶉蛋蛋品質(zhì)的測定

于正飼期的第42 d，每組隨機(jī)取6枚蛋，進(jìn)行蛋品質(zhì)的測定。檢測指標(biāo)分別為蛋重、蛋殼厚度、蛋殼重量、哈夫單位、蛋黃顏色。

用電子分析天平測量蛋重及蛋殼重量；蛋殼厚度用游標(biāo)卡尺進(jìn)行測量，測量前去除蛋殼的內(nèi)外膜，分別測量蛋殼的銳度、鈍端和中間部位并求其平均值；蛋黃顏色用羅氏比色扇進(jìn)行測定；哈夫單位用NFN381/NFN382型蛋白高度測量儀測定（日本FHK公司），測量后通過計(jì)算得出，計(jì)算式如下：

哈夫單位=100lg［H+7.57-1.7(W0.37)］

式中：H為濃蛋白高度，mm；W為蛋重，g。

1.4.2 DHA富集鵪鶉蛋蛋黃中MDA含量的測定

于正飼期第42 d，每組隨機(jī)抽選12枚蛋，共計(jì)48枚蛋，置于常溫下保存。分別于采樣后第0 d（當(dāng)天）、第10 d、第20 d以及第30 d進(jìn)行檢測，每組隨機(jī)抽取6枚蛋檢測蛋黃中MDA的含量，用蘇州科銘技術(shù)有限公司的試劑盒進(jìn)行檢測。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用Microsoft office Excel 2019對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理，SPSS 24.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析。結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，P＜0.05表示差異顯著，P＜0.01表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 雨生紅球藻對(duì)DHA富集鵪鶉蛋蛋品質(zhì)的影響

由表2可知，與對(duì)照組相比，添加雨生紅球藻對(duì)DHA富集鵪鶉蛋的蛋殼厚度和哈夫單位無顯著影響(P＞0.05)；各試驗(yàn)組的蛋黃顏色均極顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)，并隨著雨生紅球藻用量的增加蛋黃顏色逐漸加深，其中試驗(yàn)Ⅲ組顏色最深，哈夫單位達(dá)到了13.46；試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組的平均蛋重極顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)，試驗(yàn)Ⅲ組的平均蛋重顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。

表2 雨生紅球藻對(duì)DHA富集鵪鶉蛋蛋品質(zhì)的影響

2.2 雨生紅球藻對(duì)DHA富集鵪鶉蛋蛋黃中MDA含量的影響

由表3可知，DHA富集鵪鶉蛋蛋黃中的MDA含量隨著雨生紅球藻添加量的升高逐漸降低。第0 d時(shí)，與對(duì)照組相比，添加雨生紅球藻對(duì)DHA富集鵪鶉蛋蛋黃中MDA含量無顯著影響(P＞0.05)；第10 d時(shí)，各試驗(yàn)組MDA含量極顯著低于對(duì)照組(P＜0.01)；第20 d時(shí)，各試驗(yàn)組MDA含量顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)，但各試驗(yàn)組之間差異不顯著(P＞0.05)；第30 d時(shí)，試驗(yàn)Ⅰ組MDA含量與對(duì)照組無顯著差異(P＞0.05)，試驗(yàn)Ⅱ組及試驗(yàn)Ⅲ組MDA含量顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)，各試驗(yàn)組之間無明顯差異(P＞0.05)。

表3 雨生紅球藻對(duì)DHA富集鵪鶉蛋蛋黃中MDA含量的影響 nmol/g

3 討論

3.1 雨生紅球藻對(duì)DHA富集鵪鶉蛋蛋品質(zhì)的影響

有研究發(fā)現(xiàn)，消費(fèi)者在禽蛋的選擇上更加注重蛋黃的顏色，認(rèn)為蛋黃的顏色越深蛋的品質(zhì)越好［15］。但是禽類自身并不能合成色素，蛋黃中的顏色主要是由于禽類攝食的飼料中含有葉黃素等脂溶性色素沉積在蛋黃中形成的［16］。對(duì)于蛋黃的著色，二酮基、二羥基類胡蘿卜素比單羥基、單酮基或環(huán)氧類胡蘿卜素的著色功能強(qiáng)，雨生紅球藻中所含蝦青素屬非維生素A源的二羥基二酮基類胡蘿卜素，呈艷麗的紅色［17］。類胡蘿卜素是以棕油酸二酯的形式存在，與低密度脂蛋白結(jié)合后被吸收，以游離狀態(tài)進(jìn)入血液，并隨著血液循環(huán)進(jìn)入蛋黃等組織重新轉(zhuǎn)化為棕油酸二酯并在蛋黃中沉積下來，從而增加蛋黃的顏色［18-19］。CONRADIE T A 等［20］、LEEETAL K S 等［21］研究發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，加入了蝦青素的試驗(yàn)組的蛋黃顏色明顯加深。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧中添加雨生紅球藻能使DHA富集鵪鶉蛋蛋黃的顏色加深，可能是雨生紅球藻中含有豐富的蝦青素導(dǎo)致的，與前人研究結(jié)果一致。哈夫單位是衡量蛋品新鮮度的指標(biāo)，值越大說明蛋白越黏稠，蛋越新鮮，品質(zhì)越好，本試驗(yàn)中添加了雨生紅球藻的DHA富集鵪鶉蛋的哈夫單位要比對(duì)照組高，可能是蝦青素對(duì)機(jī)體起到了一定的抗氧化作用。而雨生紅球藻對(duì)蛋殼厚度無顯著影響，這與李潤樺等［22］研究結(jié)果一致。

目前關(guān)于雨生紅球藻對(duì)平均蛋重的影響的研究結(jié)果不一致。據(jù)報(bào)道，在禽類的飼料中添加雨生紅球藻并沒有改變平均蛋重［23］。但本試驗(yàn)結(jié)果顯示，試驗(yàn)組的平均蛋重顯著高于對(duì)照組，考慮是抗氧化劑和多不飽和脂肪酸復(fù)合作用的結(jié)果，其具體原因及機(jī)理還有待進(jìn)一步的研究。

3.2 雨生紅球藻對(duì)DHA富集鵪鶉蛋蛋黃中MDA含量的影響

MDA是多不飽和脂肪酸受到活性氧攻擊后形成的有毒物質(zhì)，其含量反映了脂質(zhì)的過氧化程度［14］。不飽和脂肪酸極易被氧化生成脂質(zhì)過氧化物［24］，同時(shí)脂質(zhì)過氧化物對(duì)DHA富集鵪鶉蛋的貯存也產(chǎn)生不利影響，加速DHA富集鵪鶉蛋的腐敗變質(zhì)，縮短其保質(zhì)期［25］。本試驗(yàn)中，DHA富集鵪鶉蛋隨著貯存時(shí)間的延長蛋黃中MDA含量呈增加趨勢，且未添加雨生紅球藻的DHA富集鵪鶉蛋在貯存過程中蛋黃中MDA含量在數(shù)值上均高于試驗(yàn)組。由表2可以看出，添加了雨生紅球藻的試驗(yàn)組在常溫下存放30 d時(shí)，蛋黃中MDA的含量依然要比存放了10 d的對(duì)照組低。這表明雨生紅球藻可顯著增加DHA富集鵪鶉常溫下的保質(zhì)期，有利延長其貨架期。董復(fù)成等［26］在研究中也曾提到，可通過測定蛋黃中MDA的含量來反映蛋黃的抗氧化能力，機(jī)體內(nèi)MDA含量越高，則其抗氧化能力越低，細(xì)胞受到的損傷程度越大。AO X等［27］研究發(fā)現(xiàn)，給北京鴨飼喂含有蝦青素的飼料，可以降低血清中的MDA含量。魯瓊芬等［28］通過測定富含PUFA的雞蛋蛋黃中MDA含量來探究不同貯存條件對(duì)富含PUFA雞蛋的影響，得出低溫可延長雞蛋的新鮮度的結(jié)論。未來如果將雨生紅球藻和低溫儲(chǔ)存聯(lián)合實(shí)施，是否可以更大限度的增加DHA富集鵪鶉蛋的保質(zhì)期，從而延長貨架期，值得探究。

4 結(jié)論

1）飼糧中添加雨生紅球藻對(duì)DHA富集鵪鶉蛋的哈夫單位、蛋殼厚度無顯著影響；對(duì)平均蛋重存在一定的影響；對(duì)蛋黃顏色有極顯著影響。

2）飼糧中添加雨生紅球藻能夠降低DHA富集鵪鶉蛋蛋黃中MDA含量。雨生紅球藻的適宜添加量為2.0 g/kg(蝦青素含量為0.060 g/kg)。