HE 染色在臨床病理診斷中的應(yīng)用價值研究

劉微

病理診斷是對疾病確診的主要方式之一,其具有準確、客觀、權(quán)威等特點,但是此種方法檢查結(jié)果準確性會受到操作人員具體操作水平的影響,且會受到切片質(zhì)量、染色效果的影響［1］。同時臨床進行病理檢查時尚無具體標本檢驗的時間規(guī)范,這樣則可能導(dǎo)致病理組織受到脫水不完全等的影響而出現(xiàn)試劑濃度變化,以此對病理制片的質(zhì)量造成影響,導(dǎo)致患者疾病診斷的難度提高,影響診斷結(jié)果的準確性［2,3］。因此,應(yīng)合理改進HE 染色技術(shù),以此促進病理診斷準確性的提高。本研究主要對HE 染色在臨床病理診斷中的應(yīng)用價值進行分析,報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 以2018 年1 月～2020 年12 月本院72 張病理組織石蠟切片為研究對象,隨機分為實驗組和對照組,各36 張。實驗組中,胃腸肝膽制片12 張,脂肪組織制片9 張,子宮內(nèi)膜制片8 張,骨制片7 張。對照組中,胃腸肝膽制片11 張,脂肪組織制片8 張,子宮內(nèi)膜制片9 張,骨制片8 張。兩組的一般資料比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。見表1。

表1 兩組的一般資料比較(張)

1.2 方法 對照組病理診斷中實施常規(guī)HE 染色,將病理組織放置于固定液中,以此促進蛋白質(zhì)更好的凝固,最大程度保持細胞組織結(jié)構(gòu),以酒精作為脫水劑實施脫水干預(yù),將脫水后的相關(guān)組織在二甲苯中存放,其中的酒精被全部置換后進行浸蠟包埋處理,通過切片機實施標本的切片,厚度為5～6 mm,薄片水浴燙平烘干處理,之后粘貼標簽。采用二甲苯脫去石蠟,以70%、80%、95%濃度的酒精加蒸餾水,蠟脫水洗后進行相應(yīng)的染色處理,其中加入蘇木精時會出現(xiàn)細胞核以及核糖體變藍的情況,之后繼續(xù)將伊紅染料置入,可見細胞質(zhì)變?yōu)榧t色或淡紅色,分析操作中存在的缺陷,并制定相應(yīng)的改進措施,在實驗組中應(yīng)用。

實驗組病理診斷中實施改進HE 染色,結(jié)合病理組織存在的特點,確定具體染色的方法,并合理控制固定和脫水所需時間。將病理組織置于固定液中,可促使蛋白質(zhì)的凝固,以此保持細胞組織結(jié)構(gòu),以酒精作為脫水劑,實施脫水干預(yù),脫水后的組織在二甲苯中放置,在組織被酒精所置換后實施浸蠟包埋干預(yù),采用切片機對標本進行切片處理,控制厚度范圍為5～6 mm,水浴對薄片燙平處理,并進行烘干,粘貼標簽。若標本的體量較小,則適當縮短縮水時間和固定時間,對于大體量的脂肪組織標本,則相對延長固定時間和脫水時間。染色的過程中,密切關(guān)注制品的厚度和溫度,并以制品的厚度和溫度為參考,合理調(diào)整操作的時間。新產(chǎn)品使用前,應(yīng)首先實施試染操作,采用有色瓶保存染色中需要的試劑,在染色瓶上粘貼標簽,包括名稱、含量、時間等,分析具體的情況,確定是否需要進行冷藏。染色產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)后,進一步進行研究,并與二次檢測的結(jié)果進行比較,若為試劑或染色液原因所致,則及時更換。在檢查的過程中,確保制品均處于干燥狀態(tài),避免對檢查的結(jié)果產(chǎn)生不良影響。染色完成后,對制片情況觀察,采用顯微鏡查驗結(jié)果。

1.3 觀察指標 比較兩組的病理診斷符合率,即胃腸肝膽制片、脂肪組織制片、子宮內(nèi)膜制片、骨制片診斷符合率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS18.0 統(tǒng)計學(xué)軟件進行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P<0.05 表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

實驗組骨制片、子宮內(nèi)膜制片、脂肪組織制片、胃腸肝膽制片診斷符合率分別為85.71%、87.50%、77.78%、91.67%,對照組骨制片、子宮內(nèi)膜制片、脂肪組織制片、胃腸肝膽制片診斷符合率分別為50.00%、55.56%、50.00%、63.64%。實驗組病理診斷總符合率為86.11%,高于對照組的55.56%,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組的病理診斷符合率比較(%)

3 討論

實施病理檢查的過程中,病理組織染色的質(zhì)量會直接影響疾病診斷的結(jié)果,從而影響疾病治療方案的制定,最終影響患者疾病治療的效果以及預(yù)后情況［4,5］。實施病理檢查的過程中,染色的質(zhì)量主要取決于細胞核染色的質(zhì)量,染色是在物理作用與化學(xué)作用下所完成的檢驗操作,因此應(yīng)客觀分析影響診斷結(jié)果的因素,并積極防控,以此促進診斷技術(shù)的提高,保證診斷結(jié)果的準確性［6,7］。

HE 染色法是石蠟切片染色方法的一種,其主要是采用蘇木精堿性染液實施細胞核內(nèi)核酸、染色質(zhì)的著色,并實施伊紅酸性染料染色處理細胞外基質(zhì)以及細胞質(zhì),應(yīng)用較為廣泛［8］。實施HE 染色中,細胞核染色質(zhì)量會影響具體的染色質(zhì)量,在組織中存在大量微小空洞,采用染色劑浸透后與組織結(jié)合會出現(xiàn)溶解、擴散的情況,且組織細胞中存在不同水平的堿性物質(zhì)或酸性物質(zhì),與染液中陰離子、陽離子相結(jié)合可增強固定的效果［9,10］。送檢組織需要實施固定處理,保留組織活性在合理的范圍內(nèi),以此確保組織形態(tài)結(jié)構(gòu)不會發(fā)生改變,保證組織與活體時的形態(tài)、成分基本一致,防止在后期處理中發(fā)生組織自溶的情況［11,12］。組織在原有結(jié)構(gòu)消失或破壞后,會影響制片的質(zhì)量,從而對診斷的結(jié)果造成影響［13,14］。HE 染色法中細胞、組織染色質(zhì)量比較容易受到脫水、固定、取材等的影響,實施組織染色中需要結(jié)合不同的標本,合理選擇取材的范圍和工具,以此降低對組織結(jié)構(gòu)的影響程度,保持其完整性［15,16］。

HE 染色法具體操作可能會對HE 染色結(jié)果造成影響,為了保證染色的質(zhì)量,在實施染色的過程中應(yīng)分析其中存在的缺陷,并進行經(jīng)驗的總結(jié),針對性的制定完善方案和改進方案,重點強調(diào)取材的方法以及操作的時間,選擇操作工具時應(yīng)最大限度對病理組織結(jié)果保留,若使用鉗子難以順利夾取組織,或會對組織造成破壞,則需要更換為針管等操作,保持謹慎吸出組織,最大程度防止標本、組織受到損傷,常規(guī)情況下在癌細胞、腫物等壞死組織中較為適用［17,18］。同時,實施病理組織檢查時較易出現(xiàn)脫鈣的情況,其主要發(fā)生于骨組織中,實施操作的過程中需要明確實施脫鈣操作,在脫鈣操作完成后實施制片干預(yù),盡量保證結(jié)構(gòu)的完整性,確保染色的效果［19,20］。實施組織檢查時首先應(yīng)實施固定處理,盡快送檢標本,若不能及時送檢或固定處理,則可將標本冷藏,并延長固定處理的時間［21,22］。

本研究中,實驗組病理診斷符合率為86.11%,高于對照組的55.56%,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。表明改進HE 染色能夠促進病理診斷符合率的提高,更好保證診斷結(jié)果的準確性。實際實施病理診斷的過程中需要與切片的特點相結(jié)合,差別化應(yīng)用染色技術(shù),合理調(diào)整,以此促進切片質(zhì)量的提高,保證診斷結(jié)果的準確性。

綜上所述,改進HE 染色在病理診斷中應(yīng)用有著較高的價值,可更好指導(dǎo)臨床疾病的診治,意義重大。