不同尺寸白膜袋制備濃縮血小板的質量分析及其影響因素

李 津，吳憲彬，康美艷，熊惠連，羅曼華

(贛州市中心血站 a.成分科； b.質管科教科，江西 贛州 341000)

濃縮血小板是來源于患者全血的生物自體產(chǎn)物，主要由血小板和生長因子的超生理濃度組成，是常用于臨床外科中的成分輸血制品[1-2]。濃縮血小板在醫(yī)院血站較為常用，可用于失血、血小板減少等癥狀的患者。濃縮血小板作為一種臨床節(jié)約和充分利用血液資源的方法，其制備方法以白膜法最為常見，但不同大小的白膜袋對濃縮血小板的質量有著一定的影響[3-4]。為此，本研究采用2種不同尺寸的白膜袋制備濃縮血小板，比較其對濃縮血小板質量的影響，同時進一步分析制備濃縮血小板過程中的影響因素。

1 資料和方法

1.1 一般資料

抽取2021年5—12月在贛州市中心血站獻血量為400 mL的42名獻血者血液，保存待用，均符合《獻血者健康檢查要求》(2012版)。

1.2 制備方法

按照《血站技術操作規(guī)程》[5]制備濃縮血小板：全血采集于有血小板保存袋的六聯(lián)袋內(nèi)，采集后6 h內(nèi)或采集后置于20～24 ℃保存和運輸?shù)娜?4 h內(nèi)，在室溫條件下將血小板分離出，并懸浮于一定量血漿內(nèi)。將400 mL全血放入離心杯內(nèi)平衡后，溫度控制在20～24 ℃。把離心后的主袋置于全自動血液成分分離機上，分出上層血漿至血漿袋，留下約20～30 mL血漿，然后將剩余血漿連同白膜層及白膜層下1.5 cm的紅細胞擠入白膜層袋，將紅細胞保存液加入主袋內(nèi)，使之與主袋內(nèi)紅細胞混勻，熱合封閉并切斷連接主袋。將白膜層置于20～24 ℃血小板恒溫保存箱內(nèi)靜置時，取出后輕度離心，使紅細胞和白細胞下沉。上層懸液擠入濃縮血小板保存袋。分別將42名獻血者血液按照上述方法置于2種不同尺寸大小的白膜袋：小白膜袋組(A組)21袋，白膜成分袋尺寸為97 mm×120 mm,容量約為110 mL；大白膜袋組(B組)21袋，白膜成分袋尺寸為112 mm×138 mm,容量約為250 mL；2組白膜層容量均為80～90 mL。

1.3 質量控制

本研究42名獻血者均為隨機選取，隨機分組，不會因血液來自不同的人，血小板本身就存在數(shù)量上的差異而影響研究結果。

1.4 觀察指標

1)濃縮血小板計數(shù)：采用自動血細胞計數(shù)儀對濃縮血小板作血細胞計數(shù)；2)檢測血小板紅細胞混入量；3)選擇濃縮血小板質量最優(yōu)的白膜袋，控制其他變量不變，分析制備濃縮血小板過程中的影響因素。

1.5 統(tǒng)計學方法

2 結果

2.1 2組濃縮血小板計數(shù)、紅細胞混入量比較

與B組相比，A組紅細胞混入量顯著減少，血小板計數(shù)顯著增加，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.001)，見表1。

表1 2組濃縮血小板計數(shù)、紅細胞混入量比較>

2.2 制備濃縮血小板的影響因素分析

上述結果顯示，采用小白膜袋(A組)制備濃縮血小板質量優(yōu)于大白膜袋(B組)。通過控制其他變量不變分析小白膜袋(A組)制備濃縮血小板的影響因素，結果顯示，不同轉速、離心時間、濃縮血小板放置時間均是影響濃縮血小板質量的因素，見表2。

表2 制備濃縮血小板影響因素分析

3 討論

血小板是人體血液里面的重要組成部分，是最小的血細胞之一，體積比紅細胞和白細胞都要小[6-7]。血小板盡管體積非常小，但是有著非常重要的作用，最主要的功能就是凝血和止血，其含量過低或過高對人的健康都有很大影響，因此在做血常規(guī)檢查的時候，血小板檢查是其中非常重要的一項指標[8-11]。

濃縮血小板被廣泛應用于臨床[12]，目前，富血小板血漿法和白膜法是制備濃縮血小板的常用方法，大多數(shù)血站以白膜法為主。白膜法具有血小板中白細胞殘留量較低，輸注安全性好的優(yōu)勢，因此在本站中制備濃縮血小板也以白膜法為主要制備方法。目前，國內(nèi)外尚缺乏制備濃縮血小板的統(tǒng)一標準，因而濃縮血小板制備的質量有差異。本站在制備濃縮血小板過程中接觸過2種不同大小的白膜袋，本研究旨在比較兩者之間的效果。

血小板計數(shù)是可用于判斷患者止血能力的單位體積血液中所含的血小板數(shù)目[13-15]。根據(jù)濃縮血小板質控質量和要求可知，來源于400 mL全血的正常的血小板含量≥4.0×1010個，本研究A組、B組濃縮血小板含量分別為(9.43±1.56)×1010個和(5.26±2.02)×1010個，結果顯示無論是大白膜袋還是小白膜袋，其制備濃縮血小板的血小板計數(shù)均遠高于質控要求，且小白膜袋制備濃縮血小板的血小板計數(shù)更高。這提示采用大白膜袋和小白膜袋制備濃縮血小板均能達到質控要求，安全性高，小白膜袋制備濃縮血小板所得的血小板計數(shù)更高，相比于大白膜袋更具優(yōu)勢。紅細胞是把氧氣運送到全身各器官組織，帶走各組織器官產(chǎn)生的二氧化碳的血細胞[16-20]。根據(jù)濃縮血小板質控質量和要求，400 mL全血的濃縮血小板中紅細胞混入量≤2.0×109個。在本研究中，小白膜袋和大白膜袋的紅細胞混入量分別為(0.65±0.02)×109個和(1.33±0.44)×109個，均達到了質控標準，而且與大白膜袋相比，小白膜袋紅細胞混入量更少。綜合血小板計數(shù)結果可知，小白膜袋制備濃縮血小板的質量更優(yōu)。這可能是由于白膜袋體積與濃縮血小板的紅細胞混入量和血小板回收率有關，袋體大則紅細胞混入量高、血小板回收率低；而小白膜袋的容量與白膜層容量更匹配，所以充盈度更合適，離心時更不易發(fā)生血袋褶皺現(xiàn)象，能高效地回收血小板、減少血小板2次回離率。其次是血液離心分層明顯，紅細胞混入量少，避免褶疊是保證離心效果的前提條件。小白膜袋在分離時血小板更容易收集，不易造成血小板的丟失。

本研究進一步對制備濃縮血小板的影響因素進行分析，通過控制其他變量不變的情況下，均采用小白膜袋制備濃縮血小板，結果顯示，2600 r·min-1離心14 min，濃縮放置時間在1 h內(nèi)的濃縮血小板質量最佳。分析原因可能在于轉速過快或過慢，離心時間過長或過短都會對血小板分離效果造成一定的影響，導致血小板下沉，從而減少血小板含量。血小板是體積較小的細胞,膜薄易碎,放置時間過長則越容易破碎，因而放置時間對濃縮血小板的質量也會有影響。因此，血站在制備濃縮血小板時，應采用小白膜袋，且選擇轉速2600 r·min-1，離心時間14 min，放置時間控制在1 h內(nèi)等條件進行制備，可以最大程度保證濃縮血小板的質量。